实时荧光核酸恒温扩增技术检测尿液中沙眼衣原体的分析

目的评价实时荧光核酸恒温扩增技术（SAT）检测尿液中沙眼衣原体（CT）的特异性和敏感性。方法对175例疑似患者生殖道拭子行CT—SAT、PCR检测和沙眼衣原体培养,同时对对应的175份尿液标本行CT—SAT检测。结果SAT对同一患者的拭子标本和尿液标本的检测结果符合率100％。1例淋球菌培养阴性而SAT阳性,2例PCR阳性而SAT阴性。结论SAT技术检测拭子及尿液中的沙眼衣原体具有很高的灵敏度和特异性,为CT的实验室诊断提供新的检测方法。     

实时荧光核酸恒温扩增技术在淋球菌检测中的应用分析

目的采用统计学方法评价实时荧光核酸恒温扩增技术(SAT)在临床淋球菌检测中的应用。方法以淋球菌培养法为标准对照,采用实时荧光核酸恒温扩增技术同时对150例疑似患者的生殖道拭子标本和尿液标本进行检测,对结果进行统计学分析比较,并用PCR法进行验证。结果使用SAT检测的生殖道拭子和尿液阳性检出均为110例,培养法阳性检出为108例,其中培养法检出阴性的2例通过PCR验证为阳性。两种取样方式的SAT检测法和培养法三者阳性率差异均无统计学意义(P0.05);以培养法为金标准,SAT检测拭子的敏感度为100.0%,特异度为95.2%;SAT检测尿液标本的敏感度为100.0%,特异度为95.2%。结论采用实时荧光核酸恒温扩增技术对生殖道拭子和尿道标本的检测效果与培养法相比,阳性率高,敏感度较高,且尿道标本收集方法比较简便,患者依从性好,可代替拭子道取样方法,此方法可在临床推广应用。     

实时荧光定量PCR检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体

目的 应用实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体(UU),并评价其敏感性和特异性.方法 对140例疑似泌尿生殖道感染患者的拭子和尿液样本,分别采用培养法、SAT进行解脲脲原体检测,检测结果有差异的标本用实时荧光定量PCR法对拭子进行复测,根据实验结果评估SAT检测尿液UU的敏感性和特异性.结果 140例疑似患者试子培养和尿液SAT检测阳性率均为60％,两者比较差异无统计学意义(P＞0.05),其中16例培养结果与SAT检测结果不一致,8例培养法阳性、SAT阴性的拭子PCR结果复测阳性;8例培养法阴性、SAT阳性的拭子标本PCR结果4例阴性、4例阳性,结合培养法结果和PCR结果作为“扩大金标准”,得出SAT对尿液检测的敏感性为95.5％、特异性为100％.结论 SAT检测泌尿生殖道患者尿液UU具有取样方便,检测快速、准确等优点,适用于临床实验室泌尿生殖道UU的检测.     

实时荧光核酸恒温扩增检测技术检测解脲脲原体的临床价值分析

目的 探讨实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)检测解脲脲原体(UU)的临床价值.方法 选取2018年5月至2020年5月于本院就诊的疑似泌尿生殖道感染患者80例,采集所有受检者的尿道/宫颈口拭子及尿样标本,分别采用液体培养法、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法、SAT法检测拭子标本中UU阳性表达情况,以液体培养法结果为金标准,评估SAT技术在UU检测中的临床价值.结果 液体培养法结果显示,80例患者中31例(38.75％)UU检测呈阳性,49例(61.25％)UU检测呈阴性;31例UU阳性患者中SAT(拭子)检出29例,检出率为93.55％,SAT(尿样)检出27例,检出率为87.10％,qRT-PCR检出28例,检出率为90.32％;3种检测方法检测UU阳性表达情况比较差异无统计学意义.SAT(拭子)、SAT(尿样)、qRT-PCR检测UU的灵敏度、特异度、误诊率、漏诊率、正确指数比较差异无统计学意义.结论 实时荧光核酸恒温扩增检测技术检测解脲脲原体具有较高的灵敏度、特异度,且取材方便、检测快速、污染较低、结果准确,值得临床推广应用.     

GeneXpert MTB/RIF Ultra在结核病特殊标本检测中的应用价值

目的 比较全自动荧光定量PCR系统超强版本（GeneXpert MTB/RIF Ultra,GeneXpert Ultra,GeneXpert）、全自动荧光定量PCR系统（GeneXpert MTB/RIF,Xpert,GeneXpert）、DNA实时荧光定量核酸检测（FQ-PCR）、结核分枝杆菌RNA实时荧光恒温扩增（SAT-RNA）、DNA实时荧光恒温扩增检测（恒温扩增法）及传统BACTEC MGIT 960液体培养（培养法）对结核病特殊标本的诊断效能，为临床诊疗提供依据。方法 收集2021年1—9月西安市胸科医院特殊标本共170例（包括胸腹水标本47例，24 h尿沉渣标本34例，组织标本49例，脓液标本40例），分别采用GeneXpert Ultra、Xpert、FQ-PCR、SAT-RNA、恒温扩增法及传统培养法进行检测，以临床诊断为标准，对比其灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率及Kappa值。结果 GeneXpert Ultra、Xpert、FQ-PCR、SAT-RNA、恒温扩增法及传统培养法的灵敏度分别为65.18%(73/112)、49.11%(55/112)...     

涂片、培养和实时荧光定量PCR检测在妇科的临床应用

目的比较涂片革兰染色、培养和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测妇科性病淋球菌感染的临床应用价值,寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法.方法同时用涂片革兰染色、培养和FQ-PCR检测临床疑诊淋病123例女性阴道标本中的淋球菌,以培养法为"金标准",将另外两种方法与之比较,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值.结果涂片检出率为76.4%、培养法检出率为66.7%、FQ-PCR检出率为69.9%;经配对计数资料χ2检验,FQ-PCR与培养法的检出率比较差异无显著性(P＞0.05).涂片法和FQ-PCR法的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为94.2%、66.7%、87.2%、82.8%和97.6%、89.7%、95.3%、94.6%.结论FQ-PCR检测淋球菌,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点.FQ-PCR具有准确快速,敏感性和特异性较高的特点,是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法.     

涂片、培养和实时荧光定量PCR检测在妇科的临床应用

目的：比较涂片革兰染色、培养和实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测妇科性病淋球菌感染的临床应用价值,寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法。方法：同时用涂片革兰染色、培养和FQ-PCR检测临床疑诊淋病123例女性阴道标本中的淋球菌,以培养法为“金标准”,将另外两种方法与之比较,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值。结果：涂片检出率为76．4％、培养法检出率为66．7％、FQ-PCR检出率为69．9％;经配对计数资料Х^2检验,FQ-PCR与培养法的检出率比较差异无显著性（P〉0．05）。涂片法和FQ-PCR法的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为94．2％、66．7％、87．2％、82.8％和97．6％、89．7％、95．3％、94．6％。结论：FQ-PCR检测淋球菌,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点。FQ-PCR具有准确快速,敏感性和特异性较高的特点,是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法。     

恒温扩增技术在男性淋球菌性尿道炎病原菌RNA检测中的应用

目的：探讨RNA恒温扩增技术（RNA-SAT）在男性淋球菌性尿道炎病原菌RNA检测中的应用价值。方法：选取2017年6月至2018年8月温州市人民医院男性疑似淋球菌性尿道炎感染患者322例,采用RNA-SAT和实时荧光定量PCR技术（FQ-PCR）进行淋病奈瑟菌（NG）检测,并对结果进行统计分析。结果：NG阳性率最高为尿液RNA-SAT法35.1%（113/322）,NG阳性率最低为尿液FQ-PCR法26.1%（84/322）。尿液RNA-SAT法、尿液FQ-PCR法与分离培养法的阳性率比较,差异有统计学意义（χ2=6.312,P＜0.05）;而拭子RNA-SAT法、拭子FQ-PCR法与分离培养法的阳性率比较,差异无统计学意义（χ2=1.039,P＞0.05）。以分离培养法作为参考,尿液RNA-SAT法检测NG的灵敏度最高为97.9%（93/95）,尿液FQ-PCR法的灵敏度最低为81.1%（77/95）;根据ROC曲线分析,拭子RNA-SAT法和尿液RNA-SAT法的曲线下面积（AUC）中等偏上,具有较高的诊断价值（AUC＞0.9）;对其中用药7 d后临床症状、体征消失且尿常规白细胞阴性的81例患者采样复查,尿液RNA-SAT法、尿液FQ-PCR法以及分离培养法的阴转率差异无统计学意义（χ2=2.531,P＞0.05）;拭子RNA-SAT法、拭子FQ-PCR法以及分离培养法的阴转率差异也无统计学意义（χ2=2.933,P＞0.05）。结论：RNA-SAT法和FQ-PCR法均可作为判断NG病原菌感染的指标,且RNA-SAT法可采用尿液作为待检样本,具有取样方便、耗时短、污染小及反应稳定等优点,可用于男性淋球菌尿道炎NG检测与疗效预后评估。     

三种方法在检测泌尿生殖道淋病奈瑟菌感染中的比较研究

目的比较反向线点杂交技术（RLB）、实时荧光PCR（FQ-PCR）及培养法在检测泌尿生殖道淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae,NG）感染中的应用情况。方法同时采集158例患者2份泌尿生殖道标本,提取其中1份标本NG-DNA,PCR扩增NG 16SrRNA基因,然后与固定在尼龙膜上的特异性寡核苷核探针反向线点杂交;同时运用FQ-PCR检测NG的感染情况;另1份标本及时进行NG巧克力培养。结果 PCR扩增NG 16SrRNA基因的片段长度为412bp,具有较好的特异性,RLB检测158例标本中NG阳性为45例,阳性率为28.48%;FQ-PCR检测NG阳性为50例,阳性率为31.65%,二者比较差异无统计学意义（P＞0.05）;而培养法检测NG阳性为25例,阳性率为15.82%,明显低于RLB和FQ-PCR（P〈0.01）。结论与培养法相比,RLB与FQ-PCR在检测NG方面具有简便、快速且敏感性高等优点,且二者无明显差别。     

两种HBV-DNA定量测定方法的比较

目的考察实时荧光PCR定量法(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒DNA的准确性。方法通过对 56份血清进行HBV—DNA检测,其中包括一个10倍倍比稀释系列6份、阴性血清12份和阳性血清38份。比较两种方法的准确性及临床标本符合情况。结果微板核酸杂交定量法和实时荧光定量法的线性回归系统分别为0．977 和0．999。实时荧光定量法所检测的不同含量的样本批内变异系数均低于微板核酸杂交定量法。结论实时荧光定量法具有较好的灵敏度、特异性、重复性和线性,与微板核酸杂交定量法有良好的相关性。     

检测淋病柰瑟菌、沙眼衣原体、解脲支原体的临床方法评价

目的：评价Taqman技术检测临床标本中主要性病病原体的应用价值。应用：Taqman技术，常规PCR技术及培养法检测100份性病科门诊患者生殖泌尿道拭予标本，比较3种方法检测淋病票瑟菌（NG）、沙眼衣原体（CT）、解脲支原体（Uu）的灵敏度。500份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本同时经Taqman技术及常规PCR技术检测，结果不符者使用培养法验证，以比较Taqman技术及常规PCR技术的特异性。结果：在100份临床标本检测中，Taqman技术，常规PCR及培养法检出阳性率分别为41％，35％，21％，在500份送检标本中，Taqman技术检出阳标本204份。常规PCR检出性标本181份，其中结果不符的41例分标本经重复培养验证。37例与Taqman技术测结果相符。结论：Taqman技术具有良好的敏感性和特异性，集PCR扩增，杂交及荧光自动化检测于一体，实验过程简便，快速，易于质控，是检测性病病原体的有效方法。     

Taqman技术检测NG、CT、Uu的临床研究

目的：评价Taqman技术检测临床标本中主要性病病原体的应用价值。方法：应用Taqman技术、常规PCR技术及培养法检测100份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本，比较三种方法检测淋病奈瑟菌（NG），沙眼衣原体（CT），解脲支原体(Uu)的灵敏度。500份性病科门诊患者生殖泌尿道拭子标本同时经Taqman技术及常规PCR技术检测，结果不符者使用培养法验证，以比较Taqman技术及常规PCR技术的特异性。结果：在100份临床标本检测中，Taquman技术、常规PCR及培养法检出阳性率分别为41％，35％，21％。在500份送检标本中，Taqman技术检出阳性标本204份，常规PCR检出阳性标本181份，其中结果不符的41份标本经重复培养验证，37份与Taqman技术检测结果相符。结论：Taqman技术具有良好的敏感性和特异性，集PCR扩增、杂交及荧光自动化检测于一体，实验过程简便、快速、易于质控，是检测性病病原体的有效方法。     

淋病奈瑟菌PCR检测的临床应用研究

为评价淋病奈瑟菌ＰＣＲ检测的临床效果,建立了对标准淋病奈瑟菌的ＤＮＡＰＣＲ检测技术。结果显示,ＮＧ ＰＣＲ技术的灵敏度约为３个菌的基因组拷贝。对８种菌株进行ＮＧ ＰＣＲ,只有标准淋病奈瑟菌显示阳性,其余７株非淋球菌菌株均阴性,说明有很好的特异性。对４９例淋病患者同时进行涂片镜检法、细菌培养法和ＰＣＲ法检测的比较,其阳性检出率分别为７６．６％、５２．２％和９５．９％。提示ＮＧ ＰＣＲ方法比涂片和培养法更为敏感,且特异性强,在淋病的诊断,特别是早期诊断中有重要参考价值。     

UF-100和干化学筛检尿路感染的临床意义

目的探讨UF-100尿液分析仪和干化学法筛检尿路感染的临床意义.方法用UF-100仪和干化学法检测326份尿中白细胞、细菌、LEU和NIT,同时作尿定量细菌培养并将结果进行比较,用Yerushalmy模式评价两种方法的一致性及UF-100和干化学的灵敏度、特异性等.结果尿培养结果阳性的标本占20.2%,其中最常见的致病菌是大肠埃希菌.与尿培养相比,UF-100和干化学所得的最佳灵敏度、特异性、阴性预测值、阳性预测值和假阴性率分别为80.6%、80%、91.8%、85.7%、3.7%.结论 UF-100和干化学法不能较准确地预测细菌培养结果,所以不能作为筛检试验.     

泌尿道解脲脲原体感染及药敏情况分析

目的 分析解脲脲原体(Uu)在泌尿生殖道和中段尿中的检出率及其药敏情况.方法 收集泌尿生殖道(3 326例)和中段尿(701例)送检标本,进行支原体(Uu+人型支原体)培养和药敏试验,将支原体数量≥104 CFU作为阳性判断标准.结果 701例中段尿标本中,共检出Uu阳性130例(18.5％),人型支原体均为阴性;其中女性Uu阳性检出率为19.1％ (124/650),男性Uu阳性检出率为11.8％ (6/51).3 326例生殖道标本中,共检出Uu阳性851例(25.6％),其中3例人型支原体为阳性;女性Uu阳性检出率为28.1％ (783/2 790),男性Uu阳性检出率为12.5％(67/536).中段尿Uu的药敏试验结果显示,敏感率较高的药物依次为交沙霉素(98.5％)、盐酸多西环素(强力霉素)(97.9％)和原始霉素(97.7％).中段尿Uu感染对于交沙霉素、强力霉素、原始霉素的敏感率高于生殖道分泌物,耐药率则低于生殖道分泌物,差异均自统计学意义(P＜0.05).Uu对阿奇霉素的敏感率在尿路感染中仅为70.2％、而在生殖道感染中为77.7％,远低于交沙霉素的98.5％.结论 在尿路感染的初次筛查中,Uu感染的阳性检出率较高.不同部位Uu感染对抗生素的敏感性和耐药性可能小同.交沙霉素和强力霉素可考虑可以作为治疗泌尿道Uu感染的首选药物.     

IQ200全自动尿液分析系统在尿路感染筛查中的作用

目的：探讨IQ200全自动尿液分析系统在临床诊断尿路感染中的筛查价值。方法：232例清洁中段尿标本在作病原体定量培养后,立即用全自动尿液分析系统之AX4280干化学分析仪检测亚硝酸盐（NIT）、白细胞脂酶（LEU）,用IQ200流式尿沉渣定量分析仪检测细菌（BACT）、酵母茵（BYST）、小颗粒（ASP）等5项参数。以细菌定量培养结果作为金标准,评价5种参数对尿路感染细菌检出的灵敏度、特异度以及假阳性率、假阴性率。结果：AX4280检测NIT、LEU的灵敏度分别为82．9％、80．7％,特异度为97．5％、47．7％,假阳性率为2．3％、52．3％,假阴性率为16．8％、19．2％;IQ200检测BACT、BYST、ASP的灵敏度分别为80．0％、85．0％、82．1％,特异度为96．4％、95．3％、55．9％,假阳性率为3．5％,4．6％、44．1％,假阴性率为20．0％、15．0％、17．9％。结论：IQ200全自动尿液分析系统对尿路感染有一定的筛查作用,但不能代替病原菌的分离鉴定,对筛查出的阳性标本应尽早做病原体的分离培养,以指导临床及时用药。     

尿路肿瘤细胞多重荧光PCR微卫星不稳定和荧光原位杂交的联合诊断

目的 研究泌尿系统脱落细胞的微卫星、荧光原位杂交联合分子病理诊断.方法 使用ABI试剂和ABI3100仪器应用多重荧光PCR(TGFbRII、IFNA、D9S171、D9S283、D4S243、D9S162、D17S695)和FISH法(CSP3/CSP7 DNA探针,GLP P16/CSP17 DNA探针)分别检测患...