人脑肿瘤中SV40大T抗原与pRb形成特异性复合物

目的：探讨ＳＶ４０早期基因编码产物大Ｔ抗原表达及与抑癌蛋白ｐＲｂ的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义。方法：采用免疫共沉淀ｅｓｔｅｒｎ印迹法检测４３例人脑肿瘤组织及５例正常人脑组织中Ｔａｇ的表达,并对１５例Ｔａｇ阳性瘤组织检测Ｔａｇ－ｐＲｂ复合物的存在。结果：Ｔａｇ在５例室膜瘤及２例脉络丛乳头状瘤中全部表达,垂体腺瘤,星形胶质细胞瘤,脑膜瘤,多形性胶质母细胞瘤及髓母细胞瘤均有Ｔａｇ的表达;     

SV40大T抗原在人脑肿瘤中的表达

目的　检测 Ｓ Ｖ４０ 早期区域基因编码产物大 Ｔ 抗原（ Ｔａｇ）在人脑肿瘤中的表达,探讨 Ｓ Ｖ４０ 与人脑肿瘤发生的病因学关系。方法　采用免疫共沉淀、银染色及 Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测 ６５ 例人脑肿瘤组织、８ 例正常人脑组织及 ２ 株人脑胶质瘤细胞系中 Ｔａｇ 的表达。结果　 Ｔａｇ 在 ８ 例室管膜瘤、２ 例脉络丛乳头状瘤及 ２ 株人脑胶质瘤细胞系中全部表达;垂体腺瘤 Ｔａｇ 阳性率为 ９０％ （９／１０）,星形胶质细胞瘤７３％ （１１／１５）,脑 膜瘤 ７０％ （７／１０）,多形性 胶质母细胞 瘤５０％ （４／８）,髓母细胞瘤 ３３％ （２／６）;５ 例少枝胶质细胞瘤、１例松果体瘤及 ８ 例正常人脑组织无 Ｔａｇ 表达。结论　 Ｓ Ｖ４０感染与人脑肿瘤的发生有一定关系。     

重组SV40大T抗原慢病毒表达载体的构建

目的 构建含有重组SV40大T抗原基因的慢病毒表达载体pLentiGFP-Tag,转染真核细胞Eca-9706并检测SV40大T抗原基因在真核细胞内的表达.方法 以PCR方法从含有SV40大T抗原基凶的质粒上扩增出SV40大T抗原基因作为靶基因;将其连接至pGEM-T Easy载体上,并对靶基因进行DNA测序确认;再将靶基因与慢病毒表达载体pLentiGFP重组构建成为PLentiGFP-Tag;以脂质体介导转染真核细胞Eca-9706,观察慢病毒表达载体所携带的GFP基闪在细胞内的表达,使用RT-PCR检测SV40大T抗原基因在细胞内的表达水平.结果 成功克隆SV40大T抗原基因,经由DNA测序确认;成功筛选出含SV40大T抗原基因正插子的慢病毒表达载体pLentiGFP-Tag;转染真核细胞Eca-9706后48 h,观察到绿色荧光的广泛表达并检测出宿主细胞内高效表达的SV40大T抗原mRNA.结论 成功构建含SV40大T抗原基因的慢病毒表达载体pLentiGFP-Tag,并观察到SV40大T抗原在真核细胞中的成功表达.     

人脑胶质瘤与SV40的关系及其p53、RB蛋白的表达

目的：探讨人脑胶质瘤与猴病毒４０（ＳＶ４０）的关系及其ｐ５３和ＲＢ蛋白的表达。方法：采用核酸原位杂交和免疫组织化学技术对２５６例人脑胶质瘤和１１例正常脑组织进行了ＳＶ４０ ＤＮＡ和抑癌基因产物ｐ５３、ＲＢ蛋白检测。结果：胶质瘤ＳＶ４０阳性１０４例,阳性率４０．６％,正常脑组织均未检测出ＳＶ４０ ＤＮＡ,未发现ＳＶ４０感染与胶质瘤病理分级存在明显相关（Ｐ〉０．０５）;ＳＶ４０阳性胶质瘤ｐ５３、ＲＢ蛋     

41例人脑胶质瘤组织中p53基因突变的研究

背景与目的:p53抑癌基因在细胞周期的调控、维持细胞基因组的完整性、诱导细胞分化和凋亡中起着重要作用。胶质瘤尤其是星形细胞肿瘤中,经常发生p53基因突变。本研究探讨人脑胶质瘤中p53突变及与胶质瘤发生发展的相关性。方法:应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerase chainreaction-single-strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)及DNA测序技术对41例不同类型人脑胶质瘤p53基因突变进行检测。结果:通过PCR-SSCP检测发现在41例人脑胶质瘤组织中有17例(41.5%)呈现p53基因的单链构象多态性改变,均位于5～8外显子,突变例数依次为7(41.2%)、1(5.9%)、4(23.5%)、5(29.4%)。Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中p53基因突变率明显高于Ⅰ、Ⅱ级肿瘤(58.3%vs.17.6%,P<0.01);DNA序列分析显示,17例PCR-SSCP检测阳性的肿瘤p53基因相应外显子均存在基因点突变或缺失,其中错义突变13例,占76.5%;同义突变2例,占11.8%;移码突变2例,占11.8%;碱基突变以G→A或A→G最多,占55.6%。结论:胶质瘤中p53突变多发生于第5、8外显子,基因突变类型以错义突变为主,该基因的突变与胶质瘤的发生及恶性进展过程相关。     

肿瘤抗原MAGE与p53关系的研究进展

黑色素瘤抗原 (melanoma-associated antigen gene,MAGE）属于癌睾抗原 (cancer/testis antigen,CTA）,CTA在正常组织中仅限于睾丸和胎盘中表达,而在各种肿瘤组织中呈高表达。基于肿瘤特异性基因表达和基因结构的不同,MAGE家族被分为两个亚家族：MAGE-I和MAGE-II,目前研究较多的是MAGE-I。MAGE-I蛋白在细胞增殖的通路调节中发挥了重要的作用,其机制是一些MAGE-I蛋白通过控制p53肿瘤抑制因子的表达来促进肿瘤发生发展。在本文中,我们将讨论MAGE-I蛋白对p53转录活性的调控机制,及其对肿瘤治疗新策略的贡献进行综述。     

大肠肿瘤组织p53、PCNA表达及其临床意义

目的：研究p53、PCNA（增殖细胞核抗原）在大肠肿瘤组织中表达及其临床价值。方法：应用免疫组化技术（S－P法）检测17例大肠腺瘤，7例腺瘤癌变，48例大肠癌组织表达。结果：大肠腺瘤p53阳性率为29．4％，腺瘤癌变为71．4％，大肠癌p53阳性率为56．3％，PCNA强阳性（＋＋）表达与p53阳性表达呈平行关系。结论：p53、PCNA过度表达代表腺癌细胞由良性向恶性转化区域，并与大肠癌的淋巴结转移和生存期相关。     

肾盂输尿管癌中p53基因突变及增殖细胞核抗原表达的临床意义

为探讨肾盂输尿管癌中ｐ５３基因突变及增殖细胞核抗原表达的临床意义，采用免疫组化Ｓ－Ｐ法，对４５例肾盂输尿管癌突变型Ｐ５３和增殖细胞核坑原表达进行研究。结果表明：突变型Ｐ５３阳性染占５３．３％，ＴＥ＋５４突变型Ｐ５３阳性表达，ＰＣＮＡ染色分级高于Ｔ１＋Ｔ２；Ｇ３突变型Ｐ５３阳性表达，ＰＣＮＡ染色分级高于Ｇ１＋Ｇ２。     

p53基因与大肠癌

自1979年Lane等SV40感染的小鼠细胞中发现p53基因以来,人们对p53基因的认识经历了：癌蛋白抗原、癌基因、抑癌基因三个阶段。近几年来,人们对p53基因在大肠癌的发生、转移及预后上的意义十分重视。现就p53基因的结构、D53蛋白功能的研究现状及其与大肠癌的关系作一简要综述：     

EXPRESSION OF SV40 Tag AND FORMATION Tag-p53 AND Tag-Rb COMPLEXES IN CHINESE BRAIN TUMORS

Simian virus 40 (SV40), one type of polyomavirus, is able to transform different species including human normal cells to the neoplastic phenotype cell. The biological plausibility of SV40 as a tumorigenic agent has been extensively demonstrated. SV40 is tumorigenic in rodents and can immortalize human epithelial cell lines in vitro. It is also understood that SV40 large tumor antigen (Tag) interferes with p53 and Rb gene functions, and it may induce chromosomal instability. Furthermore, th…     

P53蛋白在恶性肿瘤组织中的表达及其意义

应用抗Ｐ５３蛋白单克隆抗体和ＡＢＣ方法，对１８种不同组织来源的９１例肿瘤冰冻切片进行了免疫组化检测，结果在５５例恶性肿瘤中２８例呈阳性，阳性率为５０．９％，３６例良性肿瘤中仅１例阳性，阳性率为２．８％，在良，恶性肿瘤之间阳性有显著差异（Ｐ〈０．０１），结果表明，Ｐ５３蛋白的异常表达是恶性肿瘤常见的基因变化，Ｐ５３基因的改变可能为人类多种肿瘤恶性转化的原因之一。     

A Comparative Study of Glioma Cell Lines for p16, p15, p53 and p21 Gene Alterations

A total of 10 glioma cell lines were examined for alterations of the p16, p15, p53 and p21 genes, which are tumor suppressor genes or candidates with direct or indirect CDK-inhibitory functions. Genetic alterations (deletions or mutations) were frequently seen in the p16, p15 and p53 genes in these cell lines, but not in the p21 gene. When the states of the p16, p15 and p53 genes were compared among cell lines, all the cell lines showed abnormalities in at least 1 gene, often in 2 or 3 genes coincidentally, suggesting that dysfunction of these genes is closely related to glioma cell growth. Although alteration of all 3 genes was most frequent, there were cell lines having either p16/p15 or p53 or p16 and p53 gene alterations, suggesting that the time order of these genetic alterations was variable depending on the cell line. Among cell lines examined, one with homozygous p53 gene deletion seemed of particular practical value, since such a cell line might be useful in various studies, including investigation of the functions of various mutant p53 genes in the absence of heteromeric protein formation. On examination of the primary tumor tissues, the same alterations of the p16/p15 and p53 genes as detected in the cell lines were demonstrated in all 6 cases examined: p16/p15 gene deletion in 1, p16 gene mutation in 1 and p53 gene mutations in 5 cases. This suggested that the p16/p15 and the p53 gene alterations and their combinations in at least some glioma cell lines reflected those in the primary glioma tissues.     

反式-BPDE诱发人胎气管上皮细胞p53基因突变的研究

目的：探讨苯并（ａ）芘在人肺癌发生中的作用。方法：用苯并（ａ）芘的代谢产产物反式－ＢＰＤＥ,作地体外培养的大胎气管上皮细胞８～１２周后,用ＰＣＲ－ＳＳＣＡＰ方法检测Ｐ５３抑癌基因第６,７,８外显子的点突变情况。结果：经反式－ＢＰＤＥ处理的人胎气管上皮细胞,Ｐ５３第７,８外 有点突变,而这些细胞 出现典型的转化细胞形态特征的改变。结论：反式－ＢＰＤＥ可诱发人胎气管上皮细胞Ｐ３基因点突变,此抑癌基因的     

卵巢上皮性肿瘤中c—erbB—2及p53蛋白的表达及意义

目的：研究癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２,抑癌基因ｐ５３蛋白在不同性质卵巢上皮性肿瘤中的阳笥表达率及其与临床分期,病理分级的关系。方法：应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法,结果：ｃ－ｅｒｂＢ－２,ｐ５３蛋白在卵巢上皮良性肿瘤中表达限性,交界性肿瘤中表达分别为２２．２％,１６．７％,恶性肿瘤中阳性表达率分别为５１．６％,４３．８％。     

大肠癌患者及其家族成员外周血淋巴细胞p53基因突变研究

本文应用聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＤＲ－ＳＳＣＰ）银染技术对２０例大肠癌患者和２０例大肠癌家族成员的外周血淋巴细胞ｐ５３基因第５，６，７和８外显子进行检测，发现有６例大肠癌患者和５例家族成员存在基因突变，突变率分别为３０％和２５％，这一结果表明ｐ５３基因突变在大肠癌中的普遍存在，并在大肠癌的发生过程中起着重要作用；而家族成员中发现ｐ５３基因突变将可为癌症的癌前监控和预防提供重要佐证。     

Spontaneous immortalization of oligodendroglial cells derived from an SV40 T antigen-positive human glioblastoma multiforme

The polyoma group of viruses, including SV40, is known to be oncogenic in certain species. Here we report for the first time naturally occurring, immortalized tumor cells from a patient with glioblastoma multiforme (GBM); the cells were shown to be oligodendroglia; cells had developed remarkable chromosomal changes and were positive for SV40 T antigen. Therefore, we postulated that the main cause of immortalization of these cells was the expression of SV40 T antigen gene and protein. Since the cells are naturally generated, they will provide a useful model to study the function of oligodendroglial cells and the development of GBM.     

大肠癌的RFLP分析及其p53异质性变化的研究

应用检测肿瘤ＤＮＡ多态性的探针，对１５例大肠癌进行了ＬＯＨ分析。结果，探针ｐ１０－５（１７ｐ１３．１）在检出的８个信息个体中有５例发生了ＬＯＨ（占６２．５％）。而ｐＹＮＺ２２．１（１７ｐ１３．３），ｐ５３，ｐＭＳ１－３７（３ｐ１４．２）和ＤＲ７８（１ｐ２１－ｑｔｅｒ）探针的同源区并未检出ＬＯＨ。对１０例大肠癌还进行了ｐ５３ｍＲＮＡ的Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析，发现全部被检测样品均有一条２．８ｋｂ的ｐ５３ｍＲＮＡ杂交带。１０例中６例ｐ５３ｍＲＮＡ表达水平高于配对的正常组织，３例则降低。本研究提示，ｐ５３基因突变存在明显的异质性，同时还说明１７ｐ的ＬＯＨ可能是大肠癌发生过程中的一个至关重要的分子事件。