高血脂对家兔伤口愈合的影响

通过光镜和电镜对高血脂家兔的伤口作组织学观察,术后11天伤口的肉芽组织在电镜下表现为:成纤维细胞的胞浆中出现脂质小泡,内质网数目较对照组减少并伴囊管状扩张;巨噬细胞数量增多.有些已转变为泡沫细胞;胶原微纤维较对照组细.光镜下表现为:胶原纤维的染色较对照组淡,纤维束较细,这些现象提示:高脂血症时伤口中成纤维细胞合成胶原的功能有所降低,将影响伤口的愈合.     

创面微环境对植入骨髓间充质干细胞的影响研究

目的 探讨创面局部微环境对植入的骨髓间充质干细胞(MSC)的影响。方法 采用常规的细胞培养传代技术、超微结构观察、免疫组化、RT-PCR和细胞增殖活性检测等方法。结果 将MSC植入到创面后，可见肉芽组织中有大量成纤维细胞形成，排列成“瀑布”状，成纤维细胞胞浆中有大量原胶原颗粒形成；免疫组化显示碱性成纤维因子(bFGF)、Ⅰ型胶原在新生的成纤维细胞中表达增强；伤口液促进MSC的增殖活性和迁移能力；局部微环境促进MSC基质源性因子(SDF-1)、IL-8、Ⅰ型胶原的基因表达。结论 MSC在创面局部微环境的作用下MSC表现出向成纤维细胞分化的表型。     

来氟米特抑制结缔组织生长因子诱导的肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的研究

目的探讨来氟米特（LEF）对人肾间质成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法在体外培养的人肾间质成纤维细胞中，加入不同浓度来氟米特活性代谢产物A771726和重组人结缔组织生长因子（rhCTGF），MTT法测定两者单独及同时干预下细胞增殖情况；ELISA法测定细胞合成Ⅰ、Ⅳ型胶原的含量。结果经不同浓度的rhCTGF刺激，成纤维细胞增殖和细胞合呈Ⅰ型、Ⅳ型胶原均成剂量依赖性增加（P〈0．01）：而来氟米特作用细胞后，细胞增殖及胶原合成均呈剂量依赖性减少（P〈0．01）；在来氟米特与结缔组织生长因子（CTGF）共同作用下，细胞的增殖和胶原的合成较单用同剂量的CTGF时减少（P〈0.05）。结论rhCTGF能够促进人肾间质成纤维细胞的增殖及Ⅰ、Ⅳ型胶原合成；来氟米特则抑制细胞的增殖及细胞合成Ⅰ、Ⅳ型胶原；来氟米特对rhCTGF诱导的胶原合成增加有一定的拮抗作用。     

肥大细胞与口腔粘膜下纤维性变的超微结构研究

用电镜对早期口腔粘膜下纤维性变患者病变部位进行研究，观察粘膜固有层中肥大细胞的超微结构，发现肥大细胞脱颗粒现象增多，肥大细胞与功能活跃的成纤维细胞紧密相嵌，成纤维细胞吞噬了肥大细胞脱出的颗粒，作者认为：肥大细胞可能促进成纤维细胞的生长和胶原分泌，从而导致口腔粘膜下纤维性变的发展。     

肥大细胞与口腔粘膜下纤维性变的超微结构研究

用电镜对早期口腔粘膜下纤维性变患者病变部位进行研究，观察粘膜固有层中肥大细胞的超微结构，发现肥大细胞脱颗粒现象增多，肥大细胞与功能活跃的成纤维细胞紧密相发，成纤维细胞吞噬了肥大细胞脱出的颗粒。作者认为：肥大细胞可能促进成纤维细胞的生长和胶原分泌，从而导致口腔粘膜下纤维性变的发展。     

风湿性心脏病人心瓣膜成纤维细胞的体外培养及其胶原合成

目的：观察风湿性心脏病人瓣膜成纤维细胞的胶原合成，为研究风湿性心脏病瓣膜纤维化的发病机制建立基础。方法：采用消化组织块培养法建立人二尖瓣和主脉瓣成纤维细胞体外培养方法，对５例风湿性心脏病人和５例尸检中除外心血管疾病和胶原系统疾病的二尖瓣和主动脉瓣成纤维细胞进行了体外培养，并用３Ｈ－脯氨酸测定瓣膜成纤维细胞的胶原合成。结果：二尖瓣和主动脉瓣的瓣膜成纤维细胞其形态、生长方式及胶原合成差异均不明显，风湿性心脏病瓣膜成纤维细胞的胶原合成明显高于对照组。结论：体外培养的风湿性心脏病人瓣膜成纤维细胞胶原合成明显增加     

人骨髓基质干细胞作为心血管瓣膜组织工程种子细胞的实验研究

目的探讨人骨髓基质干细胞（human bone marrow stromal cells，hMSC）作为心脏瓣膜组织工程种子细胞的可行性。方法取胸外科手术患者肋骨骨髓，Ficoll离心法获取单个核细胞，体外培养扩增，以流式细胞仪检测hMSC的表面抗原。将自然分化的hMSC接种于去细胞猪心瓣膜上2周，免疫组化检测细胞分化结果；扫描电镜和透射电镜观察细胞种植情况；生化检测种植细胞DNA含量和细胞外基质，并和隐静脉来源成纤维细胞构建的组织工程瓣膜作对比。结果hMSC在自然条件下能够分化表现成纤维细胞特性，Vimentin和α-SMA染色阳性；电镜观察活性成肌纤维细胞在瓣膜表面生长均匀平滑；瓣膜组织DNA和胶原含量显著高于去细胞瓣组，与成纤维细胞对照组无明显差异。结论hMSC能够在自然条件下先向成纤维细胞分化，并在去细胞猪心瓣膜上增殖生长，分泌胶原，可作为心血管瓣膜组织工程的种子细胞。     

聚乳酸在骨折愈合中对胶原纤维影响的实验研究

对聚乳酸及金属内固定物对骨折愈合过程中原纤维的产生、发展及钲 化的研究结果显示，在骨折愈合的早期，聚乳酸组成纤维细胞增金属内固定组丰富，胶原纤维较细排列乱；中期仍在见纤维细胞，部分胶原纤维短，排列乱；晚期半数胶原纤维钙化，半数为成骨区。     

粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的：探讨粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用及其在瘢痕治疗中的意义。方法：采用瘢痕成纤维细胞培养和兔实验性瘢痕模型。观察粉防己碱对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响。结果：体外试验显示。粉防己碱各实验组^3H-TdR掺入率和^3H-脯氨酸掺入率均较对照组明显降低。呈剂量依赖关系。动物实验透射电镜表明,对照组瘢痕成纤维细胞中有丰富,高度发达的粗面内质网;粉防己碱治疗组瘢痕成纤维细胞内粗面内质网明显减少。提示其蛋白合成与分泌功能受抑。结论：粉防己碱对瘢痕成纤维细胞增殖,胶原合成与分泌功能具有抑制作用。     

低氧对人胚肺成纤维细胞增殖及Ⅰ型前胶原基因表达的影响

目的 阐明低氧在血管壁构形重组中的作用及川芎嗪的疗效机理。方法 用细胞计数法及非放射性细胞增殖检测法观察２％低氧对人胚肺成纤维细胞增殖的影响．用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法检测２％低地人肺成纤维细胞Ｉ型前胶原基因表达的作用及川芎嗪对基因表达的影响。结果 低氧２４，４８及７２ｈ能明显促进人胚肺成纤维细胞增殖；低氧２４ｈⅠ型前胶原基因表达明显升高；川芎可抑制上述基因表达的升高。结论 低氧对人胚肺成纤维细     

PDGF-AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩影响的差异

目的：研究血小板衍生生长因子(PDGF)—AB对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞一胶原网(FPLC)收缩影响的差异,探讨PDGF—AB促进伤口愈合的作用机制及其在瘢痕增生中的作用．方法：取体外培养的人正常皮肤(NsFb)及增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),建立成纤维细胞—胶原网模型,比较PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩影响的差异．结果：PDGF—AB对两种成纤维细胞—胶原网收缩均有明显促进作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异．结论：PDGF—AB可能通过刺激伤口收缩促进创面愈合,同时可能在瘢痕挛缩性疾病中起重要作用。     

虫草多糖对8-MOP／UVA诱导光老化皮肤成纤维细胞胶原的影响

目的：探讨虫草多糖（CP）对皮肤成纤维细胞光老化保护作用中对胶原的影响。方法：用8-甲氧补骨脂素联合UVA（8-MOP／UVA）诱导皮肤成纤维细胞光老化,用电镜观察、羟脯氨酸含量、丙二醛含量测定及免疫细胞化学等方法观察虫草多糖对成纤维细胞光老化过程中胶原的影响。结果：光老化组细胞较对照组蛋白合成功能不活跃,羟脯氨酸含量下降,丙二醛含量升高,Ⅰ型胶原表达降低,Ⅲ型胶原表达增高,虫草保护组细胞有所改善。结论：虫草多糖对8-MOP／UVA诱导光老化的皮肤成纤维细胞胶原变化具有逆转作用。     

X线对大鼠皮肤伤口愈合过程胶原纤维影响组织学研究

本实验采用纯系ＳＤ雌性大鼠实验动物，在背下部伤口上分别于手术后第１，４天，第４，７天，第７，１０天和第１０，１３天，共４组行Ｘ线照射，每次照射６ＧＹ，两次共１２ＧＹ，并分别于手术后第７，１０，２０，４０天取材，在光镜下观察伤口胶原形态学变化，以ＩＢＡＳ－２０００（Ｏｐｔｏｎ）计算机图像分析系统分析胶原密度变化，光镜下观察，胶原纤维排列紊乱，并较细，照射组的胶原平均光密度明上于对照组，本实验研究提示     

中药马勃对大鼠皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

［摘 要］ 目的：中药马勃作用于体外培养大鼠皮肤的成纤维细胞,观察大鼠成纤维细胞增殖及胶原合成的能力,探讨马勃有效组分在细胞水平上促皮肤患处愈合的作用机制。方法：运用体外细胞培养技术对新生大鼠乳鼠皮肤的成纤维细胞进行培养,实验分为对照组（不给药组）和马勃有效组分37.5、75.0、150.0及300.0 mg/L组;实验组于传代培养24 h后加入不同浓度的药物,继续培养24、48、72 h后收集细胞。采用MTT比色法测定细胞增殖,生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法测定细胞胶原含量。结果：与对照组比较,37.5、75.0、150.0及300.0 mg/L实验组的成纤维细胞增长率和成纤维细胞胶原合成能力均显著性升高（P＜0.01）。在药物作用时间方面,与对照组比较,在24、48和72 h观察细胞增殖率和胶原合成能力均显著增强,72 h最强,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：在不同剂量马勃有效组分作用下,大鼠成纤维细胞活化增殖,胶原合成的能力增强。     

硅凝胶膜对增生性瘢痕组织的影响机制

目的：了解硅凝胶膜（ＳＧＳ）对增生性瘢痕的影响,探索其作用机制。方法：以１６例烧伤后期整形患者为对象,采用组织学、图像分析、放象测定等手段,观测瘢痕组织的成纤维细胞、胶原、透明质酸的变化。结果：ＳＧＳ组与对照组相比较,胶原排列趋于,微血管丰富而呈开放状态,成纤维型前胶原（ｈＰｃⅢ）含理维持在一个较高水平;透明质酸（ＨＰ）含量逐渐升高接近正常皮肤水平。结论：ＳＧＳ能抑制成纤维细胞胶原的合成及分泌,阻     

肺动脉管壁Ⅰ、Ⅲ型胶原变化在慢性低氧肺动脉高压形成中的作用

目的：探讨肺动脉管壁Ⅰ、Ⅲ型胶原以及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA变化在慢性低氧肺动脉高压中的作用。方法：将二级SD大鼠分为对照组（A）和低O2组（B），低O2时间为4w。采用透射电镜，免疫组化，原位杂交，图像分析等方法研究慢性低氧对大鼠肺动脉平均压（mPAP)，右心室经（RV＋LV＋S），管壁厚度占血管外径的百分比（MT％），管壁面积占管总面积的百分比（MA％），肺细小动脉超微结构，肺动脉管壁Ⅰ、Ⅲ型胶原以及Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的影响。结果：（1）B组mPAP,RV/LV＋S显高于A组（P＜0．01）。（2）光镜下B组MT％，MA％显高于A组（P＜0．01）；电镜显示B组肺动脉中膜平滑肌细胞增生，胶原纤维较A组明显为多。（3）免疫组化显示B组肺细小动脉（直径约100－200μm)I型胶原含量（平均吸光度值LD）较A组明显为高（P＜0．01），Ⅲ型胶原LD各组间差异无显性（P＞0．05）。（4）原位杂交显示B组肺细小动脉（直径约100－200μm)Ⅰ型前胶原mRNA平均吸光度值较A组明显为高（P＜0．01），Ⅲ型前胶原mRNA平均吸光度值各组是差异无显性（P＞0．05）。（5）肺细小动脉I型及胶原，I型前胶原mRNA与mPAP,MT%均呈正相关。结论：慢性低氧引起肺动脉管壁I型胶原，I型前胶原mRNA表达增多是导致肺血管重构以致形成同压的重要原因之。     

治疗瘢痕有新药

正常瘢痕的形成是伤口愈合的结果，它包括炎症期、增殖期和重塑期三个时期。而异常瘢痕（即肥厚性瘢痕和瘢痕疙瘩）是伤口愈合过程中真皮组织对外伤产生的一种过度的反应，以真皮成纤维细胞增殖并产生过量的胞外物质为特点。近年来对瘢痕（尤其是肥厚性瘢痕和瘢痕疙瘩）形成的分子生物学机制有了进一步的认识，特别是在药物治疗方面进行了大量的探索，促进了瘢痕治疗方法的不断发展。己酮可可碱（PTX）：可抑制正常人细胞皮肤成纤维细胞的增殖，并改变其某些生物活性，如抑制胶原、黏多糖和纤维结合素的产生，增加胶原酶的活性。他莫昔芬…     

石棉纤维诱导的细胞因子对肺成纤维细胞作用的研究

用肺泡灌洗法获取兔肺巨噬细胞，进行体外培养，取其上清液分别用同位素掺入法和MTT比色法测定上清液中炎性细胞因子TNF和IL－6的活性．并将上清液与人胚肺成纤维细胞（WI－38）培养，用同位素掺入法测定成纤维细胞生长增殖和胶原合成。用氯氨-T法分析肺成纤维细胞总羟脯氨酸含量，并用抗TNF抗体和IFNγ进行成纤维细胞增殖和胶原合成抑制试验。结果显示，石棉纤维能刺激AM释放TNF和IL－6，其活性分别为1198U／m、1511U／ml，均高于TiO2对照组。浓度与效应之间有剂量反应关系（P＜0.05）．石棉纤维诱导的AM上清液能促进肺成纤维细胞增殖和胶原合成，用3H－TdR掺入法，cpm均值为2669，14C－Pro掺入法cpm均值为27952，高于TiO2对照和阴性对照，HOP含量明显增高．抗TNF抗体和IFNγ能抑制肺成纤维细胞增殖和胶原告成。     

肥大细胞对肺成纤维细胞生长及胶原合成的影响

目的:通过肥大细胞与肺成纤维细胞接触和非接触共体培养观察,了解肥大细胞对肺成纤维细胞生长及胶原合成的影响。方法:分离成年大鼠肺成纤维细胞和腹腔肥大细胞,实验分为三组:对照组,正常大鼠肺成纤维细胞培养;接触共育组,肥大细胞与肺成纤维细胞接触共体培养;非接触共育组,肥大细胞与肺成纤维细胞非接触共体培养。每组设3复孔,并作细胞爬片,共培养5 d,每日镜下计数肺成纤维细胞数量,建立生长曲线,5 d后用MTT比色法测定肺成纤维细胞增殖率,通过ELISA法检测培养液中Ⅰ型胶原蛋白含量。结果:①细胞计数显示:接触共育组各时段成纤维细胞的数目均较非接触共育组和对照组明显增多。接触共育组中成纤维细胞增殖数与非接触共育组和对照组比较,有明显差异(P<0.05);非接触共育组和对照组比较,差异不明显(P>0.05)。②MTT结果:接触共育组肺成纤维细胞光密度值明显高于对照组和非接触共育组(P<0.05),提示接触共育组肺成纤维细胞增殖明显高于对照组和非接触共育组,非接触共育组比对照组也高,但差异不明显(P>0.05)。③ELISA法检测结果提示,在肥大细胞与肺成纤维细胞接触共育培养组,培养液中Ⅰ型胶原蛋白含量明显高于非接触共育组和对照组(P<0.05),提示接触共育组肺成纤维细胞合成Ⅰ型胶原蛋白明显增加,非接触共育组比对照组也高,但差异不明显(P>0.05)。结论:肥大细胞影响肺成纤维细胞的增殖及胶原合成;肥大细胞可能通过紧密接触来促进肺成纤维细胞的增殖及胶原合成。     

巨噬细胞迁移抑制因子通过活性氧介导的有氧糖酵解促进肺纤维化

目的探讨巨噬细胞迁移抑制因子（MIF）在肺纤维发生发展的作用和机制。方法20只小鼠被随机分为对照组和肺纤维 化模型组,其中模型组气管内滴入博来霉素,30 d后检测肺组织中MIF的水平。用重组人MIF（rMIF）刺激人胚肺成纤维细胞 （HLF）细胞,观察活性氧、有氧糖酵解和胶原生成的水平;用活性氧抑制剂、有氧糖酵解抑制剂后,观察rMIF对胶原生成的影 响。结果小鼠肺纤维化肺组织和肺泡灌洗液中MIF水平较对照组显著升高（P<0.05）。rMIF可诱导活性氧、有氧糖酵解和胶原增 加,并随着rMIF的浓度升高而增加（P<0.05）。抑制活性氧后,可抑制rMIF和过氧化氢诱导的有氧糖酵解和胶原增加;抑制有氧 糖酵解后,可减少rMIF和活性氧诱导的胶原增加（P<0.05）。结论rMIF参与肺纤维发生发展,其机制可能是通过活性氧上调成 纤维细胞有氧糖酵解,促进胶原生成。