鹿茸多肽对实验性膝骨性关节炎软骨细胞凋亡及相关细胞因子的影响

目的:探讨鹿茸多肽对实验性膝骨性关节炎软骨细胞凋亡及相关细胞因子的影响。方法:6月龄新西兰大白兔64只,随机分为正常组(8只)和模型组(56只),模型组采用Hulth法造成兔膝骨性关节炎模型。造模成功后再将模型组随机分为鹿茸多肽组(24只)和对照组(24只),鹿茸多肽组予鹿茸多肽稀释液0.5ml关节腔注射每2日1次,对照组给予0.5ml生理盐水关节腔注射每2日1次。分别于干预后第7、15、30天分批取材,光镜观察各组关节软骨形态学变化,透射电镜观察软骨细胞凋亡的结构变化;TUNEL法检测软骨细胞凋亡,计算软骨细胞凋亡指数;酶联免疫吸附法检测关节液中白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的水平。结果:随着时间的延长,鹿茸多肽组和对照组关节软骨退变进行性加重,软骨细胞凋亡明显增多。干预后第7、15、30天,鹿茸多肽组软骨细胞凋亡指数分别为(20.30±1.23)、(28.60±2.37)、(37.10±1.82),对照组软骨细胞凋亡指数分别为(31.50±2.44)、(34.40±1.77)、(42.30±2.33),差异有统计学意义(P<0.05);相同时间段内,鹿茸多肽组软骨细胞凋亡指数低于对照组。干预后第7、15、30天,鹿茸多肽组关节液中白细胞介素-1β水平分别为(15.81±1.26)、(12.59±1.42)、(9.57±0.92)μg/L,肿瘤坏死因子-α水平分别为(48.47±2.64)、(43.46±1.33)、(40.96±1.05)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组关节液中白细胞介素-1β水平分别为(18.92±1.83)、(20.25±2.76)、(22.13±2.24)μg/L;肿瘤坏死因子-α水平分别为(57.92±2.12)、(60.25±1.48)、(63.35±2.15)μg/L。相同时间段内,鹿茸多肽组白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:鹿茸多肽可抑制膝骨性关节炎过程中软骨细胞凋亡,降低关节液中白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α的水平,一定程度上延缓关节软骨的退变。     

马钱子对三种软骨细胞凋亡模型的影响

目的：观察中药马钱子对三种软骨细胞凋亡模型的影响。方法：在兔软骨细胞培养体系中分别加入2mmol／L硝普钠（SNP）、2mmol／LSNP＋马钱子、10mol／L全反式维甲酸（ATRA）、10mold／L ATRA＋马钱子；在人胚胎软骨细胞培养体系中加入30ng／L肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、TNF—α＋马钱子，各组培养24h后，采用Annexin V／PI双参数法对软骨细胞凋亡进行定量检测。结果：软骨细胞在加入SNP、ATRA、TNF—α发生凋亡时，加入马钱子能降低SNP、ATRA诱导的软骨细胞凋亡率（P〈0．01，P〈0．05），但对TNF—α诱导的软骨细胞凋亡，无明显抑制作用（P〉0．05）。结论：中药马钱子对部分软骨细胞凋亡有一定抑制作用。     

不同浓度地塞米松对人骨关节炎软骨细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的影响

目的糖皮质激素会破坏软骨,通过观察地塞米松对人骨关节炎软骨细胞(human articular chondrocytes,HACs)凋亡及Fas/FasL基因表达的影响,探讨其促进HACs凋亡的作用机制。方法取行人工膝关节置换的膝骨关节炎患者自愿捐赠软骨组织,体外分离培养HACs,取第2代细胞进行实验。将HACs分别置于含浓度为0.125、1.25、12.5、25及50μg/mL地塞米松培养液中,培养48 h后采用MTT法选择地塞米松最佳工作浓度进行后续实验。将HACs分别采用最佳工作浓度地塞米松(实验组)及不含地塞米松培养液(对照组)培养,0、24、48 h后行TMRE/Hoechst/Annexin V-FITC/7-AAD四重染色检测细胞凋亡,48 h后行实时定量PCR检测Fas/FasL mRNA表达,0、24、48 h后行免疫组织化学染色检测Fas/FasL蛋白表达。结果 25μg/mL浓度组细胞抑制率显著高于50μg/mL浓度组,差异有统计学意义(P<0.05);与其他浓度组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05);选择25μg/mL浓度作为后续实验工作浓度。培养0、24、48 h,实验组HACs凋亡细胞百分比分别为5.8%±0.3%、27.0%±2.6%、36.0%±3.1%,呈明显时间依赖性(P<0.05)。培养48 h后实验组及对照组Fas mRNA相对表达量分别为(8.93±1.12)×10—3及(3.31±0.37)×10—3,FasLmRNA相对表达量分别为(5.92±0.66)×10—3及(2.31±0.35)×10—3,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。随培养时间延长,实验组Fas及FasL蛋白表达逐渐增加,且各时间点均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论地塞米松可促进HACs细胞凋亡及上调凋亡基因Fas/FasL表达,为进一步探讨Fas/FasL信号通路在地塞米松促HACs凋亡中的作用提供了实验依据。     

不同浓度IL-1对人的软骨细胞基质金属蛋白酶1mRNA表达的影响

目的 观察不同浓度白介素-β(IL-β)对体外培养人的关节透明软骨细胞基质金属蛋白酶1(MMP-1)mRNA表达的影响。方法 体外培养的人的透明软骨细胞，随机分为4组，A组为空白对照组；B、C、D组分别加入1ng／ml，10ng／ml，100ng／ml IL-1β1作用12h。采用逆转录PCR(RT—PCR)方法及实时荧光定量PCR(FQ—PCR)的方法，观察透明软骨细胞MMP-1mRNA的表达状况，比较不同剂量IL-1β作用下传代培养的人的透明软骨细胞MMP-1基因表达与正常软骨细胞相应基因表达的关系。结果 正常人的软骨细胞均有MMP-1但表达量较低。IL-1β浓度为1ng／ml，10ng／ml，100ng／ml作用12h，对MMP-1mRNA调节作用存在明显的剂量依赖关系，各组之间存在显著性差异，MMP-1的含量分别为正常组的1．6、2．3、4．2倍。结论或研究表明，IL-1β对人的软骨细胞MMP-1表达的调控作用随其浓度的变化而不同。     

基质细胞衍生因子-1对小鼠关节软骨细胞自噬水平的影响

目的：通过研究基质细胞衍生因子-1（stromal derived factor?1, SDF?1）对小鼠关节软骨细胞自噬的影响,探讨SDF?1在骨性关节炎中的作用及机制。方法分离并体外培养小鼠关节软骨细胞,分别予以0、1、10、100、1000μg/L浓度的五组重组SDF?1蛋白干预24 h。运用RT?PCR检测各组细胞的微管相关蛋白1轻链3（microtubule associated protein 1 light chain 3, LC3）和UNC?51样激酶复合物1（uncoordinated?51 like kinase 1, ULK1）mRNA表达情况,运用Western Blot方法检测LC3?Ⅱ、LC3?Ⅰ、ULK1及泛素连接蛋白62（ubiquitin?binding protein p62, p62）蛋白表达水平,通过透射电镜观察自噬溶酶体。结果 RT?PCR结果显示10、100、1000μg/L浓度条件下LC3、ULK1的mRNA水平明显高于对照组,且差异具有统计学意义（P＜0.05）。Western Blot结果显示1、10、100、1000μg/L的各组细胞的LC3?Ⅱ/LC3?Ⅰ比值、ULK?1表达水平较对照组升高,p62蛋白表达水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。透射电镜结果显示经SDF?1干预后,自噬溶酶体较对照组增多,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 SDF?1可诱导小鼠关节软骨细胞自噬的发生,SDF?1可能通过调节软骨细胞自噬水平参与了骨性关节炎的进展。     

TNF-α对人软骨细胞中ChM-Ⅰ表达的影响

目的 研究肿瘤坏死因子α(tumor neerosis factor alpha,TNF-α)对人软骨细胞中软骨调节素-Ⅰ (chondromodulin-Ⅰ,ChM-Ⅰ)表达的影响.方法 用浓度为5 ng/mL、10 ng/mL和20 ng/mL的TNF-α处理细胞24 h、48 h和72h,荧光实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(western blot)方法检测细胞中ChM-Ⅰ在mRNA和蛋白水平的表达量.结果 TNF-α处理后,各浓度组在各时间点均可下调ChM-Ⅰ的表达(P＜0.05),且随浓度和时间的增加,下调作用增强,以20 ng/mL处理72 h时下调作用最强,下调37％;western blot结果与RT-qPCR相一致.结论 肿瘤坏死因子-α可下调人软骨细胞中ChM-Ⅰ的表达.     

氯胺酮对前炎性细胞因子的影响

在机体对创伤和应激的免疫防御反应中 ,细胞因子 (ｃｙ ｔｏｋｉｎｅｓ,ＣＫ)起着至关重要的作用。细胞因子是传递细胞间信息的小分子蛋白质或多肽 ,主要由激活的白细胞产生 ,也可由成纤维细胞和内皮细胞产生[1] 。细胞因子种类繁多 ,细胞因子之间相互影响、相互作用 ,构成了错综复杂的细胞因子网络 (ｃｙｔｏｋｉｎｅｎｅｔｗｏｒｋ)。目前认识到 ,在细胞因子网络中 ,促炎症细胞因子和抗炎症细胞因子的平衡 ,是机体产生合适免疫应答的关键。前炎性细胞因子 (ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｙｔｏｋｉｎｅ)属于促炎症细胞因子类 ,主要包…     

不同血液净化方式对尿毒症患者相关炎症因子及血清脂蛋白(a)的影响

目的 通过对比观察不同血液净化方式治疗前后血清相关炎症因子、脂蛋白(a)的变化及其之间的相互关系,探讨不同血液净化方式对尿毒症患者相关炎症因子及血清脂蛋白(a)的影响.方法 将75例初次透析的尿毒症患者随机分为血液透析组及血液透析滤过组,分别测定治疗前及治疗后3个月血清C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、脂蛋白(a)浓度的变化.结果 血液透析组治疗前后血C反应蛋白、肿瘤坏死因子α浓度及白细胞介素10/肿瘤坏死因子α差异无统计学意义(均P＞ 0.05);血液透析滤过组治疗后血C反应蛋白、肿瘤坏死因子α浓度较治疗前及血液透析治疗后明显降低(P＜0.01),白细胞介素10/肿瘤坏死因子α较治疗前明显升高(P＜0.01),与血液透析治疗后比较有所升高(P＜0.05).血液透析组治疗后血清脂蛋白(a)浓度较治疗前有所降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).血液透析滤过组治疗后血清脂蛋白(a)浓度较治疗前及血液透析治疗后明显下降(P＜0.01).脂蛋白(a)与C反应蛋白呈正相关(r=0.496),与白细胞介素10/肿瘤坏死因子α比值呈负相关(r=-0.369).结论 血液透析滤过可以通过清除部分炎症因子减轻微炎症状态,同时下调脂蛋白(a)水平,减少尿毒症患者相关并发症的发生发展.     

不同频率的机械振动与白细胞介素-1β刺激对兔软骨细胞iNOS及COX-2基因表达的作用

目的 研究不同频率的机械振动与白细胞介素-1β(IL-1β)刺激对兔软骨细胞分解代谢基因表达的作用.方法 体外培养兔软骨细胞,应用自制复合振动仪,将振动强度0.5 g,不同频率0、45、90 Hz的机械振动分别作用于不同类别的软骨细胞,实时PCR(RT-PCR)检测软骨细胞中iNOS、COX-2的含量.结果 炎性反应介质IL-1β使软骨细胞中的iNOS、COX-2基因表达升高,差异有统计学意义(P<0.01).在炎性反应介质IL-1β存在的条件下,频率为45、90 Hz振动能使软骨细胞中iNOS、COX-2的表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05).在无炎性反应介质IL-1β存在的条件下,振动对软骨细胞产生iNOS、COX-2的表达量差异无统计学意义(P>0.05).结论 炎性反应介质IL-1β能加速兔软骨细胞的去分化,合适频率的机械振动能抑制IL-1β诱导的软骨细胞分解代谢基因iNOS、COX-2的表达.

Abstract：

Objective To investigate the effects of mechanical vibration frequency and IL-1 (interleukin-1) on expressions of catabolism genes in cultured rabbit chondrocytes. Methods Chondrocytes were obtained from the joints of a freshly killed 2-month-old rabbit. Six-well plates, half of which contained IL-1β, were used to culture samples. The well plates were vibrated at the frequency and amplitude 0/45/90 Hz and 0. 5 nm, respectively. After culture and mechanical stimulation, the levels of iNOS and COX-2 in the samples were measured by RT-PCR. Results IL-1β promoted expressions of the iNOS and COX-2 genes in the rabbit chondrocytes ( P < 0. 01). In the presence of IL-1β, mechanical vibrations of 45 and 90 HZ inhibited expression levels of iNOS and COX-2 mRNA, with a significant difference ( P < 0. 05). However, in the absence of IL-1β, mechanical vibrations of 45 and 90HZ made no significant impact on expressions of iNOS and COX-2 ( P > 0. 05). Conclusion Mechanical vibration may play an important role in curbing expressions of iNOS and COX-2 genes in the presence of IL-1.     

L-精氨酸对局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织TNF-α、IL-1β及神经元凋亡的影响

目的探讨L-精氨酸对局灶性脑缺血损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）及神经元凋亡的影响。方法健康雄性SD大鼠30只,体重250～280g,随机分为3组（n=10）：假手术组（SH组）、缺血组（IS组）和L-广精氨酸治疗组（L-arg组）。L-arg组腹腔注射L-精氨酸500mg/kg,每日2次,连续3d;IS组给予等容量的生理盐水;2组均采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血损伤模型。将大鼠断头取脑,采用免疫组化法检测脑组织TNF-α表达,放免法检测脑组织IL-1β含量,流式细胞仪测定神经元凋亡情况、Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达计算Bcl-2/Bax蛋白比值。结果与SH组比较,IS组脑组织TNF-α表达、IL-1β含量、神经元凋亡率升高,Bax蛋白表达上调,Bcl-2/Bax蛋白比值降低（P〈0.01）;与IS组比较,L-arg组脑组织TNF-α表达、IL-1β含量、神经元凋亡率降低,Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调,Bcl-2/Bax蛋白比值升高（P〈0.01）。结论L-精氨酸通过抑制脑组织TNF-α和IL-1β水平的升高,上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,调节Bcl-2/Bax蛋白比值平衡,抑制神经元凋亡,从而对脑缺血大鼠神经元产生一定程度的保护作用。     

周期性张应变力对不同年龄兔关节软骨细胞产生糖胺多糖的影响

目的 观察周期性张应变力(CTS)对体外培养不同年龄兔软骨细胞产生糖胺多糖(GAG)的影响。方法 选取雄性新西兰大白兔9只,按照年龄分为幼年组（2月龄）、成年组（8月龄）及老年组（31月龄）（每组3只）,无菌条件下取双膝关节,将各年龄组兔膝软骨细胞进行消化分离和体外培养。将每个年龄组兔原代软骨细胞分别培养于2个BioFlex 6孔培养板上,随机分为CTS组和对照组（每组6个样本）,同置于培养箱内,CTS组每天CTS (sin1 0％,0.5 Hz,6h/次)作用6h,对照组不予特殊处理。CTS组与对照组在首次作用后第12、24、36、48、60、72小时分别吸取培养细胞上清液,Alcian blue染色沉淀法测定上清液GAG含量,比较两组GAG分泌的变化。结果 CTS组与对照组相比,各年龄组兔软骨细胞GAG增加量在不同时间]点差异均有统计学意义(P＜0.05)。老年组在起始时,两组GAG的增加量与年轻组的增加量无明显差异,但从第48小时起老年组增加量开始低于年轻组,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 CTS可以促进兔软骨细胞产生GAG,且CTS刺激后年轻细胞比老年细胞产生更多的GAG。     

不同浓度骨痹舒片含药血清对体外培养软骨细胞增殖的影响

目的：观察不同浓度骨痹舒片含药血清对体外培养的兔关节软骨细胞增殖的影响。方法：获取1月龄兔关节软骨细胞,随机分为空白组（正常兔血清）及骨痹舒片含药血清组,每组再分5%、10%、15%、20%4个浓度,共8组。分别于培养第1、3、5、7、9天用MTT法检测软骨细胞的增殖情况。结果：骨痹舒片含药血清组细胞呈血清浓度依赖型增殖。同一时间点各组间比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,以20%组最佳;空白血清组中5%、10%组与20%组相比在各时间点差异均有统计学意义（P〈0.05）,15%组与20%组相比在第1、3、5、7天各时间点相比差异无统计学意义（P〉0.05）,在第9天时差异有统计学意义（P〈0.05）,以20%组最佳。20%骨痹舒片含药血清组与20%空白血清组相比,在第1、3、5、7天时差异有统计学意义（P〈0.05）,第9天差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：20%的骨痹舒片含药血清能显著促进软骨细胞的增殖,并将细胞的指数增长期提前至第3天。     

A型激酶锚定蛋白2基因表达对生长板软骨细胞功能的影响

目的:探讨A型激酶锚定蛋白2(A-kinase anchoring protein 2,AKAP2)基因表达对生长板软骨细胞(growth plate chondrocytes,GPCs)增殖、分化及细胞外基质代谢的影响及作用机制。方法:设计AKAP2过表达和基因敲除质粒转染GPCs对AKAP2进行过表达或干扰,构建AKAP2过表达阴性对照组(Vector组)、AKAP2过表达组(AKAP2 OE组)、AKAP2干扰阴性对照组(si-NC组)、AKAP2干扰组(si-AKAP2组)和AKAP2 OE+U0126组[U0126:细胞外信号调节蛋白激酶1/2 (extracellular signal regulated kinase 1/2,ERK1/2)通路阻滞剂],记录各组GPCs细胞增殖活力及钙盐沉积情况,检测细胞外基质中Ⅱ型胶原α1(collagen typeⅡalpha 1,COL2A1)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,COLⅡ)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear an...     

整合素介导的软骨细胞力学信号转导与基因表达

整合素是异源二聚体组成的细胞膜黏附蛋白,它与相应的细胞外基质胶原蛋白结合是软骨细胞力学信号转导的前提.整合素一方面将细胞与细胞外基质连接在一起,维持细胞结构和力学完整性,另一方面将力学信号转化为生物化学信号并与其他细胞表面膜分子一起协调将信号传入细胞内,调控基因表达,在软骨细胞分化、生长、发育和成熟过程中发挥重要作用.整合素介导的软骨细胞力学信号转导环节的障碍或紊乱,可导致病理状态如发生骨关节炎.该文就整合素介导的软骨细胞对力学的感受,细胞内信号转导、基因表达对软骨细胞力学信号转导机制的研究作一综述.     

Effects of dexamethasone on proteoglycan content and gene expression of IL-1beta-stimulated osteoarthrotic chondrocytes in vitro

We studied the effects of dexamethasone on proteoglycan (PG) concentration and gene expression in human osteoarthrotic chondrocytes stimulated with IL-1beta. Cartilage samples were taken from 7 patients with osteoarthrosis of the knee and chondrocytes cultivated in alginate beads. Dexamethasone was added in three concentrations (10(-5), 10(-6), 10(-7) M) to IL-1beta (100 pg/nL)-stimulated chondrocytes. PG concentration was estimated by a dimethylmethylene blue assay. To assess cell proliferation, DNA content was measured fluorometrically. Quantitative Lightcycler-PCR was used to estimate the mRNA levels of stromelysin-1 (MMP-3) and aggrecan (AGG). The proliferation rate was unchanged in all treatment groups. IL-1beta increased MMP-3 expression by 44% and inhibited AGG expression by 16%, but PG-concentration was reduced by 7%. The addition of dexamethasone to IL-1beta-stimulated chondrocytes further reduced the PG concentration by 19% at 10(-5) M and by 17% at 10(-7) M. The MMP-3 expression was inhibited between 27-53% and the AGG expression between 30-46% by dexamethasone. In osteoarthrotic chondrocytes, dexamethasone in an appropriate dose range reduced the expression of MMP-3 and AGG at the same time. The resulting decrease in PG concentration should be considered when using intraarticular corticosteroids to treat an osteoarthrotic joint.     

静水压对软骨细胞凋亡和增殖细胞核抗原表达的影响

目的 探讨静水压对软骨细胞凋亡和增殖的影响及肿瘤坏死因子(TNF)-á和白细胞介素(IL)-1a与软骨细胞凋亡的关系.方法 兔膝关节软骨细胞放置在压力装置中采用不同持续时间(0、4、16、24h)和不同大小静水压力刺激(0、20、40、70 kp)后观察其凋亡及PCNA表达,测定相应细胞培养基中TNF-á和IL-1a的值.结果 软骨细胞受到不同大小静压力后,作用早期细胞凋亡显著(P＜0.05),随时间延长凋亡值出现不同的变化.PCNA的表达在不同的压力下和对照组比较均有差异有统计学意义(P＜0.05).TNF-á可重复双因素分析,时间和压力的交互作用(F=6.90,P＜0.01).IL-1a可重复双因素分析,时间和压力的交互作用(F=5.80,P＜0.01).结论 软骨细胞在持续高压力应力下凋亡增加,增殖减少;在持续低压力时出现相反的结果 .软骨细胞的凋亡和增殖和TNF-á和IL-1a变化有一定的相关性.     

Effects of shear stress on nitric oxide and matrix protein gene expression in human osteoarthritic chondrocytes in vitro.

Mechanical loading alters articular cartilage metabolism. However, mechanisms underlying intracellular signaling and communication between cells in response to mechanical stresses remain enigmatic. This study tested the hypothesis that shear stress-induced nitric oxide (NO) production participates in the regulation of matrix protein gene expression. The data presented here demonstrate that exposure of human osteoarthritic chondrocytes to a continuously applied shear stress (1.64 Pa) upregulated NO synthase gene expression and increased NO release by 1.8-, 2.4-, and 3.5-fold at 2, 6, and 24 h, respectively. Exposure of chondrocytes to a short duration of shear stress for 2 h resulted in the release of accumulation of NO in the culture medium. Exposure of chondrocytes to shear stress for 2, 6, and 24 h inhibited type II collagen mRNA signal levels by 27%, 18% and 20% after a constant post-shear incubation period of 24 h. Aggrecan mRNA signal levels were inhibited by 30%, 32% and 41% under identical conditions. Addition of an NO antagonist increased type II collagen mRNA signal levels by an average of 1.8-fold (137% of the un-sheared control) and reestablished the aggrecan mRNA signal levels by an average of 1.4-fold after shear stress (92% of the un-sheared control) (ANOVA p < 0.05). These data support the hypothesis that shear stress-induced NO release may influence the development of degenerative joint diseases by inhibiting matrix macromolecule synthesis.     

吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c表达的影响

目的 评价吸入不同浓度异氟醚对老龄大鼠海马细胞色素c(Cyt c)表达的影响.方法 健康雄性老龄SD大鼠63只,月龄20月,体重500～600 g,随机分为3组(n=21),对照组(C组):吸入30%氧气2 h;0.75%异氟醚组(L组):吸入0.75%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h;1.5%异氟醚组(I2组):吸入1.5%异氟醚和30%氧气的混合气体2 h.分别于麻醉30 min、1和2 h时,各组取5只大鼠,取动脉血样行血气分析.于麻醉结束后24 h时,各组取8只大鼠,测定认知功能;取8只大鼠,分别采用免疫组化法和Western blot法测定海马Cyt c 的表达水平.结果 与C组比较,Ⅰ1组和Ⅰ2组逃避潜伏期延长,原平台象限停留时间缩短,穿越原平台次数减少,海马Cyt c表达上调(P＜0.05);与Ⅰ1组比较,Ⅰ2组逃避潜伏期、原平台象限停留时间缩短和穿越原平台次数差异无统计学意义(P＞0.05),海马Cyt c表达上调(P＜0.05).结论 吸入异氟醚可通过上调海马Cyt c的表达导致老龄大鼠认知功能障碍.     

Growth of chondrocytes on different biomaterials

Summary Chondrocytes can be cultured on different three-dimensional culture systems suitable for transplantation to enhance the repair of localized cartilage defects. Articular cartilage chondrocytes from adult rabbit knees and from bovine calf metacarpophalangeal joints were isolated by enzymatic digestion and cultured in a monolayer system to amplify cell count. After amplification the cells were seeded on different biocompatible materials. We investigated two types of bioresorbable polymer fleece matrices (a composite fleece of polydioxanon and polyglactin and a resorbable poly-L-lactic acid fleece) and lyophilized dura as a biological carrier. On all three types of transport media the phenotypic and morphological appearance of cultured chondrocytes could be observed. The production of glycosaminoglycans was revealed by Alcian blue staining and immunohistochemical detection of Chondroitin-4 and 6-sulfate in the created constructs. The material properties of the carriers allow for transplantation of the artificial cartilage-like products into full thickness articular cartilage defects and could therefore improve the minor intrinsic healing capacity of cartilage tissue. Bioartificial cartilage may become a future perspective in the treatment options of orthopaedic and plastic surgery.