铜绿假单胞菌产AmpC酶和ESBLs的检测和耐药性分析

目的 研究AmpC酶和ESBLs在临床分离铜绿假单胞菌中的分布及其对耐药性的影响.方法 纸片扩散法测定19种抗生素的耐药性,三维试验检测高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）.结果 92株铜绿假单胞菌中,单纯高产AmpC酶者,单纯产ESBLs者,高产AmpC酶并产ESBLs者分别为17.4%、8.7%、10.7%.产酶菌株仅对美洛培南亚胺培南敏感,对大多数抗生素耐药.非产酶菌株对头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢唑林高度耐药,对大多数抗生素敏感.结论 产ESBLs和高产AmpC酶的铜绿假单胞菌在临床分离菌株中阳性率较高,产酶菌株对大多数抗生素的耐药性明显高于非产酶菌株.     

产AmpC酶铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究

目的研究产AmpC酶的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的分子机制。方法2003-2007年从临床标本中分离到铜绿假单胞菌220株，采用三维试验筛选产8内酰胺酶（包括AmpC酶）的铜绿假单胞菌，应用多重PCR检测产AmpC酶的铜绿假单胞菌质粒携带的AmpC耐药基因，应用荧光定量RT—PCR的方法检测染色体AmpC酶基因和oprD2基因的表达情况。结果共检出40株产口内酰胺酶的菌株，其中产AmpC酶、ESBLs、金属酶（MBL）和未知酶型铜绿假单胞菌的构成比分别是62．5％（25／40）、20％（8／40）、7．5％（3／40）和10％（4／40）。25株产AmpC酶菌株均有不同程度AmpC酶基因表达量升高，其中，仅1株细菌携带DHA质粒型AmpC酶基因，12株菌oprD2基因表达量减低，这些菌株均对亚胺培南耐药，13株菌oprD2基因表达量正常，其中仅5株菌对亚胺培南耐药；7株菌（占产AmpC酶菌株的28％，不产金属酶）的酶粗提物能微弱水解IPM，这7株菌AmpC酶基因的表达量均有明显升高，其中5株菌同时伴有oprD2基因表达量降低。结论铜绿假单胞菌产生的AmpC酶可做弱水解亚胺培南，且其水解亚胺培南可能与AmpC酶产生量有一定关系；产AmpC酶铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因可能是细菌AmpC酶表达量增加和oprD2表达量减低两者共同作用的结果。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的 了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据.方法 用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶.结果 50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性.结论 本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染.     

314株铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的分布及多药耐药性分析

目的了解我院2012年铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）在感染中的流行情况及耐药特征,为临床合理使用抗生素提供实验室依据。方法细菌鉴定采用法国生物梅里埃公司VITEK2-compact的GN鉴定卡;药敏试验采用K-B扩散法;双纸片增效法检测ESBLs;头孢西丁三维实验法检测AmpC酶;应用Whonet5.4、SPSS13.0软件进行统计分析。结果在2113份阳性标本中分离出铜绿假单胞菌314株为14.9%,其中呼吸道标本的阳性率最高为78.0%,以呼吸内科、老年病科及ICU病房检出率为主,分别为22.6%、19.4%、18.5%。单产AmpC酶、单产ESBLs及同时产AmpC酶＋ESBLs的铜绿假单胞菌分别为81株、56株、56株,其中ICU产酶率最高,其次为呼吸内科及老年病科,产酶率分别占79.3%、71.8%、70.5%。铜绿假单胞菌对美罗培南,阿米卡星及亚胺培南耐药性最低,分别为15.3%、19.7%、25.8%。结论产酶的铜绿假单胞菌多药耐药严重,合理使用抗生素以减少耐药率。     

铜绿假单胞菌的耐药性及多重耐药机制

目的了解铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性及耐药机制,指导临床合理选用抗生素。方法应用英国先德微生物分析系统检测药物敏感性,通过改良酶提取物头孢西丁和头孢曲松三维试验检测AmpC酶和ESBLs,K-B纸片扩散法检测金属β内酰胺酶。结果74株临床分离铜绿假单胞菌对亚胺培南的敏感率最高,敏感率达82.4%。对头孢吡肟、阿米卡星、派拉西林、环丙沙星、妥布霉素的敏感性较高。单产ESBLs、同时产ESBLs和AmpC酶、单产AmpC酶和单产金属β内酰胺酶的检出率分别为16.2%,9.4%,5.4%,4.0%。结论临床分离铜绿假单胞菌的耐约现象不容忽视,产生高活性β内酰胺酶是导致其耐药的机制之一,亚胺培南仍是治疗铜绿假单胞菌感染最有效的约物。     

下呼吸道标本铜绿假单胞菌产AmpC酶和ESBLs的研究

目的了解临床下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌耐药性、耐药表型、产AmpC酶和ESBLs情况，指导临床合理使用抗菌药物。方法收集2003年7月至2004年7月520株下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌，VITEK全自动微生物鉴定仪（MIC法）进行铜绿假单胞菌的鉴定及对12种抗菌药物的药敏试验；通过药敏试验筛选出20株多重耐药菌行三维试验，分析这些菌株产AmpC酶、ESBLs的情况；PCR扩增及序列分析检测AmpC酶的基因型。结果①铜绿假单胞菌对12种抗菌药物的敏感率结果显示：对妥布霉素、哌拉西林-三唑巴坦、亚胺培南显示较好的敏感性。②三维试验表明：20株实验菌中2株产AmpC酶，其余18株未产ESBLs及AmpC酶。③PCR及序列分析表明：1株产AmpC酶的DHA1型，1株本实验中所用ampC引物不能扩增出ampC片段。结论必须重视铜绿假单胞菌AmpC酶和ESBLs检测；对于该菌引起的呼吸道感染采用碳青霉烯类、哌拉西林一三唑巴坦、头孢他啶、联合氨基苷类或环丙沙星是一个较好的选择。     

多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与分析

目的了解本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法用K-B法进行常规药敏试验,筛选出50株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶。结果50株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs2株(4%)、产AmpC酶20株(40%),11株同时产ESBLs和AmpC酶(22%),金属酶筛选出8株(16%)阳性。结论本地区多重耐药铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmpC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

儿童耐亚胺培南铜绿假单胞菌的感染现状及药敏分析

目的调查本院2012年10月至2013年9月患病儿童送检标本中分离出铜绿假单胞菌的感染状况以及亚胺培南耐药株的药敏分析。掌握广州地区儿童感染铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药状况及耐亚胺培南菌株的发生情况。方法分析2012年10月至2013年9月儿童送检感染标本的铜绿假单胞菌检出情况,采用法国生物梅里埃公司的VITEK 2Compact分析仪进行细菌鉴定,检测对亚胺培南耐药铜绿假单胞菌对11种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果从36 600例标本中共检出161株铜绿假单胞菌,其中耐亚胺培南铜绿假单胞菌24株占14.9%;阳性菌株主要来源于痰标本,高达50.3%,分离最高的是ICU和NICU,分别占27.4%和21.8%。耐亚胺培南铜绿假单胞菌对头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南的耐药率比较高,分别是91.7%、29.0%、29.0%、29.0%和25.0%。结论耐亚胺培南的铜绿假单胞菌在本地区儿童中检出率较高,常对其他抗菌药物多重耐药,应引起高度重视,合理使用抗菌药物。     

1612例痰标本细菌培养及药敏分析

[目的]探讨痰标本细菌感染的分布及耐药状况,为临床抗感染治疗提供参考依据.[方法]总结分析本院2009年3月至2011年3月两年间1 612例痰标本细菌培养及药敏检测结果.[结果]从1 612例痰标本中共检出 497株病原菌.其中革兰阳性菌189株占38.0%,前3位为表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌;革兰阴性菌277株占55.7%,前3位为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌;真菌感染31株占6.2%.497株细菌中对第三代头孢菌素2种或以上有中介或耐药的革兰阴性杆菌108株.其中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的阳性率为大肠埃希菌40%（6/15）、肺炎克雷伯菌48.8%（21/43）、阴沟肠杆菌61.1%（11/18）、铜绿假单胞菌46.8% （15/32）;产AmpC酶的阳性率为大肠埃希氏菌20%（3/15）、肺炎克雷伯菌9.3%（4/43）、阴沟肠杆菌33.3%（7/18）、铜绿假单胞菌6.3%（2/32）.其他革兰阴性杆菌未检出ESBLs、AmpC酶.[结论]肺部感染常见病原菌发生变化,产ESBLs酶和AmpC酶阳性株发现率越来越高.临床应重视并开展ESBLs、AmpC的检测和耐药率监测,合理使用抗生素,以减少耐药菌株的产生.     

某医院下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌耐药性分析

目的了解临床下呼吸道标本分离铜绿假单胞菌对13种抗菌药物的耐药性、以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头胞菌素酶（AmpC酶）及金属β-内酰胺酶情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法选择该院2007-2012年480株下呼吸道标本中分离出的铜绿假单胞菌,菌株鉴定采用法国梅里埃API鉴定系统进行。药敏试验按K-B纸片琼脂扩散法操作并判断结果。采用三维试验法检测铜绿假单胞菌中的ESBLs和AmpC酶,双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶。结果从480株铜绿假单胞菌中检出产ESBLs、AmpC及金属β-内酰胺酶189株,总检出率39.4%。铜绿假单胞菌对妥布霉素、哌拉西林-三唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星显示较好的敏感度,对头孢曲松、头孢替坦、头孢唑林高度耐药。结论应重视铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC和金属β-内酰胺酶检测;对于该菌引起的呼吸道感染宜采用哌拉西林-三唑巴坦、头孢他啶联合氨基甙类或喹诺酮类抗菌药物治疗。     

铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶、质粒介导AmpC酶基因分布及流行特征分析

目的研究临床分离铜绿假单胞菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和质粒介导AmpC酶的基因分布及流行特性,为细菌耐药性的监控提供依据。方法回顾性调查5年间临床分离的铜绿假单胞菌的分布和耐药情况。选取每年同一时间段的临床连续分离株共169株,用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、VEB、PER、GES、TLA、IBC、CTX-M、OXA等β-内酰胺酶基因和AmpC酶基因。使用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分析菌株间的同源性。结果铜绿假单胞菌主要分离自呼吸道(痰标本),占75.7%;对复方磺胺甲噁唑和头孢曲松耐药情况严重,耐药率分别为91.9%和91.7%;对其他主要抗菌药物的耐药率分别为头孢他啶46.7%、亚胺培南38.2%、左旋氧氟沙星30.2%、环丙沙星28.3%、阿米卡星5.0%。169株铜绿假单胞菌中产TEM、CTX-M、OXA和GES型β-内酰胺酶菌株84株(49.7%);质粒介导AmpC酶23株(13.6%)。PFGE结果显示铜绿假单胞菌仅3株具有同源性,呈散发流行。结论铜绿假单胞菌临床感染率高,呈多重耐药且散发流行趋势。     

云浮地区多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因的研究

目的研究云浮地区临床分离的多重耐药铜绿假单胞菌相关耐药基因。方法采用K-B法进行药敏实验,聚合酶链反应（PCR）对多重耐药铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶相关基因和氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因检测,并进行测序。结果 25株铜绿假单胞菌未发现对多黏菌素B耐药,其余抗生素耐药率均大于50%,氨基糖苷类修饰酶基因ant（2″）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ和aac（3）-Ⅱ基因阳性率分别为20%、32%、24%、28%和24%,未检出aac（3）-Ⅰ基因;β-内酰胺酶基因OXA-10、TEM-1、SHV、DHA-1、PER和IMP-9基因阳性率分别为32%、12%、8%、12%、12%和12%,未检出CTX-M-9基因和VIM基因;另外OprD2基因缺失率达60%。结论本地区多重耐药的铜绿假单胞菌携带多种β-内酰胺酶和氨基糖苷类修饰酶基因,应引起高度重视。     

改良三维试验检测阴沟肠杆菌产β-内酰胺酶及耐药分析

[目的]对近年耐三代头孢的阴沟肠杆菌进行β-内酰酶（主要是ESBLs与AmpC酶）监测以进行流行病学调查，同时作相关统计以指导实验室检测及临床用药。[方法]收集来自各种标本对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌45例，三维试验检测Es-BLs与AmpC酶。[结果]产ESBLs42株，占93．33％，产AmpC酶8株，占17．78％，两种酶均产的有8株。[结论]对三代头孢耐药的阴沟肠杆菌主要产ESBLs，体外实验对亚胺培南敏感率为97．66％，对其它抗菌药物敏感性差。     

耐头孢西丁肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC酶的检测及耐药基因分析

目的 了解浙江省台州地区肺炎克雷伯菌ESBLs和AmpC -内酰胺酶产生情况及AmpC酶的耐药基因型别特征。 方法 采用VITEK-AMS60全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按CLSI推荐的确证试验检测ESBLs,采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,通过酶粗提物三维试验确证产AmpC酶,并经PCR测序等实验分析该菌株的基因型。 结果 在对头孢西丁不敏感的86株肺炎克雷伯菌中,ESBLs和AmpC酶检出率分别为88.37%和77.91%;以同产ESBLs和AmpC酶为主要形式,占47.67%,单产ESBLs和单产AmpC酶分别占40.70%和30.23%;AmpC酶阳性菌株的耐药基因型:62株为DHA-1型、5株为ACT-1型。 结论 台州地区肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶检出率较高,AmpC酶以DHA-1型为主。     

产超广谱β-内酰胺酶及AmpC酶的阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β lactamases,ESBLs）及AmpC酶的阴沟肠杆菌的分布情况及耐药特征.方法 选择49株阴沟肠杆菌,采用纸片扩散法进行药物敏感试验,按美国临床实验室标准化协会推荐的确证试验检测产ESBLs阳性菌株;头孢西丁纸片扩散法初步筛选产AmpC酶阳性菌株,采用PCR检测AmpC酶基因.结果 抗生素敏感试验结果显示阴沟肠杆菌对头孢西丁、替卡西林/克拉维酸、头孢曲松、氨曲南的耐药率均达79.6％以上,对美罗培南敏感率较高,达91.8％.49株阴沟肠杆菌中对头孢西丁耐药的菌株46株（93.9％）;产ESBLs菌株29株（59.2％）,PCR 扩增产AmpC酶的阴沟肠杆菌36株（73.5％）,同时产两种酶的菌株为13株（26.5％）.结论 产ESBLs 及AmpC酶阴沟肠杆菌普遍且耐药现象严重.     

三维试验检测耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶

目的了解耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶的现状。方法采用K-B法进行药敏试验,筛选耐头孢他啶的铜绿假单胞菌,采用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶。结果 65株临床分离耐头孢他啶铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)30株(46.2%),AmpC酶4株(6.2%),同时产ESBLs和AmpC酶10株(15.4%),同时产金属酶和产ESBLs 15株(23.1%),同时产AmpC酶和金属酶2株(3.1%)。结论益阳市第三人民医院铜绿假单胞以产ESBLs为主,其次为AmpC酶和金属酶。