用分子杂交技术分析不同种株利什曼原虫动基体DNA同源性

用~(32)P和生物素标记利什曼原虫动基体DNA(k-DNA),以Southern 杂交法分析了杜氏利什曼原虫四川人分离株(四川人株),四川犬分离株(四川犬株)及蜥蜴利什曼原虫k-DNA微环同源性。结果表明,形态上不能区别的利什曼原虫k-DNA 微环同源程度有种和株水平的差异。用电镜观察四川人株和四川犬株k-DNA 网,测得两者微环周长相同。     

光敏生物素和32P标记DNA打点杂交检测钩端螺旋体

Photobiotin- and 32P-labelled DNA probes of L. interrogans sv. lai strain 017 were produced and the DNA and leptospires were dotted on the NC filter and hybridized. The results showed that photobiotin and 32P-labelled DNA probes could detect DNAs of homology. The smallest amount of DNA that could be detected with the probes were 5pg and 1pg, and the smallest numbers of pathogenic leptospires were 5 x 10(3) and 10(3), respectively. Nonpathogenic leptospires. L. biflexa sv. patoc strain Patoc 1, L. illini strain 3055, Escherichia coli, Bacillus aerogenes capsulatus, and Salmonella anatis, could not be detected by the probes. The study demonstrates that leptospires DNA probe could be produced by labelling the DNA with photobiotin. It has higher sensitivity and specificity and can be used for detection of leptospires in the field and clinic.     

墨西哥利什曼原虫无鞭毛体超微结构研究

从感染墨西哥利什曼原虫的仓鼠的肿大趾跖部位,切取病变组织,电镜观察原虫形态。无鞭毛体平均长度3.64μm。表膜分内外两层。膜下微管中心间距55.2nm。膜下微管总数约100～110根。鞭毛袋内藏鞭毛。鞭毛从基体发出。基体后部鞭毛公式为“9×2+O”,前部为“9×2+2”。动基体腊肠状。内腔中有高度弯曲的DNA纤丝。动基体有时与线粒体相连,表明前者具线粒体功能。墨西哥利什曼原虫的超微结构,与其他利什曼原虫相似。但原虫长度、膜下微管中心间距及膜下微管数有一定区别,可能为利什曼原虫的虫种鉴定提供线索。     

光敏生物素和~(32)P标记DNA打点杂交检测钩端螺旋体

应用光敏生物素和~(32)P标记黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体DNA(简称017DNA)作为探针,打点杂交检测问号状钩体。结果表明:两种探针均能检测不同群、型的问号状钩体DNA,最小检测量分别为5pg和1pg;与双曲钩体patoc型PatocⅠ株、细螺旋体属illini型3055株及其他致病菌和正常人血清未发现明显杂交信号。提示光敏生物素制备的017DNA探针可以用于检测钩体,也可应用于钩体病的早期诊断和流行病学调查。     

光敏生物素标记DNA探针检测海南大劣按蚊

光敏生物素标记ＤＮＡ探针检测海南大劣按蚊刘斌陆晓林刘忠湘（第四军医大学寄生虫学教研室西安７１００３３）关键词大劣按蚊光敏生物素斑点杂交中图号Ｒ３９１．１同位素３２Ｐ标记的质粒ｐＡＤ－３２０是一株特异性、敏感性均较好的海南大劣按蚊探针．但是，由于同位素...     

黑热病杜氏利什曼原虫超微结构观察

本文报告一例黑热病患者骨髓内杜氏利什曼原虫的超微结构。结果表明其基本结构与其他利什曼原虫相似,但虫体大小、膜下微管数及膜下微管中心间距有一些区别     

用光生物素标记DNA探针鉴定军团菌种

DNA探针过去多用同位索标记．但半衰期短。价格昂贵。且防护和操作困难，故应用受限。近年来非同位素标记探针大量应用．结果十分理想。作用光生物索标记DNA探针的方法，对本室保存的标准军团菌种进行了鉴定。对从环境中分离培养到的形态疑似军团菌的菌落亦进行了鉴定。     

骨髓发现杜氏利什曼原虫小儿黑热病2例

黑热病病原体杜氏利什曼原虫的无鞭毛体，主要寄生在肝、脾、骨髓、淋巴结等器官的巨噬细胞内，常引起全身症状，如发热、肝脾肿大（脾进行性肿大）贫血等。我院于2005年5月-8月收治2例黑热病患儿，骨髓检查发现巨噬细胞胞浆内及细胞外有杜氏利什曼原虫，现报告如下。     

地高辛标记探针与生物素标记探针用于斑点杂交检测HBV DNA的初步研究

为研究地高辛标记和生物素标记核酸探针斑点杂交检测ＨＢＶ ＤＮＡ的敏感性、特异性和稳定性，用两种探针和＾３２Ｐ标记探针进行平行检测对照。结果表明，地高辛探针检测灵敏度为０．１Ｐｇ，已达到＾３２Ｐ标记探针水平。生物素探针为１￣１０Ｐｇ。两种探针与＾３２Ｐ标记探针相比。符合率分别９６．６５％和８９．１３％；敏感性分别为９４．４４％和８３．３３％；特异性分别为９６．４３％和９２．８６％。两种探针在－２０℃     

宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒16型DNA序列的检测

应用DNA斑点分子杂交技术检测了54例宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒16型DNA序列,并应用DNA Southern印迹杂交技术分析了部分斑点杂交阳性的标本。结果表明,50%的宫颈癌标本中HPV16DNA阳性,而在18例正常宫颈组织中未测到HPV16DNA序列;Southern印迹杂交发现HPV16DNA以整合状态存在。提示HPV16与宫颈癌的发生密切相关。     

DIFFERENTIATION OF PSEUDOCONDYLOMA OF VULVA AND CONDYLOMA ACUMINATA BY DOT BLOT HYBRIDIZATION AND POLYMERASE CHAIN REACTION

ＤＩＦＦＥＲＥＮＴＩＡＴＩＯＮＯＦＰＳＥＵＤＯＣＯＮＤＹＬＯＭＡＯＦＶＵＬＶＡＡＮＤＣＯＮＤＹＬＯＭＡＡＣＵＭＩＮＡＴＡＢＹＤＯＴＢＬＯＴＨＹＢＲＩＤＩＺＡＴＩＯＮＡＮＤＰＯＬＹＭＥＲＡＳＥＣＨＡＩＮＲＥＡＣＴＩＯＮＬｉｕＹｕｅｈｕａ刘跃华；Ｗａｎｇ...     

重组DNA技术斑点杂交法检测生物检材的性别

介绍了用斑点杂交技术,以Y染色体特异的3.5kb DNA片段为探针检测人血痕、人的组织碎块、牙齿、头发、羊水等的性别。样本经制备相当于0.1ul新鲜血的血痕,0.05 mg的组织块,带毛囊的头发1根,1/20颗牙齿牙髓质和2ul的羊水经本法检查,均能确定其性别。组织块经用福尔马林固定1周后,同样可以判断其性别,血痕性别的盲测结果全部正确。同时,对9种常见动物的血痕亦作了检查,均未显示阳性反应。本法准确灵敏,操作简单,值得进一步推广。     

分子杂交技术检测免疫球蛋白基因重排的意义

目的：探讨分子杂交技术检测免疫球蛋白基因重排的意义。方法：采用Ｊ＿Ｈ和Ｃ＿λ探针，经Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹法检测１２例确诊或疑诊血液系统肿瘤患者的２０份淋巴结、血和骨髓细胞的Ｉｇ基因重排。结果：发现Ｂ－ＮＨＬ、ＣＬＬ、ＨＣＬ和ＭＭ均有不同于胚系的重排模式，而淀粉样变性、ＣＭＬ、Ｔ－ＡＬＬ和鼻咽癌为胚系模式。结论：克隆性Ｉｇ基因重排仅见于Ｂ细胞，可作为Ｂ细胞克隆性增殖的证据，用于Ｂ细胞恶性增生性疾病的诊断，也可以用于分析Ｂ细胞肿瘤的克隆来源。     

抗杜氏利什曼原虫单克隆抗体识别抗原分子的检测

本文报道用SDS-PAGE、Western blot和ELISA方法,对杜氏利什曼原虫新疆株前鞭毛体中McAbs识别的抗原成分进行了检测。我们制备的抗杜氏利什曼原虫新疆株McAbs(A-9、A-11、C-11、E-12和H-10)共识别7条特异性抗原区带,抗原分子量分别为77000、74000、59000、54000、48000、43000和41000。     

RNA-DNA杂交法研究乳酸脱氢酶-C基因在睾丸中特异性表达

用同位32~P标记乳酸脱氢酶-C(LDH-C)cDNA作为探针,与小鼠胸腺、脑、胰、心肌、骨骼肌、睾丸、肾、肺、肝的RNA以及人胰、皋丸、肝、骨骼肌、心肌及脑的RNA分别作点溃杂交(dot blot hybridization)及Northern印迹杂交,证实LDH-C基因只在睾丸中特异性表达。     

圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——生物素-亲和素酶复合物在该方法中的应用

目的：应用生物素－亲和素－酶复合物系统，建立一种繁感、特异、经济简便的囊虫病血清学诊断。方法：生物素－亲和素－酶复合物圆斑酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）、滤纸血斑ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。结果：ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ 诊断囊虫病，检出率（９５．９２％ ）远较圆斑酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）高８３．６７％ ，平均几何滴度（１∶２ ８０１．７３）约为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ（１∶５８７．２６）的５ 倍；用该方法对４℃条件下保存３ 月的患者滤纸血斑样本进行检测，阳性率为９４．７４％ （５４／５７），无假阳性反应（０／４５）；对相同患者血清和滤纸血斑双份血样进行检测，阳性率均为９０％ （２０／２２）。结论：该方法提高了检出率，简化了采样及送样程序，适合于边远地区和用于流行病学调查。     

运用FQ RT-PCR和Western blot检测Claudin-1在人类大肠癌细胞株的表达

目的:探讨密连接蛋白Claudin-1与人类大肠癌进展的关系.方法:采用实时荧光定量RT-PCR(FQ RT-PCR)和Western blot,检测Claudin-1在3株不同分期人类大肠癌细胞株中的表达.结果:Claudin-1在大肠癌Dukes'type C期细胞株SW620强表达,Dukes'type B期细胞株SW480次之,Dukes'type A 期细胞株SW1116最弱.结论:Claudin-1在人类大肠癌细胞株中有表达,其表达量与大肠癌分期有关.