基于因子分析的定经汤调节卵巢早衰生物学机制研究

目的: 探讨定经汤调节卵巢早衰的生物学机制。方法: SD大鼠90只,随机分为3组:正常组、模型组、定经汤干预组;分别检测其与卵巢早衰相关的生物分子:β-内啡肽 (β-EP) 、白介素-1 (IL-1)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、雌激素受体 (ER)、孕激素受体(PR)、促性腺激素释放激素 (GnRH)、促肾上腺皮质激素释放激素 (CRH)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E₂)、孕酮(P)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT);利用因子分析方法探究定经汤干预下各生物分子之间的相互调控关系,并探寻定经汤调节卵巢早衰过程中的关键生物分子。结果: 定经汤干预状态的生殖内分泌网络主调控因子主要包括垂体-卵巢轴上的4个生物分子,垂体-肾上腺轴靶腺层生物分子CORT以及部分下丘脑生物分子;IL-1是定经汤干预状态生殖内分泌网络主调控因子与其他公共因子共有的下丘脑部位的生物分子。结论: 定经汤一方面可以直接调节垂体-肾上腺轴生物分子,另一方面又可以通过下丘脑间接调节垂体-肾上腺轴生物分子;各调控因子之间起枢纽作用的生物分子为IL-1。     

补肾二仙汤治疗卵巢早衰的临床观察

目的探讨补肾二仙汤治疗卵巢早衰患者的,临床疗效和免疫调节机制。方法60例卵巢早衰患者按照就诊次序以2：1比例分为两组,治疗组40例予补肾二仙汤治疗,对照组20例采用人工周期疗法,疗程6个月。停药3个月后,观察两组疗效及治疗前后血清生殖激素和T淋巴细胞的变化。结果治疗组总有效率为72．5％（29／40例）,对照组为45、0％（9／20例）,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后两组促卵泡激素（FSH）、促黄体生成素（LH）下降,雌二醇（E2）升高（P〈0．05）;治疗后治疗组血清FSH值降低[（22．57±12．49）IU／L],与对照组[（31．10±14．50）IU／L]比较差异有统计学意义（P〈0205）。治疗组治疗后CD4升高、CD8降低、CD4／CD8比值升高,与治疗前及对照组治疗后比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论补肾二仙汤有助于改善卵巢早衰,具有较好的临床疗效。     

补肾调经汤对卵巢早衰患者性激素的影响

目的:观察补肾调经汤治疗卵巢早衰(POF)的临床疗效及其对性激素的影响。方法:46例POF患者随机分为两组,治疗组23例予补肾调经汤治疗,对照组23例予激素替代治疗,疗程3个月。治疗结束后随访3个月,观察两组患者治疗前、治疗结束时、停药3个月的临床症状积分,性激素水平[卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)]。结果:治疗组、对照组的总有效率分别为91.3%、69.6%(P<0.05);治疗结束时,两组患者血清E2升高(P<0.01),FSH、LH下降(均P<0.01),症状总积分下降(P<0.05或<0.01);停药3个月,对照组血清E2、FSH、LH水平和症状总积分,与治疗组比较差异有显著性(P<0.05或<0.01)。结论:补肾调经汤治疗卵巢早衰的疗较显著,能明显地改善患者的临床症状,且不良反应少,复发率低,可值在临床推广应用。     

二仙汤对免疫性卵巢早衰模型小鼠FoxP3基因表达的影响

目的:观察二仙汤对免疫性POF模型小鼠FoxP3基因的影响。方法:用小鼠透明带ZP3第330～342个氨基酸序列(NSSSSQFQIHGPR)为免疫原建立免疫性POF小鼠动物模型,并用二仙汤干预,用RT-PCR观察小鼠卵巢上FoxP3基因的表达。结果:模型组卵巢中FoxP3的基因水平下降;各用药组FoxP3的基因表达均增强,中西药无明显差异。结论:二仙汤能使FoxP3基因蛋白表达增强。     

抗苗勒氏管激素在免疫性卵巢早衰中的发病意义及左归丸的作用机制

目的:研究抗苗勒氏管激素(AMH)在免疫性卵巢早衰(POF)中的发病意义及左归丸对POF小鼠AMH及其信号转导通路[AMH/活化素蛋白激酶2(ALK2)/Smad1]的影响,探讨左归丸的作用机制。方法:8周龄Balb/c雌性小鼠随机分为正常组、模型组、戊酸雌二醇组、左归丸组。以小鼠透明带3多肽建立POF动物模型,予左归丸及戊酸雌二醇进行治疗。电化学发光法检测小鼠血清AMH,卵泡刺激素(FSH)的水平,光学显微镜检测小鼠生长卵泡比率,免疫组化法及蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测小鼠卵巢AMH及其信号转导蛋白ALK2,Smad1蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠血清AMH水平明显降低,FSH水平明显升高(P0.05);与模型组比较,左归丸组明显升高小鼠血清AMH水平,明显降低FSH水平(P0.05)。与正常组比较,模型组小鼠卵巢生长卵泡比率明显减少(P0.01),与模型组比较,左归丸组生长卵泡比率明显增高(P0.05)。AMH,ALK2,Smad1蛋白均在卵泡颗粒细胞胞浆表达。与正常组比较,模型组小鼠卵巢AMH,ALK2,Smad1蛋白表达明显下降(P0.05);与模型组比较,左归丸组小鼠卵巢AMH蛋白表达明显升高(P0.05),免疫组化检测显示ALK2,Smad1表达均有上升,但无统计学差异,Western blot检测显示ALK2,Smad1表达也均明显升高(P0.05)。结论:POF的发生与AMH分泌不足、卵巢AMH蛋白表达低下有关,其通过影响AMH/ALK2/Smad1信号转导,影响始基卵泡的募集,从而使卵泡消耗过快,卵巢功能过早衰竭,卵巢处于衰老状态。左归丸可促进POF小鼠AMH分泌,上调卵巢AMH蛋白的表达,并通过影响AMH/ALK2/Smad1信号转导,抑制始基卵泡的过快募集和消耗,改善卵巢功能。     

补肾调经方对卵巢早衰患者生殖轴的影响

目的:观察补肾调经方治疗卵巢早衰(POF)的临床疗效,及其对生殖轴的影响。方法:将96例POF患者采取随机数字表法分成3组,中药组(32例)给予补肾调经方治疗,西药组(32例)给予激素替代治疗(HRT),中西药组(32例)给予补肾调经方加激素替代治疗(HRT),治疗6个疗程,治疗结束后随访3个月。比较分析3组治疗前、治疗结束时、停药3个月的临床疗效、临床症状、性激素水平[雌二醇(E2)、卵泡成熟素(FSH)、黄体生成素(LH)]及复发率等。结果:中药组、西药组、中西药组总有效率分别为83.3%,70.0%,93.3%,3组间比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗结束时、停药3个月中药组和中西药组的临床症状积分均优于西药组(P<0.05,P<0.01);治疗结束时、停药3个月中药组和中西药组改善血E2,FSH,LH和FSH/LH水平均优于西药组(P<0.05,P<0.01);中西药组在月经改善情况、改善时间优于中药组、西药组(P<0.05),中药组和中西药组复发率低于西药组(P<0.05)。结论:补肾调经方改善卵巢早衰(POF)患者的临床症状、恢复正常月经和调节血清性激素水平的疗效较显著,且复发率低,不良反应少,其作用机制可能是通过调节"肾-天癸-冲任-胞宫"生殖轴来实现的。     

二仙汤对免疫性卵巢早衰模型小鼠形态学影响

目的:观察二仙汤对免疫性POF模型小鼠卵巢形态学影响。方法:用小鼠透明带ZP3第330～342个氨基酸序列(NSSSSQFQIHGPR)为免疫原建立免疫性POF小鼠动物模型,并用二仙汤干预,观察小鼠性周期,用ELISA法检测小鼠外周血抗透明带抗体,称卵巢重量,计算卵巢指数,在光镜下观察小鼠卵巢的组织学改变。结果:模型组小鼠逐渐出现动情周期紊乱,时间相对较早,动情间期延长,阴道细胞涂片主要表现为大量白细胞及少量有核上皮细胞;卵巢体积缩小,成熟卵泡少,卵泡颗粒细胞层较正常减少,排列紊乱,部分卵泡发育不良,卵巢间质可见较多淋巴细胞及浆细胞浸润;二仙汤处理后POF小鼠上述情况均有不同程度改善。结论:二仙汤对免疫性卵巢早衰小鼠的卵巢形态具有一定的改善作用。     

122例卵巢早衰患者中医证候分析及致病因素调查

目的探讨卵巢早衰中医证候及分布规律、卵巢早衰发病原因与中医证候的关系。方法对122例卵巢早衰患者进行病情、病因调查及中医辨证。结果卵巢早衰中医症状临床呈多样趋势。122例卵巢早衰患者中，肝郁。肾虚证33．61％，肝。肾阴虚证18．03％，脾肾阳虚证15．57％，热盛伤津证15．57％，肾虚血瘀证8．20％。肝郁脾虚证7．38％。在68．03%卵巢早衰患者病史中可找到现代生活环境及生活方式因素对疾病发生的影响。因情致因素致病者占31．15%。因药物、疾病因素致病者占31．97％；因情志及药物、疾病双重因素致病者占4．92％。因情志因素致病组。以肝郁肾虚证比例最高（P〈0．05）；因药物、疾病因素致病组，以热盛伤津证、肝郁肾虚证所占比例较高（P〈0．05）；无诱因致病组37例，以肝肾阴虚、肝郁肾虚、脾肾阳虚三证为主，3组比较，P〉0．05。结论肝郁肾虚、肝肾阴虚、脾肾阳虚、热盛伤津为卵巢早衰常见证候；除患者个体先天禀赋不足、肾气未盛、冲任气血不充或由遗传因素致卵巢早衰外。现代生活环境及生活方式因素对卵巢早衰发病有促进作用。     

基于雌激素信号通路传导加味八珍益母胶囊治疗卵巢早衰的作用机制

目的 探讨加味八珍益母胶囊对卵巢早衰雌性大鼠血清性激素、性器官及雌激素信号通路传导的影响。方法 采用网络药理学分析,筛选加味八珍益母胶囊治疗卵巢早衰的关键靶点蛋白。选取雌性健康SD大鼠,采用卵巢摘除术建立大鼠卵巢早衰模型,将50只卵巢摘除的大鼠随机分为模型组,戊酸雌二醇组、加味八珍益母胶囊低、中、高剂量组,另取10只健康雌性大鼠设为假手术组,假手术组和模型组大鼠灌胃蒸馏水、其他给药组大鼠灌胃相应剂量药物。21 d后,测定雌性大鼠血清激素水平,包括雌二醇（E₂）、孕激素（P）、卵泡刺激素（FSH）及黄体生成素（LH）;免疫荧光染色（IF）检测关键靶点蛋白雌激素受体1（ESR1）、雌激素代谢P4503A4酶（CYP3A4）和P45019A1酶（CYP19A1）,在雌性大鼠子宫组织中的蛋白表达水平。结果 与模型组比较,加味八珍益母胶囊低、中、高剂量组明显升高雌性大鼠血清E₂、P水平;均可改善雌性大鼠子宫内膜状态;升高雌性大鼠子宫组织中雌激素受体1（ESR1）、激素代谢酶CYP3A4及CYP19A1的阳性表达（P<0.05）。结论 加味八珍益母胶囊治疗卵巢早衰可能与其类激素样作用和激活雌激素信号通路有关。     

逍遥助卵煎治疗卵巢早衰30例

目的观察逍遥助卵煎治疗卵巢早衰(POF)的临床疗效。方法对30例肝肾不足、气血虚弱的POF患者(治疗组)从肝入手,用逍遥助卵煎益肾养肝、调补气血、活血通经治疗。并与同期雌孕激素贯序疗法(HRT)治疗的30例(对照组)作对照,以3个月为1个疗程,连续治疗1～2个疗程,治疗后作阴道超声、内分泌检查及临床症状评估。结果治疗组总有效率80.0%,对照组总有效率83.4%,两组疗效经统计学处理无显著性意义(P>0.05)。结论逍遥助卵煎有改善卵巢功能的作用,可替代西医激素疗法。     

补肾养阴方治疗卵巢早衰临床新探

目的:观察补肾养阴方治疗卵巢早衰的效果。方法:中药组40例用补肾养阴方治疗,西药组40例用倍美力及安宫黄体酮治疗。结果:中药组总有效率72.5%,西药组总有效率75.0%,两组比较无显著性差异(P>0.05)。中药组患者闭经状况,月经量、色、质、周期,不孕状况,围绝经期症候群,生殖器萎缩等均有明显改善,与西药组比较有显著性差异(P<0.05),药物不良反应中药组低于西药组(P<0.05)。结论:补肾养阴方治疗卵巢早衰疗效好,副作用小。     

穴位埋线治疗卵巢储备功能下降及卵巢早衰概述

目前激素替代是预防DOR和POF应用最广泛的方法,虽其疗效显著,但有一定的副作用及危险性。穴位埋线因其有众多的优点,是激素替代疗法之后又一种安全可靠的预防和治疗方法,对提高女性的生育能力和生活质量有着不可估量的作用。在调节卵巢储备功能下降及卵巢早衰的穴位埋线治疗中,按照经络、脏腑、病位原则选择相应的穴位,辨病与辨证结合,可为中医妇科的穴位埋线临床治疗卵巢储备功能下降及卵巢早衰提供一定的依据。但不同穴位配伍的疗效缺乏大样本的数据比较,尚待进一步研究和探讨。     

中药补肾调冲方治疗卵巢早衰的临床研究

目的:观察中药补肾调冲方治疗卵巢早衰的临床疗效。方法:将60例卵巢早衰患者随机分为2组。治疗组采用补肾调冲方口服,对照组采用激素替代疗法。结果:补肾调冲方不仅可使卵巢早衰患者恢复月经周期,其月经的期、量、色、质恢复正常或基本恢复正常,类围绝经期症状消失或减轻,而且可使患者的性激素水平恢复正常,中药治疗组与西药对照组相比其疗效具有等效性,药物不良反应中药组明显低于西药组,其差异有统计学意义(P<0.05)。提示:补肾调冲方具有调节卵巢功能,治疗卵巢早衰的功效,且无明显毒副作用。     

补肾活血方治疗卵巢早衰的疗效及对患者免疫调节的影响

目的:探究补肾活血方治疗卵巢早衰的疗效及对患者免疫调节的影响.方法:选取2015年12月至2017年8月秦皇岛市妇幼保健院收治的卵巢早衰患者182例作为研究对象,根据随机数字表法分为观察组及对照组,每组91例.对照组采用激素序贯疗法治疗,观察组在此基础上服用补肾活血方治疗,2组均治疗3个月.比较2组治疗前后的激素水平、...     

隔药脐疗对卵巢早衰大鼠VEGF和AMH表达的影响

目的:探讨隔药脐疗法对卵巢早衰(POF)大鼠血管内皮生长因子(VEGF)及抗苗勒氏管激素(AMH)的作用机制。方法:50只Wistar雌性大鼠随机分成正常组、隔药脐疗组、模型组、西药组,采用腹腔注射环磷酰胺制作大鼠卵巢早衰模型。隔药脐疗组采用自制灸膏做脐疗,西药组采用补佳乐灌胃。治疗2周后,采用放射性免疫法检测大鼠血清雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)及促卵泡激素(FSH)水平,应用酶联免疫吸附法检测血清VEGF及AMH的含量。结果:与正常组相比,模型组E2水平降低(P<0.05),与模型组比较,隔药脐疗组和西药组均升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠血清中VEGF及AMH含量明显下降(P<0.05);与模型组比较,隔药脐疗组及西药组血清VEGF及AMH水平显著升高(P<0.05);隔药脐疗组与西药组之间VEGF和AMH水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:隔药脐疗法对卵巢早衰大鼠的卵泡数量及卵巢储备功能均有明显的促进作用,可能与其对血清E2、VEGF和AMH的表达调节有关。     

加减益经汤对有卵泡型卵巢早衰的临床研究

目的:探讨加减益经汤治疗治疗有卵泡型卵巢早衰的疗效和机理。方法:将90例有卵泡型卵巢早衰患者随机分为3组。治疗组采用自拟加减益经汤治疗,对照1组组采用人工周期治疗,对照2组采用维生素C片联合复合维生素B片治疗,观察患者治疗后临床疗效改善情况,血清FSH、LH、E2、INH-b的含量。结果:加减益经汤治疗本病临床疗效总有效率为63.63%,痊愈率为6.06%,显效率为18.18%,临床症状显著改善,显示本方具有改善卵巢储备功能、降低血清FSH、LH水平、升高E2、INH-b的作用。结论:加减益经汤治疗本病,是通过提高卵巢储备功能而实现的。     

从基因角度对卵巢早衰病因及治疗的研究

卵巢早衰发病原因复杂,治疗效果亦不理想,近年研究显示,染色体上某些基因出现异常可能与卵巢早衰的发生密切相关,相关基因的发现,为基因治疗提供了依据,不仅可筛查相关基因来预测妇女是否会发生过早绝经,使其能及时选择最佳生育时机,还可采用一些措施对其表达进行调控,以达到治疗此病的目的。尽管基因角度的卵巢早衰研究并不完善,但寻找相关基因并进行治疗的研究前景看好,它为从基因角度完整地阐明卵巢早衰的病因,并研制出基因调控药物提供了可能性,有希望从根本上解决卵衰早衰问题。     

基于因子分析的心理应激大鼠卵巢早衰生物学机制研究

目的:探讨正常及心理应激状态下影响卵巢早衰的各生物分子之间相互调控关系。方法:SD大鼠60只,随机分为两组:正常组和模型组;分别检测其正常及心理应激状态下与卵巢早衰相关的生物分子:β-EP、IL-1、NOS、NO、ER、PR、GnRH、CRH、FSH、LH、E2、P、ACTH和CORT;利用因子分析方法探究正常及心理应激状态各生物分子之间的相互调控关系,并探寻心理应激导致卵巢早衰过程中的关键生物分子。结果:正常状态主调控因子主要包括下丘脑生物分子和垂体-卵巢轴生物分子;心理应激状态下主调控因子包括垂体-肾上腺轴生物分子ACTH及下丘脑和垂体-卵巢轴生物分子,且IL-1是心理应激状态第1和第2公共因子上共有的下丘脑部位的生物分子。结论:正常状态下丘脑生物分子与垂体-卵巢轴生物分子之间关系密切,垂体-肾上腺轴生物分子相对独立;而心理应激状态主调控关系显示了垂体-肾上腺轴上的生物分子ACTH对下丘脑和垂体-卵巢轴生物分子的反馈影响,初步揭示了心理应激首先引起垂体-肾上腺轴生物分子变化,进而通过下丘脑生物分子IL-1使下丘脑-垂体-卵巢轴紊乱,导致卵巢早衰的生物学机制。     

基于脂质与动脉粥样硬化通路探讨菟丝子防治卵巢早衰的作用机制

目的 通过网络药理学及分子对接技术初步预测菟丝子防治卵巢早衰的活性成分、作用靶点及信号通路，并构建卵巢早衰动物模型，基于脂质与动脉粥样硬化信号通路探讨其作用机制。方法 从中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、Swiss Target Prediction、Pharmmapper等数据库中获取药物的有效成分及对应靶点；使用GeneCards数据库收集疾病的相关靶点；利用Venny2.1.0在线工具筛选出药物与疾病的交集靶点，用STRING数据库及Cytoscape v3.7.2软件构建“药物-成分-靶点”与蛋白质-蛋白质互作网络（PPI）网络图；通过运行R语言脚本对交集靶点进行基因本体（GO）及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析，利用分子对接技术将药物成分与靶点进行对接，并对其部分对接结果进行可视化；将小鼠随机分为正常组、模型组、菟丝子组与戊酸雌二醇组，采用慢性应激制备卵巢早衰模型，正常组与模型组给予等量生理盐水灌胃，菟丝子组给予菟丝子水煎剂2.6 g·kg^-1·d^-1，戊酸雌二醇组给予戊酸雌二醇溶液0.13 mg·kg^-1·d^-1，4周后取材，苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢的组织形态学改变，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中促卵泡素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E₂）、缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素（AMH）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞外调节蛋白激酶（ERK）、核转录因子-κB p65（NF-κB p65）、核转录因子-κB抑制因子α（IκBα）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等表达水平。结果 共筛选菟丝子防治卵巢早衰靶点171个，主要包括细胞肿瘤抗原（TP53）、蛋白激酶B1（Akt1）、原癌基因酪氨酸蛋白激酶（SRC）、肿瘤坏死因子（TNF）、表皮生长因子受体（EGFR）等，KEGG通路富集分析预测菟丝子防治卵巢早衰主要涉及脂质与动脉粥样硬化、TNF信号通路、TP53信号通路等。动物实验表明，与卵巢早衰模型组比较，菟丝子组可明显上调AMH、E₂、HDL-C（P<0.05，P<0.01），显著下调LH、TC、LDL-C（P<0.01），显著降低IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白水平与ERK、NF-κB p65及其磷酸化水平（P<0.01）。结论 菟丝子可通过“多成分-多靶点-多通路”方式，调节激素水平改善卵巢功能，其机制可能与调控脂质与动脉粥样硬化信号通路有关。     

卵巢早衰的中医辨证论治

卵巢早衰为妇科常见病,是指月经初潮正常或青春期延迟,第二特征发育正常的女性在40岁以前出现持续性闭经和性器官萎缩,并伴有卵泡刺激素和黄体生成素升高,而雌激素降低的综合征。由于其可导致不孕不育及低雌激素状态,严重影响女性生理和心理健康,且发病率呈逐年上升趋势,成为当今医学研究热点和难点。本文对卵巢早衰的病因病机、辨证分型及对应中医治疗方法进行分类总结,做一综述。不管是中药治疗还是针灸治疗,对于证型辨证分类及对病因病机的认识差别不大。卵巢早衰多责之于肾精不足,在补肾同时根据病情进行辨证,兼调心肝脾,活血化瘀。大量文献显示,中医由于其副作用小,疗效明显,且多体现"治未病"的防治思想,在治疗卵巢早衰方面有很大优势。