包裹液态氟碳的脂质纳米粒的制备及术中评估射频消融边界的实验研究

目的制备一种热敏型纳米粒——包裹液态全氟己烷(PFH)的脂质纳米粒,探讨其术中评估射频消融边界的可行性。方法采用均质-乳匀法制备包裹PFH的纳米粒,Malvern激光粒度分析仪检测纳米粒粒径范围。水囊实验观察纳米粒热相变情况;将24块大小相同的离体猪肝分为两组,分别给予单纯射频消融、射频消融联合纳米粒处理,术中观察气化区的形成,并测量气化区及大体病理的大小,分析其相关性。结果制备的热敏型纳米粒平均粒径为(328.00±65.57)nm。体外加热实验显示,当温度达到78℃时,二维超声观察纳米粒回声较加热前明显增强;离体猪肝消融实验显示,加入纳米粒后射频消融产生的气化区更明显,且与大体病理所示坏死范围呈高度相关(r=0.996、0.949)。结论通过均质-乳匀法成功制备了纳米粒,其粒径小且均一,具有热敏相变潜能,有望成为术中实时监控、评估射频消融边界的新方法。     

超声引导扇形立体定位单极冷循环射频消融离体猪肝实验研究

目的 通过离体猪肝的实验研究为超声引导扇形立体定位单极冷循射频消融(RFA)治疗肝癌提供参考依据.方法 应用单极冷循环射频消融治疗仪,取新鲜离体猪肝20个,分成2组,每组10个,应用单点和多点2种方法 进行实验.单点每次消融时间分别设定为6、8、10、12 min;多点扇形立体定位按设计为1针2点、2针4点、3针6点、4针8点法,每次消融时间设定为6 min.电极间的间距为2 cm,发射功率分别设置为50、70、90、120 W,在超声引导下行穿刺新鲜猪肝进行射频消融.超声实时观察猪肝声像图变化.切开猪肝观察及测量凝固范围,计算消融凝固面积,并将两组消融的面积进行比较;同时行病理检查.结果 声像图显示强回声气化区域逐渐扩大,离体猪肝凝固性坏死面积随时间及功率的增加逐渐扩大,扩大到一定范围后不再扩大.切开猪肝观察,单点消融区域的形态呈椭球形;多点扇形立体定位离体猪肝消融区域的形态呈类圆形,消融范围明显大于单点消融.镜下:RFA治疗区周围1 cm肝细胞正常,作用区细胞脱落、松解、变性,大片坏死区,失去小叶结构.结论 多点扇形立体定位消融范围明显大于单点消融,能够达到预期的治疗目的,估计具有一定临床实用价值.     

射频消融与微波消融对离体牛肝作用的实验研究

目的：比较射频消融与微波消融对离体牛肝的作用效果。方法实验分为射频组与微波组,分别使用Cool-tip射频针与冷循环微波刀,均采用单针单次方式消融离体牛肝,比较两组间相同消融时间消融灶纵径、横径及体积。结果消融4、6、8 min,微波组消融灶纵径及体积均大于对应时间射频组消融灶纵径及体积（P＜0.05）,消融10 min,两组消融灶纵径及体积差异均无统计学意义（P＞0.05）;消融4 min,微波消融灶横径大于对应时间射频消融灶横径（P＜0.05）,消融6、8、10 min,两组消融灶横径差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论与射频相比较,微波的热效率更高,消融速度更快,但随着消融时间延长,最终两者可取得相近的消融效果。     

植入式915 MHz微波消融离体猪肝实验研究

目的 通过植入式915MHz微波对离体猪肝消融的实验研究，探讨其消融形态及范围。 方法 采用南京康友微波能应用研究所研制生产的KY-2000型微波消融治疗仪，微波频率915MHz，采用连续波和脉冲波2种工作方式，作用时间分别为600s和1200s。不同功率条件下，植入式内冷却微波天线直接插入离体猪肝进行消融。 结果 不同条件下消融的形态均为椭球形，统计了消融灶的最大长径和宽径。 结论 植入式915MHz微波可以有效地扩大消融范围，对较大肝癌消融治疗会有应用潜力。     

超声引导下新型植入式微波消融离体猪肝实验研究

目的通过使用新型微波天线对离体猪肝消融的实验研究,探讨相同功率/不同消融时间的凝固范围及碳化区范围的差异。方法采用的KY-2000型微波治疗仪(微波频率2450 MHz,南京康友微波能应用研究所研制生产)在同种功率(50 W)、不同时间下(300、600、900 s)以连续波的工作方式,新型微波天线直接插入离体猪肝造成组织凝固区及碳化区范围。结果同种功率,不同时间下消融的形态均为椭球形,在功率为50 W、时间为600 s的情况下,凝固区及碳化区的范围最理想。结论新型水冷式2450 MHz微波天线可以有效地凝固肝组织,在功率相同的情况下,凝固范围随时间的增加而不断的增大,但到一定范围后,单纯的延长作用时间对凝固区横径、厚度的增加无显著意义。     

冷循环射频消融输出功率及作用时间与凝固灶大小的关系

目的:分析冷循环射频消融输出功率及作用时间与牛肝组织凝固灶大小的关系。方法:实验于2006-11/2007-01在中山大学附属第二医院超声科治疗室完成。对新鲜离体牛肝组织进行冷循环射频消融,测量在不同作用时间(6,8,10,12,14min)和输出功率(50,60,70,80,90W)组合条件下凝固灶纵径(Dv)及横径()大小,并Dt分析凝固灶大小与作用时间、输出功率的关系。结果:在作用时间(14min)和输出功率(90W)范围内,凝固灶大小与作用时间和输出功率有高度线性相关关系,凝固灶纵径与作用时间、输出功率的相关系数r=0.951,P<0.001,二元线性回归方程为Dv=11.986 0.833T 0.172P(T为消融时间,P为输出功率);凝固灶横径与作用时间、输出功率的相关系数r=0.977,P<0.001,二元线性回归方程为Dt=9.246 0.907T 0.102P。结论:冷循环射频消融输出功率及作用时间与牛肝组织凝固灶大小呈正相关。     

壳聚糖纳米粒制备及表征与其抗肿瘤的生物学效应

目的:近期研究发现,壳聚糖纳米化后,不仅可改善其溶解性,还可提高其生物学功能。拟建立壳聚糖纳米粒的制备方法,并对壳聚糖纳米粒的表征及抗肿瘤生物学效应进行初步研究。方法:实验于2006-08/2007-05在浙江省医学科学院生物工程所完成。①建立壳聚糖纳米粒的制备方法:将壳聚糖粉末溶于乙酸溶液,用NaOH调节其pH为5,采用三聚磷酸钠为凝聚剂,进行离子交联来制备壳聚糖纳米颗粒。通过离心和冷冻干燥得到壳聚糖纳米粒粉末。②纳米粒的表征:经超声得到壳聚糖的悬浊液,用透射电镜来观察纳米颗粒的外观形态;用动态光散射仪来测定纳米颗粒的粒径大小与分布。③采用MTT法对壳聚糖纳米粒体外抗肿瘤生物学效应进行了初步研究。结果:①透射电镜下观测到了稳定、均一的颗粒;激光粒度分析仪测量发现纳米粒粒径大小在300nm左右,粒径分布较窄。②500mg/L的壳聚糖纳米粒对Hela细胞的抑制率为27%;对SMMC-7721细胞的抑制率为23%;对BGC-823细胞的抑制率为29%;对MCF-7细胞的抑制率最高,达55%。结论:建立的壳聚糖纳米粒的制备方法可靠,并证明其体外具有较好的抗肿瘤作用。     

模拟甲状腺囊实性结节囊性成分射频和微波消融的离体实验研究

目的探讨甲状腺囊实性结节射频和微波消融的可行性及效能。 方法使用目前常用的热消融方式（射频和微波）对甲状腺囊实性结节囊性成分的模拟液体（蒸馏水、生理盐水、血液、肝囊肿穿刺液和甲状腺囊实性结节穿刺液）进行消融。作用功率为目前临床常用的热消融功率（35 W和50 W）,每30 s记录温度值,连续监测10 min,绘制时间温度曲线。观察消融针针尖情况,记录针尖液体固化大小、形态及内部结构特点,必要时送病理检查。比较相同功率消融达到目标温度（60 ℃）的时间,并使用方差分析比较相同功率的射频和微波消融的热效能差异。 结果蒸馏水仅能进行微波消融,而无法进行射频消融。35 W射频消融在生理盐水、肝囊肿穿刺液中比微波消融较早达到消融目标温度［（171.4±3.9）s vs（343.6±5.7）s、（170.2±4.8）s vs（444.5±7.2）s］,时间温度曲线上具有较好的热效能（F=228.311、193.632,P均＜0.001）;50 W射频消融在肝囊肿穿刺液中比微波消融较早达到消融目标温度［（127.3±3.1）s vs（165.7±3.4）s］,时间温度曲线上具有较好的热效能（F=47.429,P＜0.001）;但射频消融在血液和甲状腺囊实性结节穿刺液中无法达到消融目标温度。而50 W微波消融能在所有模拟液体中达到消融目标温度,且在血液和甲状腺囊实性结节穿刺液中的热效能明显优于射频消融（F=47.429、22.859,P均＜0.001）。 结论微波消融能对各甲状腺囊实性结节囊性成分的模拟液体进行消融,且性能相对稳定。射频消融热效能较高,但对蒸馏水无法消融,对血液和甲状腺囊实性结节穿刺液因针尖容易形成积碳而效果不佳。     

超声引导下新型内冷式微波天线凝固离体猪肝的实验研究

目的:通过冷循环微波天线对离体猪肝凝固的实验研究,探讨不同时间、功率组合下凝固区的形态及范围。方法:应用ECO-100增强型冷循环微波天线,分别以不同时间和功率组合凝固25只新鲜离体猪肝,采用脉冲波方式,微波频率为2450MHz,观察不同凝固条件下造成的组织凝固范围和形态。结果:加大输出功率或者延长凝固时间均可扩大凝固范围,在加大输出功率的同时延长凝固时间,凝固范围显著增大。以60～70W、20min时凝固区形态更接近球形。结论:加大微波的输出功率或延长凝固时间可以增大肝组织凝固范围,其中60～70W时所形成的凝固范围更趋向球形,此对肝癌凝固治疗会有较大指导意义。     

神经生长因子纳米粒透过AD大鼠血脑屏障的实验研究

目的:制备神经生长因子聚氰基丙烯酸丁酯(nenre growth factor-polybutylcyanoacrylate,NGF-PBCA)纳米粒并评价质量,探讨其在阿尔茨海默病(Akheimer's disease,AD)大鼠体内透过血脑屏障的情况.方法:采用乳化聚合法制备NGF纳米粒并评价质量;Wistar大鼠30只,D-半乳糖和Aβ1-40先后注射实验组大鼠脑室后经Morris水迷宫法鉴定,制备有效AD大鼠模型;实验组静注NGF纳米粒后,Morris水迷宫法检测动物学习记忆能力的变化;ELISA法检测动物脑内NGF含量改变.结果:NGF-PBCA-纳米粒呈圆球形,包封率为83.56%,栽药量为22.87%.与对照组相比,实验组动物找到平台时间明显下降,脑组织内NGF含量显著增加(P<0.01).结论:乳化聚合法制备的NGF纳米粒,可使AD大鼠学习记忆能力损伤程度减轻,可增加外源性NGF通过AD大鼠血脑屏障的数量.     

Reduction of atrial fibrillation inducibility by radiofrequency ablation: an experimental study

A study is made of the antifibrillatory effects of radiofrequency (RF)-induced atrial lesions using nine Langendorff-perfused rabbit hearts in which the atrial electrophysiological properties and atrial fibrillation (AF) inducibility were modified by atrial stretching. Using a multiple electrode consisting of 121 unipolar electrodes, determinations were made of the atrial refractory periods, conduction velocity, wavelength of the atrial activation process, and the inducibility of sustained AF episodes (duration over 30 s) by atrial burst pacing in four situations: (a) control; (b) following dilatation of the right atrium; (c) after adding an RF linear lesion at the cava-tricuspid annulus isthmus; and (d) after adding two RF linear lesions rounding the base of the right atrial appendage and extending from the inferior zone of the sulcus terminalis to the anterior wall of the appendage. Under control conditions, AF was not induced in any of the experiments. The wavelengths were 10.5 +/- 1.2 cm for basic cycles of 250 ms and 6.6 +/- 0.5 cm for cycles of 100 ms. Following dilatation, a significant decrease was recorded in the atrial refractory periods, conduction velocity, and wavelength, which reached values of 6.1 +/- 0.7 cm (250-ms cycle, P < 0.01), and 3.9 +/- 0.3 cm (100-ms cycle, P < 0.01); AF was induced in five cases (P < 0.05). After producing the lesion at the cava-tricuspid isthmus, the electrophysiological modifications induced by atrial dilatation persisted (wavelength = 6.2 +/- 0.6 cm (250-ms cycle) and 4.3 +/- 0.3 cm (100-ms cycle); P < 0.01 vs the control) and AF was triggered in eight cases (P < 0.0001). In turn, on adding the two lesions at the right atrial free wall and appendage, AF was induced only in one experiment (P = NS vs control), and the dilatation-induced decrease in refractoriness and wavelength was attenuated. Nevertheless, differences remained significant with respect to the controls, with the exception of the functional refractory periods determined at cycles of 100 ms. In this phase, the wavelength was 6.6 +/- 0.7 cm (250-ms cycle, P < 0.01 vs control) and 4.9 +/- 0.5 cm (100-ms cycle; P < 0.05). Atrial conduction between the zones separated by the lesions was blocked at any frequency, or selectively at rapid atrial activation frequencies. In conclusion: (a) the production of three linear lesions in the right atrium (cava-tricuspid isthmus, atrial appendage, and inferior free wall) reduces AF inducibility in the experimental model used; (b) conduction block (either absolute or frequency dependent) through the lesions, reduction in tissue mass caused by lesion creation, and possibly the attenuation of the shortening of atrial refractoriness and wavelength in the zones not separated by the lesions are implicated in the reduction of AF inducibility; and (c) the single lesion in the cava-tricuspid isthmus does not impede AF inducibility.     

Preliminary experimental study on splenic hemodynamics of radiofrequency ablation for the spleen

Purpose: To test the splenic blood flow change after radiofrequency ablation (RFA) of the spleen in a porcine experimental model.

Material and methods: Six pigs underwent RFA of the spleen via laparotomy. During the procedure of RFA, clamping of splenic artery (one) and both splenic artery/vein (one) was also performed. Measurement of blood flow of both splenic artery (SA) and splenic vein (SV) with flow-wire at pre- and post-RFA of the spleen was also performed.

Results: Ablated splenic lesions were created as estimating ～50% area of the spleen in all pigs. Resected specimens reveal not only the coagulated necrosis but also the congestion of the spleen. On the SA hemodynamics, maximum peak velocity (MPV) changed from 37?±?7?to 24?±?8?cm/s (normal), 11?to 10?cm/s (clamp of the SA), and 12?to 7.5?cm/s (clamp of both SA/SV), respectively. On the SV hemodynamic, MPV changed from 15?±?5?to 13?±?4?cm/s (normal), 17?to 15?cm/s (clamp of the SA), and 17?to 26?cm/s (clamp of both SA/SV), respectively.

Conclusions: RFA of the spleen could induce coagulation necrosis and reduce the splenic arterial blood flow.     

术中超声造影评价肝射频消融效果的实验研究

目的 探讨术中超声造影(contrast enhanced intraoperative uhrasound,CE-IOUS)评价肝射频消融(radio frequency ablation,RFA)的价值.方法 12条狗共15个消融灶于RFA后15 min及30 min行术中超声(intraoperatiVe ultrasound,IOUS)和CE-IOUS扫查,评价显示效果,并与大体标本对比.结果 RFA结束15 min后行CE-IOUS可获得满意图像;与IOUS相比,CE-IOUS能更清楚地显示消融灶的边界(P=0.000),且CE-IOUS所示消融灶形态与大体标本一致性好;IOUS、CE-IOUS和大体标本显示坏死灶面积分别为(4.82±1.49)cm2、(3.48±1.25)cm2及(2.93±0.87)cm2,IOUS和CE-IOUS与太体标本显示面积差别均有统计学意义(P=0.000),但前者与大体标本间无线性相关(r=0.28,P=0.316),后者与大体标本相关性良好(r=0.75,P=0.002).结论 CE-IOUS能在一定程度上准确评价RFA效果,值得进一步临床研究.     

射频消融治疗肝癌对免疫功能的影响

目的:探讨射频消融对机体免疫功能的影响。材料与方法:将27只荷VX2肝癌新西兰白兔分为射频消融组(10只)、酒精注射组(10只)和实验对照组(7只),观察荷瘤兔实验前后sIL-2R变化。检测20例肝细胞癌(HCC)患者射频消融前后CD4 、CD8 、CD4 ?CD8 比值和sIL-2R,并与25名健康体检者进行比较。结果:动物实验表明:射频消融组实验前后sIL-2R无显著变化;酒精注射组和实验对照组实验后sIL-2R显著升高。临床研究表明:20例HCC患者与健康对照者相比CD4 、CD4 ?CD8 显著降低,sIL-2R显著增高;射频消融治疗后CD4 、CD4 ?CD8 显著升高,sIL-2R显著降低。结论:射频消融治疗肝癌可在一定程度上改善患者的抗肿瘤免疫抑制状态。     

不同辅助性试剂对肝脏射频消融增效作用的实验研究

目的:通过离体肝脏射频消融(RFA)实验,评价高渗盐水、冰醋酸以及冰醋酸和高渗盐水混合溶液(AAHS)对RFA的增效作用。方法:取厚度和大小近似的新鲜猪肝12块,每3块肝脏作为一组进行射频消融实验。A组:单纯RFA,B组:36% NaCl+RFA,C组:50%冰醋酸+RFA,D组:50%冰醋酸+36% NaCl+RFA。每组猪肝上选取12个点,每个点注射1ml上述试剂后即进行射频消融。记录最低阻抗、消融持续时间并测量消融区的深径及横径,进行统计学分析。结果:A组最低阻抗值最高,同其它组最低阻抗间具有显著差别;B、D组最低阻抗值明显低于A、C组;B、D组间的差别不具有统计学意义。各组射频消融持续的时间也存在差别,其中A组消融持续时间最短,B组持续时间最长。各组消融区最大面积的平均值中D组的面积值最大,A组消融最大切面的面积最小,B组的消融最大切面面积仅次于D组,两者具有显著差别,B组同其它组亦具有显著差别。结论:将射频消融同50% AAHS溶液注射联合比单纯射频消融能获得更大的射频毁损区,其对肝脏射频消融的增效作用大于单一溶液的作用。     

射频导管消融术时经食管超声心动图引导大头电极导管到位的实验研究

目的 研究经食管超声心图（TEE）作为影像学引导射频导管消融术时大头电极导管到位的可行性。方法 5只健康杂种犬,分别由TEE引导大头电极导管入左心和右心系统。结果TEE引导大头电极导管到左,右心相应部位的成功率均为100％,结论 TEE可引导射频导管消融术治疗预激综合征和特发性室性心动过速时大头电极导管的顺利到位。     

The loop electrode: A new device for US-guided interstitial tissue ablation using radiofrequency electrosurgery - an animal study

Summary

In an animal study, we have tested a special loop electrode for ultrasound-guided percutaneous interstitial tissue ablation using monopolar radiofrequency (RF) electrosurgery. The loop electrode with a radius of 1 cm was inserted into calf livers via an insulated introducer cannula. Monopolar RF current in the cut mode was applied to the loop electrode which was rotated a full turn. During this, a lesion was cut off interstitially. In three sedated calves a total of seven liver lesions were made percutaneously or during laparotomy. The procedure was guided and monitored by ultrasono-graphy including colour Doppler imaging. Autopsy was performed on day 0 or day 8 post treatment and included gross sectional examination and microscopic evaluation (light microscopy and electron microscopy). In the first animal, the lesions were incomplete because of insufficient voltage setting. In the second and third animal, however, four spherical lesions with a diameter of 2 cm were cut off without clinical complications. A minor haematoma surrounded the four lesions. The cut off lesion was non-vital on electron microscopy. The presented tissue ablation technique is shown to be feasible and efficient in a live organism. More animal studies are warranted to evaluate the safety aspects with this technique.     

腹腔镜超声在经皮射频消融术治疗肝肿瘤中的应用价值

目的 探讨腹腔镜超声在经皮射频消融术治疗肝肿瘤中的应用价值.方法 31例不能耐受开腹手术的肝癌患者,常规超声均无法经皮定位病灶,行经皮射频消融术时术中均在腹腔镜超声下引导穿刺,并动态观察手术进程.结果 31例肝癌患者均在腹腔镜超声引导下完成经皮射频消融术.其中7例为术前CT或MRI发现而常规超声无法扫查的膈顶部病灶,3例为术前未发现小病灶,1例排除术前MRI诊断的假阳性病灶.31例肝癌患者腹腔镜手术顺利,无术中死亡,术后未出现出血、感染等并发症,5例出现一过性发热,4例出现恶心,3例出现轻微腹痛.术后随访6个月内无1例复发.结论 腹腔镜超声可检出术前影像学检查遗漏的肝癌小病灶、定位常规超声盲区处肝癌病灶并引导经皮射频消融术.腹腔镜超声可以辅助完成不能耐受开腹手术、常规经皮超声又无法定位治疗的肝癌患者的经皮射频消融治疗.     

多电极射频对动物肾脏作用的实验研究

目的研究多电极射频对离体和活体动物肾脏的作用,消融时间和功率对消融灶的影响及超声在评估消融效果的应用价值。方法取新鲜离体猪肾10枚,杂种犬4只。在离体猪肾的上、下极和中部进针1cm,30个离体靶点随机分两组,每组15个,分别应用5W和10W的初始功率进行消融。活体狗16个靶点初始功率为40W。用实时超声、4h后超声和病理检查进行对比观察。结果消融灶大小和电极伞径相似,初始功率不同所产生的消融灶大小差异无显著性。超声显示消融灶为边缘极不规则的强回声,肉眼观察离体肾为棕褐色类圆形、活体肾为楔形的凝固性坏死。实时超声所测消融灶值均明显大于肉眼测定值和4h超声测值(P<0.005),4h后超声测得消融灶明显小于肉眼值(P<0.05)。结论消融灶的大小不随初始功率和时间增加而增大。超声能准确引导定位,消融灶显示不规则的强回声,但不能反映消融灶的大小。根据伞径预测消融灶的大小是可靠的。