MAV3104与鸟胞内分枝杆菌复合群耐克拉霉素作用研究

目的：研究鸟胞内分枝杆菌复合群（MAC）MAV3104基因编码蛋白与药物外排的关系。方法以MAC 标准株基因组为模板,扩增 MAV3104基因,构建 pMV261-MAV3104c 重组质粒;测序正确后,转化重组质粒到大肠杆菌 DH5并在 MAC 标准株中诱导表达,Western Blot 鉴定 MAV3104表达;按照 CLSIM24-A2的操作要求检测 MAC标准株对克拉霉素的敏感性及外排泵抑制试验。结果经基因测序及 Western Blot 蛋白表达验证重组质粒构建成功;MAV3104过表达能提高鸟分枝杆菌对克拉霉素的 MIC,且硫利达嗪能抑制该作用;MAV3104过表达也能提高胞内分枝杆菌对克拉霉素的 MIC,但硫利达嗪对其没有抑制效应。结论 MAV3104转运蛋白介导的药物外排在鸟分枝杆菌耐克拉霉素中起重要作用。     

60株快速生长分枝杆菌对11种抗结核化疗药物的敏感性分析

目的了解脓肿、龟、偶发3种快速生长分枝杆菌对11种抗结核化疗药物的敏感性。方法应用绝对浓度法对脓肿、龟、偶发分枝杆菌进行药物敏感性测定，测定药物及其浓度（ug／mL）分别为：异烟肼（1、10）、利福平（50、250）、链霉素（10、100）、乙胺丁醇（5、50）、阿米卡星（10、100）、力克肺疾（1、10）、卷曲霉素（100、1000）、环丙沙星（1、10）、莫西沙星（1、10）、左氧氟沙星（1、10）和克拉霉素（10、100）。结果共检测31株脓肿、20株龟和9株偶发分枝杆菌菌株。敏感性高于10％的有：脓肿分枝杆菌对克拉霉素87．1％、脓肿分枝杆菌对阿米卡星22．6％、龟分枝杆菌对克拉霉素75．0％、龟分枝杆菌对阿米卡星55．0％、偶发分枝杆菌对克拉霉素77.8％、偶发分枝杆菌对阿米卡星33.3％。另外，3种分枝杆菌虽对乙胺丁醇、链霉素、环丙沙星低浓度敏感性低．但对其高浓度则表现相当程度的敏感性。结论脓肿、龟、偶发3种快速生长杆菌对克拉霉素具有较高的敏感性。     

鸟-胞内分枝杆菌肺病与耐多药肺结核的多层螺旋CT特征比较

目的：探讨鸟-胞内分枝杆菌（MAC）肺病与耐多药性肺结核（MDR-TB）的多层螺旋CT（MSCT）的表现异同。方法：回顾性分析经菌种鉴定的MAC肺病41例（MAC肺病组）和同时期经1:1病例匹配的MDR-TB 41例（MDR-TB组）的MSCT表现,比较2组间差异。结果：MAC肺病组薄壁空洞检出率为69.2%,高于MDR-TB组的30.6%,MAC肺病组空洞平均壁厚为2.5（1.8,3.3）mm,低于MDR-TB组的3.9（2.7,5.0）mm（均P ＜0.001）;MAC肺病组空洞外壁分叶或毛刺征象、空洞周围卫星灶、引流支气管征检出率分别为53.8%、49.2%、27.7%,低于MDR-TB组的79.6%、93.9%、67.3%（均P ＜0.05）;MAC肺病组支气管扩张检出率、支气管扩张累及范围≥3肺叶、右肺中叶、左肺舌叶及左肺下叶支气管扩张检出率、柱状支气管扩张、支气管扩张伴小叶中心结节检出率分别为73.2%、43.9%、63.4%、48.8%、22.0%、53.3%、56.1%,高于MDR-TB组的46.3%、9.8%、12.2%、2.4%、4.9%、21.1%、24.4%（均P ＜0.05）;MAC肺病组囊状支气管扩张占比13.3%,低于MDR-TB组的47.4%（P ＜0.05）;MAC肺病组＞1 cm结节/球形肿块检出率为22.0%,低于MDR-TB组的68.3%（P ＜0.001）。结论：MAC肺病与MDR-TB的MSCT表现比较有一定的特异性,空洞类型、支气管扩张分型及分布优势部位、结节的大小有鉴别意义,有助于临床诊断。     

脓肿分枝杆菌对头孢类抗生素的药物敏感性分析

目的：：研究临床痰标本中分离得到的脓肿分枝杆菌,进行3种头孢类抗生素的体外药物敏感性测定,以期了解头孢类抗生素的抗菌活性。方法：通过16SrRNA 鉴定的30株脓肿分枝杆菌,采用改良的微量肉汤稀释法,进行头孢西丁、头孢美唑和头孢哌酮的药物敏感性测定。结果：脓肿分枝杆菌的临床分离株对头孢美唑的敏感性最高,敏感率达到90.00%;其次是头孢哌酮,其敏感率为76.67%;对头孢西丁的敏感性最低,为16.67%。MIC50和 MIC90的分析显示,实验菌株对于头孢美唑的敏感性较好,其值分别为16μg/mL 和64μg/mL;头孢哌酮的敏感性次之,分别为4μg/mL 和256μg/mL;头孢西丁的敏感性最低,分别为64μg/mL 和256μg/mL。结论：头孢美唑的抗菌活性最好,其次是头孢哌酮,而头孢西丁的抗菌活性最低。     

300株铜绿假单胞菌对抗菌药物敏感性分析

目的 了解铜绿假单胞菌(PAE)对抗菌药物的敏感性,并对其变化趋势进行分析,为临床防治PAE的感染提供依据.方法 对300株PAE菌进行回顾性分析.结果 3年来所监测的8种抗菌药物对PAE的敏感性保持稳定状态,敏感性＞70%,其中敏感性＞90%有亚胺培南、哌啦西林、阿米卡星. 结论应注意加强对细菌的耐药性监测,头孢他啶、哌啦西林、阿米卡星对PAE敏感性高,应作为治疗该菌感染的首选药;亚胺培南应限制性使用,以减缓PAE多重耐药菌株的产生.     

非结核分枝杆菌临床分离株的流行病学及临床特征分析

目的 分析台州市非结核分枝杆菌临床分离株的流行病学及临床特征,为非结核分枝杆菌病的疫情监测和诊断治疗提供参考依据。方法 回顾统计分析我院于2015 年1 月～2019 年12 月间检到的非结核分枝杆菌的分离率、菌种分布、混合感染情况、性别年龄构成和临床特征等。应用DNA 微阵列芯片法对分枝杆菌进行菌种鉴定。结果 5年间共检到非结核分枝杆菌331 株,分离率为19.0%,且逐年增加。检到的主要为胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌和龟/脓肿分枝杆菌,以胞内分枝杆菌最为常见,占57.7%。男性高于女性,50 岁以上高发。非结核分枝杆菌感染者常合并有肺结核、支气管扩张、肺部感染和慢性阻塞性肺疾病,临床表现多以咳嗽、咳痰首次就诊。结论 台州市非结核分枝杆菌的分离率和患病率逐年增加,以胞内分枝杆菌最为常见,DNA 微阵列芯片法可以用于分枝杆菌的快速鉴定。     

应用PCR技术快速鉴定结核分枝杆菌复合群菌种

目的 建立快速鉴定结核分枝杆菌复合群菌种的方法.方法 将7对结核分枝杆菌复合群各菌种特异性引物(Mtbc1-7)进行聚合酶链反应(PCR)扩增,通过对扩增产物的不同系带型进行分析,对已知标准株和96株临床分离株进行菌种鉴定.结果 用3株结核分枝杆菌复合群(MTBC)标准株,9株非分枝杆菌标准株以及27株非结核分枝杆菌的分枝杆菌(MOTT)对7对结核分枝杆菌复合群各菌种特异性引物进行特异性鉴定,结果证明引物Mtbc1能鉴定出分枝杆菌和非分枝杆菌;引物Mtbc2能鉴定出MOTT和MTBC;引物Mtbc3能鉴定出田鼠分枝杆菌;引物Mtbc4能从MTBC中识别出牛分枝杆菌和卡介苗;引物Mtbc5能鉴定出非洲分枝杆菌Ⅱ型和结核分枝杆菌;引物Mtbc6和引物Mtbc4结合能鉴定出卡介苗;引物Mtbc7和引物Mtbc5联合能鉴定出canettii分枝杆菌.96株临床分离株经7对引物扩增,扩增结果显示MOTT 20株,牛分枝杆菌1株,卡介苗1株,canettii分枝杆菌3株,田鼠分枝杆菌3株,非洲分枝杆菌Ⅰ型3株,caprae分枝杆菌1株,结核分枝杆菌或非洲分枝杆菌Ⅱ型64株.结论 应用PCR技术鉴定结核分枝杆菌复合群菌种结果准确可靠,且具有简便和快速等优点,有较大的分子流行病学应用价值.     

202株铜绿假单胞菌的临床分布及药物敏感性分析

目的：了解铜绿假单胞菌的临床分布及药物敏感性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法：对各种临床标本分离出的202株铜绿假单胞菌的临床分布和药物敏感试验结果进行分析。结果：铜绿假单胞菌从痰标本分离出的菌株最多,阳性率为45.55%。铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮＋舒巴坦的敏感性较高。结论：根据药敏结果合理使用抗生素可避免耐药菌株的产生,有效控制感染。     

MDR-TB诊断试剂盒鉴定广东结核分枝杆菌复合群及RIF和INH药敏效果分析

目的评价耐多药结核病(MDR-TB)快速诊断试剂盒对广东地区结核分枝杆菌复合群的鉴定效果及利福平(RIF)和异烟肼(INH)的药敏检测效果。方法选取151份痰标本和150份细菌培养物,采用MDR-TB快速诊断试剂盒对其进行菌群鉴定及RIF和INH药敏检测,结果分别与常规法进行比较。结果与常规生化菌种鉴定结果相比,两者鉴定结果一致率为96.7%(291/301);与常规比例法药敏试验结果相比,诊断试剂盒检测单耐RIF的灵敏度为94.1%(64/68),检测单耐INH的灵敏度为87.7%(57/65),检测RIF和INH皆耐药株的灵敏度为79.3%(46/58),检测RIF和INH皆敏感株的特异性为100%。结论该试剂盒能简单快速地鉴定结核分枝杆菌复合群,检测RIF和INF的敏感性高、特异性好,在广东地区应用前景较好。     

海南省某医院2014—2021年脓肿拟分枝杆菌分离鉴定及药物敏感性分析

目的 通过对海南医学院第二附属医院肺部感染患者脓肿拟分枝杆菌复合群(Mycobacteroides abscessus complex,MABC)进行菌种鉴定,探讨海南地区MABC肺部感染菌种类型、药物敏感性及人群分布情况。方法 收集2014—2021年期间就诊于海南医学院第二附属医院疑似肺结核患者的呼吸道标本并进行分枝杆菌分离培养,通过对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼(PNB/TCH)培养基与DNA微阵列芯片法初步鉴定出非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)菌株,再采用hsp65及rpoB基因测序法鉴定MABC及其亚种,并采用微量肉汤稀释法进行体外药敏试验。结果 研究期间共收集3 025例疑似肺结核患者呼吸道标本,从123例患者呼吸道标本中分离培养鉴定出124株MABC菌株,包括脓肿拟分枝杆菌脓肿亚种(Mycobacteroides abscessus subsp.abscessus)74株,脓肿拟分枝杆菌马赛亚种(Mycobacteroides abscessus subsp.massiliense)38株,脓肿拟分枝杆菌博莱亚种(M...     

PCR检测结核分枝杆菌复合群IS_(986)DNA重复序列

用ＰＣＲ检测ＭＴＢＣ特异的ＩＳ９８６ＤＮＡ重复序列。ＩＳ９８６ＤＮＡ重复序列全长１３５８ｂｐ，特异地存在于ＭＴＢＣ细菌染色体ＤＮＡ中，并且多次重复出现。作者参照文献，在此序列内合成一对引物，扩增出１８８ｂｐ的ＭＴＢＣ特异的ＤＮＡ片段。实验证明具有高度的特异性和敏感性。与其它的分枝杆菌和人血细胞ＤＮＡ无交叉反应。最小检出极限为１０ｆｇＤＮＡ或１０个菌体／ｍｌ。对ＰＣＲ反应体系中有关实验条件如引物浓度、ＴａｑＤＮＡ聚合酶用量、循环程序等进行了优化选择。在临床标本细菌ＤＮＡ抽提中首次采用了简便的ＴＥ－Ｔｒｉｔｏｎ煮沸法，节省了成本，使整个检测时间缩短至６～８ｈ，适合于临床实验室对结核病病原学的检测     

利用荧光定量RT-PCR和PCR方法检测结核分枝杆菌复合群

目的 建立一种新的检测结核分枝杆菌复合群的荧光定量试验方法 （R/P分析）,探讨R/P分析检测临床标本中结核分枝杆菌复合群的应用价值.方法 根据结核分枝杆菌复合群基因保守序列设计引物和探针构建质粒标准品.运用R/P分析检测54例确诊结核病人临床样本,检测的结果 同时与培养法、荧光定量PCR法进行比较.结果 不同临床标本用R/P分析诊断结核病,其敏感性高于荧光定量PCR法和培养法,阳性检出率分别为96.3%、83.3%和55.6%.结论 R/P方法 是一种快速、特异的直接检测方法,它可以区分结核分枝杆菌复合群的死菌与活菌,因此可以更好的指导医生进行治疗,更准确地做出公共卫生决策.     

医院内下呼吸道感染细菌菌株分布特点及药物敏感性分析

为探讨院内下呼吸道感染细菌分布特点和药物敏感性,对临床确诊的下呼吸道感染患者分别采取痰细菌培养及下气道分泌物培养共获得１９６株细菌。抗生素敏感性测定采用ＫＢ纸片法,最低抑菌浓度（ＭＩＣ）采用琼脂二倍稀释法。结果发现革兰氏阴性细菌（Ｇ＾－）以铜绿假单胞菌（ＰＡ）和肺炎克雷白杆菌（ＫＬＢ）为主,分别占３０％和２２％;革兰氏阳性菌（Ｇ＾＋）以表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为多见,分别占１４％和１２％。药敏     

结核分枝杆菌两种方法测试药物敏感性分析

结核病是长期危害人类健康的慢性传染病,耐药菌株的出现成为结核病控制的重要不利因素之一。国内外关于耐药情况的报道很多,但由于药敏方法常有差异,耐药水平可比性仍存争议。我国30多年来结核分支杆菌药敏试验普遍采用绝对浓度法,与目前WHO推荐的1%比例法在药物临界浓度、试验方法和判别标准都     

下呼吸道铜绿假单胞菌的药物敏感性分析

目的研究下呼吸道感染的铜绿假单胞菌对18种抗菌药物的敏感情况。方法收集近4年来我院呼吸内科住院的下呼吸道感染患者的痰标本进行分离培养,通过全自动微生物分析仪鉴定菌种和药敏实验。结果3426份痰标本共分离病原菌1397株,其中铜绿假单胞菌165株,占11．8％。铜绿假单胞菌的敏感率达60％以上的药物依次有多粘菌素E（95．8％）、头孢哌酮／舒巴坦（86．1％）、美洛培南（72．1％）、亚胺培南（71．5％）、头孢吡肟（67．3％）、哌拉西林／他唑巴坦（66．1％）、头孢他啶（64．8％）、阿米卡星（63．6％）、替卡西林／棒酸（61．8％）、奈替米星（60．O％）。结论呼吸内科下呼吸道感染患者的铜绿假单胞菌检出率高,耐药现象多,应根据药敏试验结果合理使用抗菌药物。     

760株致病菌与药物敏感性分析

为帮助临床用药,我们从本院1995—2000年分离760株细菌对14种抗生素的敏感性进行了监测。简述如下: 1.材料与方法 1.1 菌株来源 住院病人的血液、尿、大便、痰、脓及各种穿刺液、分泌物等标本,分离菌株共760株。     

广东地区脓肿分枝杆菌复合群对克拉霉素的耐药机制研究

目的 探讨脓肿分枝杆菌复合群(MABC)对克拉霉素的耐药机制,为MABC肺病诊治提供依据.方法 对广州市胸科医院冻存的191株龟-脓肿分枝杆菌复合群进行hsp65、rpoB、ITS多靶位基因菌种鉴定,确定为MABC的菌株进行克拉霉素最低抑菌浓度(MIC)药敏,延长培养时间至14 d,记录3、7、10、14 d的MIC值...     

251株分枝杆菌的分离培养及临床耐药性分析

目的从痰及体液等临床标本中分离培养出分枝杆菌并进行体外药物敏感性分析,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法采用绝对浓度间接法试验对251份培养阳性标本进行4种抗结核药物(INH、RFP、EMB、SM)的耐药性测定。结果总耐药率为60.96%(153),初治耐药率为45.10%(69),初治耐多药率为30.07%(46),复治耐药率为85.71%(84),复治耐多药率为56.12%(55)。耐药顺序为RFP﹥INH﹥SM﹥EMB,耐药率分别为49.80%、47.41%、25.10%、18.73%。结论本地结核菌耐药情况严重,因此应加强抗结核药物的耐药性监测,根据药敏结果选择有效化疗方案,彻底治疗结核病人。     

泌尿生殖道沙眼衣原体临床株体外药物敏感性检测及分析

目的:检测江门地区泌尿生殖道沙眼衣原体临床分离株对强力霉素、四环素和左氧氟沙星等8种临床常用抗生素的体外药物敏感性。方法:McCoy细胞培养法分离沙眼衣原体临床株,测定8种抗生素对沙眼衣原体的最低抑菌浓度(MIC)。结果:共培养出沙眼衣原体阳性株100株,经传代培养至感染率达90%以上符合药敏试验所需菌量的菌株有73株;MIC值范围分别为强力霉素0.016~0.125μg/ml、四环素0.039~0.625μg/ml、阿奇霉素0.032~1μg/ml、交沙霉素0.005~0.16μg/ml、红霉素0.125~2μg/ml、克拉霉素0.004~0.064μg/ml、左氧氟沙星0.063~1.0μg/ml和司帕沙星0.032~0.256μg/ml。结论:克拉霉素及阿奇霉素有较强的抗菌活性,强力霉素次之,红霉素和左氧氟沙星的抗菌活性则较低。     

345株结核分枝杆菌获得性耐药分析

目的：分析本院结核分枝杆菌对一线和二线药物的获得性耐药情况,为结核病防治工作提供参考依据。方法：采用WHO推荐的药敏比例法对577株结核分枝杆菌菌株进行鉴定及药物敏感试验,分析各类型结核分枝杆菌的获得性耐药情况。结果：577株结核分枝杆菌初始耐药232株(40.2％),获得性耐药345株(59.8％)。345株获得性耐...