骨髓活检组织制片方法的改进

骨髓活检组织在病理切片中常出现染色模糊和细胞固缩的现象,对骨髓组织造血细胞的辨认,造成一定的困难,甚至导致误诊或漏诊,实践中我们发现除了与染色方法有关外,主要与脱钙剂/固定剂关系密切.经过反复实验,我们采用骨髓活检标本经Bouin固定液固定,甲酸混合液脱钙,甲醛-冰醋酸-酒精混合液(简称F.A.A混合液)再固定的方法,获得了良好的制片效果,配合使用微波技术,明显缩短了脱钙时间,现介绍如下.     

改良骨髓脱钙液对免疫组化染色结果的影响

目的 探讨酸脱钙液对骨髓活检组织免疫组化染色的影响.方法 对445例骨髓活检组织经混合酸脱钙及EDTA双重脱钙固定、免疫组化染色.结果 组织结构、细胞形态清晰完整,免疫组化染色定位准确、背景清晰.结论 混合脱钙液与EDTA联合应用有助于免疫组化染色,是骨髓活检病理诊断的有效方法.     

Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用

目的：探讨Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用。方法收集200例骨髓活检穿刺组织,选取其中150例采用Jy-Ⅱ脱钙液脱钙,同时选取50例采用5%的硝酸脱钙液脱钙做对照观察,脱钙后分别做HE染色、特殊染色（Go-mori氏网状纤维染色）和免疫组织化学染色（MaxVisionTM法CD38染色）,观察Jy-Ⅱ脱钙液对骨髓活检组织结构的保存及染色情况。结果经Jy-Ⅱ脱钙液脱钙后骨髓活检组织结构保持完整,完整率达98.67%。镜下形态结构清晰,组织结构清晰率达100.00%,染色情况良好,脱钙时间短,为150 min。脱钙完全,效果好。经5%的硝酸脱钙液脱钙后的骨髓活检组织,结构保持不完整,完整率达60.00%,镜下形态结构欠清晰,清晰率达52.00%,染色情况欠佳,脱钙时间长,长达240 min,脱钙不完全,效果欠佳（P〈0.05）。结论 Jy-Ⅱ脱钙液效果明显优于5%的硝酸脱钙液,骨髓活检组织结构保持良好,操作简便,脱钙时间短,在脱钙过程中无需更换脱钙液,HE染色、特殊染色、免疫组化染色效果也较满意,实用性强,不失为一种良好的脱钙液,值得推广     

改良脱钙液在骨髓穿刺组织制片中的应用

<正>骨髓组织制片的关键是脱钙,送检的骨髓组织硬度不同,所以时间也很重要,时间太短组织较硬,切边不连片,目标易脱片;时间太长破坏组织的形态结构和细胞成分的性质,造成细胞核不着色或着色很浅,而影响对病变组织的病理诊断。对此我们在工作中反复摸索推荐一种改良的脱钙液并获得了满意效果,现报告如下。     

脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的：探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法：收集36例骨髓活检穿刺组织，分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组，每组12例，分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织，将同一例标本分成两份，观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果：A液、B液的脱钙时间比C液短；3种方法的HE染色效果均较好；而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好，但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论：采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法，实验操作简便，HE染色和免疫组化染色效果较为满意。     

改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用

目的 探讨改良混合脱钙液在临床骨髓组织活检中的应用。方法 选取临床骨髓穿刺活检病例188例,分别采用改良混合脱钙液（改良混合脱钙液组,146例）与传统硝酸类脱钙液（硝酸类脱钙液组,42例）在常温下进行脱钙处理,比较两组脱钙的时间、制成切片的质量、HE染色效果及免疫组化表型表达情况。结果 改良混合脱钙液的脱钙时间短于硝酸类脱钙液,改良混合脱钙液的切片质量良好为97.9%（143/146）,HE染色效果良好为98.6%（144/146）;硝酸类脱钙液切片质量良好为61.9%（26/42）,HE染色效果良好为54.8%（23/42）。改良混合脱钙液组标本免疫组化表达效果优于硝酸类脱钙液组。结论 改良混合脱钙液效果良好、脱钙时间短、染色效果佳、组织抗原不丢失、实用性强,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。     

两种骨髓活检组织制片方法的比较

1971年Burkhardt&#183;R报告了用塑料包埋剂代替石蜡包埋制备组织切片技术,使组织制片方法更加完善。塑料包埋切片与石蜡包埋切片相比,具有细胞收缩小、切片薄、结构清晰等优点,其制片质量明显优于石蜡切片,特别在骨髓活检组织制片中起到了一定地促进作用,有利于对细胞细微结构的观察。塑料包埋切片技术在骨髓活检组织中的应用弥补了石蜡包埋组织切片的不足,对血液病的诊断和研究提供了更好的手段。但这一技术操作繁琐,质量要求高,制作时间长,国内从1980年开展到目前除少数科研院所外还不能广泛用于基层医院病理诊断的需要。石蜡包埋切片仍是制作骨髓切片最常用方法,具有方法恒定,操作简便,又能自动化。本文就两种骨髓包埋制片方法进行了探讨和比较,现介绍如下。1骨髓石蜡包埋切片制作石蜡包埋制作骨髓切片经不断的改进,切片质量明显提高,其制作切片的关键在骨髓活检组织脱钙和切片染色。1.1石蜡包埋制片将送检的骨髓活检标本经4%中性缓冲甲醛固定10h后移至95%乙醇内脱脂12h;用0.2M磷酸缓冲液调至pH7.0的10%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)液中进行初步脱钙5h,后经Plank ang Rychlo脱钙剂充分脱钙10h;不经流水冲洗,直接...     

不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色效果的对比研究

目的:探讨不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色质量的影响。方法:选用10%乙二胺四乙酸钠(EDTA)、HA S复合酸脱钙液和10%硝酸3种不同的脱钙液,分成A、B、C 3组用于脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20~28℃)不同脱钙液对骨髓组织切片制作的影响。结果:A组脱钙液所制切片染色效果良好,但脱钙速度缓慢,所需时间较长;B组脱钙液脱钙速度快,所制切片染色好;C组脱钙液所制切片的染色强度和对比度均不如前两种脱钙液。结论:在制作骨髓组织切片时,EDTA脱钙液和HA S复合酸脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果,但EDTA脱钙液脱钙周期过长;HA S复合酸脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合于临床速检工作;硝酸脱钙液组染色效果较差。     

骨髓活检组织的免疫组织化学和核酸原位杂交研究

目的：建立既适用于常规病理检验又可进行免疫组化及核酸原位杂交研究的骨髓活组织检查方法。方法：活检标本１０例，用ＬｏｗｙＦＭＡ液固定、脱钙，石蜡包埋。切片行常规染色、ＴＧＦ－β１和ＭＩＰ－１α免疫组化及地高辛标记ＤＮＡ探针ｍＲＮＡ原位杂交。结果：ＨＥ染色、鼠源性单抗和兔源性多抗的免疫组化及不同长度探针的ｍＲＮＡ析位杂交均取得理想的效果。结论：ＬｏｗｙＦＭＡ液固定、脱钙后石蜡包埋的骨髓活检组织不仅能满     

两种骨髓活检标本脱钙方法比较

<正>临床骨髓活检组织来之不易,并且病理诊断十分困难。为了正确诊断,要求制备高质量的骨髓切片。在病理制片过程中,如果稍有处理不当,将直接影响骨髓活检标本的诊断以及患者的治疗。与其他组织不同,骨髓组织中含丰富的钙盐、脂肪及各种造血细胞,成分复杂,软硬程度不一,因此制片要十分慎重。首先,骨髓组织需要脱钙处理。对于目前经常使用的各类强酸脱钙液,脱钙的时间不好控制,容易造成过     

骨髓活检组织制片技术的改进与应用

近年来，骨髓活检已越来越多地应用于临床。按我院临床要求，每份活检材料须做常规染色（HE染色）及网状纤维染色（网染）。我科经反复摸索实践的骨髓活检组织制片技术，缩短了制片时间，提高了制片质量。现介绍如下。     

骨组织病理制片三种脱钙液的比较

目的比较三种文献报道的改良脱钙液的效果,获得简单、便捷、适用于临床病理制片的脱钙液。方法考察在常温及37℃恒温条件下,三种改良脱钙液对骨组织的脱钙及染色效果。结果常温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为72h左右,组织结构损伤小,改良脱钙液Ⅰ、Ⅲ染色效果佳;37℃恒温条件下,三种改良脱钙液的脱钙时间为8—14h,改良脱钙液Ⅰ镜下组织结构破坏,改良脱钙液Ⅱ组织结构破坏且染色效果不佳,改良脱钙液Ⅲ组织结构损伤小,染色效果佳。结论37℃恒温条件下,改良脱钙液Ⅲ是较适合于临床病理制片的脱钙溶液。     

骨组织脱钙技术及在免疫组化染色中的应用

与一般的软组织不同 ,骨组织石蜡切片在脱水、透明等制片前需要使用脱钙剂除去骨组织中的钙盐才能制备成 4～ 5 μm厚的切片。为了更好地了解脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色质量的影响 ,本文根据骨组织及其免疫组织化学染色的特点 ,结合文献对影响骨组织免疫组织化学染色质量的组织的固定、常用的脱钙方法及脱钙液、低温 微波快速脱钙技术及注意事项等方面进展进行了综合分析。     

骨组织脱钙方法的改良

骨组织必须经过脱钙才能制作切片。选择适当的脱钙液、脱钙方法以及脱钙时间与骨组织的制片质量有密切关系。我们运用超声波技术及两种传统的脱钙方法对不同的骨性组织分组进行脱钙制片,并进行比较,发现该方法在不破坏组织结构及影响染色的同时,缩短了诊断时间,保证了切片质量。现将方法介绍如下。     

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

目的 对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法 观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果 常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论 标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.     

骨髓穿刺活检组织快速处理的新方法

目的：介绍本科室探索的一种骨髓穿刺组织的快速脱钙处理方法。方法通过查阅参考文献、细致研究病理科常用试剂理化特性结合骨髓穿刺组织特点，试验出一种骨髓穿刺组织快速脱钙方法。结果采用本方法处理骨髓穿刺组织简便快捷，仅需2~4h；骨髓组织处理质量满意，各造血系统细胞染色鲜明、透亮，示细胞核与细胞质对比度清晰；骨小梁脱钙完全，结构清楚，呈鲜艳红色，免疫组织化学染色高质量阳性显色，低背景着色，无非特异性显色的特点。结论该方法是较为简便实用的骨髓组织快速处理方法，提高工作效率，值得在病理科工作中推广采用。     

骨组织电镜脱钙技术在免疫组化中的应用

骨组织的免疫组化一直是病理技术中的一大难题。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，因而骨组织固定、脱钙都是制备标本的重要环节。一些强酸如盐酸、硝酸等虽能快速有效除去骨组织中的钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏；近几年发展的微波辅助EDTA脱钙技术，虽然可实现较好地保护组织抗原性且快速的效果，但操作程序复杂。骨组织的电镜制片技术对组织固定与脱钙要求均远高于常规染色与免疫组化，其脱钙液与固定液均与其他方法有较大差别，本实验用该方法进行骨组织免疫组化，取得了较理想的效果，现报道如下。     

冷丙酮固定剂在骨髓活组织塑料冷包埋切片免疫组化染色中的应用研究

目的:探讨骨髓活组织塑料冷包埋切片免疫组化染色技术在血液系统疾病诊断和治疗中的应用。方法:在不脱钙的骨髓活组织塑料冷包埋切片上,采用经典免疫组化技术SP染色法。结果:冷丙酮固定剂在骨髓活组织塑料冷包埋免疫组化染色中,效果优于Bouin固定液(P<0.05),-20℃操作条件下免疫组化结果优于4℃(P<0.05)。结论:冷丙酮固定骨髓活组织塑料冷包埋免疫组化染色技术,结果稳定,特异性高,敏感性强。     

骨及钙化组织脱钙法的比较

目的：探讨骨及钙化组织的脱钙方法。方法采用三种不同方法处理相同的骨及钙化组织,甲组先将骨及钙化组织切成薄片,用甲酸氯化铝脱钙固定液彻底脱钙,流水冲洗,碳酸铝饱和溶液中和酸;乙组先用甲酸氯化铝脱钙固定液处理大块骨及钙化组织至彻底脱钙,再将骨及钙化组织切成薄片,碳酸铝饱和溶液中和酸;丙组按传统方法脱钙。三组组织脱钙后均常规制作HE切片,并行CD68和TTF-1免疫组化检测,比较三种方法的脱钙时间、HE染色和免疫组化检测结果。结果甲组脱钙时间短、切片完整、组织结构清晰、染色对比鲜明、长期保存不易褪色、免疫组化阳性信号正常,各项结果均优于乙组和丙组。结论甲酸氯化铝脱钙固定液处理骨及钙化组织,脱钙时间短,切片质量、染色质量、免疫组化质量好,切片长期保存不易褪色,值得推广。     

介绍一种骨髓穿刺活检的理想脱钙剂及其HE染色法

在活体组织检查中常会碰到像骨髓穿刺组织这样微小的骨组织的脱钙问题,过去我们一直沿用传统的"10%硝酸脱钙液".