死后视网膜组织mRNA降解的初步研究

业已证实死后组织样本mRNA在一定时间内具有相当高的稳定性.所以根据死后组织mRNA的降解规律推断死后时间间隔(PMI)便成为可能.     

PTEN编码蛋白对TGF-β1刺激大鼠肾成纤维细胞增殖的抑制作用

目的观察PTEN基因编码蛋白对TGF-β1刺激所致大鼠肾成纤维细胞增殖的影响。方法用重组PTEN腺病毒转染体外培养的大鼠肾成纤维细胞,倒置荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达,RT-PCR检测PTEN mRNA表达。转染48h后TGF-β1体外刺激,TGF-β1刺激24h后MTT法检测细胞增殖活力,免疫细胞化学检测PCNA蛋白表达。结果PTEN腺病毒转染后绿色荧光蛋白和PTEN mRNA表达明显增多。PTEN基因编码蛋白明显抑制TGF-β1刺激所致大鼠肾成纤维细胞增殖,并显著减少PCNA的表达。结论PTEN能抑制TGF-β1刺激所致大鼠肾成纤维细胞增殖,可能具有抑制残肾纤维化、延缓残肾毁损的作用。     

高湿环境致大鼠肾功能损害与水通道蛋白-2的表达

目的 观察高湿环境对SD大鼠肾功能的影响,探讨水通道蛋白-2（AQP2）和加压素受体-2（V2R）在高湿环境大鼠肾脏中的表达及其意义.方法 20只SD大鼠随机分为对照组和高湿组,每组10只.高湿组大鼠每日放入人工气候箱10 h[温度25 ℃,相对湿度（RH）为（90±2）%],对照组置常温常湿环境[温度（25±2）℃,RH（55±5）%].处理20 d后,荧光定量PCR检测肾髓质AQP2和V2R mRNA表达水平,Western blot法检测肾髓质AQP2、磷酸化AQP2（p-AQP2）以及V2R的蛋白表达水平.结果 与对照组相比,高湿组大鼠血尿素氮（BUN）、血肌酐（SCr）显著升高（P＜0.05）;肾髓质AQP2和V2R mRNA表达较对照组显著降低（P＜0.01）,AQP2、V2R的蛋白表达水平和AQP2的磷酸化水平较对照组显著降低（P＜0.05）.结论 高湿环境可对大鼠肾功能造成一定损害,且使V2R和AQP2的表达水平降低,AQP2磷酸化水平也降低,提示V2R和AQP2可能参与了高湿环境引起的肾功能损害的发生发展.     

低氧诱导肾细胞癌786-O细胞HIF-1α的表达变化及意义

目的探讨缺氧条件下肾透明细胞癌786-O细胞缺氧诱导因子1α（HIF-1α）的表达变化及意义。方法786-O细胞在缺氧条件下培养不同时间（0、8、16、24h）后,RT-PCR法检测HIF-1α mRNA的转录情况;Western blot法检测HIF-1α蛋白表达变化。结果常氧状态下HIF-1α mRNA和蛋白均有一定表达。缺氧处理一定时间（8、16、24h）后786-O细胞HIF-1α mRNA表达没有明显改变（P〉0．05）,而HIF-1α蛋白表达水平显著升高（P〈0．01）。结论缺氧条件下786-O细胞HIF-1α表达变化主要在翻译水平而非转录水平。在蛋白水平对HIF-1α表达进行调控可作为肾透明细胞癌治疗的新靶点。     

羟基喜树碱诱导大鼠心脏移植免疫耐受机制的探讨

以纯系SD大鼠为供者,Wistar大鼠为受者行异体颈部心脏移植,移植后受者大鼠接受不同剂量羟基喜树碱（HCPT）、环孢素A（CsA）治疗或二者联合应用。应用RT-PCR方法检测移植物内及受者脾内细胞因子mRNA表达情况,观察HCPT和CsA在诱导异基因大鼠心脏移植免疫耐受中的作用,并探讨免疫耐受的形成机制。结果显示,与对照组比较,各用药组移植心脏存活时间显著延长。[HCPT2.0mg/（kg·d）]组中3/10和[HCPT1.0mg/（kg·d）+CsA10mg/（kg·d）]组中5/10受者大鼠形成特异性免疫耐受。耐受组IL-4、IL-10mRNA表达明显高于排斥组,而IL-2、IFN-γ明显低于排斥组。受者脾内细胞因子表达量近似于移植物内。提示大剂量NCPT或小剂量HCPT与CsA合用可诱导异基因大鼠心脏移植免疫耐受;细胞因子偏向Th2亚类是免疫耐受形成机制之一。     

Rho-A mRNA 在大鼠脊髓损伤中的表达及与损伤程度的相关性

目的观察大鼠不同时间和不同损伤程度下，损伤段脊髓内Rho—A mRNA的表达及与损伤程度的相关性。方法按WD法制模，将SD大鼠135只随机分成3组，A组为全瘫组，B组为不全瘫，C组为空白手术对照组，每组分别为45只。致伤后8h、24h、3d、7d、28d，提取损伤段脊髓内的总RNA，荧光定量PCR和凝胶电泳检测Rho—A mRNA的表达，进行大鼠后肢运动功能评分，并作相关性分析。结果（1）A、B、C组在各时间点均有Rho—A mRNA表达，但同时间点A、B组的表达明显高于C组，A组同时间点的表达高于B组，C组各时间点表达维持在较恒定水平；脊髓损伤后8hRho-A mRNA表达增加，伤后3d达高峰，持续高水平表达28d。（2）C组各时间点大鼠后肢运动功能评分明显高于A、B组，A组同时间点的评分低于B组。结论脊髓损伤后Rho—A mRNA的表达明显升高，且与脊髓损伤程度呈正相关。     

大鼠脊髓损伤后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ结合配体mRNA的表达

目的 探讨大鼠脊髓损伤后神经型一氧化氮合酶（nNOS）羧基末端PDZ结合配体（carboxy-terminal PDZ ligand of nNOS，CAPON）mRNA的表达变化及其意义。方法采用脊髓横断模型，用实时荧光定量聚合酶链式反应（realtime-PCR）及原位杂交与免疫荧光技术结合的方法检测正常成年大鼠脊髓内以及脊髓损伤后不同时间点损伤段脊髓组织中CAPONmRNA的表达，采用cresylviolet染色计数脊髓组织内存活神经元。结果 CAPON mRNA在对照组大鼠脊髓内呈低水平表达于前角神经元，脊髓损伤后表达于灰质各部分神经元及白质。在损伤早期2h表达开始升高，于8h达到高峰，随后1d有下降趋势，3d时稍有上升，损伤后14d恢复至正常水平。而nNOSmRNA在损伤后2h迅速上调，于8h达高峰，随即下降至正常水平。在此过程中，有神经元凋亡现象的发生。损伤后2h存活神经元的数量即减少，随后稍有增多，但仍少于对照组，3d后存活神经元再度减少，持续至14d。结论 大鼠脊髓损伤后CAPONmRNA表达发生变化，提示CAPON可能通过调节nNOS的活性及亚细胞定位而影响神经元的凋亡，在脊髓损伤病理过程中发挥积极的调节作用。     

缬沙坦对糖尿病大鼠肾皮质中肾上腺髓质素受体(ADMR)表达的影响

目的 探讨缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用.方法 30只SD大鼠随机均分为正常对照组(N组)、糖尿病未干预组、糖尿病大鼠缬沙坦干预组.采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病动物模型,缬沙坦干预组以缬沙坦10mg/(kg·d)灌胃.8周后通过RT-PCR和Western blot方法,以GAPDH为内参照,检测肾皮质中肾上腺髓质素受体(ADMR) mRNA和蛋白的表达. 结果缬沙坦干预组较糖尿病未干预组大鼠体重明显增加(P＜0.01), 24h尿白蛋白排泄率显著降低,两组糖化血红蛋白及血糖比较无显著性差异;缬沙坦干预组大鼠肾皮质中ADMR mRNA和蛋白的表达显著高于糖尿病未干预组.结论 缬纱坦可上调糖尿病大鼠肾皮质中ADMR基因和蛋白的表达;ADMR可能参与了缬沙坦对肾脏的保护作用.     

右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响

目的评价右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响。方法健康Wistar大鼠36只,雌雄不限,体重300～350g,随机分为3组：假手术组（S组）、肾脏缺血再灌注组（IR组）和右美托咪啶组（D组）,各12只。采用动脉压夹夹闭双侧肾动脉60min、恢复灌注4h建立大鼠肾脏缺血再灌注模型。D组于夹闭双侧肾动脉前10rain尾静脉注射右美托咪啶3μg／kg：IR组于夹闭双侧肾动脉前10rain尾静脉注射等容量生理盐水;S组不夹闭双侧肾动脉,分离肾动脉后尾静脉注射等容量生理盐水。术后再灌注4h时处死大鼠取肾组织,采用PCR技术检测血红素氧合酶-1mRNA的表达,Western blot法测定血红素氧合酶-1（HO-1）蛋白水平,光镜下观察肾组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调（P〈0．05）;与IR组比较,D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调（P〈0．05）,肾组织病理学损伤减轻。结论右美托咪啶减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤与其上调肾组织血红素氧合酶-1的表达有关。     

基质金属蛋白酶-9在大鼠弥漫性脑损伤中表达及与脑水肿相关性研究

目的 观察大鼠弥漫性脑损伤中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-9mRNA表达和脑水肿的变化，探讨二者之间的关系。方法 建立Marmarou大鼠弥漫性脑损伤模型，实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应测定伤后不同时间MMP-9mRNA的表达，干湿重法测定脑含水量并观察脑组织中炎症反应和毛细血管超微结构变化。结果 外伤后1h大鼠脑组织中MMP-9mRNA开始增加，伤后12h达到高峰并持续7d（P＜0．01），14d下降至对照组水平（P＞0．05）。脑组织含水量比似手术组明显增加，炎性反应和毛细血管的超微结构破坏更重。结论大鼠外伤后诱导MMP-9mRNA表达增加，可能参与了弥漫性脑损伤后血管源性脑水肿的形成，从而加重了继发性脑损伤。     

非电离辐射对海马体的影响及研究方法进展

海马体作为神经系统的重要组织,与生物的学习、记忆、空间认知等功能密切相关。在研究非电离辐射对神经系统的影响过程中,探究其对海马体的影响格外重要。本文就非电离辐射对海马体的影响及其研究方法进行综述,以期为后续的研究提供借鉴。     

家庭结构对大学生心理健康的影响

目的:了解高校中具有特殊家庭结构的大学生的心理健康状况,分析特殊家庭结构对大学生心理健康的影响,为院校心理健康教育提供参考.方法:采用UPI对分校2001～2003年入学的有特殊家庭结构的大学生的心理健康状况进行抽样调查和配对分析.结果:有特殊家庭结构的大学生90.91%可能存在心理问题需要咨询和关注;其心理健康状况远比正常大学生的心理健康状况差.结论:有特殊家庭结构背景的学生,易形成孤僻、自卑、多疑、偏激等灰暗心理,是大学生中心理问题的高危人群,应引起院校心理卫生机构的高度重视.     

Interobserver agreement on the radiological criteria of the International Panel on the diagnosis of multiple sclerosis

We assessed the interobserver agreement on the radiological part of the International Panel (IP) criteria for the diagnosis of multiple sclerosis (MS), comprising the assessment of dissemination in space (DIS) and time (DIT) based exclusively on MRI. Four radiologists trained and four radiologists naive in the application of the IP criteria scored the fulfillment for DIS (i.e., ≥3 periventricular, ≥1 infratentorial, ≥1 juxtacortical, ≥ 1 enhancing lesion or a total of ≥9 T2-weighted lesions) and DIT (presence of new or enhancing lesions at follow-up) in baseline and two follow-up scans from 20 patients suspected for having MS. The IP-trained radiologists agreed at least moderately on all assessments (κ>0.40), whereas the IP-naive radiologists showed fair agreement (κ<0.40) on five of 16 assessments. In the final conclusion on DIS and DIT, the IP-trained radiologists agreed substantially on both items (κ=0.62 and κ=0.60, respectively) compared with a fair agreement on DIS (κ=0.29) and moderate agreement on DIT (κ=0.52) among the IP-naive radiologists. Given the poor interobserver agreement among IP-naive observers, the new IP criteria for MS require additional training and should perhaps be simplified.     

Initial observations on the effect of irradiation on the liver-specific uptake of Levovist

The aim of this pilot study was to see if the biodistribution of the microbubble Levovist (SHU 508 A; Schering AG, Berlin) during its liver specific phase is altered by radiotherapy. The mechanism of this liver-specific phase of this agent remains poorly understood. One way of investigating this is to see what effect radiotherapy has on liver uptake, as both Kupffer cell function and vascular endothelial integrity are selectively damaged by irradiation. The regional liver specific uptake of Levovist was evaluated in eight patients undergoing radiotherapy to the hepatic area. Ultrasound (US) sweeps were made 4 min after Levovist injection using the phase inversion mode (PIM) which is specific for microbubbles. Differences between irradiated and non-irradiated areas were observed in 2/8 subjects completing the study. Both subjective and objective evaluations in these subjects showed a significantly reduced grey scale unit in non-irradiated versus irradiated liver regions (average values 99 vs. 89, P < 0.0045 and 75 vs. 62, P < 0.0001). These findings are somewhat inconclusive, but given the difficulty in defining areas of irradiated and non-irradiated liver, because multiple radiotherapy portals were used in all patients, tentatively suggests a radiotherapy induced effect in at least some patients. The two likely mechanisms would be damage to the Kupffer cells and or the vascular endothelium, although the relative contribution of these is unclear.     

基于Lemple-Ziv算法的麻醉深度监测系统的架构研究

通过Lemple-Ziv复杂度算法分析原理，找到脑电图和麻醉深度的一种量化关系，应用计算机技术进行麻醉深度监测系统的架构研究，监测病人的脑电图，计算病人脑电图的复杂度，了解其麻醉深度。这种方法算法简单，适合计算机实时处理，易于临床应用。