应用酶联免疫吸附试验检测人群白喉毒素抗体

Engvall等首创的酶联免疫吸附试验(ELISA)已广泛用于医学研究的许多方面。1977年Svenson等用ELISA检测免疫动物的白喉毒素抗体。我们用ELISA间接法检测了321份人血清白喉毒素抗体,并与锡克氏试验作了比较,提出ELISA代替锡克氏试验的可能性。材料和方法 (一)材料 1.聚苯乙烯微量反应板=100×45毫米40孔(上海塑料制品三厂出品)。 2.抗原:精制白喉类毒素由北京生物制品研究所供给,蛋白含量9毫克/毫升。 3.包被缓冲液:0.05MPH9.6碳酸盐缓冲液。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清单纯疱疹病毒抗体的研究

本文对ELISA间接法检测HSV抗体作了下列研究:以两种较简易的方法,即病毒感染细胞连同维持培养基一起(方法一)或经洗涤后在PBS中(方法二)反复冻融,分别从原代兔肾、原代鸡胚、传代Vero和FL细胞制备HSV抗原,结果以方法二制取的Vero细胞病毒抗原滴度最高;原代兔肾者次之。选取16份ELISA呈不同滴度的血清作中和试验,两法结果呈正相关关系(r=0.79,P<0.005)。初步得出△A492≥0.2可作为血清抗体阳性。以ELISA检测3组年龄人群血清抗体,婴儿组抗体阳性率6.6％,儿童组80％,成人组100％。最后,比较了酶联抗人IgG及酶联SPA ELISA检测的29份血清抗体含量,两种结合物测得的结果呈正相关关系(r=0.986,P<0.0005),并提出酶联SPA在鉴别两型HSV血清中具有重要意义。     

不同方法及试剂检测血吸虫抗体的结果比较

目的探讨不同方法及试剂在血吸虫抗体检测中的应用价值。方法用3种方法[酶联免疫吸附试验（ELISA），间接血凝试验（IHA），金标法]、5种试剂（A和B为ELISA法，C和D为IHA法，E为金标法）对确诊血吸虫病患者血清和健康体检者血清同时进行血吸虫抗体检测。结果ELISA法检测阳性率显著高于金标法（P〈0．01），金标法高于IHA法；试剂之间检测阳性率A高于B，C高于D；A、B、C、E4种试剂在健康体检者血清检测中都存在不同程度假阳性。结论ELISA法检出率显著高于IHA法和金标法（P〈0．01），具有较高的敏感性和特异性；血吸虫抗体的检测应以ELISA法为主，辅以其他检测方法来共同诊断血吸虫病。     

酶标记SPA在DASS法检测腺病毒抗体中的应用

<正> 金黄色葡萄球菌 A 蛋白(SPA)能和人及某些哺乳动物的 lgG 的 Fe 段发生非特异性的结合。据此理论,国内外学者开始应用 A 蛋白作为硷测特异性 lgG 的手段。我们曾报道应用 DASS 法检测宄腺病毒的 lgG 抗体。最近试用酶标记 SPA 代替酶标记抗 lgG 用 DASS法检测腺病毒抗体,结果比较满意。     

E-coli和Yeast菌体蛋白ELISA定量测定方法的建立

目的:提高酶联免疫吸附测定(ELISA)方法的灵敏度。方法:将聚苯乙烯微孔板(PS)经过紫外线(UV)辐照后,用葡萄球菌A蛋白(SPA)预包被,再应用生物素-链霉亲和素(BSA)反应建立双抗体夹心ELISA。结果:检测低限为1.95ng/ml,方法的批内变异分别为7.96%和8.63%。结论:为菌体蛋白的测定提供了一种新的方法。     

实验感染华支睾吸虫家兔血清抗体动态的初步观察

我们曾应用竦根过氧化物酶联葡萄球菌A蛋白(HRP—SPA)为第二抗体做酶联免疫吸附试验(ELISA)检测感染华支睾吸虫病人及感染动物血清的特异性抗体,已经取得较好效果。但对于感染华支睾吸虫后抗体水平的变化尚不了解。本文采用此法对家兔感染华支睾吸虫后血清抗体消长动态进行了初步观察,现将结果报告如下:     

PPA-ELISA和PSAHIgG-ELISA检测日本血吸虫病人抗体比较研究

本文报告酶联A蛋白(PPA)和酶联羊抗人IgG-IgG(PSAHIgG)的ELISA间接法,用血吸虫虫卵粗抗原检测血吸虫病人血清抗体的比较研究,探讨PPA-ELISA的特性.两种酶结合物的ELISA结果是相当一致的.检测也吸虫病人的消光值均数约为健康人消光值均数的8倍;血吸虫病人的消光值均高于健康人的消光值正常范围上限值(阈值),与粪检(阳性)结果是符合的.同样条件对肺吸虫病人试验,PPA-ELISA尚未见交叉反应,PSAHIgG-ELISA出现少数交叉反应.目测法和光电比色法的判读结果基本上是符合的.初步认为PPA可以代替PSAHIgG用于ELISA检测人体抗血吸虫抗体的研究.     

五种血清学方法检测鼠疫F_1抗体的比较(摘要)

本文比较了五种监测鼠疫F1抗体的血清学方法的敏感性和特异性。五种方法中以放射免疫沉淀试验最敏感,特异性最好。其次为血凝—SPA、SPA—ELISA、Inhjd—ELISA、间接血凝。鉴于放射免疫沉淀试验能够查出用血凝试验所无法查出的F1抗体,所以它能发现处于静息状态疫源地动物病的动态和动物病流行微弱的疫源地,为鼠疫监测工作提供了可靠而有效的予报。本试验中血凝—SPA和SPA—ELISA两种方法对绵羊血清的检查获阴性结果。据薛采芳等报导用辣根过氧化物酶酶联SPA检验14种动物血清中IgG,证明与绵羊血清亲和力弱,本试验检查证明与藏系绵羊无亲和力。     

应用PPA-ELISA检测实验家兔弓形体抗体的研究

本文首次报告了应用过氧化物酶标记金葡菌 A 蛋白取代酶标第二抗体进行酶联免疫吸附试验(PPA—ELISA)检测实验家兔弓形体抗体的结果。24只感染兔和32只正常兔的阳性和阴性符合率均为100%,与16只爱美尔球虫病兔之间亦无交叉反应现象。采用滤纸血片标本检测,阳性符合率为100%,阴性符合率为96.87%,与间接血凝试验(IHA)比较,前法在弓形体感染后第11天8/11(72.72%)的家兔呈现阳性反应,而后法尚未能检出,提示 PPA-ELISA 较 IHA 具有更高的敏感性。文章叙述了弓形体遣殖子的分离纯化和抗原制备过程,并对胰蛋白酶处理前后的速殖子所制备的可溶性抗原在 PPA-ELISA 中的使用效果进行了比较。     

胶体金法、酶联免疫吸附试验和明胶颗粒凝集试验检测血清梅毒抗体的结果比较

目的探讨胶体金法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒抗体假阴性结果的现象。方法 50例梅毒明胶颗粒凝集试验(TPPA)阳性标本同时进行胶体金法和ELISA法实验,比较结果的差异性。结果胶体金法和酶联免疫吸附法实验检测梅毒有假阴性结果。结论胶体金法和酶联免疫吸附法实验应结合TPPA一起检测梅毒抗体,避免漏诊现象发生。     

应用PPA—ELISA检测实验家兔弓形虫抗体的研究

目前弓形虫病的诊断较常用的免疫血清学方法为间接荧光抗体试验(IFA)间接血凝试验(IHA)和染色试验(DT).但有些方法操作繁琐,设备复杂,有些要用活的虫体,不易标准化,自动化,不适于大规模普查.近年来,国外试图将ELISA用于该病的诊断获得满意结果,为了简化ELISA所用酶标第二抗体的制备程序,使这一新技术适用于检测多种哺乳动物血清中弓形虫IgG抗体,用于弓形虫病流行病学调查,我们采用过氧化物酶标记金萄菌A蛋白(PPA)取代酶标第二抗体进行酶联免疫吸附试验(PPA—ELISA),对实验感染家兔血清弓形虫抗体进行了检测,现将结果简报如下:     

免疫层析法与酶联免疫法检测手足口病EV71-IgM抗体的阳性率比较

目的比较免疫层析法(GICA)与酶联免疫法(ELISA)检测手足口病EV71-IgM抗体的阳性率。方法选择自2015年1月至2015年12月期间,我院收治的80例手足口病患者的末梢血为研究样本。采用免疫层析法与酶联免疫法检测研究样本,比较EV71-IgM抗体的阳性率。ELISA法以吸光度值A≥0.15诊断为阳性,GICA法色带显色诊断为阳性。结果 ELISA法检测EV71-IgM抗体的阳性率为28.75%(23/80),GICA法检测EV71-IgM抗体的阳性率为46.25%(37/80);组间具有显著性差异(P0.05)。ELISA法检测A值为0.1~0.15的样本中,GICA法的阳性检测率为45.45%(10/22)。ELISA法检测A值1.50的样本中,GICA法的阳性检测率为91.30%(21/23)。结论免疫层析法检测足口病EV71-IgM抗体的阳性率高于酶联免疫法,但两种方法检测EV71-IgM抗体为阴性的患者均不能排除感染了EV71。     

McAb-ELISA间接夹心法检测家鼠型HFRS疫区人和动物血清中特异性抗体

用McAb-ELISA间接夹心注和IFAT或酶标SPA染色法平行检测山西地区(家鼠型HFRS疫区)的人及动物血清中HFRS病毒特异性IgM和/或IgG抗体。结果ELISA检测174份HFRS患者血清的阳性率及抗体滴度均明显高于IFAT。检测295份无明确HFRS病史的健康人血清,ELISA的阳性率也高于IFAT。检测215份鼠类血清、102份兔血清及108份猪血清,ELISA的阳性检出率与IFAT或酶标SPA染色法基本相同。用阻断试验等证明本ELISA检出的抗体确为HFRS病毒特异性抗体。     

微量酶联免疫吸附试验检测人群弓形体IgG抗体的初步研究

弓形体病是由弓形体引起的一种细胞内寄生、人畜共患的流行性传染病,多脏器受累,且可母婴垂直传播,其危害相当严重。在我国,随着对此病研究的逐步重视,对其检测手段亦要求更高。目前国内仍以间接血凝法(IHA)为最主要的诊断方法,而酶联免疫吸附法(ELISA)敏感性更高、特异性更强。1976年Voller等应用微量酶联免疫吸附法测定弓形体抗体,取得了较好结果。建立可靠的ELISA,     

PPA-ELISA技术在检测自身免疫病抗DNA抗体中的应用

本文报道了用酶联A蛋白免疫吸附测定技术(PPA—ELISA)检测42例系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫病患者血清中抗DNA抗体的实验结果并与临床常用的免疫荧光法(IFA)做了比较。结果表明用PPA-ELISA法检测抗DNA抗体的阳性率为69.1％。它比免疫荧光法的阳性率高21.5％,两者的符合率为80.9％,提示PPA-ELISA的敏感性和特异性比免疫荧光法高。此法可做为自身免疫病的诊断及观察病情变化与疗效的一种新的方法。     

酶联A蛋白(PPA)检测血吸虫抗体动物实验初步研究

本文报告,在ELISA间接法中应用辣根过氧化物酶酶联葡萄球菌A蛋白(PPA)检测感染兔血吸虫抗体获得良好效果。通过辣根过氧化物酶酶联羊抗兔IgG-IgG(PSARIgG)对比试验,表明PPA—ELISA检测感染兔具有较高的阳性符合率。并且发现PPA对正常兔血清的非特异性反应较PSARIgG小得多,因而PPA法检测阳性反应值与阴性反应值之间的差距比PSARIgG法大得多,这有利于检测结果的判读。     

HRP-SPA免疫组织细胞化学法检测抗核抗体

用辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)标记葡萄球菌A蛋白(SPA),在酶标记免疫组织细胞化学法中,代替酶标记第二抗体(马抗人IgG)。以鼠肝印片作为抗原基质,检测32例病人血清中的抗核抗体,并与免疫荧光间接法、酶标记抗体(HRP—IgG)免疫组织细胞化学法,检测抗核抗体比较,三者在敏感性和特异性方面基本相符。HRP—SPA免疫组织细胞化学法,HRP—IgG免疫组织细胞化学法,都可在光学显微镜下观察,标本可长期保存。但是HRP—SPA试剂较HRP—lgG试剂稳定,为检测抗核抗体提供了更便于推广的一种新方法。     

应用三种酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断肺螨病的比较观察

应用三种酶联免疫吸附试验:Dot——ELlSA、ABC——ELISA和SPA——ELISA分别检测相同类型45份肺螨病患者血清尘螨性抗体,结果阳性率分别为93.33％,83.24％和51.11％(同Dot——ELISA比P<0.05)。肺螨病患者阳性血清的几何平均滴度分别为295.43,191.12和112.54。因而Dot——ELISA的敏感度为ABC——ELISA和SPA——ELISA的1.70倍和2.88倍。实验结果证明Dot—ELISA在诊断肺螨病中有较高的敏感性和特异性。     

SPA——HRPO与兔抗人IgG——HRPO用於检测职业人群布鲁氏菌病抗体的研究

用 SPA——HRPO 与兔抗人 IgG——HRPO 做酶联免疫吸附试验(ELISA),测定了371例职业人群布鲁氏菌病抗体,阳性率分别为13.48%,11.05%,结果证明:两种结合物敏感性基本一致。用 SAT,AGT,RBPT 等常规试验进行对比检查测定,阳性率分别为1.08,4.31,8.63%,测定了78例非布鲁氏菌病人血清,结果未见阳性滴度。由于 SPA——HRPO 可检测多种动物及人的抗体,方法简便,特异性和敏感性较好,在实际工作中有一定意义。但要对布鲁氏菌病做出准确的诊断,还需结合其它方法,综合判定。     

酶联免疫吸附法检测梅毒的临床价值

目的 通过TRUST、TPHA和ELISA等3种检测梅素抗体方法的比较,探讨ELISA检测梅毒抗体的临床价值.方法 以重组表达的梅毒螺旋体表面膜蛋白的P47和P15作为抗原,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)法,与甲苯胺红卡片试验(TRUST)法对比检测148例梅毒患者血清,不符合者用螺旋体血球凝集试验(TPHA)法验证.结果 TRUST法有5例假阴性,ELISA与TPHA结果相符.结论 ELISA法检测梅毒螺旋体抗体准确率高,敏感性、特异性好,还具有自动化程度高,易于标准化优点,适合于临床梅毒患者确诊,有较高的应用价值.