二甲双胍联合顺铂对黑色素瘤细胞的抑制作用及其机制研究

目的 探讨二甲双胍联合顺铂对黑色素瘤细胞的抑制作用及机制.方法 小鼠恶性黑色素瘤细胞B16,设空白组、对照组、给药组A、给药组B、给药组C、给药组D、给药E组.给药A、B、C、D、E组分别加入稀释后的二甲双胍(1、2.5、5、10、15mmol/L)和顺铂(5、12.5、25、50、75μmol/L)混合物,室温处理2...     

二甲双胍激活AMPK促进顺铂对肝癌细胞凋亡的初步研究

目的 探讨二甲双胍与顺铂合用对肝癌细胞的作用,为进一步的体内研究奠定基础.方法 MTT法检测不同浓度、不同时间二甲双胍、顺铂单用及两者合用于SMMC7721、HepG2肝癌细胞所致细胞增殖及凋亡;Hoechst33258检测二甲双胍、顺铂单用及合用对HepG2细胞核形态变化的影响.Western blot检测细胞内AMPK/p-AMPK的表达.结果 二甲双胍、顺铂单用及合用于SMMC7721、HepG2,随着作用时间及浓度增加抑制率增加,呈时间-浓度依赖性;Hoechst33258结果显示合用组细胞凋亡最严重;Western blot结果显示二甲双胍、顺铂单用及合用均激活AMPK,联合用药组p-AMPK上调最明显.结论 二甲双胍联合低浓度顺铂可激活AMPK,增加其对SMMC7721、HepG2癌细胞的毒性.     

二甲双胍对顺铂诱导急性肾损伤大鼠的治疗作用

目的： 二甲双胍对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的治疗作用尚不明确,本研究采用顺铂诱导的 AKI 大鼠作为实验模型,给予二甲双胍药物干预,探索二甲双胍对AKI 大鼠的治疗作用,并初步探索其作用机制。 方法：18 只雄性SD大鼠适应性喂养1 周后,将其随机分为正常对照组、模型组及二甲双胍治疗组,每组6 只。模型 组和二甲双胍治疗组大鼠采用腹腔注射顺铂(8 mg/kg)的方法建立AKI模型。二甲双胍治疗组大鼠在造模前48 h 开始 给予200 mg/(kg·d)的二甲双胍灌胃,正常对照组及模型组大鼠用等体积的羧甲基纤维素钠灌胃,连续给药9 d。最后 一次灌胃给药后,留取大鼠24 h 尿液,检测中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)水平;取大鼠血液以检测肾功能;行肾组织切片HE染色后评估肾小管损伤程度;采用TUNEL法评估肾小管 上皮细胞凋亡情况。结果：与正常对照组相比,模型组血尿素、血肌酐、尿NGAL水平明显升高(均P<0.05),肾小 管损伤程度评分和肾小管上皮细胞凋亡数量明显增加(均P<0.05);与模型组相比,二甲双胍治疗组血尿素、血肌酐、 尿NGAL水平明显降低(均P<0.05),肾小管损伤程度评分和肾小管上皮细胞凋亡数量明显减少(均P<0.05)。结论：二 甲双胍对顺铂诱导AKI大鼠有治疗作用,可能减少肾小管上皮细胞的凋亡有关。     

二甲双胍对顺铂治疗食管鳞癌的增敏作用

目的探讨二甲双胍(Met)对食管鳞癌细胞株TE-1增殖的抑制作用及其对顺铂治疗食管鳞癌的增敏作用。方法人食管癌细胞株TE-1细胞分为空白对照组、单用顺铂组(顺铂A组浓度为4.17μmol·L-1,顺铂B组浓度为8.33μmol·L-1)、单用Met组(Met浓度分别为5、10、20、40、80 mmol·L-1)及顺铂+Met联合组(联合A组:顺铂浓度为4.17μmol·L-1、Met浓度为5 mmol·L-1,联合B组:顺铂浓度为8.33μmol·L-1,Met浓度为5 mmol·L-1),通过四甲基偶氮唑盐法测定各试验组不同时间(24、48、72 h)的细胞增殖抑制率。结果在同一时间点,不同浓度Met对TE-1细胞的增殖抑制率均显著高于空白对照组(P<0.01),且呈浓度依赖性(P<0.01);在Met各浓度组内,48、72 h时的TE-1细胞增殖抑制率均显著高于24 h时(P<0.01),但48 h与72 h增殖抑制率比较差异无统计学意义(P>0.05)。作用24、48、72 h时,联合A组和联合B组对TE-1细胞的增殖抑制率均高于同时间段5 mmol·L-1Met组和同浓度单用顺铂组,差异均有统计学意义(P<0.01);联合A组增殖抑制率与单用顺铂B组比较差异无统计学意义(P>0.05);同一时间点联合B组增殖抑制率均高于联合A组,差异有统计学意义(P<0.01);联合A组和联合B组48、72 h时对TE-1细胞的增殖抑制率均高于24 h时,72 h时的增殖抑制率均高于48 h时,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Met对食管鳞癌细胞株TE-1细胞的增殖有抑制作用,且可增加TE-1细胞对顺铂的化学治疗敏感性。     

二甲双胍逆转卵巢癌细胞对紫杉醇耐药性的研究

目的:探讨二甲双胍对卵巢癌耐药细胞A2780/Taxol紫杉醇耐药性的逆转作用及可能的机制.方法:实验分为对照组和二甲双胍作用组(10 mM、20 mM、30 mM).药物作用48 h后,使用CCK-8法检测细胞A2780/Taxol的增殖;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞的迁移能力;流式细胞术检测细胞内Rh123的积累;蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3及Bcl-2蛋白的表达.结果:二甲双胍抑制细胞A2780/Taxol的增殖,实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);实验组细胞染色质凝集,细胞凋亡率增高(P<0.05);细胞的迁移能力下降,实验组与对照组差异明显(P<0.05);10 mM、20 mM组细胞内Rh123累积量增加,与对照组差异明显(P<0.05);凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达下降.结论:二甲双胍可能通过上调cleaved Caspase-3表达、下调Bcl-2蛋白表达,启动线粒体内源性凋亡途径来逆转卵巢癌细胞A2780/Taxol对紫杉醇的耐药性.     

二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及其机制。方法通过Annexin V-FITC/PI染色镜下观察及流式细胞仪检测观察二甲双胍对786-O细胞凋亡的影响,通过免疫印迹检测AMPK信号及Caspase 9表达探讨可能分子机制。结果二甲双胍能够诱导786-O在低浓度血清环境凋亡,激活Caspase 9,二甲双胍能够激活786-O细胞中AMPK信号,但与其凋亡诱导效应无关。结论二甲双胍能够诱导肾癌细胞在低浓度血清环境凋亡,具有潜在治疗肾癌作用。     

二甲双胍通过mTOR信号通路促进结肠癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨二甲双胍对结肠癌细胞增殖以及凋亡的作用及其潜在机制。 方法 将HCT8细胞随机分为4组:对照组和二甲双胍组(5、10以及20 mM),对照组不接受任何干预措施。MTT法观察4组细胞增殖及对结肠癌细胞的抑制率,AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒观察细胞凋亡情况,同时应用PCR以及Western-blot检测mTOR通路相关基因与蛋白的表达量。 结果 与对照组比较,不同浓度二甲双胍对HCT8均有抑制作用,并且呈剂量依赖性,20 mM二甲双胍对结肠癌HCT8细胞抑制作用最明显,与5、10 mM以及对照组差异均有统计学意义(P<0.05)。另外,随着时间的增加,二甲双胍对结肠癌HCT8的抑制作用增加,72 h后抑制率与24 h以及48 h抑制率差异均有统计学意义(P<0.05)。凋亡结果显示5、10以及20 mM二甲双胍作用于结肠癌HCT8细胞后凋亡率分别是(3.16±0.16)%、(5.12±0.39)%以及(6.11±0.15)%,均高于对照组凋亡率(1.5±0.28)%,各组之间凋亡率差异均有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍干预后结肠癌细胞4EBP1、S6K1以及mTOR的mRNA表达量以及蛋白表达量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 二甲双胍通过抑制mTOR信号通路抑制结肠癌细胞增殖以及促进结肠癌细胞凋亡。      

二甲双胍抑制哮喘模型大鼠气道重塑的研究

目的 观察二甲双胍对哮喘气道重塑的影响及其可能作用机制.方法 28只B/N大鼠随机分为对照组、哮喘组、二甲双胍干预组和雷帕霉素干预组;制备哮喘模型,以二甲双胍、雷帕霉素进行干预;末次激发48小时后测定大鼠气道阻力及气道反应性,收集肺组织标本,采用组织病理学方法观察气道炎症细胞浸润、气道壁杯状细胞增生、气道壁纤维化和重塑...     

二甲双胍改善卵巢癌预后及相关机制的研究进展

摘要 二甲双胍(metformin,Met)作为一线降糖药不仅用于治疗2型糖尿病(type2diabetes,T2DM),而且能改善 卵巢癌(ovariancancer,OC)患者预后。其主要通过 AMPK 途径、改善铂类耐药、抑制 OC转移、影响肿瘤微环境途径改 善 OC预后。此外,Met联合化疗药物、靶向药物(如奥拉帕利、贝伐珠单抗)及免疫检查点抑制剂均可抑制 OC进展。     

二甲双胍减轻阿霉素诱导的心脏毒性:基于AMPK通路

目的 探究AMPK通路是否以及如何影响二甲双胍调节体内阿霉素心脏毒性的能力。方法 临床研究：以123例使用阿霉素进行阶段性化疗的髓系白血病、非霍奇金淋巴瘤、乳腺癌患者为研究对象,其中80例未联用二甲双胍（对照组）,43例联用二甲双胍（200 mg/d,试验组）治疗。首先对两组患者进行基线资料对比,再使用自身对照及组间对照方法,回顾分析两组患者用药前后心肌损伤指标[血浆肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平、乳酸脱氢酶（LDH）]水平及心衰相关指标[血浆B型钠尿肽（BNP）、左心室射血分数（EF）、左室短轴缩短率（FS）]等的变化。基础研究：以24只6周龄AMPKα2基因敲除小鼠（AKO）为研究对象,24只6周龄C57BL/6野生型小鼠（WT）为对照,将AKO组和WT组小鼠组内再随机分为4组,分别是对照组（Con）、二甲双胍组（MET）、阿霉素组（DOX）及二甲双胍联合阿霉素组（MET+DOX）,6只/组。对上述各组小鼠行血清LDH、肌钙蛋白I(cTnI)、心肌细胞凋亡水平检测,心功能FS测定。结果 临床研究结果：两组患者化疗前血CK-MB、LDH、BNP水平及左心室EF、FS值无差别。化疗后...     

顺铂耐药卵巢癌细胞化疗敏感性实验

【目的】研究顺铂（DDP）、洛铂（LBP）、紫杉醇（PTX）、吉西他滨（GEM）对卵巢癌SKOV3细胞及顺铂耐药SKOV3/DDP细胞增殖的影响。【方法】培养基中不含药物的处理组为对照组,加入不同浓度化疗药物的处理组为实验组。在相差显微镜下观察细胞形态变化;用MTT法测定单药应用、双药联合使用对两种细胞生长的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化。【结果】SKOV3∕DDP细胞耐药指数为7.10&#177;2.19。紫杉醇、洛铂、吉西他滨对两种细胞的抑制率无明显差别。洛铂、紫杉醇、吉西他滨两药联合组与相应单一用药组相比,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其中吉西他滨＋洛铂及紫杉醇＋洛铂组抑制率明显增高。相同浓度顺铂作用48h后,SKOV3/DDP细胞的凋亡率低于SKOV3细胞。洛铂、紫杉醇、吉西他滨作用两种细胞48h后,细胞凋亡率差异无统计学意义。顺铂、洛铂与紫杉醇、吉西他滨主要作用于不同的细胞周期。【结论】SKOV3/DDP细胞对紫杉醇、洛铂、吉西他滨无交叉耐药。联合用药有高效协同抑制细胞生长作用,临床治疗卵巢癌顺铂耐药患者可考虑选择吉西他滨＋洛铂、紫杉醇＋洛铂联合化疗。     

P5增强卵巢癌细胞顺铂敏感性的体外研究

目的:探讨凋亡诱导核苷P5增强卵巢癌细胞顺铂(DDP)敏感性的作用,为临床改善卵巢癌患者的预后提供新方法.方法:选择卵巢癌细胞株COC1,以MTT法、Hoechst染色法,观察P5对卵巢癌细胞的生长抑制作用及其对DDP化疗的增敏作用.结果:小剂量P5(25 μg/mL)和大剂量P5(200 μg/mL)分别联合DDP共同作用于COC1细胞,DDP IC50值由2.51 μg/mL降至1.56～1.52 μg/mL.Hoechst染色法观察,小剂量P5和大剂量P5联合DDP作用于COC1细胞株,细胞凋亡明显增加.结论:小剂量P5与大剂量P5均能增加COC1细胞对DDP的敏感性,P5 DDP化疗增敏作用与其增加肿瘤细胞凋亡有关.     

二甲双胍和紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：研究二甲双胍联合紫杉醇在体外对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响,阐明二甲双胍与紫杉醇的药物协同效应。方法：将卵巢癌SKOV3细胞分为空白对照组、不同浓度（0.01、0.50、1.00、5.00和10.00 mmol·L^-1）二甲双胍组和联合用药组（不同浓度二甲双胍及紫杉醇联合用药）。MTT法检测各组SKOV3细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组SKOV3细胞凋亡率及细胞周期变化;MTT法检测各组SKOV3细胞增殖抑制率。结果：MTT法检测,不同浓度二甲双胍组SKOV3细胞增殖抑制率明显升高,并呈浓度和时间依赖性,与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术检测,不同浓度二甲双胍作用下SKOV3细胞凋亡率明显升高,与空白对照组比较,随着二甲双胍浓度的增加,药物作用48h后实验组SKOV3的细胞凋亡率明显升高（P<0.05）;同时细胞周期发生明显变化,随着二甲双胍浓度的增加,G₀/G₁期细胞百分率降低（P<0.05）,而 G₂/M期细胞百分率升高（P<0.05）。MTT法检测,1.00 mmol·L^-1二甲双胍与紫杉醇联合用药组SKOV3细胞增殖抑制率高于0.50 mmol·L^-1二甲双胍与紫杉醇联合用药组（P<0.05）;二甲双胍与紫杉醇联合用药组SKOV3细胞增殖抑制率高于单独紫杉醇组（P<0.05）。结论：二甲双胍通过诱导细胞凋亡抑制卵巢癌细胞SKOV3细胞增殖,二甲双胍能够增强紫杉醇对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制作用,二者具有药物协同效应。     

高浓度二甲双胍通过JNK通路抑制MIN6细胞增殖和迁移

目的本研究从细胞生物学角度检测二甲双胍对小鼠胰岛瘤MIN6的影响,并探讨此过程中包含的分子生物学机制。方法 MTT法检测不同浓度二甲双胍(1、2、5、10、20 mmol/L)对MIN6细胞活力的影响,细胞划痕实验检测二甲双胍对MIN6细胞迁移的影响,免疫印记实验检测此过程中细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase3表达的变化,及AMPK和JNK信号通路蛋白磷酸化水平的变化。结果二甲双胍浓度大于10 mmol/L时可以抑制MIN6细胞的活力(P<0.01),降低其迁移能力(P<0.01),高浓度二甲双胍可以上调细胞内凋亡蛋白Bax(P<0.05)和p-AMPK的表达(P<0.05),降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,增加caspase3剪切体(P<0.05)。同时,二甲双胍可以降低MIN6细胞内JNK信号通路的磷酸化水平(P<0.05)。结论高浓度二甲双胍可以抑制MIN6细胞的增殖和迁移,其作用可能与降低了JNK信号的通路活化有关。     

二甲双胍通过调控糖代谢抑制甲状腺结节的研究进展

甲状腺结节是指各种原因导致甲状腺内出现的一个或多个组织结构异常的团块。近年来甲状腺结节患病率不断增加，糖代谢异常可能是其重要原因之一，主要涉及胰岛素/胰岛素样生长因子１、瘦素、炎症、遗传免疫等机制。二甲双胍作内应用最广泛的抗糖尿病药物，可以通过不同信号通路发挥抑制甲状腺结节的作用。文章就此方面研究进展进行综述。     

顺铂耐药卵巢癌细胞化疗敏感性实验

【目的】 研究顺铂(DDP)。洛铂(LBP)。紫杉醇(PTX)。吉西他滨(GEM)对卵巢癌SKOV3细胞及顺铂耐药SKOV3 /DDP细胞增殖的影响。【方法】 培养基中不含药物的处理组为对照组,加入不同浓度化疗药物的处理组为实验组。在相差显微镜下观察细胞形态变化;用MTT法测定单药应用。双药联合使用对两种细胞生长的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化。【结果】 SKOV3∕DDP细胞耐药指数为7.10 ± 2.19。紫杉醇。洛铂。吉西他滨对两种细胞的抑制率无明显差别。洛铂。紫杉醇。吉西他滨两药联合组与相应单一用药组相比,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其中吉西他滨 + 洛铂及紫杉醇 + 洛铂组抑制率明显增高。相同浓度顺铂作用48 h后,SKOV3/DDP细胞的凋亡率低于SKOV3细胞。洛铂。紫杉醇。吉西他滨作用两种细胞48 h后,细胞凋亡率差异无统计学意义。顺铂。洛铂与紫杉醇。吉西他滨主要作用于不同的细胞周期。【结论】 SKOV3/DDP细胞对紫杉醇。洛铂。吉西他滨无交叉耐药。联合用药有高效协同抑制细胞生长作用,临床治疗卵巢癌顺铂耐药患者可考虑选择吉西他滨 + 洛铂。紫杉醇 + 洛铂联合化疗。     

二甲双胍对非酒精性脂肪肝的缓解与AMPK-G0S2信号通路的关系

目的:探讨二甲双胍对G0期G1期转换基因2(G0S2)的调控作用在非酒精性脂肪肝(NAFLD)治疗中的作用机制。方法:在动物水平12只雄性ob/ob小鼠随机分为二甲双胍组,对照组。在小鼠药物处理期间测量小鼠体重,实验结束时称量小鼠的进食量,肝脏的重量,检测肝脏组织中脂质含量。实时荧光定量PCR和Western blotting在RNA水平和蛋白水平检测小鼠肝脏组织中AMPK信号通路相关分子以及G0S2的变化。结果:二甲双胍组ob/ob小鼠体重明显低于对照组,且摄食量没有明显差异。二甲双胍组ob/ob小鼠肝脏组织重量以及脂质含量均低于对照组。在分子水平上二甲双胍显著激活ob/ob小鼠肝脏组织中AMPK信号通路且下调G0S2蛋白表达。结论:二甲双胍通过激活AMPK信号通路下调G0S2的表达,促进脂肪分解进而有效的缓解NAFLD。     

二甲双胍缓解小鼠放射性皮炎引起的病理性疼痛:基于抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路

目的 探讨二甲双胍（Met）对放射性皮炎病理性疼痛的治疗作用及其可能机制。方法 将32只SPF级雄性ICR小鼠随机分为4组,即正常对照组（Control组）、放射性皮炎模型组（Model组）、二甲双胍干预组（Met组）及阳性药物加巴喷丁组（GBP组）,8只/组。小鼠模型制备成功后,Met组小鼠采用腹腔注射方式给药,每次剂量为200 mg/(kg·d),连续给药16 d,GBP组加巴喷丁灌胃[100 mg/(kg·d)],连续灌胃16 d,Control组及Model组小鼠腹腔内注射与二甲双胍组等体积生理盐水。末次给药后评估各组小鼠放射性皮炎分级情况;分别于建模前及建模后第1、4、8、12、16天观察并记录各组小鼠建模侧（右侧）后足机械缩足反射阈值（MWT）和热缩足反射潜伏期（TWL）;Western blot检测脊髓L4～L6节段p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化（p）-p38MAPK、磷酸化（p）-NF-κB p65蛋白表达。ELISA检测脊髓组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子...     

二甲双胍通过AMPK/STAT3信号通路抑制星形胶质细胞的反应性

探讨二甲双胍对体外培养的大鼠脊髓星形胶质细胞反应性的作用及机制。方法 使用三因子（TNF-α、IL-1α、C1q）诱导产生反应性星形胶质细胞,RT-qPCR及Westernblot检测补体3（C3）的表达;使用5、10、20 mM浓度的二甲双胍处理,Westernblot检测星形胶质细胞中腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）与信号转导和转录激活因子3（STAT3）磷酸化水平;采用AMPK抑制剂Compound C处理,检测AMPK和STAT3磷酸化水平。结果 形态学及RT-qPCR结果显示：与对照组相比,三因子处理改变了星形胶质细胞形态并显著提高了C3的表达（P＜0.05）,表明成功建立反应性星形胶质细胞模型。RT-qPCR结果及Westernblot结果显示：与对照组相比,二甲双胍对C3表达有明显的抑制作用,呈现浓度依赖性（P＜0.05）。在诱导星形胶质细胞反应性过程中,与对照组相比,AMPK的磷酸化水平显著降低（P＜0.05）,使用不同浓度二甲双胍处理后,AMPK的磷酸化水平显著增加且呈浓度依赖性（P＜0.05）,同时信号传导及STAT3的磷酸化水平显著降低且呈浓度依赖性（P＜0.05）。AMPK抑制剂Compound C处理后显著抑制了二甲双胍导致的AMPK活性升高及STAT3活性降低,同时抑制了C3表达下调（P＜0.05）。结论 二甲双胍通过AMPK/STAT3信号通路抑制星形胶质细胞的反应性