RNA干扰技术基础与病毒学应用

RNA干扰(RNAi)是指由双链RNA始动的序列特异性转录后基因沉默机制，Fire等首先用这一术语描述双链RNA阻滞线虫基因表达这一现象。现已证实，RNAi不仅存在于线虫，也存在于昆虫、植物、真菌和脊椎动物。1999年Tuschl等将果蝇胚胎提取物中小RNA介导的靶mRNA降解，提出了RNAi的作用模式：大于30个碱基对的长双链RNA(dsRNA)被加工成21～23nt的小干涉RNA(siRNA)，后者可介导特异性mRNA的降解。如今RNAi在发育生物学、基因调控、基因功能的研究以及肿瘤和病毒的基因治疗等方面发挥了重要的作用。     

RNA干扰原理及应用研究进展

RNA干扰（RNAi）是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制,指内源性或外源性与靶基因的转录产物mRNA有同源互补序列的双链RNA（dsRNA）在细胞内特异降解该mRNA,从而致使特异性的基因有效封闭的过程,是一种序列特异性的转录后基因沉默（PTGS）。RNAi作为一种简单快速、特异、高效、经济、效果可预测的技术,具有明显的优势,它比反义核酸技术优越,比基因敲除简单,具有良好的应用前景。RNAi主要用于基因功能的分析、信号传导通路的研究、新药物的研究和开发、病毒感染和肿瘤的治疗等。     

RNA干扰技术用于白血病基因治疗的研究进展

许多类型白血病的发病和进展与基因突变有关。 RNA干扰技术作为一种高效、特异的基因沉默技术正被广泛应用于白血病的相关致病基因功能及基因治疗研究中,为人类探索白血病的根治方法开辟了一条新途径。本文对RNA干扰技术用于白血病基因治疗的研究作一综述。     

RNA干扰技术及其在神经病学中的研究进展

RNA干扰(RNAi)是指一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象,其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。微RNA(miRNA)在哺乳动物的大脑的不同区域具有不同的作用,并且RNAi在大脑的发育过程中具有重要的作用,miRNA具有调控多种目的基因表达的功能。由于神经元一旦受到损害就很难恢复正常的特性,目前RNAi被认为是治疗和改善神经变性疾病最有潜力的的技术。目前治疗性RNAi已运用于多种神经退行性疾病的体内和体外研究当中(如遗传肌张力障碍、阿尔茨海默病等),但其运用于临床治疗仍需进一步的研究。     

基因沉默与RNA干扰

生物体经过漫长的进化和自然选择后逐渐形成了对异常基因活动进行监控和防御的能力,这种天然免疫机制在最近几年的研究中得到了进一步认识。所谓异常基因活动是指病毒基因侵入和复制,转座子和转基因表达。正常基因活动几乎不产生双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA),而异常基     

RNA干扰技术

在基因治疗领域里，继反义RNA、核酶和三链DNA技术之后，现在又掀起了RNA干扰技术，这项技术在2002年度里荣登美国著名“科学”杂志评选出的世界十大科技进展之榜首，现将有关RNA干扰技术作一介绍。     

RNA干扰-dsRNA介导的基因沉默

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来首先在线虫体内发现的一种生物现象,即双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)能抑制序列特异性基因的表达[1].目前,RNAi现象在包括植物、真菌、果蝇以及某些哺乳动物等多种生物体内也已得到证实[2～4],被认为是进化过程中普遍存在的一种保守机制,是生物体防御病毒感染和转座子,保护自身基因组的重要手段[5、6],并因此引起生命科学界极大的关注.     

RNA干扰技术的原理与应用

RNA干扰作用(RNA i)是通过双链RNA(dsRNA)引发的转录后基因沉默机制。RNA i主要是指dsRNA分子进入细胞内,特异性降解与之同源的mRNA,从而特异高效地抑制相应基因表达活性的现象。近年来,RNA i以其高特异性、高效性等显著优势已成为研究基因功能的新手段,在功能基因组学、基因表达调控机制研究等领域得到了广泛的应用。在此对RNA干扰技术的发展历程、作用机制、作用特点及应用前景予以综述。     

RNA干扰-转录后水平的基因沉默

随着人类基因组计划的初步完成，生命科学也随之进入后基因组计划的时代。在各种研究基因功能的方法中，RNA水平使目的基因沉默无疑是目前研究的新点和热点，特别是双链RNA(dsRNA)介导的转录后水平的基因沉默(PTGS)，更是快速关闭基因的途径，目前在植物、线虫、果蝇和小鼠早期胚胎中均有发现和证实。这一现象的发现和应用将有助于基因功能及其在信号传导．病毒抵御机制等方面的研究，并有可能开创基因治疗的新模式。     

RNA干扰对小鼠脾淋巴细胞分泌TNF-α的影响

目的：探讨小干扰RNA（siRNA）对小鼠脾淋巴细胞分泌的肿瘤坏死因子α（TNF-α）的抑制效果。方法：体外PCR扩增合成针对TNF-α靶位点的DNA表达盒，转染经脂多糖（LPS）激活的小鼠脾淋巴细胞，在细胞内源性RNA聚合酶III作用下转录形成siRNA，诱发目标mRNA的降解。于转染后48h收集细胞培养上清。TNF-α浓度用ELISA方法测定。结果：与空白对照组和无关干扰组相比，干扰组TNF-α分泌量明显降低（P〈0．05），抑制率约为16％。结论：RNA干扰技术可以在原代培养的小鼠脾淋巴细胞中发挥特异性干扰作用，产生抑制TNF-α分泌的效果，为TNF-α的基因治疗开拓新途径。     

RNA干扰技术及其应用

RNA干扰(RNAi)是一种由双链RNA诱发的基因沉默。在此过程中,与双链RNA有同源序列的信使RNA被降解,从而抑制了该基因的表达。从发现RNAi现象以来,对RNAi的了解已取得重大进展。包括从最初的,对其干扰模式的预测,到如今,能够精确了解RNAi在多个物种中调节基因表达的作用机制及多面性。RNAi技术也已经在很多领域成为研究基因功能的重要工具。     

基因沉默的工具-RNA干扰技术的研究进展

<正>RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指与靶基因序列同源的双链RNA(dsRNA)所诱导的转录后基因沉默现象,是真核生物抵御病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制,也可替代基因敲除、核酶、反义核酸等进行基因沉默相关研究。众所周知,基因的表达具有选择性,我们发现生物体内存在一套RNA监视系统,能通过多种途径产生异常dsRNA,诱发RNAi,激活抑制基因,控制活跃基因,从而参与基因选择性表     

RNA干扰及其技术的应用

RNA干扰(RNAi)是细胞内由双链RNA诱导降解与其配对的特定mRNA的过程。细胞内双链RNA在酶的作用下,形成20-25碱基大小的小干扰RNA(si RNAs),由si RNAs进一步掺入多组分核酸酶并使其激活,从而精确降解与si RNAs序列相同的mRNA,抑制该基因在细胞内的翻译表达。介绍了RNA干扰的分子机制、制备方法、以及RNA干扰技术在功能基因组学、微生物学、基因治疗和信号转导等研究领域里的应用。     

RNA干扰技术在疾病治疗学上的应用研究

RNA干扰(RNAi)是一种广泛存在于各种真核细胞，由小干扰RNA(siRNA)介导对靶mRNA选择性识别和降解的转录后基因沉默现象。通过病毒或质粒栽体在培养细胞中转染外源性siRNA的RNAi技术被广泛用于基因功能的研究。临床研究表明，RNAi技术可选择性地消除疾病相关蛋白的表达，在疾病治疗学领域内具有可观的应用前景。     

RNA干扰及其抗病毒作用

RNA干扰 (RNAi)是一种新发现的通过 ds RNA介导的特异同源靶基因沉默途径。 RNAi主要包括两个步骤 :RNase 样核酸酶切割 ds RNA而生成 2 1- 2 3nt的 si RNA和 si RNA引导 RNA诱导的沉默复合体 (RISC)降解同源性靶基因 m RNA。在某些生物体中 RNAi具有放大效应。通过将 - 2 1nt si RNA导入哺乳动物细胞的 RNAi技术不仅可避免非特异干扰素反应 ,更重要的是还可介导序列特异的基因沉默。最近将 RNAi应用于许多病毒性疾病的治疗研究均取得了显著的基因沉默效果 ,预示 RNAi有望成为一种预防、治疗病毒性疾病的新手段。     

RNA干扰技术及应用

RNA干扰(RNAinference,RNAi)是指双链RNA(dsRNA)在细胞内特异性的诱导与之同源互补的mRNA降解,使相应基因的表达关闭,从而引发基因转录后水平沉默的现象.近年来,RNAi因其具有特异性、高效性等特点已经成为科研领域的新手段,它在反向基因组学、基因治疗、抗病毒、抗肿瘤、抗遗传疾病以及胚胎干细胞的研究中显示了巨大的潜力.