逍遥散调节慢性束缚应激大鼠代谢组学的实验研究

目的 通过检测慢性束缚应激大鼠血浆和逍遥散干预引起的大鼠内源性代谢物的变化,确定与之相关的“代谢组学特征”的小分子标志化合物,探讨慢性束缚应激大鼠代谢网路改变和逍遥散作用机制。方法 选用雄性SD大鼠36只,随机分为3组。即：正常对照组、模型组及逍遥散治疗组,其中每组又分为7、21天组,每组6只。以慢性束缚方法制作应激大鼠模型,每天束缚3 h。自造模第1天开始,逍遥散治疗组每日在束缚前1 h灌服逍遥散,给药量为3.854 g/kg,灌胃容积为1 mL/100 g体重。正常对照组、模型组灌服等体积的蒸馏水。分别于第8、22天采集血浆后取上清300 μL,在27 ℃的条件下,在Varian UNITYINOVA 600MHz 超导傅立叶变换核磁共振波谱仪上分别调用弛豫编辑脉冲序列(CPMG)、扩散编辑脉冲序列 (LED),采用预饱和方式抑制水峰,自由感应衰减（FID）信号经过32k点傅立叶变换得到一维NMR谱图。以TSP为化学位移参考峰的位置,调用VNMR软件中的程序将1H谱中从4.5～0.5 ppm (CPMG) 以及6.0～0 ppm (LED)范围内的谱峰,按每段为0.04 ppm,进行分段积分。将积分数据归一化之后,将积分值进行中心化和定标,用SIMCA-P 10.0软件包进行主成分分析（PCA）,必要时进行判别分析（PLS-DA）。结果 (1)正常组与模型组之间代谢产物有明显的不同,两组比较,存在代谢网路的改变。模型组与治疗组各对照组间基本能分开,不同组别之间代谢产物存在差异、代谢网路有所不同,给予逍遥散后可以干预代谢物或代谢途径而致代谢终产物的改变。(2)慢性束缚应急大鼠血清中代谢产物乳酸（1.4、4.16）、胆碱（3.24）、N-乙酰半乳糖胺（NAC）、饱和脂肪酸（1-3）升高,而不饱和脂肪酸（1.99、4.5）、血糖（3.4）、HDL（0.83）等化合物含量降低。逍遥散可使乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸下降,血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物含量升高,有明显的代谢终产物的调节效应。结论 慢性束缚应激大鼠代谢表型为乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸含量上升,血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物含量降低。其代谢产物标志物可能是乳酸、胆碱、NAC、饱和脂肪酸、血糖、不饱和脂肪酸、HDL、3.44 ppm等化合物。慢性束缚应激发生的代谢终产物的改变以脂类物质更明显。逍遥散对代谢终产物有明显的调节效应,但主要干扰何种代谢物或代谢途径而改变代谢终产物还需进一步研究确认。     

丹酚酸B大鼠体内代谢产物及途径分析

目的:研究分析丹酚酸B在大鼠体内的代谢产物及途径。方法:取SD大鼠12只,分为两组。用于收集空白血浆、胆汁、尿液样品的大鼠各2只;尾静脉注射丹酚酸B(100 mg·kg-1)后,用于收集血浆、胆汁、尿液中丹酚酸B代谢产物的大鼠各2只;采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF)联用技术,对处理后的各样品进行检测,并对代谢产物进行定性与结构鉴定分析。结果:根据质谱信息,共检测到大鼠体内丹酚酸B相关代谢产物11个,其中血浆样品中检测到丹酚酸B酯键水解等2个代谢产物;胆汁样品中检测到丹参素、紫草酸和紫草酸的甲基化物等5个代谢产物;尿液样品中检测到丹酚酸B甲基化和硫酸化等4个代谢产物。结论:丹酚酸B可在大鼠体内代谢为丹参素等代谢产物;依据检测的代谢产物,推测丹酚酸B代谢反应位置主要在酯键和五元环上,代谢途径主要有酯键水解、分子内脱水、脱羧、羟化、甲基化和硫酸化等。     

参麦方对于大鼠尿液代谢组学影响的初步研究

目的:运用代谢组学方法研究大鼠灌服参麦方后机体内源性代谢物的变化,探讨参麦方在体内的作用及其机制。方法:通过超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/TOF-MS)分析药物作用后大鼠尿液的代谢物图谱,采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)寻找各组代谢物差异,变量重要性投影(VIP)及t检验筛选潜在内源性标志物。结果:鉴定出16种内源性代谢物。结论:结果表明参麦方可通过改变色氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等氨基酸代谢,脂肪酸、嘌呤以及能量代谢来影响机体的生理功能从而发挥功效。该研究为参麦方在疾病模型的分析以及临床应用方面提供了依据。     

二至丸对四氯化碳致大鼠急性肝损伤血浆代谢组学研究

目的 研究四氯化碳（CCl₄）致大鼠急性肝损伤模型大鼠血浆内源性代谢物变化特点和二至丸对异常代谢的调节作用,寻找二至丸治疗急性肝损伤可能的代谢生物标志物,以探索二至丸治疗肝损伤的作用机制。方法 运用快速分离液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF/MS）技术,对大鼠血浆中内源性代谢物进行测定。结果 定性鉴定出9种潜在代谢生物标志物,通过独特通路分析（IPA）,找到2条肝损伤代谢通路。结论 二至丸可以使造模后大鼠的体内代谢物含量有不同程度的恢复,提示其治疗作用可能与2条肝损伤代谢通路的调节有关。独特通路分析能有效的识别药物靶标,这有助于进一步了解药物作用机制,提高研究效率。     

生地黄凉血作用的肺脏代谢组学研究

目的：利用代谢组学研究血热证大鼠肺脏代谢的变化以及生地黄对其的干预作用。方法：采用“干酵母混悬液注射+无水乙醇灌胃”的复合造模法建立血热证大鼠模型;利用超高效液相串联四极杆飞行时间质谱（UHPLC-Q/TOF-MS）技术检测正常组、血热证模型组和生地黄组大鼠肺脏样本中内源性小分子代谢物,通过主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）筛选出与血热证模型相关的生物标志物,并应用Mev软件对标志物的相对定量结果进行热度图绘制和聚类分析;结合MBRole、KEGG和MetaboAnalyst等在线数据库进行通路富集分析和代谢网络构建。结果：共鉴定出血热证相关生物标志物41个,富集得到3条显著受到干扰的代谢通路,包括精氨酸与脯氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,甘油磷脂代谢。结论：血热证大鼠肺脏内存在的能量代谢、氨基酸代谢、甘油磷脂代谢等多种代谢紊乱与肺细胞损伤、肺部炎症和气道损伤密切相关,经生地黄提取物干预后,血热证大鼠的上述肺部症状显著改善。     

逍遥散干预肝损伤小鼠的代谢组学研究

目的通过代谢组学方法研究逍遥散干预肝损伤小鼠血清内源性代谢物的变化,探索与肝损伤密切相关的代谢模式及逍遥散的作用机制。方法以CCl4致小鼠肝损伤模型为研究对象,测定小鼠血清ALT、AST,肝组织匀浆SOD、MDA。检测小鼠血清中内源性代谢物的变化情况,并运用主成分分析方法对这一变化过程进行模式识别。结果与对照组小鼠相比,模型组小鼠血清ALT和AST明显升高(P<0.01),肝组织匀浆SOD显著降低,MDA明显升高(P<0.01);与模型组小鼠相比,给药组小鼠血清ALT和AST显著降低(P<0.01),肝组织匀浆SOD明显升高,MDA显著降低(P<0.01)。模型组、给药组与对照组的血清内源性代谢物均发生了明显变化,模型组血清中甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、氨基丙二酸、苹果酸、谷氨酰胺、天门冬氨酸、赖氨酸、鸟氨酸均明显升高(P<0.01),肌醇升高(P<0.05)。给药组中显示逍遥散对其有调节作用。结论逍遥散干预肝损伤的作用显著,推测其机制是清除自由基,抑制脂质过氧化,恢复部分氨基酸代谢、三羧酸循环、尿素循环等代谢通路。     

高脂血症大鼠造模过程中血液代谢组学研究

目的采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-TOF-MS)代谢组学法动态观察高脂血症大鼠造模过程中血液的代谢轮廓的改变,寻找高脂血症演化过程中的生物标志物。方法将SD大鼠分成正常对照组和模型组,运用高脂乳剂灌胃法复制高脂血症大鼠模型,并收集不同时间点的血样,采用UPLC-TOF-MS检测并进行主成分分析。结果随着造模时间的延长,高脂血症大鼠血清代谢轮廓呈现动态演变。与正常对照组比较,模型组鞘磷脂、乙酰糖蛋白、谷酰胺、3-羟基丁酸、甲硫氨酸、甜菜碱、磷脂酰胆碱、柠檬酸、乌头酸、肌酸、3-吲哚硫酸、赖氨酸、甘氨酸等21种物质发生明显改变。结论在高脂血症进展过程中,不仅大鼠血液脂质代谢发生了紊乱,而且还伴随着糖代谢、氨基酸代谢的紊乱以及炎症和氧化应激。     

不同证型更年期综合征妇女血浆UPLC-QTOF/MS代谢组学特征研究

目的研究肾阴虚型、肝气郁结型及肝肾阴虚型更年期综合征妇女血浆超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-QTOF/MS)代谢组学特征,探讨UPLC-QTOF/MS代谢组学技术在妇女更年期综合征中医分型中的应用价值。方法对肾阴虚型、肝气郁结型、肝肾阴虚型更年期综合征妇女及健康同龄妇女各25例的血浆样品进行UPLCQTOF/MS检测,建立正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模型,比较不同证型更年期综合征妇女血浆代谢物谱的差异,寻找潜在的生物标志物。结果 OPLS-DA分析表明,不同证型更年期综合征及健康同龄妇女血浆UPLC-QTOF/MS代谢物谱能够被明确区分,鉴定出包括氨基酸、脂肪酸、磷脂、糖类、酯类以及醇类等16个潜在生物标志物在3组中存在明显差异。与健康同龄妇女相比,不同证型更年期妇女血浆内3种氨基酸含量异常(P<0.05),8种脂肪酸及有机酸类含量异常(P<0.05),磷脂、醇类、酯类、酮体及糖类各1种含量异常(P<0.05),不同证型更年期妇女发生明显氨基酸代谢、脂肪酸代谢、磷脂代谢、能量代谢以及糖代谢等代谢紊乱。结论不同证型更年期综合征妇女血浆UPLC-QTOF/MS代谢物谱存在显著差异,能从代谢组学分析中确定其特异生物标志物,据此在一定程度上区分更年期综合征的不同中医证型。     

广陈皮抗高脂血症的血清代谢组学研究

目的揭示广陈皮干预高脂血症模型的代谢物靶点,构建广陈皮体内成分与内源性生物标记物的关系网络,阐明广陈皮干预高脂血症大鼠模型的作用机制。方法采用血脂4项血清生化指标评价高脂血症大鼠模型以及广陈皮的干预作用;应用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC Q-TOF/MS)技术对广陈皮体外化学成分和口服给药后的血中移行成分进行分析鉴定;运用代谢组学技术分析广陈皮对高脂血症大鼠作用的代谢物靶点;构建入血成分与内源性生物标记物关联的数理模型,发掘广陈皮防治高脂血症潜在的药效物质基础。结果与模型组比较,广陈皮组的体质量、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显降低(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显升高(P<0.05)。共鉴定出11个入血的化学成分;血清代谢组学分析得到19个高脂血症模型生物标记物,其中1 1个为广陈皮干预后具有回调趋势的代谢物;与模型组比较,有4个代谢物的回调作用差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。入血成分中川陈皮素和5-去甲川陈皮素葡萄糖醛酸代谢物与内源性生物标记物具有较高的关联性。结论广陈皮抗高脂血症的作用机制可能与调节鞘脂代谢和甘油脂代谢有关。     

运用代谢组学技术研究发现炮制引起大黄多成分变化

利用代谢组学技术,对大黄全成分进行对比分析,研究生熟大黄各类化学成分的变化。应用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF)联用技术,获取大黄生品和熟品的色谱和质谱信息,采用多元统计分析技术对提取的324个特征峰进行比较分析。炮制大黄非靶向代谢组学研究中,发现大黄生品和熟品化学成分明显不同,与生大黄相比,炮制后有127个成分发生显著变化,其中125个成分含量降低,2个成分升高。该研究鉴定了其中的10个化合物,另外推测了其他23个成分的结构类型,其中15个为鞣质类,8个为蒽醌类,炮制均使它们含量降低。炮制大黄靶向代谢组学研究发现炮制使芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄素甲醚含量降低。炮制显著影响大黄中多种成分的含量,代谢组学研究能够比较全面地揭示这种变化。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS代谢组学技术研究炮制前后何首乌化学成分变化

目的 利用代谢组学分析方法对比分析市售生首乌和制首乌化学成分的差异。方法 采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)方法,通过主成分分析和偏最小二乘判别分析等方法对比分析市售生首乌和制首乌化学成分的差异。结果 市售生首乌和制首乌化学成分差异较大,共鉴别45个差异化学成分,主要为蒽醌、二苯乙烯和鞣质等。结论 基于UPLC-Q-TOF-MS/MS代谢组学技术从整体角度分析了市售生首乌和制首乌的化学成分差异,为其炮制机理的阐释和临床应用奠定基础。     

白香丹胶囊干预经前期综合征肝气逆证大鼠血清代谢组学研究

目的通过代谢组学方法研究白香丹胶囊(白芍、香附和丹皮)干预经前期综合征肝气逆证大鼠血清内源性代谢物的变化,探索与该病证密切相关的代谢模式及白香丹胶囊的作用途径。方法基于代谢组学理论,以UPLC/Q-TOF-MS为技术平台,建立大鼠血清代谢指纹谱,通过多元统计分析方法研究PMS肝气逆证大鼠血清的代谢差异及白香丹的干预作用。结果模型组、给药组与对照组的血清内源性代谢物发生了明显变化,模型组血清中肾上腺素、四氢脱氧皮质酮、5a-四氢皮质醇、雌酚酮、赖氨酸、5-羟基赖氨酸、乙酰半胱氨酸水平升高,孕二醇水平降低,给药组中显示白香丹胶囊对其有调节作用。白香丹表现出糖皮质激素、雌激素、神经递质及氨基酸等多靶点的作用特点。结论应用代谢组学方法可以从整体出发研究PMS肝气逆证及中药复方干预后的代谢模式差异,为PMS的临床诊断和治疗提供依据。     

基于UPLC-Q/TOFMS技术的隔药饼灸合募配穴治疗UC大鼠的尿液代谢组学研究

目的:运用代谢组学用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF MS)技术探讨隔药饼灸合募配穴治疗溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)的作用机制。方法:27只SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药饼灸合募配穴组,采用DSS水溶液饮用法制备UC大鼠模型。隔药饼灸合募配穴组每次每穴各灸2壮,1次/d,共灸14次。治疗结束后,搜集各组尿液,UPLC-Q/TOF MS分析检测,主成分分析(PCA)分析和偏最小二乘法分析(PLS-DA)对数据进行处理,运用Metlin(http://metlin.scripps.edu/)、KEGG(http://www.kegg.jp)、HMDB(http://www.hmdb.ca)、Metabo Analyst 3.0(http://www.metaboanalyst.ca)数据库和网站,确认潜在生物标志物,分析代谢物通路。结果:正、负离子模式下,正常组、模型组、隔药饼灸合募配穴组3组大鼠尿液在PLS-DA数据模型下分离趋势良好。隔药饼灸合募配穴可有效回调UC模型大鼠6个差异代谢物L-Cysteine(半胱氨酸)、Atraric acid、Tocopheronic acid、Dibutyl malate(二丁基苹果酸盐)、L-Tyrosine(酪氨酸)、L-Pipecolic acid(哌啶酸)表达,主要参与Phenylalanine,tyrosine and tryptophan biosynthesis(苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成)、Cysteine and methionine metabolism(半胱氨酸和蛋氨酸代谢)、Tyrosine metabolism(酪氨酸代谢)等氨基酸代谢通路。结论:隔药饼灸合募配穴治疗UC可能主要与氨基酸代谢有关。     

逍遥散对肝郁脾虚证和肝损伤模型大鼠干预作用的代谢组学研究

目的：利用代谢组学方法探讨肝郁脾虚证和肝损伤模型的共同本质及逍遥散的干预作用。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、肝郁脾虚证模型组、肝郁脾虚证给药组、肝损伤模型组、肝损伤给药组,每组8只。采用夹尾激怒致肝郁联合番泻叶致脾虚的方法制备肝郁脾虚证模型,采用四氯化碳致肝损伤法制备肝损伤大鼠模型。肝郁脾虚证给药组、肝损伤给药组灌胃2 g/ml逍遥散液,其余各组灌胃等体积生理盐水,连续给药28 d。末次给药后12 h,采用气相色谱-质谱法分析各组大鼠血清代谢物谱及含量变化,采用 HE 染色法观察各组大鼠肝组织病理学变化。结果肝郁脾虚证模型组和肝损伤模型组大鼠肝组织均出现细胞核萎缩、崩解、变性坏死并伴有淋巴细胞浸润等病理改变,且血清中甘氨酸、琥珀酸、丙酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸含量较空白对照组升高(P＜0.05)。逍遥散可降低血清中甘氨酸、琥珀酸、丙酸、蛋氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸含量(P＜0.05)。结论逍遥散可调节一碳单位、含硫氨基酸、芳香族氨基酸等特殊代谢及三羧酸循环,发挥肝保护作用。     

败酱草总皂苷对大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及代谢组学的初步研究

目的以常规药理学指标研究败酱草总皂苷(BJC)对溃疡性结肠炎的药效,同时考察其尿液代谢表型差异。方法 SD大鼠随机分为BJC组、模型组和正常组,检测相关生化指标,尿样采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOf MS)检测分析,采用主成分分析(PCA)以及偏最小二乘判别法(PLSDA)对数据进行处理。结果与模型组比较,BJC组大鼠结肠组织学损伤明显减轻,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P0.01),而髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)水平显著降低(P0.01)。代谢组学分析各组间区分明显,尤以PLSDA方法分组更加明显。结论代谢组学初步研究显示,败酱草总皂苷可明显改善大鼠溃疡性结肠炎,PLSDA数据处理方法可靠。     

冠心病痰瘀互结证小型猪血浆代谢组学研究

目的 基于液相色谱-质谱联用技术对冠心病痰瘀互结证小型猪血浆除磷脂外的代谢物进行代谢组学分析。方法 将小型猪分为对照组和模型组,采用高脂饲料喂养结合冠状动脉内皮损伤法建立冠心病痰瘀互结证小型猪模型。HE和Masson染色观察心肌组织病理变化;血浆样本用96孔SPE板进行除蛋白和去磷脂处理,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱（UPLC-QTOF-MS）对样本进行检测,偏最小二乘判别分析（PLS-DA）进行数据分析,通过HMDB数据库和二级质谱裂解规律比对,对内源性成分进行定性分析,筛选差异代谢物,通过MetaboAnalyst 5.0结合HMDB、KEGG数据库对差异代谢物进行代谢通路分析。结果 HE和Masson染色显示,模型组心肌细胞肥大,部分心肌细胞融合,心肌间质水肿,大量胶原纤维增生;PLS-DA结果显示,模型组和对照组血浆代谢物差异明显,筛选出7a,12a-二羟基-3-氧代-4-胆氨酸、3b,12a-二羟基-5a-胆酸、脱氧胆酸甘氨酸结合物、别石胆酸、十六烷二酸、3-氧代十八烷酸、二十二碳六烯酸、丁烯肉碱、3-羟基-9-十六碳烯酰肉碱、3-羟基十六烷基肉碱、(9E)-10-...     

金芪降糖片治疗2型糖尿病大鼠的血清代谢组学研究

目的：本研究采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,探讨了金芪降糖片(JQJT)治疗2型糖尿病(T2DM)的作用机制。方法：采用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)诱导T2DM模型,检测大鼠体质量、血糖等指标。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析对照组、模型组、阳性药组、正常给中药组、模型给中药组大鼠的血清样品代谢谱。采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)对差异代谢物进行筛选和鉴别。结果：从血清中筛选出15个潜在的生物标志物,并利用Met PA构建了1条相关的代谢通路,即甘油磷脂代谢通路。在2型糖尿病(T2DM)大鼠血清中,溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)(18∶0)和LysoPC(16∶1)等9种代谢物下调,LysoPC(18∶1)和LysoPC(20∶0)等6种代谢物上调。结论：金芪降糖片给药组能使这15种潜在的生物标志物有良好的回调趋势,推测金芪降糖片可能通过调节脂代谢紊乱而缓解T2DM的进程。     

红花水煎液干预硬皮病小鼠的血清代谢组学研究

目的 基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)技术探讨红花水煎液对硬皮病小鼠血清代谢组的影响,旨在寻找血清中的内源性差异代谢物及其相关代谢通路,以阐释红花水煎液治疗硬皮病的作用机制。方法 将雌性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组、红花水煎液组,每组8只。除对照组外,其余2组均皮下注射200μg·mL^-1博来霉素0.1 mL,每天1次,连续28 d,复制硬皮病小鼠模型。造模同时进行药物干预,红花水煎液组给予1.5 g·kg^-1红花水煎液灌胃,每日1次,连续28 d。观察各组小鼠的一般情况;采用Sirius Red染色法观察皮肤、肺组织病理变化;免疫组化法测定皮肤、肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达;ELISA法检测血清及皮肤组织中血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平;应用UPLC-Q-TOF/MS技术进行血清样品的分离和数据采集,通过主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法分析红花水煎液对内源性差异代谢物的影响,并通过MetaboAnalyst 3.0数据库分析其代谢通路。结果...     

基于血浆代谢组学和网络药理学研究脑心通胶囊活血化瘀作用机制

目的 运用代谢组学和网络药理学探讨脑心通胶囊活血化瘀的作用机制。方法 24只大鼠随机分为空白组、模型组和药物组，每组8只。药物组给予脑心通胶囊1.5 g/kg灌胃，空白组和模型组灌胃给予等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液，每日早、晚各1次，共7次。实验第3天第5次给药后模型组和药物组给予肾上腺素（0.8 mg/kg两次）制备急性血瘀证模型。超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱技术分析大鼠血浆代谢轮廓，采用Progenesis QI和Simca-P软件进行多元统计分析及差异内源性代谢物筛查，通过MetaboAnalyst数据库对代谢通路进行分析。通过MBRole 2.0数据库对差异内源性代谢物的作用靶标进行筛选，利用网络药理学方法对脑心通胶囊中主要活性成分及其作用靶标进行筛选，采用Cytoscape软件构建差异内源性代谢物-靶标-脑心通胶囊活性成分网络。结果 正常组和模型组比较鉴定得到白三烯A4、21-脱氧皮质醇、7α-羟基-3-氧代-4-胆甾烯酸酯、17α,21-二羟基孕烯醇酮、1-磷酸鞘氨醇和鹅去氧胆酸6个差异内源性代谢物，涉及花生四烯酸代谢、类固醇激素的合成、初级胆汁酸的生物合成和鞘...     

清热化痰通腑方干预卒中相关性肺炎大鼠的血清代谢组学研究

目的基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF/MS）技术探讨清热化痰通腑方（HTF）对卒中相关性肺炎（SAP）大鼠血清代谢组的影响,旨在寻找血清中的内源性差异代谢物及其相关代谢通路,以阐释HTF 治疗SAP 的作用机制。方法将雄性SD 大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组7 只。采用改良线栓法结合气管注射铜绿假单胞菌法复制SAP 模型。造模同时给予大鼠HTF 药液38 g·kg-1·d-1灌肠,给药体积为38 mL·kg-1,每天1 次,连续7 d。应用UPLC-Q-TOF/MS 技术进行血清样品的分离和数据采集,通过主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）法分析HTF 对内源性差异代谢物的影响,并通过MetaboAnalyst 3.0 数据库分析其代谢通路。结果在正、负离子模式下共筛选鉴定出22 种内源性差异代谢物。与模型组比较,HTF 治疗组大鼠血清中的N-乙酰谷氨酸、顺乌头酸、雌激素、癸二酸、维生素E、酪氨酸、脱氧胞苷、莽草酸及胞苷含量显著升高（P < 0.01）,3-甲氧基- L-酪氨酸、白三烯B4、苯乙酰甘氨酸、磷酸丝氨酸、前列腺素E2、前列腺素F2α、血栓素B2、11-脱氧皮质酮、19-氧睾酮、前列腺素E3、前列腺素F1α、油酸以及棕榈酸含量显著降低（P < 0.01）。22 个潜在生物标志物主要涉及15 条异常代谢通路,其中与苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,花生四烯酸代谢,柠檬酸循环（TCA 循环）,脂肪酸生物合成,类固醇激素生物合成,嘧啶代谢以及甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等7 条代谢通路密切相关。结论HTF对SAP 大鼠的治疗作用可能与其改善血清中内源性代谢物的水平,调节花生四烯酸代谢、脂质代谢以及能量代谢等有关。