栀子粗提物对抑郁模型小鼠行为学及海马神经发生的影响

目的观察栀子粗提物对慢性轻度应激模型小鼠行为学及海马神经发生的影响。方法采用10种不同应激源实施对小鼠连续10周刺激,从第3周开始口服给予栀子粗提物3个剂量治疗8周后,测定各组小鼠行为学改变,并采用NeuN和BrdU免疫组化观察海马区神经细胞的增殖情况。结果栀子粗提物高剂量组蔗糖饮水量明显增加（P〈0.05）,强迫游泳不动时间明显缩短（P〈0.05）;NeuN阳性表达升高（P〈0.01）,BrdU阳性细胞的面数密度亦显著增加（P〈0.05）。结论栀子粗提物对抑郁模型小鼠行为有明显改善作用,并能显著促进海马区神经元发生,提示栀子粗提物具有良好的抗抑郁作用。     

成年海马神经发生与阿尔茨海默病的关系

阿尔茨海默病（Alzheimers disease,AD）即老年性痴呆,是一种呈渐进性恶化的致死性神经退行性疾病,其发病与年龄相关。成年海马神经发生是海马齿状回颗粒下区终身形成新生神经元的过程,近年来有大量研究表明,AD发生时成年海马神经发生也出现了改变,许多AD相关的分子同时也影响着成年海马神经发生,本文就AD中成年海马神经发生的改变和它们之间共同相关病理学机制进行了综述。     

成年海马齿状回神经发生研究进展

大量研究表明成年海马齿状回存在神经发生,海马齿状回的神经干细胞位于海马门区与颗粒细胞层间的下颗粒带,其终生保持着增殖分化的能力。海马齿状回的神经发生受到生活环境、生长因子、应激及学习和记忆等多种因素的调控。海马齿状回神经干细胞产生的新的神经元可能与学习、记忆等功能密切相关。     

断乳前丰富环境暴露促进大鼠学习记忆及海马神经发生

目的 探讨断乳前丰富环境(Enriched environment)暴露对大鼠空间记忆和海马神经发生的影响.方法 新生大鼠随机分为对照组和丰富环境组,丰富环境组大鼠每日予以丰富环境暴露20 min.50 d龄开始用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力.采用BrdU标记增殖细胞,观察2组海马神经发生情况,并对海马神经发生与Morris水迷宫测试成绩作相关分析.结果 丰富环境组Morris水迷宫成绩优于对照组,差异均有显著性(均P ＜0.05).丰富环境组大鼠海马区BrdU阳性细胞数[(5363±487)个]、神经元分化率[(85.0±2.8)%]和星形胶质细胞分化率[(4.0±0.5)%]均高于对照组[分别为(2984±318)个,(80.2±2.8)%,(2.6±0.6)%](均P ＜0.01).相关分析显示对照组海马DG区新生神经元数目与Morris水迷宫测试成绩相关(r =0.648,0.609,P ＜0.05),但在丰富环境组中相关性消失.结论 断乳前丰富环境暴露可以促进海马神经发生和海马功能.丰富环境暴露在新生期或幼年期脑损伤康复治疗中可能有良好的应用前景.     

成年海马神经发生与阿尔茨海默病的关系

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是老年期常见的神经退行性疾病,被 WHO 公布为目前人 类面临的最大全球公共卫生事项之一。临床主要症状是学习记忆能力渐进性减退。其神经病理学改变包括 β- 样淀粉蛋白(amyloid β protein,Aβ)聚集在神经细胞外形成的老年斑(senile plaque,SP)、Tau 蛋白过度磷酸化 聚集在神经细胞内形成的神经纤维缠结(neurofibrillary tangle,NFT)、神经元丢失变性和突触减少等,特别是神经 发生异常改变,也是 AD 神经病理改变的主要特征。神经发生是成年哺乳动物海马齿状回神经干细胞产生新生神 经细胞的过程,增加成年神经发生对补偿神经元和改善学习记忆障碍有促进等作用,维持了脑内的可塑性和相关 性功能。因此,促进成年海马神经发生可能有利于 AD 的治疗。该文就成年海马神经发生与 AD 的关系予以总结。     

海马神经发生障碍--抑郁症发病机制的新观念

抑郁症(depression)是一种常见的精神病,发病机制不清,其总患病率高达11.3%,居全球致残疾病的第1位.尽管单胺递质学说[5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素在突触间隙的缺乏]在抑郁症的发病机制研究中具有里程碑意义,但是选择性5-HT再摄取抑制剂(selective serotonin reuptake inhibitor, SSRIs)能很快增加患者大脑突触间隙的5-HT递质浓度,而需2～6周后才能改善仅60%抑郁症患者临床症状的现象,则难以解释.     

年龄对成年小鼠嗅球细胞增殖与神经发生的影响

目的：观察年龄对成年小鼠嗅球细胞增殖与神经发生的影响。方法：用5-溴-2-脱氧尿核苷(5-bromo-2’-deoxyuridine，BrdU)标记新生细胞，免疫组化染色后统计新生细胞数量；应用BrdU与TuJl／GFAP双标记，鉴别出BrdU阳性细胞的细胞类型。结果：老年组小鼠嗅球细胞增殖与神经发生明显低于青年组。结论：成年小鼠嗅球的细胞增殖与神经发生随着年龄的增长而减慢，这可能是嗅觉减退的结构基础之一。     

增加海马的神经发生有望治疗阿尔茨海默病

哺乳动物大脑持续存在的神经发生为阿尔茨海默病(AD)等神经变性疾病提供了神经替代治疗的理论基础。神经发生的增加出现在一些急性神经系统疾病(如缺血和癫痫),而在慢性神经变性疾病中的作用尚未确定,一些AD动物模型表现为神经发生受损。为弄清AD患者大脑的神经发生如何受到影响,美国加州Buck老年医学研究所Kunlin Jin等对标志海马新生神经元生成的未成熟神经标记蛋白进行了测定研究。     

利多卡因对慢性应激成年小鼠海马齿状回神经元再生的影响

目的观察利多卡因对慢性应激成年小鼠海马齿状回神经元再生的影响及其作用机制。方法将24只重约16—26g的成年雄性昆明种小鼠随机分为3个组（n=8）：（1）正常对照组（C组）：只注射生理盐水不接受应激刺激;（2）单纯慢性应激组（s组）：每日注射生理盐水后接受不同应激原的交替刺激;（3）慢性应激复合利多卡因用药组（L组）：每日注射利多卡因后接受不同应激原的交替刺激;反复应激14d后注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记处于分化期的细胞。实验结束时取小鼠肾上腺HE染色,并取海马区冰冻切片应用免疫组织化学的方法分别观察不同组小鼠Brdu阳性细胞和脑源性神经生长因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）的情况。结果与C组比较,S组小鼠肾上腺皮质排列不整、髓质结构不清;海马齿状回BrdU标记的新生细胞及脑源性神经生长因子减少（P〈0．05）;L组与C组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论成年小鼠海马齿状回存在神经元再生现象,慢性应激可以抑制神经元再生,利多卡因能够阻止这种抑制并可能是通过影响肾上腺皮质功能和脑源性神经生长因子等来促进神经元再生的。     

Noggin蛋白对D 半乳糖致衰老小鼠学习记忆及海马齿状回神经发生的影响

目的观察侧脑室注射Noggin蛋白后对D 半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆行为能力与海马齿状回神经发生的影响。方法采用皮下注射D 半乳糖构建衰老小鼠模型后,连续7?d侧脑室注射Noggin蛋白,对照组同时注射等量生理盐水,造模42?d后对各组小鼠进行Y迷宫学习记忆能力测试,用BrdU标记海马齿状回增殖细胞。 结果Y迷宫检测结果表明,模型组小鼠学习记忆能力较正常对照组明显降低（P<0.05）,而模型治疗组小鼠学习记忆能力较模型对照组明显改善（P<0.05）;模型组与模型对照组小鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组减少（P<0.05）,而模型治疗组BrdU阳性细胞数较模型组、模型对照组显著增多（P<0.05）。结论侧脑室给予Noggin蛋白可改善衰老模型小鼠的空间学习及记忆能力,可能与Noggin能保护海马神经元并促使齿状回神经干细胞增殖有关。        

Selective deletion of dnmts in excitatory neurons impairs recognition memory and synaptic function in hippocampal network of adult mice

Objective: DNA methylation is one of the most important epigenetic modulation, which is catalyzed primarily by three methyltransferases, DNMT1, DNMT3a and DNMT3b. The aim of our study is to investigate the modulatory effect of DNMTs on hippocampus-dependent memory formation, and to explore the underlying molecular, cellular and synaptic mechanisms. Methods: Dnmt1, 3a and 3b were selectively deleted in the CA1 region of dorsal hippocampus by Cre/LoxP recombinase systerm, either with virus-mediated Cre expression in CA1 of Dnmtsflox/flox mice or conditional αCaMKII-Cre; Dnmtsflox/flox mice. Hippocampus-dependent and hippocampus-independent memory performance were evaluated in adult KO and control mice. RNA-seq analysis was conducted to screen differential expression genes in the hippocampus after conditional Dnmts knockout. Real-time qPCR and Western blot analysis were used to confirm the differential expression. We also analyzed the alteration in DNA methylation by Whole Genome Bisulfite Sequencing. Neuronal excitability, synaptic transmission and plasticity were measured in CA1 pyramidal neurons of hippocampal slices. Finally, we checked whether virus-mediated shRNA expression in hippocampal CA1 could ameliorate abnormal synaptic function and memory deficit observed in αCaMKII-Cre; Dnmstflox/flox mice. Results: We found that both Dnmt1flox/floxDnmt3aflox/flox mice and Dnmt3bflox/flox mice receiving AAV-Cre virus infection into CA1 region displayed recognition memory deficit to object place, but normal memory to novel object. All mice showed similar performance in fear memory tests. Also, virus infection and Dnmts deletion did not changed anxiety- or depression-like behavior. The object place recognition memory deficit was also observed in both αCaMKII-Cre; Dnmt1flox/floxDnmt3aflox/flox mice and αCaMKII-Cre; Dnmt3bflox/flox mice. The Cre expression in αCaMKII-Cre mice was verified to be dominant in hippocampal CA1. RNA-seq based gene expression and followed real-time qPCR and western blot analysis confirmed significant upregulation of certain genes after Dnmts deletion in aCaMKII-expression excitatory neurons in the hippocampus. WGBS analysis showed differentiated DNA methylation in related genes. Normal basal synaptic transmission but impaired LTP was observed in SC-CA1 path of both αCaMKII-Cre; Dnmt1flox/floxDnmt3aflox/flox mice and αCaMKII-Cre; Dnmt3bflox/flox mice. AAV-virus mediated specific shRNA expression in CA1 region of dorsal hippocampus interfered upregulation of candidate genes, rescued abnormal synaptic function, and ameliorated object place cognition impairment in both αCaMKII-Cre;Dnmt1flox/floxDnmt3aflox/flox mice and αCaMKII-Cre;Dnmt3bflox/flox mice. Virus-mediated shRNA expression in CA1 region of dorsal hippocampus did not affect recognition memory to novel object. Conclusion: In conclusion, our findings suggest that Dnmts in CA1 excitatory neurons plays an important role in regulating synaptic function and hippocampus-dependent recognition memory process by control the expression of certain target genes.     

Notch1调控小鼠脑出血后海马神经发生与神经功能恢复

目的 探讨Notch1在小鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分裂方式影响中的作用以及对小鼠ICH后远期神经功能恢复的影响.方法 利用免疫荧光、Western blot、转轮实验和平衡木实验等方法检测小鼠脑出血后海马NSCs的分裂方式情况、Notch1蛋白表达情况和神经功能恢复情况.结果 与Sham组比较,ICH导致小鼠海马NSCs水平分裂的比例明显降低(P＜0.01),同时发现小鼠海马中Notch1的表达也明显降低(P＜0.05).促进ICH小鼠海马中Notch1的表达能够有效地增加小鼠海马NSCs水平分裂的比例(P＜0.01),维持NSCs的数量,同时能够有效地增加ICH后小鼠转轮实验掉落的潜伏期以及小鼠海马中DCX阳性细胞数(P＜0.01),维持神经发生的持续性,另外还能够减少ICH后小鼠平衡木行走实验腿的滑落次数(P＜0.01).结论 Notch1信号可以调控脑出血后小鼠海马NSCs的分裂方式以及促进远期神经功能恢复.     

Curcumin improves learning and memory ability and its neuroprotective mechanism in mice

Background Increasing evidence suggests that many neurons may die through apoptosis in Alzheimer＇s disease （AD）. Mitochonddal dysfunction has been implicated in this process of neuronal cell death. One promising approach for preventing AD is based upon anti-apoptosis to decrease death of nerve cells. In this study, we observed the memory improving properties of curcumin in mice and investigated the neuroprotective effect of curcumin in vitro and in vivo. Methods The mice were given AlCl3 orally and injections of D-galactose intraperitoneally for 90 days to establish the AD animal model. From day 45, the curcumin group was treated with curcumin for 45 days. Subsequently, the step-through test, neuropathological changes in the hippocampus and the expression of Bax and Bcl-2 were carried out to evaluate the effect of curcumin on the AD model mice. In cultured PC12 cells, AlCl3 exposure induced apoptosis. The MTT assay was used to measure cell viabilities; flow cytometric analysis to survey the rate of cell apoptosis; DNA-binding fluorochrome Hoechst 33258 to observe nuclei changes in apoptotic cells and Western blot analysis of Bax, Bcl-2 to investigate the mechanisms by which curcumin protects cells from toxicity. Results Curcumin significantly improved the memory ability of AD mice in the step-through test, as indicated by the reduced number of step-through errors （P 〈0.05） and prolonged step-through latency （P 〈0.05）. Curcumin also attenuated the neuropathological changes in the hippocampus and inhibited apoptosis accompanied by an increase in Bcl-2 level （P 〈0.05）, but the activity of Bax did not change （P 〉0.05）. AICI3 significantly reduced the viability of PC12 cells （P 〈0.01）. Curcumin increased cell viability in the presence of AICI3 （P 〈0.01）. The rate of apoptosis decreased significantly in the curcumin group （P 〈0.05） when measured by flow cytometric analysis. Curcumin protected cells by increasing Bcl-2 level （P 〈0.05）, but the level of Bax did not ch     

低氧预适应增强小鼠学习记忆能力

目的探讨脑低氧预适应对Balb／C小鼠学习记忆能力的影响，进一步研究低氧预适应的机制。方法选用清洁级成年健康雄性Balb／C交系小鼠，数字表法随机分为3组（n=12）：①对照组（H0）；②1次低氧组（H1）；③4次低氧组印低氧预适应组（H4）。然后行改良的Morris水迷宫测试：在一直径约为1米的圆形水槽边缘等距的四个点（NESW）处做好标记，在一固定位置放一玻璃平台，使槽中水面高于平台1．5厘米，水面覆以泡沫屑，小鼠在水迷宫中训练5日后，进行低氧预适应模型制备，随后分别在低氧处理后1小时、2小时、4小时、1天、2天、3天进行测试，共进行6个时段测试，每个时段4次，分别将小鼠从改良的Morris水迷宫的NESW4个起始点放入水槽中任其游动，寻找平台，记录每次的遗避潜伏期，将4次平均值作为该小鼠在该时段的成绩。然后比较各组测定的小鼠在迷宫中的逃避潜伏期，以确定低氧预适应对小鼠学习记忆能力的影响。结果H4组小鼠在低氧处理后4小时、1、2．3天的逃避潜伏期明显短于H0和H1组（P〈0．05）。结论脑低氧预适应能增强小鼠学习记忆能力，具体的产生机制需要进一步的研究。     

阻断内源性P75NTR对阿尔茨海默病小鼠海马神经干细胞增殖与学习记忆的影响

目的 研究阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)小鼠侧脑室注射p75NTR胞外段(extracellular domain of p75NTR, p75NTR-ECD) 阻断内源性p75NTR激活后对海马神经干细胞增殖和学习记忆影响.方法 选取12月龄APP/PS1双转基因AD小鼠16只,注射组(n=8)连续7 d 侧脑室注射p75NTR-ECD(1 μg/d),对照组(n=8)向侧脑室注射等量生理盐水,Morris 水迷宫检测空间记忆,腹腔注射BrdU检测海马齿回神经干细胞增值变化.结果 与对照组比较,注射组小鼠海马齿回BrdU阳性细胞数显著增加[(286.39±26.17)vs(142.01±18.12) ,P<0.01],行为学检测显示逃逸潜伏期明显缩短[(30.39±4.31) s vs (39.58±6.19) s, P<0.05]、穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率显著增加[(3.72±0.45)vs(2.54±0.32);(39.58±6.19)% vs (30.42±4.31)% ;P<0.05].结论 阻断内源性p75NTR激活可促进AD小鼠海马神经发生并改善AD小鼠学习记忆.     

七氟烷对小鼠短期记忆功能和海马突触短时程增强的影响

目的 观察七氟烷对小鼠短期内记忆能力及其对海马突触传递效能的影响.方法 昆明小鼠吸入七氟烷后12h、24h、72h,分别用Y型迷宫测试进行自发交替和活动能力,离体脑片细胞外记录技术观测海马短时程增强(STP)的变化.结果 与对照组比较,吸入1.5％七氟烷后12h可使小鼠的自发交替的百分率明显降低[(54.7±1.7)％,P＜0.01],活动能力明显下降(16.4±1.3,P＜0.01),在海马脑片上STP诱发后群峰电位(PS)幅值明显降低[(122.3±13.9)％,P＜0.05],但在吸入七氟烷后24h和72 h均无影响.在离体海马脑片直接应用七氟烷后,可使基础[(83.5±8.9)％,P＜0.01)]和强直后[(116.5±14.9)％,P＜0.01)]PS幅值降低,但冲洗后PS幅度可恢复.结论 七氟烷在短期内可明显抑制突触传递效能,损害记忆功能,但无远期作用.     

大豆磷脂酰胆碱提高幼年大鼠学习记忆能力及海马突触素的表达

目的:观察大豆磷脂酰胆碱(SB-pc)对幼年大鼠海马结构突触素(SYN)的免疫表达和空间辨别性学习记忆能力的影响. 方法:5 wk龄雄性Wistar大鼠21只,随机分为3组:①SB-pc添加喂养组(PC,n=8);②迷宫对照组(MC, n=7);③正常对照组(NC, n=6). 喂养8 wk,PC组和MC组大鼠在Morris水迷宫中进行连续4 d的空间辨别性学习记忆能力检测,计算机分析系统自动记录逃避潜伏期(escape latency, EL)等相关参数,分析大鼠行为变化. 用免疫组织化学方法检测PC、MC和NC各组大鼠海马结构SYN的免疫表达. 结果:逃避潜伏期(EL):PC组与MC组比较,差异有统计学意义(P<0.01). SYN免疫表达:PC组与MC组比较,大鼠海马结构各区SYN免疫反应阳性产物的吸光度值差异有统计学意义(P<0.01); MC组与NC组比较,差异有统计学意义(P<0.01). 结论:添加SB-pc喂养幼年大鼠,可促进其海马结构突触的增长,使SYN的免疫表达增强,提高了突触的可塑性,从而提高幼年大鼠的空间辨别性学习记忆能力.     

柴胡止血液含药血清的制备方法及对培养兔子宫组织NO分泌的影响

目的　研究用中药血清药理学方法制备柴胡止血液含药血清的标准。方法　观察给药 3天或 7天 ,灭活或未灭活处理制备的含药血清及空白血清对培养的兔子宫内膜组织块分泌一氧化氮 (NO)的影响。结果　与对照组比较 ,给药 3天未灭活的空白血清组有显著性差异 (P <0 0 1 ) ,给药 7天已灭活的空白血清组无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　 1柴胡止血液含药血清的制备应选取连续给药 7天后采集并需经灭活处理