蒙药九黑散对冠状病毒感染肺黏疫病小鼠的干预作用研究

目的:研究九黑散(Yisen Har,YH)对人冠状病毒229E感染肺黏疫病小鼠的干预作用。方法:建立人冠状病毒229E感染肺黏疫病小鼠模型,YH连续灌胃给药4 d,检测肺指数、抑制率及肺组织病毒载量,考察外周血淋巴细胞百分比、肺组织血管紧张素转化酶2(ACE2)、血清特异性免疫球蛋白G(IgG)以及肺组织炎性因子含量等指标,评价YH的作用。结果:YH可显著提升冠状病毒229E感染肺黏疫病小鼠外周血CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞百分比例,明显降低肺组织肿瘤坏死因子-α水平;对小鼠肺指数、肺部病毒载量和肺组织ACE2含量未见降低作用,对血清特异性IgG抗体水平未见明显升高作用。结论:YH对人冠状病毒229E感染肺黏疫病小鼠有提高免疫力和降低肺部炎症反应作用,未见直接抑制冠状病毒作用。     

免疫抑制剂在反复胚胎种植失败患者中的应用价值研究

目的： 观察免疫抑制剂环孢素A在反复胚胎着床失败患者中的临床疗效，探索免疫抑制剂在辅助生殖中的应用价值。方法： 回顾性分析2016年1月至2018年1月在某院行体外受精-胚胎移植助孕治疗的97例反复胚胎着床失败患者的临床资料，根据再次行胚胎移植时是否应用环孢素A将患者分为研究组54例，对照组43例。比较2组患者胚胎着床率、临床妊娠率，观察外周血淋巴细胞免疫表型变化，以及不良事件发生情况。结果： 采用χ²检验比较组间差异，研究组胚胎着床率（28.89%）、临床妊娠率（46.3%）均高于对照组（11.11%，23.26%），差异有显著性（P<0.05）；治疗后CD3⁺T细胞、CD4⁺T细胞占淋巴细胞的比率下降，但差异无显著性；治疗后活化的CD3⁺T细胞比率（CD3⁺HLA-DR⁺）、B淋巴细胞（CD3^-CD19⁺）较治疗前无显著性（P>0.05），CD8⁺T细胞占淋巴细胞的比率上升、CD4⁺/CD8⁺比值下降，NK细胞（CD3^-CD16⁺CD56⁺）占淋巴细胞的比率明显下降，差异有显著性（P<0.05）。2组患者治疗过程中均未出现严重不良事件。结论： 免疫抑制剂环孢素A能增加反复着床失败患者的胚胎着床率，提高临床妊娠率，促使外周血免疫细胞分布向有利于胚胎着床方向偏移，免疫抑制剂在辅助生殖中的应用值得进一步开展研究。     

桂枝茯苓胶囊通过MAPK信号通路介导T淋巴细胞下调ICAM-1、HE4表达抑制子宫肌瘤细胞增殖、迁移和侵袭

目的：探究桂枝茯苓胶囊对子宫肌瘤大鼠细胞增殖、迁移和侵袭、MAPK信号通路和T淋巴细胞水平的影响。方法：60只大鼠随机分为对照组、子宫肌瘤组和子宫肌瘤+GZFLc组（n=20）。通过注射苯甲酸雌二醇和黄体酮构建子宫肌瘤模型。桂枝茯苓胶囊灌胃干预,剂量为1 000 mg·kg^-1。检测各组小鼠激素水平、子宫系数、雌二醇（E2）、孕酮（P）、促卵泡激素（FSH）、细胞间黏附分子1（ICAM1）、附睾蛋白4（HE4）、Ki67、基质金属蛋白酶2（MMP2）、ERK1/2、p38 MAPK蛋白表达量。通过流式细胞术检测CD3⁺比例和CD4⁺/CD8⁺水平。结果：3组大鼠上述指标比较差异有统计学意义（P<0.05）。子宫肌瘤组大鼠血清中E2[（782.45±65.38） pg·mL^-1]、P[（57.11±5.84） ng·mL^-1]和FSH[（6.24±0.61） IU·L^-1]、子宫系数（15.36±1.92）、ICAM1（1.82±0.15）、HE4（1.19±0.12）、Ki67（0.74±0.07）、MMP2（0.62±0.06）、ERK1/2（1.28±0.11）、p38 MAPK（1.10±0.10）水平显著高于对照组,CD3⁺[（34.58±2.35）%]和CD4⁺/CD8⁺（1.17±0.22）水平显著低于对照组（P<0.05）。子宫肌瘤+GZFLc组的E2[（437.62±41.49） pg·mL^-1]、P[（46.52±4.57） ng·mL^-1]、FSH[（4.85±0.46） IU·L^-1]、子宫系数（8.25±1.04）、ICAM1（0.76±0.07）、HE4（0.71±0.07）、Ki67（0.32±0.03）、MMP2（0.27±0.03）、ERK1/2（0.52±0.05）和p38 MAPK（0.56±0.05）水平显著低于子宫肌瘤组,CD3⁺（42.44±3.76）和CD4⁺/CD8⁺（1.85±0.31）水平显著高于子宫肌瘤组（P<0.05）。结论：桂枝茯苓胶囊可抑制子宫肌瘤的增殖迁移和侵袭,抑制MAPK通路,提高CD3⁺、CD4⁺/CD8⁺的水平。     

西黄丸对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制研究

目的:研究西黄丸对H₂₂荷瘤小鼠的抑制作用及相关作用机制。方法:采用H₂₂荷瘤小鼠模型分析西黄丸对肿瘤抑制作用;流式细胞仪测定血中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺细胞含量;酶联免疫法测定相关因子含量。网络药理学预测其抑制肝癌的相关通路,并用蛋白免疫印迹法(Western blot)对关键蛋白靶点验证。结果:西黄丸给药组可降低H₂₂荷瘤小鼠的肿瘤重量(P<0.05);升高胸腺指数、脾脏指数(P<0.05),升高CD4⁺/CD8⁺水平(P<0.05);升高IL-2、IFN-γ的水平,降低IL-6、IL-10的水平(P<0.05)。网络药理学筛选得到77个重要有效成分,28个核心靶点,Western blot验证显示,西黄丸对PI3K-Akt-MMP9通路关键蛋白靶点有显著调节作用。结论:西黄丸具有抑制肝癌移植瘤的作用,纠正患瘤小鼠的免疫紊乱,其作用机制与多成分多靶点的整合调节效应有关。     

吉林省不同产地白屈菜药效学的比较

目的： 探讨吉林省不同产地白屈菜的药效成分含量及其止咳平喘作用,确定白屈菜的最优产地,指导临床更加合理的使用白屈菜。方法： 采用HPLC法测定9个产地白屈菜中白屈菜红碱的含量,通过观察诱咳模型小鼠咳嗽潜伏期、咳嗽次数、炎症因子IL-1、IL-6水平;哮喘模型豚鼠哮喘潜伏期、行为学评分、气道黏多糖含量、CD4⁺/CD8⁺变化及肺组织病理学改变,评价不同产地白屈菜的药效作用差异。结果： 9组不同产地的白屈菜浓缩液均能延长小鼠咳嗽潜伏期,降低3 min内咳嗽次数（P<0.05或P<0.01）,延长豚鼠哮喘潜伏期,降低行为学评分（P<0.05或P<0.01）;其中靖宇产白屈菜控制小鼠咳嗽发生的潜伏期、3 min内咳嗽次数、豚鼠发生哮喘潜伏期、哮喘发生的行为状态、气道黏多糖含量及CD4⁺/CD8⁺值明显优于其他8组（P<0.05或P<0.01）。结论： 不同产地的白屈菜均有止咳平喘作用,但作用效果不同,其中靖宇地区产白屈菜在治疗咳嗽、哮喘症状方面具有一定的优势。     

柠檬苦素对MFC胃癌荷瘤模型小鼠免疫功能及凋亡相关因子表达的影响

目的:研究柠檬苦素对MFC胃癌荷瘤模型小鼠免疫功能及凋亡相关因子表达的影响。方法:将MFC胃癌细胞接种于小鼠右侧腋下以复制MFC胃癌荷瘤模型,造模成功后分为模型组、环磷酰胺组(阳性对照,25 mg/kg)和柠檬苦素高、中、低剂量组(100、50、25 mg/kg),每组10只。除模型组小鼠灌胃0.5%羧甲基纤维素钠外,其余各组小鼠灌胃相应药物,每天1次,连续14天。小鼠给药前及末次给药后均测定体质量,并在末次给药后取脾、胸腺、肿瘤组织以计算脾指数、胸腺指数及抑瘤率;采用流式细胞术检测小鼠CD4⁺、CD8⁺T淋巴细胞百分数和CD4⁺/CD8⁺比值;采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中免疫功能相关指标[白细胞介素2(IL-2)、IL-10、干扰素γ(IFN-γ)]的表达水平;采用实时定量聚合酶链式反应法和Western blot法检测小鼠肿瘤组织中凋亡相关因子[细胞色素C(Cyt-C)、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的mRNA和蛋白的相对表达水平。结果:除环磷酰胺组小鼠体质量较模型组显著降低外(P<0.05),其余各组小鼠体质量的差异均无统计学意义(P<0.05)。环磷酰胺组和柠檬苦素高、中、低剂量组小鼠的抑瘤率分别为(58.16±7.07)%、(37.09±4.26)%、(27.30±3.64)%、(15.13±2.95)%。与模型组比较,环磷酰胺组小鼠脾指数、胸腺指数、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞百分数、CD4⁺/CD8⁺比值、血清中IL-2和IL-10的表达水平、肿瘤组织中Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平以及柠檬苦素各剂量组的IL-10表达水平、Bcl-2的mRNA和蛋白的相对表达水平均显著降低(P<0.05);环磷酰胺组IFN-γ表达水平、Cyt-C和Bax的mRNA和蛋白的相对表达水平,以及柠檬苦素各剂量组的脾指数(低剂量组除外)和胸腺指数、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞百分数、CD4⁺/CD8⁺比值、IL-2和IFN-γ的表达水平、Cyt-C和Bax的mRNA和蛋白的相对表达水平均显著升高(P<0.05)。结论:柠檬苦素能抑制MFC胃癌荷瘤模型小鼠肿瘤组织的生长,且毒副作用相对较小;其作用机制与提高免疫功能和诱导凋亡有关。     

重组人干扰素α-2b凝胶联合微波治疗宫颈柱状上皮异位合并HPV感染的疗效分析

目的分析重组人干扰素α-2b凝胶联合微波治疗宫颈柱状上皮异位合并人乳头瘤病毒(HPV)感染患者的效果。方法选取2019年8月～2020年7月宫颈柱状上皮异位合并HPV感染患者482例,采用随机数表法分为两组,各241例。对照组采用微波治疗,观察组在微波治疗基础上联合重组人干扰素α-2b凝胶。比较两组临床症状缓解时间、治疗前后炎症因子[白介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、免疫功能(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺)、血清病毒载量、复发率。结果观察组小腹坠胀、白带异常、创面糜烂缓解时间均较对照组短(P <0.05);治疗后两组血清IL-6、IL-8、TNF-α、血清病毒载量均低于治疗前,且观察组低于对照组(P <0.05);治疗后两组CD3⁺、CD4⁺均高于治疗前、CD8⁺低于治疗前,且观察组CD3⁺、CD4⁺均高于对照组、CD8⁺低于对照组(P <...     

益母草碱对结肠癌荷瘤小鼠肿瘤生长和免疫功能的影响

目的 探讨益母草碱对结肠癌荷瘤小鼠肿瘤生长和免疫功能的影响。方法 C57BL/6小鼠建立结肠癌荷瘤小鼠模型,造模后的小鼠随机分为对照组(0.9%NaCl)、低剂量实验组(180 ng·g^-1益母草碱)、高剂量实验组(360 ng·g^-1益母草碱)、高剂量+空载组(360 ng·g^-1益母草碱+空载质粒)、高剂量+cGAS敲低组(360 ng·g^-1+cGAS siRNA质粒)。分组处理后测定肿瘤体积与质量,以免疫组化染色检测肿瘤组织环状GMP-AMP合成酶(cGAS)、干扰素基因刺激因子(STING)相对阳性表达及CD4⁺T与CD8⁺T阳性细胞数,以细胞计数试剂盒8法检测小鼠CD4⁺T与CD8⁺T细胞对肿瘤细胞杀伤率。结果 对照组、高剂量实验组、高剂量+空载组、高剂量+cGAS敲低组小鼠的肿瘤体积分别为(1 088.32±70.82)、(468.20±24.28)、(480.01±23.78)和(998.99±3...     

自然衰老对小鼠免疫功能的影响

目的探讨自然衰老对小鼠免疫功能的影响。方法测量8周龄(青年组)和16月龄(老年组)ICR雄性小鼠各8只体重和免疫器官指数。流式细胞术检测两组小鼠脾脏组织和外周血中T淋巴细胞亚群(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺)、髓源性抑制细胞(MDSC)及其亚型单核细胞样MDSC(M-MDSC)细胞比例,分析两种细胞比例相关性。结果与青年组比较,老年组体重、脾脏指数和肾脏指数升高(P<0.05),脾脏组织中CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺细胞比例降低,而CD4⁺/CD8⁺比值升高(P<0.05或P<0.01),外周血中CD3⁺和CD4⁺细胞比例降低(P<0.05),脾脏组织和外周血中MDSC和M-MDSC细胞比例升高(P<0.01)。老年组CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺细胞比例与MDSC、M-MDS...     

迷迭香酸抑制荷瘤小鼠H22肝癌移植瘤生长的作用机制

目的 观察迷迭香酸抑制荷瘤小鼠H22肝癌移植瘤生长的作用机制。方法 建立肝癌H22荷瘤小鼠模型,根据随机数字表法分为模型组、迷迭香酸组、环磷酰胺(CTX)组,每组5只。迷迭香酸组灌胃给予迷迭香酸,CTX组腹腔注射CTX,模型组灌胃给予等体积0.9%氯化钠注射液,3组均连续给药14 d。比较3组肿瘤生长情况、免疫器官指数、肿瘤组织病理变化、T淋巴细胞(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)、CD3⁺、CD4⁺凋亡率、肿瘤组织中免疫细胞因子[干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)]水平。结果 给药14 d后,CTX组和迷迭香酸组的肿瘤重量和体积低于模型组(P均<0.01);迷迭香酸组小鼠体质量、胸腺指数和脾脏指数与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05);CTX组小鼠体质量和胸腺指数低于模型组(P均<0.01),脾脏指数与模型组比较差异无统计学意义(P>0...     

富于淋巴细胞型乳腺癌中PD-L1和CD8+TILs的表达及临床意义

目的　探讨富于淋巴细胞型乳腺癌（lymphocyte-predominant breast cancer,LPBC）中程序性死亡配体-1（programmed death ligand-1,PD-L1）和CD8⁺肿瘤浸润淋巴细胞（tumor-infiltrating lymphocytes,TILs）在肿瘤中不同部位的表达与临床病理学特征的关系及对患者预后的影响。方法　选取滨州医学院附属医院病理科2011年1月至2018年12月有完整临床病理资料的LPBC 60例,患者均为女性,中位年龄51岁,肿块中位直径为2.5 cm,淋巴结转移率40.0%,组织学类型均为浸润性导管癌。应用免疫组化EnVision法检测PD-L1在肿瘤细胞和免疫细胞中的表达以及CD8在间质（stromal,s）和瘤内（intratumoral,i）TILs中的表达,采用卡方检验或Fisher精确检验、Spearman秩相关检验进行相关性分析,采用Kaplan-Meier法进行生存分析并行Log-Rank检验。结果　LPBC中PD-L1阳性表达率为81.7%（49/60）,PD-L1在肿瘤细胞中的表达与组织学分级有关（P=0.041）,PD-L1在免疫细胞中的表达与肿瘤大小、Ki-67有关（P=0.004、0.001）。CD8⁺sTILs高密度组与更好的无瘤生存期（DFS）显著相关（P=0.037）,CD8⁺iTILs高密度组与更差的DFS显著相关（P=0.042）,CD8⁺sTILs和CD8⁺iTILs的表达与总生存期（OS）均无显著相关性（P=0.084、0.076）。CD8⁺iTILs表达与肿瘤细胞中PD-L1表达呈正相关（r_s=0.301,P=0.019）。结论　CD8⁺iTILs高表达的患者预后差,而CD8⁺sTILs高表达的患者预后好,CD8⁺iTILs表达与肿瘤细胞中PD-L1表达呈正相关,CD8⁺iTILs高表达患者预后差可能是由于肿瘤细胞PD-L1抑制了CD8⁺iTILs的肿瘤免疫作用。     

三种常用高效抗逆转录病毒治疗方案疗效的比较

目的：比较替诺福韦酯（tenofovir disoproxil fumarate,TDF）+拉米夫定（lamivudine,3TC）+依非韦伦（efavirenz,EFV）、替诺福韦酯+拉米夫定+克力芝（lopinavir/ritonavir,LPV/r）、齐多夫定（zidovudine,AZT）+拉米夫定+依非韦伦3种高效抗逆转录病毒治疗（highly active anti-retroviral therapy,HAART）方案的疗效。方法：回顾性收集2011年1月至2021年4月在广西中医药大学附属瑞康医院治疗的HIV感染者/艾滋病患者220例,按治疗方案分为3组,其中TDF+3TC+EFV （A组）136例、TDF+3TC+LPV/r （B组）53例、AZT+3TC+EFV （C组）31例。比较不同组治疗1年、2年后的CD4⁺、CD8⁺T细胞计数和病毒载量（HIV RNA）的变化,并计算各组的用药成本。结果：治疗1年和2年后,各组CD4⁺T细胞计数、CD4⁺/CD8⁺T细胞比值均显著升高（P<0.05）;CD8⁺T细胞计数均有所下降,其中A组治疗前后差异有统计学意义（P<0.05）;HIV RNA在最低检测限以下的患者达96%以上;病毒学指标和免疫学指标的组间差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：TDF+3TC+EFV、TDF+3TC+LPV/r、AZT+3TC+EFV三种方案的疗效相近,其中,TDF+3TC+EFV有成本低、安全性高的优势。     

调节性T细胞在阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常克隆中的免疫机制研究

目的　测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）患者调节性T细胞的变化,探讨其在PNH异常克隆中可能的免疫机制。方法　2018年1月至2022年1月在宁德师范学院附属宁德市医院血液科就诊的31例PNH患者为病例组,其中发作性PNH 15例（男10例、女5例,年龄23～69岁）、再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿（AA-PNH）16例（男11例、女5例,年龄20～68岁）;25例健康体检者为对照组（男14例、女11例,年龄19～56岁）。用流式细胞仪检测各组外周血T细胞和Th细胞亚群变化以及CD4⁺CD25⁺T细胞和Th3细胞数量,用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（RT-PCR）测定转化生长因子-β（TGF-β）和叉头框蛋白P3（FOXP3）的表达水平,用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测TGF-β和白细胞介素-10（IL-10）浓度。采用F检验、Bonferroni方法、H检验、χ²检验。结果　AA-PNH组CD4⁺/CD3⁺细胞和CD4⁺/CD8⁺比例低于对照组［（44.55±11.91）%比（57.61±6.90）%、0.66（0.38,1.26）比1.32（0.86,1.64）］,CD8⁺/CD3⁺细胞高于对照组［（62.31±10.76）%比（45.51±5.54）%］,差异均有统计学意义（均P<0.05）;AA-PNH组Th1/CD3⁺CD4⁺细胞高于发作性PNH组及对照组［（24.27±4.30）%比（12.61±3.02）%、（4.07±1.93）%］,差异有统计学意义（P<0.05）。AA-PNH组及发作性PNH组CD4⁺CD25⁺ T细胞和Th3细胞的数量高于对照组［（67.82±15.67）×10⁶/L、（97.11±17.10）×10⁶/L比（43.86±9.52）×10⁶/L,（57.15±10.58）×10⁶/L、（82.27±15.15）×10⁶/L比（42.35±9.33）×10⁶/L］,差异均有统计学意义（均P<0.05）。发作性PNH组、AA-PNH组中FOXP3及TGF-β的mRNA的阳性表达率和TGF-β及IL-10浓度均高于对照组［86.67%（13/15）、75.00%（12/16）比40.00%（10/25）,73.33%（11/15）、62.50%（10/16）比36.00%（9/25）,（49.76±2.03）μg/L、（37.29±1.78）μg/L比（17.01±3.27）μg/L,（7.86±1.17）pg/ml、（5.57±1.13）pg/ml比（1.33±0.49）pg/ml］,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论　PNH患者调节性T细胞数量增加,功能亢进,推测其免疫抑制作用可能使其在PNH异常克隆中逃避免疫监视。     

泼尼松联合长春新碱治疗慢性免疫性血小板减少症的疗效及对细胞免疫功能的影响

目的　研究泼尼松联合长春新碱治疗慢性免疫性血小板减少症的疗效及对细胞免疫功能的影响。方法　选取中山市人民医院2019年1月至2021年8月期间收治的136例慢性免疫性血小板减少症患儿为研究对象,进行前瞻性研究,按照随机数字表法等分为两组,分别予以不同的药物进行治疗。对照组中男33例,女35例,年龄（11.13±2.83）岁,采取泼尼松治疗;研究组中男34例,女34例,年龄（11.12±2.28）岁,在泼尼松治疗的基础上联合长春新碱治疗。持续治疗2个月后比较两组患者治疗前后的细胞免疫功能变化情况以及不同疗法的治疗效果和不良反应发生概率。使用SPSS 22.0统计软件分析数据,采用t、χ²检验。结果　治疗后,研究组的CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺分别为（54.87±4.59）%、（33.97±3.85）%、（1.85±0.36）,均高于对照组［分别为（52.35±5.24）%、（31.03±3.70）%、（1.72±0.21）］,研究组CD8⁺为（23.78±2.38）%,低于对照组的（25.32±2.43）%,两组比较差异均有统计学意义（t=2.983、4.720、2.572、3.733,均P<0.05）。研究组患者的治疗有效率为94.12%（64/68）,高于对照组的79.41%（54/68）,两组比较差异有统计学意义（χ²=6.403,P=0.011）。两组不良反应发生情况差异无统计学意义（χ²=0.119,P=0.730）。结论　泼尼松联合长春新碱治疗慢性免疫性血小板减少症患儿具有较好的效果,并且对患儿的细胞免疫功能具有积极影响,值得广泛推广。     

Immunological protection against HPV16 E7-expressing human esophageal cancer cell challenge by a novel HPV16-E6/E7 fusion protein based-vaccine in a Hu-PBL-SCID mouse model

Increasing evidence has suggested that infection with high-risk human papillomavirus (HPVs) is closely associated with esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) in China. The E6 and E7 oncoproteins expressed in ESCC are considered as attractive tumor-specific antigen targets for immunotherapy. We have reported that the HPV16 mE6delta/mE7/TBhsp70delta fusion protein vaccination induced powerful anti-tumor immunity against TC-1 tumor cells in a C57BL/6 mouse model. In the present study, we further evaluate the protective efficacy of this fusion protein vaccine using an HPV E7-expressing human ESCC cell line (EC9706) and a Hu-PBL-SCID mouse model. We demonstrated that immunization with the fusion protein vaccine caused significant inhibition of tumor growth with the delay time to tumor detection (tests vs. controls, 16 d vs. 9 d, p<0.01) and much smaller tumor size (p<0.01) in vivo. The inhibitory rate was ca. 69.6%, and 25% of the fusion protein vaccinated-mice remained tumor free by the end of the experiment (42 d). Furthermore, the activated lymphocytes (CD8+) were capable of infiltrating into the tumor site, and much more apoptotic cells along with activation of caspase-3 were observed in the tumors from vaccinated-mice. Also, high expression levels of human IFN-gamma, TNF-alpha, granzyme B and perforin were detected in the tumors from vaccinated-mice. Therefore, we concluded that the HPV16 mE6delta/mE7/TBhsp70delta fusion protein vaccine is able to stimulate cellular-mediated immune response against E7-containing ESCC cells through CD8+-dependent CTL-induced apoptosis in Hu-PBL-SCID mice. These findings provide a scientific basis for HPV E7-expressing ESCC active immunotherapy.