MDR1和GST-π在神经母细胞瘤中的表达及临床病理意义

目的:研究神经母细胞瘤中多药耐药(MDR1)基因和谷胱甘肽转移酶-π(GST-π)蛋白表达及其临床病理意义.方法:采用S-P免疫组化方法检测72例神经母细胞瘤组织中MDR1和GST-π蛋白表达,分析其表达与神经母细胞瘤临床病理特征的关系,探讨二者之间表达的关系.结果:MDR1和GST-π蛋白在神经母细胞瘤中阳性表达率分别为62.5%(45/72)和58.33%(42/72).MDR1蛋白表达与神经母细胞瘤的组织学分型和转移密切相关(P＜0.05);GST-π蛋白表达与神经母细胞瘤的肿块大小和组织学分型密切相关(P＜0.05);在神经母细胞瘤中MDR1和GST-π蛋白表达呈正相关(P＜0.05).结论:MDR1和GST-π蛋白可以作为反映神经母细胞瘤分化与耐药关系的分子基础,其表达为神经母细胞瘤的化学治疗提供科学理论依据.     

bcl-2,MDR1基因及编码蛋白在儿童急性白血病骨髓单个核细胞中表达的研究

目的:探讨bcl-2,MDR1基因及编码蛋白p26,p170表达与多药耐药的关系.方法:RT-PCR技术、S-P免疫组化方法检测36例白血病患儿及10例血小板减少性紫癜患儿骨髓单个核细胞bcl-2,MDR1基因及蛋白表达.结果:bcl-2基因的表达初治组、完全缓解组低于复发组(P<0.05);MDR1基因的表达复发组高于对照组(P<0.05),p26,p170阳性率初治组、完全缓解组、对照组低于复发组(P<0.05).p170阳性率初治组高于对照组(P<0.05).化疗后p170阳性率明显高于化疗前(P<0.01).bcl-2,MDR1基因的表达与临床生物学特征无相关性.bcl-2与MDR1基因之间、p170和p26蛋白之间均无相关性.结论:bcl-2和MDR1基因、蛋白通过不同的机制与白血病的耐药有关.     

新基因HA117在肠腺癌中的表达及意义

目的 研究新基因HA117在肠腺癌细胞中的表达位置和分布情况,了解其与肠腺癌各临床病例特征的关系.方法 应用免疫组化SP法,检测20例肠腺癌和10例结肠正常组织中HA117的表达.结果 HA117在肠腺癌中的表达阳性率为75%,在正常结肠组织中的表达阳性率为10%,其结果差异有统计学意义(P=0.001);结肠癌组织中的阳性表达率显著高于直肠癌组织和正常结肠组织(P=0.002).在Ⅲ～Ⅳ期组织中的表达阳性率比Ⅰ～Ⅱ期高,有淋巴结转移组的表达阳性率比无淋巴结转移组高,低分化组的表达阳性率比中高分化组高,但其结果差异均无统计学意义(P>0.05).结论 HA117在肠腺癌中有着广泛的分布,从而提示实体肿瘤对化疗药物的耐受性同样受HA117基因的影响.     

肺癌组织中FHIT蛋白的表达及其与MDR1的关系

目的:观察肺癌组织中FHIT的表达及其与MDR1蛋白的关系,探讨其表达变化的临床意义.方法:免疫组化S-P法检测肺癌组织及其癌旁组织(n=60)中FHIT蛋白以及肺癌组织中MDR1蛋白的表达,分析在肺癌不同临床病理指标下FHIT蛋白的表达情况,并分析其在肺癌组织中与MDR1表达的关系.结果:FHIT在癌旁组织中的阳性表达率明显高于癌组织(76.7% vs 50%,P＜0.01);癌组织中FHIT阳性表达率与患者性别、年龄、吸烟状况、大体分型、TNM分期、组织学分类、淋巴结转移与否等指标均无显著相关性(P＞0.05);FHIT蛋白阳性表达的癌组织中MDR1的阳性率明显高于阴性表达者(83.3% vs 60%,P＜0.01).结论:肺癌组织中FHIT蛋白表达明显下调;FHIT蛋白表达与MDR1表达有一定的相关性,在应用FHIT基因作为基因治疗手段时应考虑到其可能具有的耐药潜能.     

新基因HA117编码蛋白在儿童急性白血病中的表达及其临床意义

目的探讨多药耐药新基因HA117编码蛋白在儿童急性白血病(acute leukemia,AL)患儿骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BMMNC)中的表达及其临床意义。方法将67例AL患儿分为初诊组、完全缓解组和未缓解组,10例ITP患儿为对照组。应用免疫组织化学法检测BMMNC中HA117编码蛋白及P-糖蛋白(P-gp)表达。结果HA117编码蛋白在AL患儿中阳性表达率从低至高为:完全缓解组、初诊组、未缓解组,对照组呈阴性表达;初诊组中强阳性(+++)表达者其首次缓解(CR1)率(16.67%)显著低于阴性表达组(94.74%)(P<0.01)及中度表达组(87.50%)(P<0.05);同一患儿中HA117编码蛋白表达与P-gp表达无相关性(κ=0.195,P>0.05),两者均表达者CR率(30.00%)显著低于HA117+/P-gp-、HA117-/P-gp+组(83.33%)(P<0.05)及HA117-/P-gp-组(94.44%)(P<0.01)。结论 HA117编码蛋白的过表达与临床化疗耐药密切相关,是儿童AL预后的不利因素,且其耐药机制可能是独立的非P-gp介导的;HA117编码蛋白与P-gp两者同时高表达提示预后不良。     

肺癌组织中p16基因表达的意义

目的:了解p16基因蛋白在人肺癌组织中的表达情况.方法:应用免疫组化SP法检测69例肺癌及癌旁正常肺组织,21例肺良性疾病肺癌组织中p16基因蛋白的表达.结果:肺良性疾病及癌周正常肺组织p16蛋白阳性率分别为100%和91.3%,高于肺癌组织中的39.1%,差异显著(P＜0.05);p16蛋白表达与肺癌病理类型、临床分期及淋巴结转移有明显的相关性(P＜0.05);与组织学分级无关.结论:p16基因蛋白的表达情况与肺癌的发生、发展有关.     

肾母细胞瘤组P16蛋白的表达

目的探讨肾母细胞瘤中抑癌基因p16蛋白的表达及其意义。方法应用S-P免疫组织化学方法对53例肾母细胞瘤中抑癌基因p16蛋白的表达进行观察。结果24例肾母细胞瘤呈p16阳性表达,阳性率为45.29％,其阳性率与肿瘤的病理分类,临床分期及预后等密切相关。结论p16基因在抑制肾母细胞瘤发生、发展中起重要作用。     

ATRA耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义。方法随机选择23例肺癌组织和21例乳腺癌组织作为实验组,9例非癌肺组织和11例非癌乳腺组织作为对照组,应用免疫组化S-P法检测HA117相关蛋白在上述组织切片中的表达,并结合其临床资料进行回顾性分析。结果 HA117相关蛋白在肺癌组织、乳腺癌组织、非癌肺组织及非癌乳腺组织中的阳性表达率分别为60.9%(14/23)、57.1%(12/21)、11.1%(1/9)及0.0%(0/11)。HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的阳性表达明显高于非癌组织(P<0.05)。HA117相关蛋白的表达水平与肺癌及乳腺癌患者的年龄、肿瘤分级、病理分型、淋巴结转移及有无术前化疗方面无明显相关性(P>0.05)。结论 HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌的高表达提示二者对ATRA具有较强的耐药性。     

食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因改变的研究

目的 :探讨食管癌及癌旁组织中 p53、MDR基因的表达及其临床意义。 方法 :采用免疫组化ABC法及逆转录一聚合酶链反应的方法 ,对 50例食管癌和 37例癌旁组织中p53、MDR基因的表达情况进行检测。结果 :p53基因蛋白在食管癌中有显著表达 70 % (35/ 50 ) ,癌旁组织中有表达 62 % (2 3/37) ;其中在正常组织中占 36 % (5/ 1 4 ) ,在非典型增生中占 78% (1 8/ 2 3)。MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显著意义 ,癌与正常组织中有极显著意义。在不同年龄、性别、肿瘤大小上 p53、MDR基因的表达无显著意义。结论 :p53、MDR基因在食管癌中均呈高水平表达 ,癌旁组织中MDR有表达 ,p53基因突变早于组织形态学改变     

CD133+ 胶质瘤干细胞化疗耐受机制分析

目的:探讨ABC超家族转运体蛋白在CD133 胶质瘤干细胞多药耐药性中的作用机制.方法:选取30例人脑胶质瘤标本,利用免疫磁珠法分选标本中的CD133 胶质瘤干细胞(悬浮细胞)和CD133-肿瘤细胞(黏附细胞),并进行分选细胞的体外扩增培养、传代与鉴定,应用免疫组化和RT-PCR法分别检测细胞中 MDR1和MRP1的蛋白及其活性表达情况.结果:3例胶质母细胞瘤来源的CD133 细胞能在含血清培养基中形成肿瘤干细胞球,并进行1～3次传代;MDR1与MRP1耐药蛋白在CD133 细胞中高度表达,阳性细胞比例范围分别为18%～67%和23%～73%;MDR1与MRP1在CD133 细胞中的表达活性分别为在CD133-细胞中的16.1倍和19.6倍;多药耐药蛋白的阳性细胞比例和其表达活性与肿瘤的恶性程度呈正相关,而表达阳性率与肿瘤的病理级别无关;MDR1与MRP1在CD133 细胞中的表达有明显的相关性.结论:神经上皮肿瘤中仅有小部分细胞亚型(CD133 胶质瘤干细胞)具有内在耐药性(天然耐药性),而ABC超家族转运体蛋白MDR1与MRP1在CD133 胶质瘤干细胞中的共同过度表达是胶质瘤多药耐药的主要原因之一;CD133 细胞是胶质瘤化疗的关键性治疗标靶.     

食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因改变的研究

目的：探讨食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化ABC法及逆转录－聚合酶链反应的方法。对50例食管癌和37例癌旁组织中p53、MDR基因的表达情况进行检测。结果：p53基因蛋白在食管癌中有显表达70％（35／50），癌旁组织中有表达62％（23／37）；其中在正常组织中占36％（5／14），在非典型增生中占78％（18／23），MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显意义。癌与正常组织中有极显意义。有不同年龄，性别、肿瘤大小上p53、MDR基因的表达无显意义，结论：p53、MDR基因在食管中均呈高水平表达，癌旁组织中MDR有表达，p53基因突变早于组织形态学改变。     

32例食道鳞癌MDR1及MRP基因表达结果分析

目的探讨多药耐药(MDR1)基因、多药耐药相关蛋白(MRP)基因在食道鳞癌中的表达情况及其与肿瘤分化程度的关系.方法用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测新鲜食道癌组织标本.结果32例食道鳞癌标本MDR1、MRP基因阳性表达率分别为78.1%、75.0%,明显高于癌旁组织(均P＜0.01).MDR1、MRP基因表达与肿瘤分化程度无关(均P＞0.05).结论MDR1、MRP基因在食道鳞癌组织中有较高的阳性表达率,但与食道鳞癌的组织分化程度无关.     

Expression of HA117 protein in bone marrow mononuclear cells in children with acute leukemia and its clinical significance

目的 探讨多药耐药新基因HA117编码蛋白在儿童急性白血病(acute leukemia,AL)患儿骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BMMNC)中的表达及其临床意义.方法 将67例AL患儿分为初诊组、完全缓解组和未缓解组,10例ITP患儿为对照组.应用免疫组织化学法检测BMMNC中HA117编码蛋白及P-糖蛋白(P-gp)表达.结果 HA117编码蛋白在AL患儿中阳性表达率从低至高为:完全缓解组、初诊组、未缓解组,对照组呈阴性表达；初诊组中强阳性(+++)表达者其首次缓解( CR1)率(16.67％)显著低于阴性表达组(94.74％)(P＜0.01)及中度表达组(87.50％)(P＜0.05)；同一患儿中HA117编码蛋白表达与P-gp表达无相关性(K=0.195,P＞0.05),两者均表达者CR率(30.00％)显著低于HA117 +/P-gp -、HA117-/P-gp+组(83.33％)(P＜0.05)及HA117 -/P-gp -组(94.44％)(P＜0.01).结论 HA117编码蛋白的过表达与临床化疗耐药密切相关,是儿童AL预后的不利因素,且其耐药机制可能是独立的非P-gp介导的；HA117编码蛋白与P-gp两者同时高表达提示预后不良.     

CCN1在结肠癌中的表达及其临床意义

目的检测CCN1基因在结肠癌组织中的表达情况,探讨CCN1的表达与结肠癌患者临床病理特征的关系及意义。方法应用Real-time PCR及Western blot方法检测CCN1在4例结肠癌及相应癌旁正常组织中mRNA和蛋白表达水平的差异表达;采用免疫组化检测117例结肠癌石蜡组织中CCN1的表达情况,分析其与结肠癌临床病理特征的关系及预后意义。结果在4例结肠癌组织中CCN1基因在mRNA及蛋白水平的表达高于相应正常癌旁组织;免疫组化检测结果显示CCN1蛋白在结肠癌组织中的表达阳性率为87.2%(102/117),强阳性率为58.1%(68/117),CCN1蛋白在结肠癌组织中的表达水平高于相应癌旁组织;统计学分析结果显示,CCN1蛋白高表达与结肠癌临床分期、淋巴结转移及远处转移密切相关,而与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小及分化程度无显著相关性。结论CCN1在结肠癌组织中高表达,其表达水平与肿瘤进展密切相关,提示CCN1在肿瘤发生和转移中可能起到重要作用。     

多药耐药相关蛋白在肾母细胞瘤中的表达

目的 :检测多药耐药相关蛋白 (MRP)在肾母细胞瘤中的表达 ,探讨其在肾母细胞瘤术前术后化疗蛋白水平的依据及耐药问题。方法 :采用免疫组织化学方法检测 36例肾母细胞瘤及瘤旁组织MRP的表达。结果 :肾母细胞瘤中阳性表达者 6例 ,占 16 .7% ,瘤旁组织中阳性表达者 2 2例 ,占 6 1.1% ,两者表达差异显著 (P<0 .0 1)。结论 :MRP表达显著差异 ,从蛋白水平上为肾母细胞瘤术前和术后的化疗疗效提供了依据     

腺病毒介导的新基因HA117对Jurkat细胞多药耐药功能的影响

目的 研究新基因HA117对急性淋巴细胞白血病细胞Jurkat耐药性的影响,探讨新基因HA117多药耐药(muhidmg resistance,MDR)相关功能.方法 以携带HA117基因的重组腺病毒Ad5-HA117感染Jurkat细胞得到高表达HA117基因的细胞Jurkat/HA117,以荧光显微镜和流式细胞术检测细胞感染效率,RT-PCR检测感染前后实验细胞HA117基因表达,MTT检测比较高表达HA117基因前后Jurkat细胞药物敏感性变化.结果 新基因HA117可使Jurkat细胞对多种化疗药物耐药性增强,转染AdS-HA117重组腺病毒的Jurkat细胞对VCR、ADM、Vp-16、DNR、MMC、CTX药物的药物耐受性均比未转染的Jurkat细胞增高,增高3～7倍(P<0.05,P<0.01),转染空载体组耐药性跟未转染的Jurkat细胞相比无显著差异(P>0.05).结论 新基因HA117可使Jurkat细胞的耐药功能增加,证实新基因HA117具有多药耐药功能.     

p53和cyclin D1蛋白在甲状腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨p53和cyclin D1蛋白在甲状腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法用免疫组化方法对68例甲状腺癌、46例甲状腺腺瘤和瘤旁甲状腺组织进行p53和cyclin D1的检测。结果 p53和cyclin D1在甲状腺癌组织中的阳性表达率为58.82%和63.23%,均高于其在甲状腺腺瘤和甲状腺腺瘤旁甲状腺组织中的阳性率,差异均有显著性（P〈0.01）。不同病理类型甲状腺癌组织中,p53和cyclin D1在乳头状癌中的阳性率分别为37.83%和40.54%,低于其在滤泡癌,髓样癌和未分化癌组织中的阳性率,差异均有统计学意义（P〈0.05）。p53和cyclin D1在甲状腺癌的阳性表达呈正相关（r=7.78,P〈0.05）。结论 p53和cyclin D1在甲状腺癌组织中的表达与癌细胞分化及恶性程度似有一定的关系。     

大肠癌中ASPP1和p53蛋白的表达及意义

目的 观察人大肠癌组织中ASPP1以及p53蛋白的表达,并探讨其与大肠癌临床病理之间的关系.方法 应用免疫组织化学PV-6000法检测30例大肠癌和15例相应癌旁组织中ASPP1及p53的表达情况,比较ASPP1在大肠癌组织与癌旁组织中表达的差异,并探讨其与p53表达及临床病理之间的关系.结果 p53阴性时,大肠癌旁组织中ASPP1蛋白表达阳性率为80%,明显高于癌组织的16.7%（P〈0.05）;p53阳性时,癌组织、癌旁组织中的ASPP1蛋白表达差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 当p53阴性时,大肠癌组织中ASPP1表达明显降低,这提示ASPP1蛋白表达降低在大肠癌的发生、发展中起着重要作用.     

裸小鼠人肝癌原位移植多药耐药模型的形态学研究

目的建立裸小鼠人肝癌原位移植多药耐药模型,探讨其生物学特征及耐药机制。方法裸小鼠人肝癌(Bel-7402)原位移植,用阿霉素腹腔注射诱导耐药,观察其病理形态学特征,采用荧光定量RT-PCR检测多药耐药基因MDR1mRNA在肝癌组织中表达。以流式细胞仪检测癌细胞MDR1基因产物P-糖蛋白(Pgp)的表达,并通过免疫组化和激光共聚焦显微成像系统对Pgp进行细胞定位及形态观察。结果移植瘤组织形态及生物学行为符合人肝癌特征,实验组MDR1mRNA表达量在1.4×103~3.6×106copy/μgRNA,阳性率达70.00%,Pgp表达为75.45%±5.67%;而对照组MDR1mRNA表达阴性,Pgp表达阳性率为4.25%±1.28%(P<0.01)。形态学观察显示Pgp大多位于细胞膜。结论裸小鼠人肝癌原位移植模型在形态及生物学特征上能高度模拟人肝癌。阿霉素在体内主要通过诱导人肝癌细胞多药耐药MDR1mRNA基因及影响功能蛋白Pgp的表达,获得耐药性。     

重组腺病毒Adeasy-HA117载体的构建及其在K562细胞的表达

目的:构建携带耐药相关基因HA117的高滴度重组腺病毒,转染K562细胞,检测其在K562细胞中的表达情况.方法:用基因工程技术将ATRA相关耐药新基因HA117的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdeasy同源重组,后将重组腺病毒Adeasy-HA117经脂质体转染包装细胞HEK293,并收获原代的重组腺病毒Adeasy-HA117,经乒乓交互感染的方法扩增原代腺病毒,应用RT-PCR、荧光显微镜及流式细胞仪鉴定和检测重组腺病毒感染K562细胞后HA117的表达情况.结果:酶切罄定及PCR结果证明ATRA相关耐药新基因HA117重组腺病毒载体构建成功.携带新基因HA117重组腺病毒载体的效价达8.3×1011pfu/mL.RT-PCR检测到转染后K562细胞内HA117的表达.结论:成功获得携带新基因HA117的重组腺病毒,并能使其在K562细胞巾高表达.