白细胞介素-6抑制白细胞介素-1β诱导的兔纤维环细胞凋亡的研究

目的探讨白细胞介素(IL)-6对IL-1β在体外诱导兔纤维环细胞凋亡作用的影响。方法以10μg/L浓度的IL-1β诱导体外培养的原代兔纤维环细胞发生凋亡,然后分别加入10μg/ L和100μg/L的IL-6以影响纤维环细胞凋亡进程。对细胞行Annexin-V-PI染色和Caspase-9功能染色,采用流式细胞仪检测结果。结果IL-1β诱导下,凋亡纤维环细胞比例由(2.67±1.08)%上升至(20.37±1.57)%,而在两种浓度IL-6的干预下,细胞凋亡比例分别为(18.17±4.68)%和(9.42±1.27)%,与IL-1β诱导退变的纤维环细胞差异有统计学意义(P＜0.05)。而Caspase-9功能阳性细胞也由(19.40±0.98)%分别降至(15.13±1.45)%和(10.17±2.50)%(P＜0.05)。结论IL-6对IL-1β诱导的体外兔纤维环细胞凋亡有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过抑制纤维环细胞内Caspase-9的激活实现的。对IL-6抑制作用的进一步研究,将有助于明确椎间盘细胞凋亡的调控途径,为椎间盘退变的治疗寻找新切入点。     

基质金属蛋白酶-13、白细胞介素-1在大鼠 退变腰椎间盘组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-13( MMP-13 )、白细胞介素-1( IL-1 )在去势大鼠退变腰椎间盘组 织中的表达及临床意义。方法 80只3月龄却rague-Dawiey ( SD )大鼠,随机均分为3组,每组10 只：基础对照组（BL组）手术组（0VX);手术对照组（Sham组）;BL组在手术开始前处死,其余2组 术后三个月处死,并与处死前10凿和4凿分别给予显色双荧光标记。L2-4椎体进行骨密度及硬组织 切片分析,蕴源-5进行HE常规染色、灾郧特殊染色及运用免疫组化检测MMP-13、L-1的表达,观察椎 间盘的病理学改变并据评分标准对腰椎间盘的退变程度（LVD)进行评分。结果1、大鼠腰椎骨量的 下降及椎间盘的退化：双侧卵巢切除组比手术对照组严重;2、免疫组化：双侧卵巢切除组与手术对照 组比较大鼠椎间盘中MMP-13、L-1表达明显升高（孕<0.05 )。结论基质金属蛋白酶-13、白细胞介 素-1表达量的增加是腰椎间盘退变形成和发展的重要因素。     

白细胞介素1β对组织工程化椎间盘细胞基质金属蛋白酶13表达的作用

[目的]观察不同浓度白细胞介素1β对组织工程化椎间盘细胞基质金属蛋白酶13表达的影响.[方法]将体外培养的兔组织工程化椎间盘细胞随机分为1、10、100 μg/L浓度白细胞介素1β作用组及空白对照组,免疫组织化学检测基质金属蛋白酶13表达.[结果]1、10、100 μg/L浓度白细胞介素1β组基质金属蛋白酶13阳性表达率均较对照组增高(P＜0.05).随着白细胞介素1 β浓度的增高,基质金属蛋白酶13阳性表达率显著升高,100 μg/L浓度高于1、10 μg/L浓度组(P＜0.05),10 μg/L浓度组高于1.μg/L浓度组(P＜0.05).[结论]白细胞介素1β对兔组织工程化椎间盘细胞基质金属蛋白酶13表达的调控作用随其浓度的升高而呈正相关.     

金天格胶囊对膝骨关节炎患者关节液中MMP-3、TIMP-1、IL -1β、TGF-β1水平的影响

目的 探讨金天格胶囊对膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者关节液中基质金属蛋白酶-3 ( MMP-3 )、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法 选取90例KOA患者,分别在治疗前、治疗1个疗程、治疗2个疗程后,对患者进行WOMAC量表评分,评估患者膝关节功能。分别抽取患者膝关节腔关节液,进行酶联免疫吸附法(ELISA),测定关节液中MMP-3、TIMP-1、IL-1β、TGF-β1的含量。结果 ⑴服用金天格胶囊后,患者WOMAC评分降低,膝关节功能改善。（2)与治疗前相比,治疗后关节液中MMP-3、IL-1β含量都有所降低,TIMP-1、TGF-β1含量都有所增加,差异具有统计学意义(P <0. 01)。(3)随着服用金天格胶囊疗程的增加,膝关节液中MMP-3、IL-1β含量逐渐下降,TIMP-1、TGF-β1的含量逐渐升高,组间差异具有统计学意义(P <0. 01)。结论 金天格胶囊可以降低KOA患者关节液中MMP-3、IL-1β水平,升高TIMP-1、TGF-β1的水平,从而起到保护关节软骨、改善KOA患者膝关节功能的作用。     

基质金属蛋白酶3和白细胞介素1在突出的腰椎间盘组织中的含量及其相关性研究

目的检测正常和突出的腰椎间盘组织中的基质金属蛋白酶3(m atrix m eta lloprote inase 3,MM P-3)、白细胞介素1(in terleuk in 1,IL-1)含量,探讨MM P-3及IL-1间的关系,以及在椎间盘突出症中的作用。方法检测标本分为实验组和对照组,为2003年6月~2004年12月突出的腰椎间盘标本,实验组30例为膨隆型11例,突出型9例,脱垂游离型10例。其中男14例,女16例。年龄33~64岁。对照组9例,为非突出的腰椎间盘标本。其中男4例,女5例。年龄21~58岁。用酶联免疫吸附实验方法测定两组椎间盘标本中MM P-3、IL-1的含量。结果实验组MM P-3膨隆型、突出型和脱垂游离型分别为14.25±1.32、19.89±2.97和20.69±2.18 ng/m l,IL-1膨隆型、突出型和脱垂游离型分别为8.52±0.22、11.88±0.52和11.90±0.73 pg/m l,含量明显高于对照组(P<0.01);实验组中突出型和脱垂游离型MM P-3、IL-1的含量差异无统计学意义(P>0.05),明显高于膨隆型(P<0.01);对照组和各型突出的腰椎间盘标本中MM P-3、IL-1含量差异有统计学意义(P<0.01)。结论退行性变的腰椎间盘能产生MM P-3及IL-1,且二者在椎间盘退行性变中起着重要作用。     

白细胞介素-1受体拮抗蛋白和白细胞介素-10联合基因转染人骨关节炎软骨细胞的研究

目的探讨逆转录病毒载体PLXRN介导的人白细胞介素-1受体拮抗蛋白（hIL-1Ra）和白细胞介素-10（hlL-10）联合基因转染在人骨关节炎（OA）关节软骨细胞中稳定表达的可行性。方法构建含目的基因的表达载体PLXRN-IL-1Ra和PLXRN—IL-10，经酶切及测序鉴定正确后单个或联合转染人OA软骨细胞，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测细胞内目的基因的表达；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中hlL-1Ra和hlL-10蛋白表达量的水平。结果酶切和测序表明获得了与预期结果一致的PLXRN—IL—IRa和PLXRN—IL-10真核表达载体。稳定转染软骨细胞后，RT-PCR检测到了细胞内hIL-1Ra和hIL-10mRNA片段。ELISA检测发现基因转染组均有相应的一定量的hlL．1Ra和hIL-10表达，单个基因转染组中分别为（60．47±15．13）和（19．73±4．10）ng／L；联合基因转染组为（67．15±11．47）和（16．76±9．96）ng／L。未转染组及PLXRN空质粒转染组均无hIL—IRa和hlL-10表达，基因转染组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），而单个基因转染组和联合基因转染组组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论逆转录病毒载体PLXRN介导的hlL-1Ra和hlL-10联合基因可有效地感染人OA关节软骨细胞并获得稳定表达，为将表达hIL-IRa和hlL-10目的基因的人OA软骨细胞用于OA基因治疗提供了依据。     

大蒜素对兔膝骨关节炎作用的实验研究

[目的]探讨大蒜素对兔膝骨关节炎的作用。[方法]将30只家兔随机分为空白对照组、模型对照组和大蒜素组,每组10只;除空白对照组外其余2组按改良Hulth法建立模型,术后开始灌服药物,大蒜素组(大蒜素,128 mg/kg/d)、空白对照组和模型对照组(等量生理盐水20 ml),连用8周。术后8周处死所有家兔取右膝股骨髁大体观察;苏木精-伊红(HE)和番红O(SA-O)染色对股骨髁关节软骨行Mankin评分;采用q RTPCR法检测股骨内侧髁负重区软骨组织interleukin-1β(白细胞介素-1β,IL-1β)、matrix metalloproteinase-3(基质金属蛋白酶-3,MMP-3)和tissue inhibitor of metalloproteases-1(基质金属蛋白酶组织抑制因子-1,TIMP-1)的m RNA相对表达量。[结果]三组之间比较,空白对照组的Mankin评分最低,IL-1β、MMP-3和TIMP-1 m RNA表达量最低,模型对照组和大蒜素组,分别与空白对照组比较,上述指标差异均有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,大蒜素组Mankin评分降低,IL-1β、MMP-3、TIMP-1 m RNA表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]大蒜素能够改善兔膝骨关节炎Mankin评分并能够下调股骨髁关节软骨中IL-1βm RNA、MMP-3m RNA表达,上调TIMP-1 m RNA表达量。     

基质金属蛋白酶9及TGF-β_1 mRNA和蛋白在骨关节炎中的表达

目的 TGF-β1对骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨起保护作用,探讨OA中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、TGF-β1 mRNA和蛋白表达的相关性,为临床治疗OA寻找有效的干预靶点提供理论依据。方法取自愿捐赠的关节软骨及滑膜标本,其中OA患者60例(实验组),外伤截肢、交叉韧带断裂、盘状软骨损伤与半月板损伤患者20例(正常对照组)。行HE染色观察关节软骨与滑膜的病理组织学改变,免疫组织化学染色观测MMP-9及TGF-β1蛋白表达,原位杂交技术检测MMP-9及TGF-β1 mRNA表达;并进行相关性分析。结果 HE染色显示实验组关节软骨细胞固缩、坏死、排列紊乱,细胞外基质断裂,关节滑膜细胞肥大增生、淋巴细胞和单核细胞浸润,多数小血管增生;正常对照组软骨细胞排列整齐、基质染色均匀,滑膜组织无慢性炎症表现、无明显增生。两组均可见MMP-9、TGF-β1 mRNA和蛋白阳性表达,阳性细胞包括软骨细胞、滑膜衬里层细胞及滑膜下层的血管内皮细胞、成纤维细胞、炎性浸润细胞等。实验组MMP-9及TGF-β1 mRNA和蛋白表达均高于正常对照组(P<0....     

白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α对人正常髓核细胞基质金属蛋白酶-28转录影响的研究

目的 探讨白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）对髓核细胞的基质金属蛋白酶-28（matrix metalloproteinase-28,MMP-28）是否具有调控作用。方法 培养人体正常髓核细胞,将3个不同浓度的IL-1β（0 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL）和3个不同浓度的TNF-α（0 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL）分别与体外扩增的第3代髓核细胞联合培养72 h,采用实时聚合酶链反应（real time-polymerase chain reaction,RT-PCR）法测定MMP-28 mRNA的转录水平,采用单因素方差分析法比较转录水平的差异。结果 不同浓度（0 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL）的IL-1β与髓核细胞共培养72 h后,各组间MMP-28mRNA转录水平（0.325±0.019、0.343±0.018、0.343±0.018）差异无统计学意义（P>0.05）。不同浓度（0 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL）TNF-α与髓核细胞共培养72 h后,各组间MMP-28 mRNA转录水平（0.325±0.019、0.515±0.02、0.610±0.012）差异有统计学意义（P<0.01）,且高浓度组MMP-28 mRNA转录水平较低浓度组明显升高（P<0.01）。结论 IL-1β对正常人体髓核细胞MMP-28转录无调控作用,而TNF-α可以上调MMP-28mRNA转录水平,且呈浓度依赖性。     

骨关节炎与基质金属蛋白酶及其抑制剂的关系

基质金属蛋白酶在骨关节炎关节软骨的破坏中起主要作用。对基质金属蛋白酶及其抑制因子的结构、功能、调控等方面的深入研究,将有助于阐明骨关节炎的发病机制,并为治疗提供新的有效途径。     

大肠癌组织中基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达及对微血管生成和肿瘤转移的影响

目的　探讨基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)与基质金属蛋白酶抑制剂 -1(TIMP -1)在大肠癌中的表达及其与血管生成 ,侵袭转移之间的关系。方法　采用免疫组化S -P法 ,检测 46例大肠癌组织中MMP -9,TIMP -1的表达和微血管密度之间的关系。结果　MMP -9的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移明显相关 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;TIMP -1的表达与Dukes分期、淋巴结转移明显相关 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;MMP -9表达阳性的大肠癌组织微血管密度 (MVD)值明显高于表达阴性者 (P <0 .0 1)。结论　MMP -9、TIMP -1的表达和微血管生成与大肠癌侵袭转移密切相关     

基质金属蛋白酶9及TGF-β1 mRNA和蛋白在骨关节炎中的表达

目的 TGF-β1对骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨起保护作用,探讨OA中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、TGF-β1 mRNA和蛋白表达的相关性,为临床治疗OA寻找有效的干预靶点提供理论依据。方法取自愿捐赠的关节软骨及滑膜标本,其中OA患者60例(实验组),外伤截肢、交叉韧带断裂、盘状软骨损伤与半月板损伤患者20例(正常对照组)。行HE染色观察关节软骨与滑膜的病理组织学改变,免疫组织化学染色观测MMP-9及TGF-β1蛋白表达,原位杂交技术检测MMP-9及TGF-β1 mRNA表达;并进行相关性分析。结果 HE染色显示实验组关节软骨细胞固缩、坏死、排列紊乱,细胞外基质断裂,关节滑膜细胞肥大增生、淋巴细胞和单核细胞浸润,多数小血管增生;正常对照组软骨细胞排列整齐、基质染色均匀,滑膜组织无慢性炎症表现、无明显增生。两组均可见MMP-9、TGF-β1 mRNA和蛋白阳性表达,阳性细胞包括软骨细胞、滑膜衬里层细胞及滑膜下层的血管内皮细胞、成纤维细胞、炎性浸润细胞等。实验组MMP-9及TGF-β1 mRNA和蛋白表达均高于正常对照组(P<0.01)。实验组MMP-9 mRNA与蛋白表达成正相关(r=0.924,P=0.000),TGF-β1 mRNA及蛋白表达亦成正相关(r=0.941,P=0.000);实验组MMP-9及TGF-β1蛋白表达成负相关(r=—0.762,P=0.000),MMP-9 mRNA及TGF-β1 mRNA表达成负相关(r=?0.681,P=0.000)。结论 OA中TGF-β1的高表达下调了关节软骨与滑膜中MMP-9的表达,对OA关节软骨起保护作用,从而延缓OA进展。     

基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制剂-1、增殖细胞核抗原在病理性瘢痕中的表达

目的：研究基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）、增殖细胞核抗原（PCNA）在病理性瘢痕中的表达及意义.方法：对58例病理性瘢痕手术切除标本采用免疫组化方法.结果：MMP-1、TIMP-1、PCNA在病理性瘢痕中呈阳性表达.结论：病理性瘢痕中细外基质合成增加为成纤维细胞过度增殖所致;病理性瘢痕形成与MMP-1、TIMP-1相互作用失衡有关.     

基质金属蛋白酶13抑制剂在骨关节炎治疗中的现状与展望

骨关节炎(OA)是一种以关节软骨的变性、破坏及骨质增生为特征的慢性关节病.基质金属蛋白酶13(MMP13)是在骨关节炎发生发展过程中的一种关键介质,而MMP13抑制剂则能够通过对MMP13的抑制作用起到保护软骨细胞的作用.本文简要回顾了目前在临床工作和基础研究中被人们所关注的各种MMP13抑制剂,横向对比其优劣性,对未...     

白细胞介素-32和基质金属蛋白酶-2对原发性肝细胞癌的诊断价值

目的探讨白细胞介素(IL)-32和基质金属蛋白酶(MMP)-2对原发性肝细胞癌(PHC)的临床诊断价值。方法选择38例PHC及32例肝硬化患者作为研究对象,采用酶联免疫吸附试验检测血清MMP-2和IL-32表达水平,分析其与甲胎蛋白(AFP)的相关性及对PHC的诊断价值。结果 PHC患者血清MMP-2表达水平显著高于肝硬化及健康对照组(t=4.012、3.707,P=0.000、0.001);PHC患者血清IL-32表达水平高于肝硬化及健康对照组(t=3.265、9.001,P=0.002、0.000),肝硬化患者高于健康对照组(t=6.876,P=0.000);血清MMP-2、IL-32和AFP预测PHC发生ROC面积为0.827、0.702和0.873;三者均能较好地预测PHC发生(P均<0.05);以血清MMP-2、IL-32和AFP为参数,拟合预测PHC发生的Logistic二元回归方程,模型方程拟合优度高(χ2=0.714,P=0.994),准确率达到89.47%(34/38)。结论 IL-32、MMP-2和AFP均能较好地预测PHC的发生,若三者联合作为预测因素,则准确性更高。     

骨关节炎患者血清及关节液中白细胞介素-17表达及其意义

目的检测膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者血清及关节液中自细胞介素-17(interleukin-17)的表达并评估其与OA严重程度的相关性。方法收集100例原发性膝OA患者血清及关节液标本,并以50例健康志愿者血清标本作为对照。OA严重程度及分级分别采用Lequesne指数和K-L分级系统。酶联免疫吸附法分别检测血清及关节液中IL-17浓度,并分析其与OA严重程度的相关性。结果 OA组患者血清中IL-17浓度[(5.292±1.470)pg/ml]明显高于对照组[(4.173±0.640)pg/ml],差异有统计学意义(P0.05)。K-L4级或3级OA患者关节液IL-17的浓度明显高于2级OA患者,差异有统计学意义(P0.05)。4级OA患者关节液IL-17的浓度[(6.161±1.120)pg/ml]明显高于3级OA患者[(4.474±0.816)pg/ml],差异有统计学意义(PO.05)。关节液IL-17浓度与Lequesne指数呈正相关(r=0.6232,P0.05);血清IL-17浓度与Lequesne指数之间无明显相关。结论 IL-17在OA患者血清及关节液中的表达明显升高,关节液中IL-17的水平与OA严重程度之间明显相关,提示IL-17的失衡表达在OA的发病机制中具有一定作用。     

β-榄香酮酸对白细胞介素-1β作用下大鼠软骨细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的:观察β-榄香酮酸(β-EA)对白细胞介素-1β(IL-1β)作用下大鼠软骨细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法:提取大鼠原代软骨细胞并使用甲苯胺蓝鉴定,将其用随机数字表进行简单随机分组,分为对照组、IL-1β组、β-EA低、高剂量组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测软骨细胞活力,采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核...     

尿中基质金属蛋白酶-9及组织金属蛋白酶抑制剂-1在慢性肾脏病中的临床意义

目的：探讨尿液中基质金属蛋白酶-9（MMP -9）和组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP -1）水平及其与尿蛋白、肾功能的关系。方法：将69例慢性肾脏病（CKD）分为小量蛋白尿（〈1．0 g/24 h）、中等量蛋白尿（〉1．0 g,〈3．5 g/24 h）、大量蛋白尿组（≥3．5 g/24 h）;20例健康体检者作为对照组者。用酶联免疫吸附法（ELISA 法）测定尿液中 MMP -9和 TIMP -1的水平,同时测定血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）,分析它们之间的关系。结果：（1）CKD 各组尿 MMP -9及 TIMP -1水平均显著高于健康对照组（均 P 〈0．01）,3组间 MMP -9差异无统计学意义（P 〉0．05）;大量蛋白尿组 TIMP -1显著高于中、小蛋白量组（P 〈0．01）,但中、小蛋白尿组之间差异无统计学意义（P 〉0．05）。（2）大、中量蛋白尿组血 BUN、Scr 均显著高于小量蛋白尿组（P 〈0．01）。（3）尿 TIMP -1与尿蛋白（r =0．412,P 〈0．01）及 Scr（r =0．263,P 〈0．05）均呈正相关。尿 MMP -9与尿蛋白、Scr 均无相关性（均 P 〉0．05）。结论：CKD 时肾内促进 ECM 降解和抑制降解酶均增高,但抑制降解作用大于促进降解作用。尿中 TIMP -1明显增高且与尿蛋白量、Scr 均成正相关,故尿中 TIMP -1可以间接反映 ECM 聚积和纤维化。     

基质金属蛋白酶-2、组织转化生长因子β1的表达及微血管密度与大肠癌临床生物学特性的关系

目的 :探讨基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )、组织转化生长因子 β1 (TGFβ1 )的表达以及微血管密度 (MVD)与大肠癌临床生物学特性的相关性。方法 :应用标准霉菌抗生物素蛋白 -过氧化物酶亲和免疫组织化学法 ,检测 6 0例大肠癌标本中MMP- 2、TGFβ1的表达及 MVD值。结果 :MMP- 2阳性表达率 5 6 .7% (34/6 0 ) ;TGFβ1的阳性表达率 4 3.3% (2 6 /6 0 ) ;MVD1 8～ 1 32 ,平均值 4 6 .6± 2 0 .8。无淋巴结转移组、高分化组、无远处转移组的 MMP- 2和 TGFβ1表达水平分别低于有淋巴结转移组、低分化组、有远处转移组 ,(P <0 .0 5 )。 MVD值增大提示大肠癌分化程度低、易发生淋巴结转移和远处转移及预后差 ;TGFβ1表达与大肠癌血管生成有关 ;MMP- 2、TGFβ1高表达组 MVD值大于 MMP- 2、TGFβ1低表达组 (P <0 .0 5 )。结论 :MMP- 2、TGFβ1在大肠癌的发生、发展过程中起重要作用 ,尤其在肿瘤侵袭、转移过程中发挥重要作用 ,MMP- 2、TGFβ1与 MVD关系密切