塞来昔布对Tca8113细胞侵袭性影响的体外研究

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygenease-2,COX-2)抑制剂——塞来昔布(celecoxib)对Tca8113细胞侵袭性的抑制作用。方法:用划痕实验检测Tca8113细胞的迁移能力;不同浓度的塞来昔布处理人舌鳞癌Tca8113细胞后,用MTT法检测细胞-基质黏附力的变化;用Transwell小室结合Matrix胶检测肿瘤细胞侵袭能力的变化。结果:10、20μmol/L的塞来昔布作用24 h后,细胞的侵袭能力分别下降了54%和73%(P<0.001),细胞-基质黏附力也明显降低(P<0.001)。结论:Tca8113细胞是高侵袭性细胞,塞来昔布对Tca8113细胞侵袭的抑制作用呈剂量依赖性。     

塞来昔布对Tca8113细胞环氧化酶-2表达及诱导凋亡的作用

目的观察选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对人舌鳞癌Tca8113细胞的生长抑制、COX-2表达调节及诱导凋亡的作用。方法在Tca8113细胞中分别加入含有不同浓度塞来昔布的培养液,培养24、48、72 h后,采用MTT方法测定细胞生长抑制率,采用免疫组化方法观察COX-2蛋白在Tca8113细胞中的表达,应用荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学特征,应用Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞的早期凋亡率,相对定量荧光定量PCR检测Tca8113细胞中COX-2 mRNA的表达。结果COX-2蛋白在Tca8113细胞中呈强阳性表达,塞来昔布在抑制细胞生长的同时,抑制Tca8113细胞COX-2蛋白的表达;Tca8113细胞经塞来昔布处理后凋亡细胞多见,与对照组相比,塞来昔布处理组早期凋亡细胞增多有统计学意义;塞来昔布调节COX-2 mRNA表达的作用与对照组相比无统计学意义。结论塞来昔布主要以剂量依赖的方式抑制Tca8113细胞生长,诱导细胞凋亡,其作用与抑制COX-2蛋白表达有关,而对COX-2基因作用较弱,其作用机制有待进一步研究。     

塞来昔布抑制Tca8113细胞释放PGE_2及抑制细胞增殖的作用

目的研究选择性环氧化酶2抑制剂塞来昔布对人舌鳞癌Tca8113细胞生长抑制、诱导细胞凋亡与释放前列腺素E2（PGE2）的影响。方法采用四唑氮蓝（MTT）法检测细胞增殖,AnnexinV-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡,酶联免疫吸附实验（ELISA）检测PGE2含量,AO/EB荧光双染观察凋亡细胞的形态学变化。结果塞来昔布以剂量依赖方式抑制Tca8113细胞生长及释放PGE2,其抑制PGE2释放与抑制细胞生长及诱导细胞凋亡均呈负相关,AO/EB荧光双染观察发现经塞来昔布处理24h后,细胞出现典型的凋亡变化,凋亡细胞多见。结论塞来昔布抑制人舌鳞癌Tca8113细胞生长及诱导细胞凋亡与其抑制PGE2释放密切相关。     

塞来昔布增强博来霉素对人舌鳞状细胞癌Tca8113杀伤作用的研究

目的 研究环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)增强博来霉素(bleomycin)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞的杀伤作用.方法 用含不同浓度的塞来昔布和博来霉素培养液培养Tca8113细胞24、48、72 h后,甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞生长抑制率,并采用金正钧法判断药物合用的相互作用;流式细胞术检测Tca8113细胞周期进程和诱导细胞凋亡的作用.结果 小剂量的塞来昔布(10 μmol/L)可增强博来霉素对Tca8113细胞的生长抑制作用,增强博来霉素阻滞Tca8113细胞周期进程的作用,其阻滞G1期细胞进入S期的作用最为明显,导致G0、G1细胞的数量增加[(60.93±0.32)%],S期[(30.57±0.78)%]、G2及M期[(8.50±0.50)%]细胞减少,同时,细胞凋亡率[(1.87±0.11)%]显著提高.结论 小剂量的塞来昔布可增强博来霉素对Tca8113细胞的毒性作用,阻滞细胞周期进程并诱导细胞凋亡.     

舌鳞状细胞癌侵袭和转移的研究进展

舌鳞状细胞癌是头颈鳞状细胞癌中最常见的恶性肿瘤,尽管医疗技术水平已经取得较大进步,但舌鳞状细胞癌患者的预后仍不理想,局部或区域性复发及颈部淋巴结转移仍为临床治疗的巨大挑战。文章介绍了与舌鳞状细胞癌侵袭和转移相关的一系列蛋白和基因、micro RNA、上皮间质转化和肿瘤干细胞行为的研究进展。随着对舌鳞状细胞癌侵袭和转移机制研究的不断深入,舌鳞状细胞癌侵袭和转移的生物学行为难题将有望被攻克。     

环氧化酶-2抑制剂对舌癌细胞侵袭及基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的探讨环氧化酶-2（Cox-2）抑制剂塞来昔布对人舌鳞癌细胞系Tca8113侵袭、黏附及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）分泌的影响。方法Tca8113细胞经塞来昔布作用24 h后,免疫组织化学方法检测细胞Cox-2蛋白表达,细胞外基质黏附实验检测细胞黏附力,Boyden侵袭小室测定细胞的侵袭力,酶联免疫吸附法检测培养液中MMP-2的水平。结果Tca8113细胞经塞来昔布作用24 h后,Cox-2蛋白表达明显受到抑制,Boyden侵袭小室细胞穿膜数和细胞外基质黏附率明显降低,同时,培养液中MMP-2水平也明显降低。结论Cox-2抑制剂塞来昔布可抑制Tca8113细胞Cox-2蛋白表达,其抑制细胞侵袭力和黏附率作用可能与抑制MMP-2分泌有关。     

RhoE在舌鳞状细胞癌中的表达及其对细胞迁移和侵袭的影响

目的初步探讨RhoE在舌鳞状细胞癌(TSCC)中的表达水平,及其对TSCC细胞迁移和侵袭的影响及相关机制。方法选取在青岛大学附属青岛市市立医院口腔医学中心颌面外科2017—2019年手术切除的TSCC原发灶48例,采用免疫组织化学法检测标本(TSCC组织、癌旁组织)中RhoE的表达水平,并提取标本的RhoE mRNA和蛋白进一步检测RhoE的表达水平。选取TSCC SCC-4和CAL-27细胞系进行体外实验,采用瞬时转染法过表达RhoE,并应用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)及蛋白质免疫印记法检测过表达效率;细胞划痕实验及Transwell细胞侵袭实验分别检测TSCC细胞的迁移和侵袭能力;蛋白质免疫印记法检测相关蛋白Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1 (ROCK1)、基质金属蛋白酶2 (MMP-2)、基质金属蛋白酶9 (MMP-9)的表达水平;采用GraphPad Prism 8.2.1软件对实验数据进行统计学分析。结果 TSCC组织中RhoE的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05);在体外实验中,与空白对照组和阴性对照组相比,过表达实验组TSCC细胞的迁移和侵袭能力显著...     

塞来昔布增强 KB/VCR 细胞对长春新碱敏感性与诱导凋亡的相关性研究

目的：探讨环氧化酶－2（COX －2）抑制剂塞来昔布增强口腔癌耐长春新碱细胞株 KB ／VCR 细胞对长春新碱敏感性与诱导凋亡的相关性。方法将 KB ／VCR 细胞分别采用长春新碱、塞来昔布及长春新碱联合塞来昔布处理后,用 MTT 法检测 KB ／VCR 细胞的生长抑制率,Annexin V －FITC ／PI 双标法检测细胞早期凋亡率,Western blot 检测抗凋亡蛋白 Bcl －xl 和Bcl －2的表达。结果塞来昔布以时间和剂量依赖方式抑制 KB ／VCR 细胞的生长,当塞来昔布浓度≤10μmol ／L 时,其对KB ／VCR 细胞的生长无明显影响。但小剂量的塞来昔布（10μmol ／L）与长春新碱（1．5μmol ／L）作用 KB ／VCR 细胞24、48及72 h 后,其生长抑制率分别为（33．16±4．66）％、（39．20±5．77）％、（44．01±4．27）％,显著高于长春新碱组（1．5μmol ／L）（P均＜0．01）。流式细胞术检测结果示联合用药组处理24 h 后早期凋亡率显著高于长春新碱单独用药组（P 均＜0．01）。West-ern Blot 结果显示联合用药组较其他给药组明显下调 Bcl －2、Bcl －xl 的表达（P 均＜0．01）。结论 COX －2抑制剂塞来昔布促进长春新碱对 KB ／VCR 细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,可能与下调 Bcl －2、Bcl －xl 蛋白表达有关。     

体外沉默法尼基转移酶对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响

目的 通过RNA干扰沉默法尼基转移酶（FTase）,探讨沉默FTase对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响及其相关机制。方法 针对FTase设计并构建3条小干扰RNA（siRNA）,转染人舌鳞状细胞癌CAL27和SCC-4细胞（实验组）,同时设置阴性对照组（转染NC-siRNA）和空白对照组（不转染siRNA）。应用实时荧光定量PCR检测各组细胞FTase、HRAS的mRNA表达,根据FTase mRNA的表达量,选取沉默效率最高的FTase-siRNA转染组作为进一步研究的实验组。蛋白质免疫印迹法检测各组细胞FTase、HRAS、p65、p-p65(S536)、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、低氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）的蛋白表达,Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测各组细胞的侵袭和迁移能力。结果 与阴性对照组和空白对照组相比,实验组FTase的mRNA和蛋白表达下降（P<0.05）,HRAS的mRNA和蛋白表达无明显变化（P>0.05）,p-p65(S536)、MMP-9、HIF-1α、VEGF蛋白表达下降（P<0.05）,p65蛋白表达无明显变化（P>0.05）;实验组的细胞侵袭和迁移能力降低（P<0.05）。结论 体外沉默舌鳞状细胞癌细胞FTase,可以抑制细胞体外迁移和侵袭能力,为FTase可能作为舌癌治疗的分子靶点提供了一定的理论和实验依据。     

舌鳞状细胞癌免疫治疗的研究进展

随着免疫学技术和分子生物学的发展,生物治疗尤其是主动免疫治疗为舌鳞状细胞癌的预防和治疗提供了新的思路。本文从免疫细胞、肿瘤抗原和细胞因子等方面对近年来舌鳞状细胞癌免疫治疗的研究进展作一综述。     

尼美舒利对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞ang-2基因表达的影响

目的 探讨环加氧酶(COX) -2抑制剂尼美舒利(NIM)对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞中ang-2基冈表达的影响及其意义.方法 以25、50、100和200 μmol·L-1浓度的NIM处理Tca8113细胞48 h,半定量RTPCR检测其ang-2 mRNA的表达.结果 Tca8113细胞中ang-2 mRNA...     

磁共振成像评估舌鳞状细胞癌浸润深度的准确性分析

目的以光镜下病理切片为参照,分析磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)测量的舌鳞状细胞癌浸润深度的准确性,为临床提供参考。方法选取2018年1月至2020年9月就诊于山西医科大学第一医院口腔科和中南大学湘雅口腔医院的73例舌鳞状细胞癌患者,术前均行MRI评估舌鳞状细胞癌浸润深度,术中冰冻病理切片再次测量舌鳞状细胞癌浸润深度。结果T1加权成像测量的舌鳞状细胞癌浸润深度较病理结果平均高估1.11 mm(95%CI=0.51~1.70,t=3.72,P<0.001),相关系数r为0.95;T2加权像平均高估2.17 mm(95%CI=1.32~3.02,t=5.10,P<0.001),相关系数r为0.92。Bland?Altman图显示T1、T2加权像与病理测量的浸润深度一致性佳。结论MRI测量的舌鳞状细胞癌浸润深度较为准确,与病理测量结果相比有平均1~2 mm的高估,其中T1加权像优于T2加权像。     

体外沉默异戊二烯基半胱氨酸羧基甲基转移酶基因对舌鳞状细胞癌迁移和侵袭的影响

目的 通过构建异戊二烯基半胱氨酸羧基甲基转移酶(ICMT)小分子干扰RNA(siRNA)沉默ICMT,研究沉默ICMT基因对舌鳞状细胞癌(TSCC)迁移和侵袭的影响.方法 通过脂质体转染的方法将siRNA转染至人TSCC CAL-27和SCC-4细胞(ICMT-siRNA组),并设阴性对照组(转染NC-siRNA)和空...     

Effect of enhancer of zeste homolog 2 inhibitor GSK126 on the proliferation and apoptosis of tongue squamous cell carcinoma

目的 观察zeste基因增强子同源物2（EZH2）抑制剂GSK126对人舌鳞状细胞癌细胞体外增殖与凋亡的影响,并探讨其相关机制,为舌鳞状细胞癌的临床治疗提供新思路。方法 将不同浓度的GSK126作用于舌鳞状细胞癌CAL-27细胞,通过甲基噻唑基四唑（MTT）、克隆形成、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）荧光染色实验检测药物对细胞增殖能力的影响;采用Hoechst33342荧光染色、JC-1法观察细胞凋亡情况;采用Western blot法检测CAL-27细胞内相关蛋白细胞外调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-9的表达水平。结果 GSK126能抑制CAL-27细胞增殖并对细胞凋亡有促进作用。GSK126能下调细胞内p-ERK、Bcl-2的表达水平,同时可增加Bax、Cleaved caspase-9的表达（P<0.05）。结论 GSK126可抑制舌鳞状细胞癌CAL-27细胞的增殖,并且能促进其凋亡,其机制可能与抑制MEK/ERK信号通路以及激活Bax/Bcl-2通路有关。     

MicroRNA与舌鳞状细胞癌相关性的研究进展

舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)是口腔恶性肿瘤中最具侵袭性的一种,占口腔癌的50%~60%。尽管在诊断和治疗技术上有了相当大的进步,但是TSCC仍然是头颈部最致命的癌症类型之一。MicroRNAs是内源性合成的小的非编码RNA,负责mRNA表达的转录后调控。它们作为有效的致癌基因或肿瘤抑制因子参与调控了包括TSCC在内的各种疾病的发病机制及过程。在TSCC样本中进行大量的MicroRNA分析,揭示了它们对TSCC起始、发展、转移、化疗耐药、复发和预后的潜在分子机制的作用。本文就MicroRNA与TSCC的相关性研究作一综述总结。     

Tranexamic acid can inhibit tongue squamous cell carcinoma invasion in vitro

Objectives:  Tranexamic acid (TA) is an inhibitor of plasminogen activation commonly used in surgery. Plasmin, the end product of plasminogen activation, degrades fibrin in the thrombus, leading to thrombolysis. However, plasmin is also associated with progression of several cancers and with cancer-associated matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) activation. As the gelatinases MMP-2 and -9 are involved in cancer progression, several antigelatinolytic drugs have been developed as potential anticancer therapeutics. We previously developed gelatinases targeting peptide CTT1 capable of inhibiting carcinoma growth.
Study design:  The effects of TA and CTT1 on tongue carcinoma aggressiveness were evaluated in an in vitro assay of human HSC-3 and SCC-25 cells.
Materials and methods:  The cells were cultured with or without TA and CTT1 and their proMMP-9 production and activation were analysed with Western immunoblotting and gelatin zymography. Their effects on tongue carcinoma invasion were analysed in a Matrigel assay.
Results:  Tranexamic acid alone and in combination with CTT1 can inhibit tongue SCC invasion in vitr o, at least partially explained by its property of reducing the plasmin-mediated activation of proMMP-9.
Conclusions:  These data suggest that patients undergoing surgical therapy for large oral malignancies may cobenefit from prolonged TA therapy, because of its antithrombolytic and antitumour properties.     

EMMPRIN expression in tongue squamous cell carcinoma

Background:  Extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN) is identified as a tumor-cell membrane protein that stimulates matrix metalloproteinases (MMPs) production. Several studies have shown that higher EMMPRIN expression is associated with shorter survival time and correlated significantly with more advanced clinico-parameters of cancer. The aim of this study was to investigate the relationship between clinico-pathologic characteristics and EMMPRIN, and prognostic significance of EMMPRIN expression in human tongue squamous cell carcinoma.
Methods:  Extracellular MMP inducer expression was examined immunohistochemically on paraffin-embedded tissue specimens from 68 patients with tongue squamous cell carcinoma and who underwent radical surgeries from 1996 to 2006. The 68 patients were followed up from 1 to 119 months, with an average of 27.5 months. Nonparametric tests were performed for the comparison of EMMPRIN expression between two independent groups. Survival analysis was performed to find the prognostic significance of EMMPRIN expression.
Results:  We found that EMMPRIN expression in tongue squamous cell carcinoma is significantly higher than that in non-cancerous epithelium adjacent to carcinoma of tongue. In addition, EMMPRIN expression is significantly associated with tumor diameter and clinical stage in the samples, but did not correlate with gender, age, tumor metastasis, and pathological grade. Finally, survival analysis indicates that EMMPRIN overexpression correlates significantly with poor overall survival in the patient cohort.
Conclusion:  These results suggest that EMMPRIN might represent an attractive target for immunotherapeutic approaches in a subgroup of patients with tongue squamous cell carcinoma.