龟鹿二仙胶方义与应用述要

龟鹿二仙胶,又名龟鹿二仙膏,由瘫角胶、龟板、枸杞子、人参组成。其方见于《医方考·虚损劳瘵门》,方后论：“精极,梦泄遗精,瘦削少气,目视不明,此方主之。”然据其方义,既可作为治疗各科虚证的基本方,也可作为保健的常用方。     

中药胶剂

<正>中药里有一种剂型,称为胶剂,系指以动物皮、骨、甲或角等为原料,用水煎煮,取汁,浓缩成的干胶状内服制剂,有阿胶、龟板胶、鳖甲胶、鹿角胶、龟鹿二仙胶等。这些胶剂治病疗疾有悠久的历史,《神农本草经》就载有"白胶"和"阿胶",这些胶剂至今仍在广泛使用。胶剂的主要成分是动物水解胶元蛋白,煎煮浓缩后,按不同处方要求,加入一定量的糖、油脂、及黄酒等辅料而制成。胶剂多供内服,可烊化单服或兑入煎剂,主要功能为补血、止血、祛风等,     

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔骨髓基质干细胞增殖的影响

目的：观察龟鹿二仙胶汤对骨髓基质干细胞（BMSCs）增殖的影响,确定影响BMSCs增殖的最佳中药血清浓度。方法：经前期体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,运用不同浓度的龟鹿二仙胶汤中药含药血清对获得的兔BMSCs进行药物干预24、48、72h后,采用MTT、免疫组化、流式细胞仪等方法,研究龟鹿二仙胶汤对BMSCs增殖的影响。结果：MTT比色实验显示,龟鹿二仙胶各浓度组均能不同程度地促进BMSCs的能量代谢,促进BMSCs增殖,与空白对照组相比有显著差异（P〈0．01）,而且以15倍药物浓度组为最佳。免疫组化结果证实,龟鹿二仙胶汤含药血清可通过促进PCNA表达来控制DNA复制,以15倍龟鹿二仙胶汤药物浓度血清培养时BMSCs表达致密的棕褐色颗粒最多,其他浓度组及TGF—β3组较多,空白对照组则最少。FCM结果显示,二仙胶汤药物血清能显著提高BMSCs增殖指数,且以15倍药物浓度龟鹿血清培养时最明显。结论：龟鹿二仙胶汤刺激BMSCs增值与药物浓度有关,低浓度龟鹿二仙胶汤就能显著刺激BMSCs增殖,无论是48h、72h测验均为15倍药物浓度时具有显著的增值作用,而更高浓度龟鹿二仙胶汤则表现为促进BMSCs增殖作用减弱。     

化湿补肾法对膝骨关节炎大鼠软骨修复机制的研究

目的 探讨化湿补肾法治疗膝骨关节炎(KOA)的机制.方法 将48只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、化湿定痛汤组、龟鹿二仙胶组、化湿补肾法组,采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立膝骨关节炎模型,造模成功后各组大鼠灌胃相应药物,化湿定痛汤组灌胃化湿定痛汤4.68 g/(kg·d),龟鹿二仙胶组灌胃龟鹿二仙胶汤2.7 g/(...     

龟鹿二仙胶对秀丽隐杆线虫体内抗衰老作用研究

【目的】探讨龟鹿二仙胶对秀丽隐杆线虫体内抗衰老的作用及机制。【方法】以秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）为模型生物,观察不同浓度龟鹿二仙胶（0.5、2.5、5.0 mg/mL）对线虫健康寿命、行动力、生殖能力、吞咽频率、应激能力和体内活性氧自由基（ROS）、脂褐质水平及抗氧化酶活性的影响。【结果】龟鹿二仙胶能显著提高线虫行动能力、吞咽能力,延长其平均寿命,并对氧化损伤有显著改善作用。此外,不同浓度的龟鹿二仙胶均能显著提高线虫体内过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化酶（GSH）活性,降低机体内丙二醛（MDA）含量和脂褐质的堆积水平。【结论】龟鹿二仙胶可能是通过减缓细胞氧化损伤,进而起到延长秀丽隐杆线虫寿命的作用。     

加味龟鹿二仙膏质量标准研究

目的:建立加味龟鹿二仙膏的质量标准。方法:采用薄层色谱法对加味龟鹿二仙膏中的肉苁蓉、枸杞子、党参进行定性鉴别,采用高效液相色谱法对松果菊苷进行含量测定。结果:肉苁蓉、枸杞子、党参的薄层鉴别斑点清晰、专属性强;松果菊苷在4.58~91.6μg/mL之间呈良好的线性关系(r=0.9999,n=5),平均回收率为98.59%,RSD为0.22%(n=9)。结论:该质量标准准确、可靠,能有效控制加味龟鹿二仙膏的质量。     

龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎疗效观察(附86例报告)

目的观察中药龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎的疗效。方法采用中药龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎86例,观察2个月。结果显效36例,有效43例,无效7例,总有效率91.9%。结论龟鹿二仙胶联合内热针治疗膝关节骨性关节炎疗效满意。     

龟鹿二仙胶汤治疗膝骨性关节炎的临床研究

观察龟鹿二仙胶汤对膝骨性关节炎的临床疗效.选择符合中西医诊断标准的临床患者120例,按就诊顺序随机分为2组,以龟鹿二仙胶汤和壮骨关节丸对照治疗.结果治疗组总有效率为98.3%,对照组为88.3%,治疗组的疼痛缓解、活动范围、步行能力、日常动作等指标明显优于对照组,2组比较有显著性差异（P＜0.01）.说明龟鹿二仙胶汤能有效的改善膝骨性关节炎的临床症状.     

龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用

目的 研究龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤的保护作用。方法 体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,传至第二代后分5组培养:正常组、地塞米松（10-8mol/L）组、骨化三醇含药血清组、龟鹿二仙胶含药血清低剂量组、龟鹿二仙胶含药血清高剂量组。MTT法检测骨髓间充质干细胞活力,检测细胞上清中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、炎症因子白介素-6（IL-6）、小鼠白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）。采用Western blot检测Nrf-2/HO-1/NF-κB信号通路蛋白表达。结果 龟鹿二仙胶能显著提高细胞活力,增加SOD水平、降低MDA水平、降低炎症因子水平,增加蛋白Nrf-2、HO-1蛋白表达水平,降低NF-κB信号蛋白表达。结论 龟鹿二仙胶对地塞米松诱导骨髓间充质干细胞损伤有保护作用,且作用与调控Nrf-2/HO-1/NF-κB信号相关。      

防治痴呆症的四方药

一、填糯补髓法：中医认为肾主藏精、主骨生髓通于脑，凡呆滞而兼眩晕、健忘、耳聋、遗精、自汗盗汗、腰膝酸软、夜尿频多和齿早落、鬓早衰、性无能等诸多衰老表现者属肾精亏虚证。治宜河车大造丸、龟鹿二仙膏、左归丸三方合用：紫河车3克、龟胶6克、鹿胶6克、茯苓10克、茯神10克、远志4克、     

龟鹿二仙膏助阳药理作用研究

目的 :观察龟鹿二仙膏助阳的药理作用。方法 :测定去势大鼠性腺器官指数及皮质激素阳虚模型小鼠的自主活动增加及常压耐寒冷环境中的存活时间。结果 :龟鹿二仙膏能显著增加去势大鼠前列腺及精囊腺指数 ,使腺细胞增生、扩大、萎缩明显改善 ;龟鹿二仙膏还能明显提高肾阳虚小鼠自主活动 ,显著延长在寒冷状态下存活时间。结论 :龟鹿二仙膏有较好助阳作用     

基于网络药理学探讨龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的作用机制

目的:通过网络药理学的方法研究龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的相关作用机制。方法:基于TCMSP数据库、ETCM数据库、化学专业数据库、DrugBank数据库获取龟鹿二仙胶的潜在活性成分及相关靶点,从OMIM、Genecards数据库获取骨质疏松症的已知治疗靶点,运用STRING数据库建立活性成分-疾病靶点的蛋白相互作用网络(PPI),利用Cytoscape3.8.0软件对该网络进行拓扑参数分析得到关键活性成分及其靶点。并在R4.0.2中利用Bioconductor数据包对关键靶点进行GO生物学功能分析和KEGG通路分析,得到龟鹿二仙胶治疗骨质疏松症的有效成分和作用靶点。结果:龟鹿二仙胶共有87个活性成分和2 305个靶点,骨质疏松症共有4141个已知治疗靶点,二者共同作用靶点共71个,获得PPI核心基因69个,GO生物学过程分析得出95个条目,KEGG通路分析得出115条通路。结论:龟鹿二仙胶可能通过抑制炎症因子、调节成骨及破骨细胞分化、改善微循环、促进破骨细胞凋亡等途径起到抗骨质疏松的作用,涉及的通路包括TNF信号通路、IL-17信号通路、NF-kB信号通路、HIF-1信号通路、MAPK...     

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔体外BMSCs向软骨细胞分化的干预作用

目的:探讨龟鹿二仙胶汤含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨细胞分化的干预作用。方法:抽取兔骨髓液,经体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,将第2代兔BMSCs分为龟鹿二仙胶汤中药含药血清组、软骨细胞组、单纯诱导剂组及空白对照组,进行培养1、2、3周后,通过细胞染色、透射电子显微镜、免疫组化等实验技术,观察各组对BMSCs诱导成软骨细胞的影响。结果:在转化生长因子-β(3TGF-β3)等诱导下龟鹿二仙胶汤中药血清可以明显促进软骨表型化BMSCs的GAG分泌及Ⅱ型胶原mRNA的表达,与软骨细胞组和单纯诱导剂组有显著性差异(P<0.01)。结论:龟鹿二仙胶汤含药血清可促进BMSCs向软骨细胞转化,优化骨组织工程的种子细胞体系,改善软骨组织的质量,延缓软骨的退化过程。     

龟鹿二仙胶通过调控 PD-1 表达抑制 H22 荷瘤小鼠肿瘤生长的研究

目的初步探讨龟鹿二仙胶通过降低肿瘤周围T淋巴细胞PD-1表达,抑制T细胞凋亡,从而抑制肿瘤生长的分子机制。方法采用皮下接种H22肝癌细胞株方法建立荷瘤小鼠模型,观察药物干预后各组荷瘤小鼠肿瘤的生长速度,Annexin V/PI双染色法测定小鼠脾脏T淋巴细胞凋亡比例,分离肿瘤浸润性T淋巴细胞,流式细胞检测PD-1阳性细胞的比例。结果 (1)龟鹿二仙胶呈剂量依赖抑制皮下瘤的生长,顺铂组及高、中、低剂量组抑瘤率分别为81.36%、79.64%、48.86%、21.96%;(2)顺铂组及高、中、低剂量组小鼠T淋巴细胞凋亡比例分别为早期(24.37±0.32)%、(5.30±0.21)%、(6.90±0.16)%、(11.93±2.01)%;晚期(8.83±1.23)%、(4.73±0.33)%、(6.40±0.34)%、(7.47±0.54)%,说明与顺铂组比较,龟鹿二仙胶能够抑制小鼠T淋巴细胞凋亡;(3)龟鹿二仙胶高剂量组、中剂量组的PD-1表达阳性细胞比分别为(11.73±0.54)%、(20.00±0.66)%,明显低于生理盐水组(32.57±0.65)%和顺铂组(31.83±0.43)%,说明龟鹿二仙胶能够降低肿瘤浸润T淋巴细胞中PD-1阳性的比例。结论龟鹿二仙胶具有抑制肿瘤生长的作用,其机制可能是通过抑制PD-1表达,减少T淋巴细胞凋亡,增强机体免疫力,从而抑制和杀伤肿瘤细胞得以实现的。     

龟鹿二仙胶对创伤后应激障碍模型大鼠行为学及海马GR、5-HT受体表达的影响

目的:观察龟鹿二仙胶对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)模型大鼠行为学,海马糖皮质激素受体(glucocorticoid receptors,GR)及5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)受体1A亚型(5-HT1A)、2A亚型(5-HT2A)表达的影响。方法:采用单一延长刺激方法制作大鼠PTSD模型,通过旷场实验、拒俘反应实验以及Morris水迷宫实验观察大鼠的情感行为和学习记忆能力的改变。采用RT-PCR法检测海马GR、5-HT1A和5-HT2A受体表达。结果:PTSD大鼠表现出多种情感行为障碍,学习能力显著降低(P0.01)。海马GR表达增强(P0.01),5-HT1A受体表达下降(P0.05),5-HT2A受体表达则升高(P0.05)。龟鹿二仙胶(2.025 g·kg~(-1))和淫羊藿总黄酮(0.06 g·kg~(-1))能显著改善PTSD大鼠的情感行为障碍,提高学习记忆能力(P0.05或P0.01)。龟鹿二仙胶(2.025 g·kg~(-1))和淫羊藿总黄酮(0.06 g·kg~(-1))可以明显降低PTSD大鼠海马GR的表达水平,升高5-HT1A受体表达水平和降低5-HT2A受体表达水平(P0.05或P0.01)。结论:龟鹿二仙胶对PTSD具有良好的干预治疗作用,其作用机理与改善情感行为和认知功能以及调节海马GR、5-HT1A和5-HT2A受体表达有关。     

龟鹿二仙胶对绝经后骨质疏松性骨折愈合的影响

目的：探讨龟鹿二仙胶对大鼠绝经后骨质疏松性骨折(postmenopausal osteoporotic fractures, PMOPF)愈合的影响。方法：从34只SD大鼠中随机选取11只作为对照组,仅切除卵巢旁脂肪组织,其余大鼠行双侧卵巢切除术建立骨质疏松模型。12周后,所有大鼠行右侧股骨骨折合并髓内针固定术。将造模成功的PMOPF大鼠随机分为模型组、龟鹿二仙胶组(3.6 g·kg^-1)和阿仑膦酸钠组(3.6 g·kg^-1),每组6只。龟鹿二仙胶组和阿仑膦酸钠组给予相应药物灌胃,对照组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃,持续8周。采用HE染色、番红固绿染色观察骨折处病理形态;三点弯曲法检测骨折处最大载荷;ELISA法检测血清骨钙素(bone gamma carboxy-glutamic acid containing proteins, BGP)、骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase, BALP)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(type I collagen carboxy-terminal peptide, CTX-1)...     

龟鹿二仙胶对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎骨强度的影响及机制

目的观察龟鹿二仙胶对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎骨强度的影响及机制。方法 72只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、模型组(OVX组)、雷奈酸锶组(SrR组)、龟鹿二仙胶低剂量组(GL组)、中剂量组(GM组)和高剂量组(GH组),除S组外,其余各组切除卵巢,给药6、12周检测大鼠腰椎骨强度、骨密度、骨小梁面积、平均骨小梁宽度、血清骨钙素、尿脱氧吡啶酚的变化。结果①6周时OVX组腰椎承受最大载荷低于其余各组,12周时GM组明显高于其它2个剂量组(P0.01)。②12周时龟鹿二仙胶3个剂量组骨密度高于OVX组(P0.05),低于S组、SrR组(P0.05);GM组骨小梁面积、平均骨小梁宽度高于其余2个剂量组(P0.05)。结论龟鹿二仙胶能显著提高去卵巢大鼠腰椎骨强度,以GM组最明显,其作用机制为早期提高骨小梁宽度和骨小梁面积,后期提高骨密度和改善骨显微结构。     

阳和汤的内科临床应用

阳和汤出自清·王维德撰《外科证治全生集》。方由熟地黄、白芥子、鹿角胶、肉桂、干姜炭、麻黄、生甘草七味药组成。本方功能温补和阳、散寒通滞,是治疗外科阴证的著名方剂。寒为阴邪,其性凝滞,极易伤阳。若阳气虚弱,失于温煦推动之力,则人体气血津液运行受阻,阳虚阴寒之病遂生。《内经》云:“血气者,喜温而恶寒,寒则泣不能流,温则消而去之。”阳和汤即宗其旨。方中重用熟地补血充脉,以鹿角胶养血助阳,再以肉桂温通血     

龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松症临床观察

目的:观察龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松症患者的临床疗效及作用机制。方法:选择绝经后骨质疏松症患者60例,所有患者均以碳酸钙D3(600 mg/d)作为基础药,将其分为治疗组和对照组,治疗组应用龟鹿二仙汤;对照组应用阿仑膦酸钠,每组各30例,评价治疗前后疼痛和骨密度、性激素的变化。结果:龟鹿二仙汤组腰椎、股骨颈的骨密度明显增加,疼痛明显减轻,龟鹿二仙汤组在疼痛控制、骨密度的增加方面明显优于阿仑膦酸钠组,在性激素检测中发现龟鹿二仙汤组的雌二醇(E2)、睾酮(TESTO)较治疗前有明显提高,与治疗前比较有明显差异,具有统计学意义。阿仑磷酸钠组雌二醇(E2)、睾酮(TESTO)相对治疗前无明显差异,无统计学意义。结论:龟鹿二仙汤能够提高绝经后骨质疏松症的腰椎、股骨颈的骨密度,能缓解其疼痛,其作用机制考虑与雌二醇、睾酮的提升有关。龟鹿二仙汤治疗绝经后骨质疏松安全、有效。     

枸杞子散的药理作用研究

枸杞子散出自《太平圣惠方》,由枸杞和人参二味药物组成,其中枸杞善补肝肾精血、心肺脾阴液,也有补肾气作用,人参善补元气,有补阴生津作用.二药一补阴一补阳,一补精血一补元气,阴阳气血双补,五脏六腑皆益.二药配伍,相使互补,补气培元,益精生血.为了进一步用现化科学理论指导临床应用,我们对枸杞子散进行了相关药理研究,现报道如下.