多沙唑嗪干预对α_1肾上腺素能受体抗体免疫糖尿病大鼠心肌的保护作用

<正>目的:探讨多沙唑嗪干预对抗α1肾上腺素能受体自身抗体(抗α1R-Ab)阳性糖尿病(DM)大鼠心肌转化生长因子β1(TGF-β1)表达和心肌胶原纤维含量的影响及其心肌保护作用的可能机制。方法:DM模型大鼠采用α1R-Ab注射液(100μg/100g体重)于实验第0、4、8、12、16周尾静脉注射,建立α1R-Ab免疫的DM大鼠模型。实验动物随机分为A组(DM对照组)、B组(DM+多沙唑嗪治疗组)、C组(DMα1R-Ab免疫组)、D组(DMα1R-Ab免疫+多沙唑嗪治疗组)。B组和D组给予多沙唑嗪0.36mg/Kg/天灌胃;A组和C组同时给予等体积生理盐水灌胃。16周后处死大鼠。     

α_1-肾上腺素受体抗体介导对糖尿病大鼠肾小管转化生长因子-β_1表达的影响

目的:观察α1-肾上腺素受体抗体(简称α1-受体抗体)介导的糖尿病大鼠对肾小管转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其在肾小管间质病变发生发展中的作用。方法:Wistar大鼠64只,分为对照组和糖尿病组。对照组和糖尿病组又分为无介导组与抗α1-受体抗体介导组。用链脲佐菌素复制糖尿病模型。葡萄糖氧化酶法测定血糖,放射免疫法测定尿白蛋白,免疫组化法检测肾小管基质TGF-β1的表达。结果:成功构建糖尿病大鼠模型,α1-受体抗体介导的对照组和糖尿病组肾皮质远端小管均可见TGF-β1表达,且糖尿病组明显高于对照组(P<0.01)。结论:TGF-β1在α1-受体抗体介导大鼠表达增加,即TGF-β1的表达与自身免疫有关。     

多沙唑嗪干预对抗α1受体抗体介导的糖尿病大鼠肾基质重构的影响

目的:观察抗α1肾上腺素能受体自身抗体(α1-AA)对大鼠24h微量白蛋白(24hUpro)、血清肌酐(Scr)、肾脏结构及IV型胶原、Smad2/3蛋白等的影响。方法:采用α1-AA注射液100μg/100g于实验第0、4、8、12、16周经鼠尾静脉注射DM大鼠(免疫介导组),并设不行α1-AA注射的DM大鼠为对照组(无介导组)。ELISA检测两组抗α1-AA阳性率;常规方法检测两组24hUpro和Scr;电镜观察两组大鼠肾脏病理变化,免疫组化法检测两组大鼠肾组织中IV型胶原、Smad2/3蛋白分布及表达;并用受体阻断剂干预受体阳性大鼠(干预组)后,观察以上指标的变化。结果:(1)免疫介导组α1-AA阳性率91.67%(22/24),明显高于无介导组(27.30%),差异有统计学意义(P0.01)。(2)免疫介导组大鼠Scr和24hUpro明显高于无介导组,差异亦有统计学意义(P0.01),干预组大鼠Scr和24hUpro较免疫介导组明显改善(P0.01)。(3)电镜下α1-AA介导组大鼠肾组织损伤严重,无介导组损伤不明显,干预组较免疫介导组病变明显减轻。(4)免疫介导组肾组织IV型胶原、Smad2/3蛋白表达显著高于无介导组(P0.05),干预组上述表达明显减少,与免疫介导组差异具有统计学意义(P0.01)。结论:通过免疫介导可以建立具激动样活性的抗α1肾上腺素受体抗体的大鼠模型;抗α1-AA介导可致糖尿病大鼠肾基质重构,参与糖尿病肾脏损害的病理生理过程;受体拮抗剂可改善和逆转肾损害。     

多沙唑嗪干预对α_1-肾上腺素能受体抗体介导的糖尿病大鼠肾皮质TGF-β_1表达

<正>目的:观察多沙唑嗪干预对血清α1-肾上腺素能受体抗体(α1-受体抗体)介导的糖尿病(DM)大鼠肾皮质TGF-β1表达的影响,探讨其在肾皮质病变发生发展中的作用。方法:(1)Wistar大鼠64只,分为DM无α1-受体抗体介导组、DMα1-受体抗体介导组、DMα1-受体抗体介导+可多华干预组以及DM可多华干预组。用链脲佐菌素复制DM模型。(2)α1-受体抗体介导在0、4、8、12、16周鼠尾静脉注射α1-受体抗体,每次以100μg/100g体重注射入鼠体内。(3)葡萄糖氧化酶法测定血糖。(4)放射免疫法测尿白蛋白。(5)免疫组化法检测肾皮质TGF-β1的表达。     

长期糖尿病大鼠心脏α1肾上腺素能受体及其亚型的改变

目的观察长期糖尿病大鼠心脏α1肾上腺素能受体（α1-AR）及其三种亚型的改变。方法采用链脲佐菌素（STZ）注射造成胰岛素依赖性糖尿病大鼠模型,放射配体结合实验和离体左心房收缩功能实验等方法观察心脏α1-AR及其三种亚型的改变。结果糖尿病大鼠与同龄对照大鼠相比,心脏α1-AR最大结合容量（Bmax）无显著差异,但α1B-AR减少,α1D-AR增加。糖尿病大鼠左心房α1-AR介导的最大收缩反应较对照组增加36%（P〈0.05）,pD2值不变。α1-AR亚型三种不同选择性拮抗剂5-MU、spiperon和BMY7378拮抗NE正性变力效应的pA2值不变。结论提示长期糖尿病大鼠心脏α1-AR介导的最大收缩反应增强,其主要与受体后信号转导效应增强有关,其中以α1B-AR尤为显著。     

大鼠缺血预处理时α1肾上腺素能受体的调节

目的：研究缺血预处理的反复短暂缺血再灌注对α1肾上腺素能受体(α1AR)的影响。期望能为设计药物预处理提供基础资料。方法： 对大鼠进行缺血处理，采用放射配基结合实验，测定反复短暂缺血再灌注时大鼠心肌细胞膜α1AR的数目与亲合力。结果： 缺血预处理的反复短暂缺血再灌注阶段导致α1AR数量增加和亲合力明显下降。结论： 缺血预处理导致α1AR的数目增加与亲合力降低，后者尤为突出。α1AR数量增多与其转入低亲合力状态，可能涉及缺血预处理的保护机制。     

β1-肾上腺素受体自身抗体对大鼠B淋巴细胞增殖的影响

目的 探讨β1-肾上腺素受体自身抗体(β1-AA)对大鼠B淋巴细胞增殖的影响.方法 本研究以主动免疫大鼠的方法获得β1-AA阳性的IgGs (pIgGs);免疫磁珠分选技术获得大鼠B淋巴细胞;CCK8法检测B淋巴细胞的增殖能力.结果 β1-AA(0.1 μmol/L pIgGs)促进LPS刺激的大鼠B淋巴细胞增殖(A值:0.739±0.036 vs 0.533±0.032,P＜0.05),且有浓度依赖性的趋势;该效应可以分别被β1/β2-肾上腺素受体(β1/β2-AR)阻断剂部分阻断,被两种阻断剂共同作用完全阻断;pIgGs对静息的大鼠B淋巴细胞无增殖作用.结论 β1-AA可能通过B淋巴细胞表面的β1-AR和/或β2-AR信号通路促进激活的B淋巴细胞增殖.     

抗β1-肾上腺素受体自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用

目的：观察抗β1-肾上腺素受体（β1-AR）自身抗体对在体大鼠心肌细胞的致凋亡作用,并探讨其可能的信号转导通路,以阐明该抗体参与心衰发生发展的病理机制。方法：用β1-AR细胞外第二环合成肽段免疫抗β1-AR自身抗体阴性大鼠（9周）,定期检测大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度、心功能、心肌组织凋亡现象和caspase-3,8,9活性。结果：（1）免疫组大鼠的血清抗β1-AR自身抗体滴度逐渐升高并维持于高水平[1∶（1280±0.07）];对照组始终在1∶10左右;（2）TUNEL和琼脂糖凝胶电泳显示免疫组大鼠在免疫3、4、5周心肌组织发生明显凋亡,caspase-3,8活性增高,免疫7、9周心功能明显下降,对照组未见异常。结论：抗β1-AR自身抗体可能通过激活死亡受体途径促进在体大鼠的心肌细胞发生凋亡,最终引起心功能下降。     

糖尿病大鼠膀胱肾上腺素能α_1受体表达改变

目的研究糖尿病大鼠膀胱结构功能的改变及其肾上腺素能α1受体及其亚型的表达改变,并探讨其意义。方法采用1%链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠的模型,实验分为正常对照组和糖尿病组。分别于2周、4周、6周进行在体充盈性膀胱测压评估膀胱功能,处死动物后取膀胱组织标本常规HE染色观察膀胱逼尿肌病理组织学变化,并采用Western blot与免疫荧光检测α1受体亚型(α1A受体与α1D受体)的表达改变。结果糖尿病大鼠体重减轻,尿量和膀胱湿重增加;充盈性膀胱测压检查结果显示糖尿病大鼠膀胱容量、顺应性、逼尿肌压力上升,残余尿量明显增加,排尿效率明显降低;常规HE染色光镜下观察可见糖尿病大鼠膀胱逼尿肌肌束进行性结构松散、紊乱,甚至出现肌束断裂。Western blott结果显示α1A受体及α1D受体的表达在逼尿肌中表达量随病程进行性下降,糖尿病组与正常对照组间对比差异有统计学意义。免疫荧光结果显示糖尿病膀胱实验组α1A受体和α1D受体灰度值均较相应对照组减少,且随病程进行性减少。结论糖尿病大鼠早期即可出现膀胱逼尿肌形态学和功能的改变,糖尿病膀胱中的α1-AR表达存在负相关关系,提示糖尿病可引起膀胱部位α1-AR表达减少。α1-AR表达减少可能是引起糖尿病膀胱顺应性增加,残余尿量增加的影响因素之一。     

中年自发性高血压大鼠主动脉α1肾上腺素受体亚型的改变

目的：研究１２月龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠与同龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉α１肾上腺。素受体（α１－ａｄｒｅｎｏｃｅｐｔｏｒ，α１－ＡＲ）亚型的分布。方法：采用离体灌流血管收缩功能实验和逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，结果：ＳＨＲ与同龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠相比，ＢＭＹ７３７８拮抗去甲肾上腺素（ＮＥ）缩血管效应的ｐＡ２值显著增大，ｓｅｒｔｉｎｄｏｌｅ的ｐＡ２值显著减小，而ＷＢ４１０１的ｐＡ２值无显著变化。ＣＥＣ预处理引起ＮＥ累积浓度－收缩效应曲线右移的作用显著增大。主动脉α１－ＡＲ３种亚型的ｍＲＮＡ稳态水平无明显改变。提示１２月龄ＳＨＲ主动脉中介导ＮＥ缩血管效应的α１－ＡＲ由对照组的α１Ａ－ＡＲ与α１Ｄ－ＡＲ亚型变为以α１Ｄ－ＡＲ亚型为主，这种改变不发生在ｍＲＮＡ表达水平     

慢性心功不全大鼠心脏α_1受体对β受体正性变力效应调节作用的改变

本文用缩窄腹主动脉和左肾动脉方法复制慢性心功能不全大鼠模型。用放射配体结合实验观察心脏α＿１肾上腺素受体（α＿１－ＡＲ）及其亚型分布的变化，显示在心功能不全大鼠心肌组织上α＿１－ＡＲ的数量及对￣１２５Ｉ－ＢＥ的亲和性与假手术大鼠无显著差别，但α＿１Ａ亚型占α＿１－ＡＲ总数的比例比假手术大鼠明显增高（５１±７％比２２±５％，Ｐ＜０．０１）。离体左心房收缩功能实验结果显示，两组间心肌最大收缩效应无显著差别；当用１０μｍｏｌ／Ｌ酚妥拉明阻断α＿１－ＡＲ时，心功能不全大鼠去甲肾上腺素（ＮＥ）的浓度－收缩效应曲线无显著左移，用１μｍｏｌ／Ｌ苯肾上腺素激动α＿１－ＡＲ时，亦未使异丙肾上腺素浓度－收缩效应曲线右移，用１ｎｍｏｌ／ＬＷＢ４１０１阻断α＿１Ａ亚型时，ＮＥ浓度－收效应曲线不再出现左移，但２０μｍｏｌ／ＬＣＥＣ不可逆阻断α＿１Ｂ亚型后，ＮＥ浓度－收缩效应曲线仍显著右移。结果提示，心功能不全α＿１－ＡＲ及α＿１Ａ亚型对β－ＡＲ介导的正性变力效应的抑制作用消失，而α＿１Ｂ亚型对β－ＡＲ介导的正性变力效应的增强作用仍存在。     

α1肾上腺素能受体阻滞剂治疗III型前列腺炎的临床观察

目的 探讨α1肾上腺素能受体阻滞剂治疗III型前列腺炎(CPPS/CAP)的疗效,探讨其治疗机制.方法 选取我院CPPS/CAP患者110例,随机分为对照组与观察组.对照组予以左旋氧氟沙星,观察组在对照组基础上加用甲磺酸多沙唑嗪控释片.采用 NIH-CPS I评分作为疗效指标,对前列腺按摩液(EPS)及尿流动力学指标的变化进行检查.结果经治疗观察组排尿症状评分和总评分均显著低于对照组(P<0.05);MFR、AFR均有所提高(P<0.05),且显著高于对照组;MUP及MUCP均较治疗前明显降低(P<0.05),且优于对照组;观察组白细胞显著低于对照组 (P<0.05).观察组总有效率63.64%显著高于对照组41.82%(P<0.05).结果 α1肾上腺素能受体阻滞剂(甲磺酸多沙唑嗪控释片)治疗III型前列腺炎可有效降低尿道压力,缓解前列腺内尿液返流,改善排尿障碍,提高治疗有效率,可作为治疗CPPS/CAP的基础用药.     

12月龄自发性高血压大鼠心脏α1肾上腺素受体亚型的改变

目的和方法：采用１２５Ｉ－ＢＥ２２５４放射配基结合实验和离体灌流左心房收缩功能实验，观察１２月龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）心脏α１肾上腺素受体（α１－ＡＲ）３种亚型的分布及其介导的正性变力效应的改变。结果：ＳＨＲ与年龄匹配的Ｗｉｓｔａｒ大鼠相比，（１）心脏α１－ＡＲ最大结合容量显著增加；去甲肾上腺素（ＮＥ）通过激动α１－ＡＲ引起的累积浓度－收缩效应曲线显著左移；（２）ＢＭＹ７３７８和ＷＢ４１０１的高亲和性位点所占百分比显著增大，而（＋）ｎｉｇｕｌｄｉｐｉｎｅ不变；（３）经ＣＥＣ预处理引起ＮＥ累积浓度－收缩效应曲线右移的程度显著增加，ＢＭＹ７３７８和ＷＢ４１０１拮抗ＮＥ介导正性变力效应的ｐＡ２值均显著增大。结论：ＳＨＲ较同龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠心脏α１－ＡＲ总数增多，对ＮＥ的敏感性显著增高，α１Ｄ－ＡＲ不仅数量增多，而且在介导收缩效应中的作用亦显著增大。     

高血压糖尿病大鼠心脏β肾上腺素能受体及其亚型的改变

目的研究高血压糖尿病大鼠心脏β肾上腺素能受体（β-AR）及其亚型的改变。方法采用高血压糖尿病大鼠动物模型,放射配体结合实验和离体左心房收缩功能实验观察高血压糖尿病大鼠心脏β-AR及其亚型的改变。结果高血压糖尿病大鼠心脏β-AR的最大结合容量（Bmax）较对照组增加35％（P〈0．01）,KD值不变。CGP20712竞争抑制曲线两位点分析显示β1-AR和β2-AR之间比例未发生改变。高血压糖尿病组在异丙肾上腺素（ISO）激动下β-AR介导的最大收缩反应（Rmax）较对照组下降48％（P〈0．01）,而pD2值不变。CGP20712阻断β1-AR后,β2-AR介导心肌的Rmax不变,而pD2值显著低于对照组（P〈0．05）;ICI118551阻断β2-AR后,β1-AR介导心肌的Rmax和pD2值均显著低于对照组（P〈0．05）。结论高血压糖尿病大鼠心脏β-AR总数明显上调,且β1-AR和β2-AR上调的程度相同;β-AR介导心肌最大收缩反应的降低,主要是由β1-AR的改变引起,β-AR对ISO敏感性不变,而β1-AR和β2-AR则分别发生减敏。     

扩张型心肌病患者血清中的β1-肾上腺素受体自身抗体通过β1-肾上腺素受体抑制CD4＋T淋巴细胞的增殖作用

目的探讨扩张型心肌病患者血清中针对β1-肾上腺素受体细胞外第二环（ the second extracellular loop of β1-adrenoceptor ,β1-AR-ECⅡ）功能表位肽段的自身抗体（β1-AA）对大鼠CD4＋T淋巴细胞增殖能力的影响。方法采用亲和柱纯化试剂盒提纯扩张型心肌病（ DCM）患者血清中的β1-AA;利用免疫磁珠分选技术分离出大鼠外周血单核细胞中的CD4＋T淋巴细胞,流式细胞技术检测CD4＋T细胞的阳性率;采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力;流式细胞术检测CD4＋/CD8＋T淋巴细胞的比值。结果经免疫磁珠分选后CD4＋T淋巴细胞的阳性率为97．7％;β1-AA可浓度依赖性抑制CD3/CD28刺激的CD4＋T淋巴细胞增殖;β1-AA被β1-AR-ECⅡ中和后,该效应消失;β1-AR特异性阻断剂美托洛尔可完全阻断该抑制效应;β1-AA作用于总T淋巴细胞24 h后,CD4＋/CD8＋T淋巴细胞比值没有发生明显改变。结论从DCM患者血清中提取的β1-AA可能通过CD4＋T淋巴细胞表面的β1-AR途径,导致该细胞增殖能力下降。提示β1-AA可能会直接减少T淋巴细胞的数量,使得T淋巴细胞功能下降,进而导致免疫系统紊乱,参与DCM的发生发展。     

抗α1-肾上腺素能受体抗体对培养大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察抗α1-肾上腺素能受体自身抗体对培养平滑肌细胞增殖的影响，并探讨其可能机制。 方法： 用酶消化法培养大鼠平滑肌细胞及用亲和层析的方法纯化抗α1-肾上腺素能受体抗体，用BrdU掺入法检测平滑肌细胞的增殖率，用RT-PCR及Western blotting法检测c-jun、c-fos的表达。 结果： 抗α1-肾上腺素能受体抗体可以显著增加VSMC的增殖，并随时间的延长及抗体滴度的增加而增强，并可增加c-jun mRNA和蛋白的表达，其作用与NE相似，均显著高于正常对照IgG，并均可被α1-肾上腺素能受体阻滞剂prazosin阻断；而该抗体对c-fos的表达无显著增加。 结论： 抗α1-肾上腺素能受体抗体可以显著增加培养大鼠平滑肌细胞的增殖，并可增加c-jun的表达，在高血压血管重塑中可能发挥一定作用。     

大鼠脓毒性休克时肝α1—肾上腺素能受体的变化及其机制

在结扎和刺穿盲肠诱导的大鼠脓毒性休克模型上，发现休克大鼠发生两种代谢变化：早期（９ｈ）高代谢（高血糖）和晚期（１８ｈ）低代谢（低血搪）。３Ｈ－哌唑结合试验显示：早期脓毒性休克时，肝细胞质膜α_１－肾上腺素能受体〔α_１－ＡＲ）最大结合容量增加３５％。晚期休克时下降３０％。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ、核ｒｕｎｏｆｆ测定显示：早期脓毒性休克大鼠α_１ｂ－肾上腺素能受体（α_１ｂ－ＡＲ）ｍＲＮＡ转录水平比对照组增加３４．７％，其ｍＲＮＡ合成相对比率增加５１．３％；晚期脓毒性休克大鼠α_１－ＡＲｍＲＮＡ转录水平比对照组降低２８．１％，其ｍＲＮＡ合成相对比率减少２４．９％，而ｍＲＮＡ半衰期无明显改变。提示脓毒性休克时α_１－ＡＲ的上调和下调的时相性变化也发生于转录水平，肝脏α_１ｂ－ＡＲ的变化可能是休克时糖代谢紊乱的重要机制之一     

α1-肾上腺素受体的研究进展

α1 肾上腺素受体介导了机体内源性儿茶酚胺的大多数反应 ,参与了机体的许多基本生理过程 ,诸如交感神经传导、心脏收缩、血管张力、肝脏代谢以及泌尿生殖系统平滑肌活动的调控。本文综述了近年来关于α1 肾上腺素受体的亚型、分布及信号转导等方面的进展 ,以期为α1 肾上腺素受体的药理、生理及病理生理学作用提供更深入的认识。     

四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化和TGF-β_1表达的影响

目的:观察四逆汤对异丙肾上腺素引起的大鼠心肌纤维化的干预作用并探讨其相关机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和四逆汤组。模型组及四逆汤组给予注射异丙肾上腺素,而对照组注射生理盐水。四逆汤组给予四逆汤灌胃,对照组和模型组均给予生理盐水灌胃。4周后,各组测定左室心功能、心肌羟脯氨酸水平;测定血浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;通过免疫组化方法检测心肌TGF-β1蛋白的表达;RT-PCR法检测TGF-β1mRNA表达。结果:(1)模型组羟脯氨酸水平明显高于对照组和四逆汤组,而四逆汤组明显高于对照组(P0.05);(2)四逆汤组与模型组比较,明显改善心肌舒张功能(P0.05);(3)模型组血浆AngⅡ及TGF-β1水平明显高于四逆汤组和对照组(P0.05);(4)模型组心肌TGF-β1蛋白和mR-NA表达明显高于四逆汤组和对照组(P0.05)。结论:四逆汤可以有效抑制异丙肾上腺素所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与减少AngⅡ生成,抑制大鼠心肌TGF-β1的表达有关。