CGRP介导束缚应激大鼠骨代谢的实验研究

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)在慢性束缚应激大鼠骨退化中的作用。方法建立束缚应激大鼠模型,随机分为正常组(CON);束缚7 d组(A组);束缚14 d组(B组);束缚21 d组(C组),每组10只。观察股骨软骨下骨组织结构、细胞形态变化;用特异性放射免疫分析方法测定各组大鼠外周血、观察各组降钙素基因相关肽(CGRP)的改变。免疫组化染色检测各组软骨下骨组织CGRP的阳性表达。结果应激后C组大鼠细胞存活率下降(P﹤0.01)。C组外周血及软骨下骨CGRP的阳性细胞表达数均低于正常对照组,含量明显降低(P0.01)。结论在长期慢性束缚应激过程中低表达的神经肽导致骨代谢失衡,并显示退化状态。     

染料木黄酮对糖尿病股骨头生长板早闭及骨质疏松的影响

目的探讨染料木黄酮(genistein,Gen)对糖尿病大鼠股骨头生长板退化及骨质疏松的保护作用。方法建立速发型链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)糖尿病大鼠模型,随机分为正常组(CON)、糖尿病组(DM)、Gen干预组(Gen)。每天1次,灌胃给药(4.0 mg/kg),每组20只。15 w后光镜下作组织病理学分析及组织计量学测定;利用Van Gieson胶原纤维染色法观察胶原纤维沉积变化;ELISA测定血清蛋白聚糖和生化检测各组股骨头组织匀浆的醛糖还原酶(AR)活性。结果 CON组骨小梁粗厚、有完整的成骨细胞区。DM组骨小梁稀疏细薄、细胞核固缩;生长板厚度、生长板细胞柱密度均明显小于对照组(P0.01);生长板钙化区胶原纤维明显增多;AR活性增大(P0.01);蛋白聚糖含量明显增加(P0.01)。Gen组骨小梁排列较紧密;生长板较DM组厚、生长板细胞柱密度大(P0.01)。AR活性降低(P0.01),蛋白聚糖下调(P0.01)。结论染料木黄酮可减轻糖尿病生长板的萎缩退化和骨质疏松变化,防止生长板过早闭合。     

中药葛根素对青年大鼠峰值骨量的影响研究

目的探究葛根素(puerarin,PR)是否能提高青年大鼠的峰值骨量,起到预防骨质疏松症的作用。方法 1月龄Wistar雌性健康大鼠36只,按随机数表法分为3组,每组12只,分别为对照组(control,CON)、淫羊藿苷组(icariin,ICA,阳性对照)和葛根素组(puerarin,PR)。ICA组灌胃淫羊藿苷25 mg/(kg·d),PR组灌胃葛根素15.4 mg/(kg·d),CON组灌胃等体积蒸馏水。待各组间骨密度有显著差异后(两个月后)处死所有大鼠,进行重要脏器的器官指数计算,采用HE染色进行病理学分析、双能X线骨密度仪检测椎骨和股骨离体骨密度、万能材料试验机进行骨生物力学检测、ELISA试剂盒进行血清骨代谢指标检测以及VG染色进行骨形态计量学的检测。结果在实验期间各组大鼠体重均呈上升趋势,但组间无显著差异;各组间主要脏器肺、肾、子宫等的器官指数无明显差异,病理学观察也未见异常改变;骨密度结果显示:灌胃给药前,CON组、ICA组和PR组大鼠全身骨密度均无统计学意义,灌胃4 w时,与CON组比较,ICA组和PR组大鼠全身骨密度有升高趋势,但无统计学意义(P均0.05),灌胃8 w时ICA组和PR组大鼠骨密度显著升高,且差异具有统计学意义(P均0.05);与CON组相比,ICA组和PR组股骨离体骨密度均显著升高(P均0.01),椎骨离体骨密度显著升高(P均0.05);生物力学结果:与CON组相比,ICA组和PR组大鼠股骨和椎骨的最大载荷值均显著升高(P0.01,P0.05),弹性模量值也均显著升高(P均0.05);骨形态计量学VG染色结果分析:与CON组相比,ICA组和PR组股骨中骨小梁数目(trabecular number,Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)和骨体积/组织体积(bone volume/tissue volume,BV/TV)值均显著升高(P均0.05),而骨小梁分离度(trabecular Spacing,Tb.Sp)显著下降(P0.01)。血清骨代谢指标检测结果:与CON组比较,ICA组和PR组骨钙素(osteocalcin,OC)含量值显著升高(P均0.05),而抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP 5b)含量均显著降低(P均0.05)。结论葛根素能显著提高青年大鼠的峰值骨密度和骨质量,增强股骨和椎骨生物力学性能,改变骨形态计量学,其可能机制是具有提高骨形成和抑制骨吸收的双重活性。     

黄芪散对糖尿病大鼠股骨和胫骨的作用研究

目的观察黄芪散对糖尿病长期造模大鼠股骨和胫骨的影响。方法 180~200 g雄性SD大鼠,实验分组为正常组、模型组、给药组,给药组剂量10 ml·kg-1(前期实验已进行过高中低剂量筛选),一次性低剂量(35 mg·kg-1)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)+高脂饲料(HFD)诱导2型糖尿病(T2DM)模型,造模的同时灌胃黄芪散(HQS),实验进行120天后处死大鼠,对股骨进行材料力学与结构力学的考察,对胫骨进行骨小梁面积百分比、厚度、数目等指标测定。结果黄芪散能显著提高糖尿病大鼠股骨试件所承受的外力,其骨材料韧性、骨内在硬度、骨脆性上都与模型组有显著差异(P0.05)。模型组胫骨的骨小梁面积百分数及骨小梁数目显著降低(P0.05),而骨小梁分离度显著增加(P0.05),骨小梁宽度有减少的趋势(P0.05),给药组与模型组相比,胫骨骨小梁面积百分数、骨小梁宽度、骨小梁数目均有增大的趋势。结论黄芪散能显著改善T2DM模型大鼠股骨和胫骨质量,有预防其骨质疏松发生的可能作用。     

复方贞术调脂胶囊对糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度及生物力学特性的研究

目的观察复方贞术调脂胶囊(FTZ)对糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨密度及生物力学特性的影响。方法SPF级雄性SD大鼠32只,随机等分为4组:Nrm组为正常对照组,Met组为皮下注射甲强龙(Met)5 mg/(kg·d),每周5次,FTZL组和FTZH组在Met组基础上每日分别给予低剂量FTZ(1.5g/kg)和高剂量FTZ(6g/kg)灌胃,实验期为12w。QDR4500A型双能X线骨密度测定仪测定股骨和腰椎骨密度,MTS-858型生物力学实验机测定股骨和腰椎生物力学性能。结果Met组大鼠股骨和腰椎的骨密度、最大载荷、刚度、弹性模量、皮质骨厚度、股骨中段截面面积和椎体横断面面积均显著低于Nrm组相应指标(P0.001,P0.01),股骨骨髓腔面积显著高于Nrm组(P0.01);FTZL组大鼠的股骨骨密度,最大载荷、刚度、弹性模量、皮质骨厚度、股骨中段截面面积和椎体横断面面积较Met组有升高趋势,股骨骨髓腔面积较Met组减少,但两组间各指标均无显著性差异(P0.05);FTZH组大鼠股骨和腰椎的骨密度、最大载荷、刚度、弹性模量、皮质骨厚度和椎体横断面面积显著高于Met组相应指标(P0.01,P0.05),股骨骨髓腔面积显著低于Met组(P0.05),股骨中段截面面积较Met组有增加趋势,但无显著性差异(P0.05),FTZH组腰椎的骨密度和最大荷载显著高于FTZL组(P0.05),余各项指标间无显著性差异(P0.05)。结论高剂量FTZ对改善糖皮质激素诱导骨质疏松大鼠股骨和腰椎的骨密度及生物力学特性效果显著。     

虾青素对去卵巢糖尿病大鼠骨质流失的防治作用

目的探讨虾青素能否防治去卵巢糖尿病大鼠的骨质流失以及可能的机制。方法 3月龄雌性SD大鼠分为3组(每组6只):对照组CON(假手术),模型组OVX/T1DM(去卵巢糖尿病大鼠),药物组OVX/T1DM-ASX(去卵巢糖尿病大鼠,给予虾青素100 mg/(kg·d)。结果连续治疗60 d后,与OVX/T1DM组相比,OVX/T1DM-ASX组骨密度(BMD)明显升高(P0.01),血清I型胶原蛋白(CTX-1)、骨钙素、I型前胶原蛋白n端前肽(PINP)、抗酒石酸磷酸酶5b(TRACP 5b)水平均显著升高(P0.01)。虾青素治疗能抑制去卵巢糖尿病大鼠骨组织形态学的改变,减少骨髓脂肪细胞增加,提高OPG/RANKL的比值。结论虾青素对绝经后糖尿病骨质流失有保护作用,这种作用与调控OPG/RANKL轴有关。     

外源性NGF对转基因CGRP干细胞移植治疗骨质疏松大鼠的影响

目的 研究外源性神经生长因子（nerve growth factor,NGF)对转基因降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide, CGRP)骨髓干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗骨质疏松大鼠的影响。方法 构建CGRP基因表达载体,转染制备转基因CGRP-MSCs靶细胞;60只雌性SD大鼠骨质疏松模型随机均分为空白对照组（A组）、单纯MSCs移植治疗组（B 组）、CGRP-MSCs移植治疗组（C组）,CGRP-MSCs + NGF移植组（D组）。在治疗lw、2w、3w后,实时定量荧光PCR和Western blot检测3个时间段每组大鼠股骨骨组织中CGRP基因和蛋白的相对表达水平,评价各组疗效。结果 与A组比较,3个时间点,C组和D组中CGRP表达水平均显著上调（P<0.01);治疗lw后,C组和D组上调水平差异明显（P<0.01),D组低于C 组;治疗2w后,C组和D组之间仍保持显著差异（P <0.05),D组仍低于C组;治疗3w后,C组和D组上调水平差异明显缩 小,二者差异无统计学意义（P>0.05)。CGRP基因和蛋白相对表达水平在各组检测结果差异一致,同上。结论 在转基因 CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松大鼠中联合应用外源性NGF,无累计效应,并可能抑制大鼠股骨骨组织中CGRP的表达,表明外源NGF于转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松症中可能并无促进作用,至少在CGRP表达层面无促进作用,而单纯的转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松大鼠疗效优于联合应用外源性NGF治疗方案。     

肉桂醛对去卵巢诱导的骨质疏松大鼠模型骨密度和骨量的保护作用

目的探讨肉桂醛对去卵巢手术诱导的骨质疏松症大鼠模型中骨密度(BMD)和骨量的影响。方法 24只雌性Sprague-Dawley大鼠经过去卵巢手术或假手术。12周后大鼠被分为肉桂醛组(RGQ组)、对照组(CON组)和去卵巢组(OVX组)。检测所有大鼠股骨和腰椎骨密度(BMD),血清细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6(Interleu-kin)水平和进行股骨组织形态学分析。结果去卵巢手术显著降低大鼠的BMD值、骨小梁数量、小梁厚度和小梁面积;此外,显著增加骨小梁分离度和血清TNF-α和IL-6水平;和CON组比较差异有统计学意义(P0.05)。而RGQ治疗后,RGQ组大鼠大鼠的BMD值、骨小梁数量、小梁厚度和小梁面积显著增加,骨小梁分离度和血清TNF-α和IL-6水平显著降低;和CON组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论肉桂醛对去卵巢手术诱导的骨质疏松症大鼠模型中骨密度(BMD)和骨量有保护作用。     

乙酰肝素酶在糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生中的作用

目的 观察糖尿病肾病大鼠肾组织乙酰肝素酶（HPA）的表达，探讨其在糖尿病肾病大鼠蛋白尿发生中的作用。 方法 SD健康大鼠被随机分为健康对照组（n = 6）、糖尿病6周组(DM6w, n = 10)和糖尿病12周组(DM12w, n = 10)，采用一次性腹腔注射链脲菌素（STZ）的方法建立糖尿病大鼠模型。分别于造模后6周和12周末测定各组大鼠相对肾质量、血糖、尿素氮、血肌酐、24 h尿量及尿蛋白量(24 h)等指标，并观察肾脏病理改变。RT-PCR和免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织HPA mRNA和蛋白表达变化，并分析其与蛋白尿发生的相关性。 结果 （1）DM6w和DM12w组大鼠的相对肾质量、血糖、尿素氮、24 h尿量及尿蛋白量(24 h)与健康对照组相比明显升高, 差异均有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)。（2）DM6w和DM12w组大鼠HPA mRNA和蛋白表达比健康对照组均显著增高(P < 0.01)。（3）大鼠肾组织HPA mRNA和蛋白表达与尿蛋白量(24 h)之间均呈正相关 (r = 0.783，P < 0.01；r = 0.793，P < 0.01)。 结论 HPA在糖尿病肾病中的表达升高可能参与了糖尿病肾病蛋白尿的发生。     

糖尿病对钛合金假体骨整合影响的实验研究

[目的]了解骨-假体整合生物力学强度与血糖改变的相互关系以及血糖改变对假体周围骨代谢的影响,明确胰岛素治疗对于提高假体与骨整合的作用.[方法]将90只2个月龄、体重220～250 g的健康雄性SD大鼠随机分为两组,其中45只大鼠先在双侧胫骨近端干骺端置入假体,假体置入后8周随机分成正常对照组(C1组)、DM组(D1组)和胰岛素治疗组(I1组)各15只,DM组和胰岛素治疗组30只腹腔注射1％链脲佐菌素(STZ)液(65mg/kg)诱导建立DM模型.另外45只大鼠随机分成正常对照组(C2组)、DM组(D2组)和胰岛素治疗组(I2组)各15只,DM组和胰岛素治疗组30只腹腔注射1％STZ液(65mg/kg)诱导建立DM模型,造模4周后给大鼠双侧胫骨近端干骺端置入假体.胰岛素治疗组接受胰岛素治疗,8周后将各组大鼠处死,取双侧胫骨分别行骨生物力学和硬组织切片检测.[结果]糖尿病组较胰岛素治疗组和正常对照组假体实验最大载荷以及假体-骨整合面积的比率明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]糖尿病是导致糖尿病模型大鼠骨质量下降、人工置人假体骨整合减少的原因之一.胰岛素的使用可改善大鼠的骨质量,增加骨-假体结合力.     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。