检测γ-谷氨酰转移酶mRNA亚型在肝癌早期诊断中的临床价值

背景及目的：与正常肝脏相比,肝癌细胞表达的γ－谷氨酰转移酶（GGT）有一独特的碳水化合物结构,这种GGT可作为肝癌诊断的重要指标。但是,在癌变过程中GGT基因的改变机制尚不清楚,本研究探讨GGTmRNA亚型的转化与原发性肝癌（HCC）发生的关系,寻找肝癌早期诊断的新方法。方法：以RT－PCR方法检测正常对照组,非癌肝病组,肝癌组及肝转移癌肝组织及外周血的三种GTTmRNA亚型（F,H,P亚型）。结果：正常肝组织,非癌肝组织及肝转移癌癌周组织主要的GGTmRNA类型为F亚型,肝癌组织,癌旁组织,及远离组织GGTmRNA-H亚型的阳性率显著高于正常肝脏及非癌肝病肝组织（P＜0．05）,肝癌组织GGTmRNA-F亚型阳性率明显低于正常对照及非癌肝病组（P＜0．05）。在26例HCC眙有12例外周血中检出GGTmRNA-H亚型,AFP阴性的10例HCC中有5例检出GGTmRNA－H亚型。结论：GGTmRNA亚型转化与肝癌发生有密切关系,分析GGT基因可望成为监测肝细胞癌变的灵敏方法。     

GPC3基因在原发性肝癌中的表达意义

目的分析GPC3基因在肝癌组织和癌周组织中的表达及对原发性肝癌的诊断价值。方法从20例原发性肝癌及相对应的癌周组织提取总RNA,利用RT-PCR方法对AFP、GPC3基因进行半定量分析。结果AFP、GPC3基因在癌组织和癌周组织的表达存在显著差异,在癌组织的表达率分别为70.0%和75.0%,联合应用达80.0%,在癌周组织的表达率均为10.0%,组织AFP mRNA的表达与血清AFP相关,而GPC3 mRNA的表达不受血清AFP值影响,在血清AFP≤20 ug/l的肝癌组织中,GPC3 mRNA表达率为40.0%（4/8）。结论GPC3 mRNA在肝癌癌组织中的表达明显高于癌周组织的表达,GPC3基因对血清AFP阴性肝癌有一定的辅助诊断意义,可能是肝癌的一种新的潜在的肿瘤特异标志物。     

原发性肝癌诊断中血清α-L-岩藻糖苷酶的价值

目的　探讨血清α L 岩藻糖苷酶 (AFU)在原发性肝癌诊断中的应用价值。方法　设定原发性肝癌组、继发性肝癌组、肝硬化组、正常对照组 ,比较各组测定的AFU水平 ;在原发性肝癌组中做血清AFU水平与TNM分期相关性分析并统计AFU及AFP阳性率 ;比较接受有效治疗前后原发性肝癌患者AFU水平的变化。结果　原发性肝癌组与其他各组比较 ,AFU差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。血清AFU水平与原发性肝癌TNM分期呈正相关 (P <0 .0 0 1) ,其中AFU阳性率 76 .6 % ,AFP阳性率6 4.5 % ,同时测定阳性检出率可达 86 .2 %。 36例经过有效治疗的原发性肝癌AFU值有显著性下降(P <0 .0 0 5 )。结论　AFU敏感性较高 ,与AFP协同应用将增加阳性检出率。有助于原发性肝癌的诊断、判断病情变化及治疗效果。     

肝癌及癌旁组织中p53基因及AFP、CEA等表达异常及相关性研究

目的 :从分子生物学及病理学角度对肝癌中抑癌基因p5 3和肿瘤标志物甲胎蛋白 (AFP)、癌胚抗原 (CEA)的表达及相关性进行研究。方法 :收集 4 0例肝细胞癌 (HCC)患者癌组织连带部分癌旁组织 ,用免疫组织化学法检测p5 3基因、AFP、CEA等。结果 :p5 3基因癌内表达率为 80 % ,癌旁组织为5 0 % ;AFP癌内表达率为 87 5 % ,癌旁组织为 80 % ;CEA癌内表达率为 5 5 % ,癌旁组织表达不明显。结论 :检测p5 3基因表达 ,并与AFP、CEA一起 ,对诊断肝癌、估计预后及制定术后治疗方案等有重要作用     

血清TGF-α水平对肝癌临床诊断的意义

目的 :检测血清TGF -α在肝癌临床的应用价值。方法 :采用放射免疫法检测 38例原发性肝癌、16例肝转移癌、2 0例肝硬化及 2 5例正常人的血清TGF -α含量 ,并与AFP值进行比较。数据用x±s表示 ,以正常人x± 2s作为上限计算TGF -α阳性率 ,以 4 0 0 μg/L为上限计算AFP阳性率。 结果 :肝硬化组与正常对照组血清TGF -α比较无显著性差异 (P >0 0 5 )。原发性肝癌组、肝转移组血清TGF -α水平显著高于正常对照组 (分别P <0 0 5、P <0 0 1) ;原发性肝癌Ⅲ期组血清TGF-α水平高于Ⅱ期 ,但无明显差别 (P >0 0 5 ) ;原发性肝癌组肝转移组血清TGF -α水平无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;肝转移组血清TGF -α和AFP阳性率分别为 6 8 8%和 0 % ;原发性肝癌组血清TGF -α和AFP阳性率分别为 78 9%和 6 8 4 %。结论 :肝癌患者血清TGF -α明显升高 ,血清TGF -α检测有助于肝癌的诊断、鉴别诊断 ,效果优于AFP ,但对原发性肝癌临床分期意义不大     

血清CEA、SF、AFP联合检测对肝转移癌的诊断价值

目的　探讨肝转移癌患者血清中CEA、SF、AFP检测及临床意义。方法　检测 134例肝转移癌和183例原发性肝癌血清的CEA、SF、AFP。结果　原发性肝癌的CEA、SF和AFP阳性率分别为 2 0 2 2 % ,81 4 2 %和 6 1 75 % ,肝转移癌的CEA、SF和AFP阳性率分别为 87 31% (P <0 0 1) ,72 39% (P >0 0 5 )和5 2 2 % (P <0 0 1)。肝转移癌化疗前后的血清CEA有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　检测CEA对肝转移的诊断、治疗及预后有明显的指导意义。     

生长抑素受体亚型SSTR-2和SSTR-3mRNA在原发性肝癌中的表达

目的：了解原发性肝癌组织中生长抑素受体（somatostatin receptor,SSTR）亚型SSTR-2和SSTR-3基因的表达情况。方法：采用逆转录-PCR法检测27例原发性肝癌患者组织和癌旁组织中生长抑素受体亚型SSTR-2和SSTR-3 mRNA的表达。结果：27例原发性肝癌患者的癌组织和癌旁组织SSTR-2 mRNA的表达阳性率分别为81.5%(22/27)和96.3%(26/27);SSTR-3 mRNA在肝癌组织中表达的阳性率为66.7%(18/27),在癌旁组织中的阳性率为51.9%(14/27)。结论：大多数原发性肝癌肿瘤组织中有一种以上生长抑素受体亚型基因的表达。     

CA125和AFP检测对原发性肝癌诊断的比较

目的　分析CA12 5和AFP在原发性肝癌患者血清中的表达情况。　方法　采用放免分析对 6 3例原发性肝癌患者进行血清CA12 5和AFP的检测 ,统计分析两项指标的表达情况 ,并进行比较。结果　CA12 5和AFP的含量分别为 172 8± 2 0 0 5ku/L ,2 6 2 4± 2 86 3ug/L。以CA12 5 >35ku/L ,AFP>2 0ug/L为原发性肝癌诊断标准 ,其阳性率分别为 6 9 8%和 6 8 3% ,两者联合检测阳性率为 87 3%。统计学Ridit分析 ,两者表达阳性率无显著性差异 ;相关性分析 ,两者无线性相关关系存在。CA12 5和AFP单项检查的阳性率分别与联合检查的阳性率进行X2 检验 ,均有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　CA12 5是一项较好的原发性肝癌诊断标志物 ,与AFP阳性率无显著性差异 ,与AFP无相关性。联合检测可显著提高诊断阳性率。     

肝癌组织中雌激素受体基因启动子甲基化及临床研究

目的：研究原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织中ER基因启动子甲基化修饰与临床病理特征间的关系,同时观察5-杂氮胞苷对ER mRNA表达的影响.方法：分别采用MSP和RT-PCR方法检测30例HCC及癌旁组织中ER基因启动子甲基化修饰状况及ER mRNA的表达状况,并用5-杂氮胞苷处理肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2.结果：30例HCC组织中ER启动子甲基化修饰阳性率为60.0% （18/30）,而30例癌旁组织中ER基因启动子甲基化修饰阳性率为30.0%（9/30）,两者差异有统计学意义,χ^2=5.46,P= 0.037.30例HCC组织中ER mRNA阳性表达12例（40.0%）,其中甲基化组织和未甲基化组织中ER mRNA表达率分别为22.2%和66.7%.ER启动子甲基化修饰与mRNA表达呈负性相关,χ^2=5.93,P=0.024.同时,ER启动子区甲基化修饰与肝癌患者血清AFP含量增高呈正相关,χ^2=12.13,P=0.001.细胞培养结果提示低浓度的5-杂氮胞苷可诱导肝癌细胞系ER mRNA重新表达.结论：肝癌组织中ER启动子甲基化修饰是个频繁事件,因此沉默ER基因的表达有可能促进肝癌的发展.     

肝细胞肝癌中hTERT基因表达及其与肿瘤临床病理特征的关系

目的:研究hTERT基因在肝细胞肝癌中的表达,探讨其在肝细胞肝癌发生发展中的作用及意义。方法:应用免疫组化(SP法)和半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)同步检测62例肝细胞肝癌及对应癌旁组织、8例正常肝组织中hTERT蛋白及hTERTmRNA的表达情况,分析hTERT基因的表达与肝细胞肝癌临床病理参数的关系。结果:hTERT蛋白主要定位于肝癌细胞胞质内,偶见核内染色。hTERT蛋白和hTERTmRNA在肝细胞肝癌中的阳性率分别为88.71%(55/62)、82.26%(51/62),分别明显高于癌旁肝组织的阳性率9.68%(6/62)、6.45%(4/62),差异具有非常显著性(P<0.01)。hTERT蛋白及其mRNA在8例正常肝组织均未见表达,阳性率为0.00%(0/8)。统计学分析显示,在肝细胞肝癌中hTERT基因的表达与肿瘤分期分级、门静脉有无癌栓、血清中甲胎蛋白表达水平、是否合并HBV感染等有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小等因素无关。结论:hTERT基因可能在肝细胞肝癌的发生发展中起着重要作用,其表达有望成为肝细胞肝癌的重要分子生物学指标。     

肝癌及癌旁组织中p53基因及AFP、CEA等表达异常及相关性研究

目的　从分子生物学及病理学角度对肝癌中抑癌基因p5 3和肿瘤标志物AFP(甲胎蛋白 )、CEA(癌胚抗原 )的表达及相关性进行研究。方法　收集 40例肝细胞肝癌 (HCC)患者癌组织连带部分癌旁组织 ,用免疫组织化学法检测p5 3基因、AFP、CEA等。结果　p5 3基因癌内表达为 80 % ,癌旁组织为 5 0 % ;AFP癌内表达为 87.5 % ,癌旁组织为80 % ;CEA癌内表达为 5 5 % ,癌旁组织表达不明显。结论　检测 p5 3基因 ,并与其它肿瘤标志物和相关基因一起 ,在基因水平诊断肝癌、估计预后及制定术后治疗方案等有着重要作用。     

HS-AFP在肝癌早期诊断及鉴别诊断中的价值

目的：探讨肝癌特异性甲胎蛋白（HS—AFP）对肝细胞癌的诊断及鉴别诊断价值。方法：对105例肝癌患者及151例良性肝病血清HS—AFP及AFP进行检测，并对10例HS—AFP阳性的良性肝病患者进行15个月随访观察。HS—AFP采用不连续缓冲系统PAGE结合Westernblot分离检测，AFP采用化学发光法测定。结果：105例肝癌患者HS—AFP和AFP〉200μg／L阳性率分别为60．0％和50．5％（P〉0．05），良性肝病患者HS—AFP阳性率显著低于AFP〉200μg／L的阳性率（P〈0．05）。AFP处于50～400μg／L范围的肝癌组HS—AFP阳性率为77．1％，良性肝病组阳性率为13．6％（P〈0．01），151例良性肝病中有10例HS-AFP出现阳性，其中3例于随访期间检出肝癌。11例小体积肝癌HS—AFP阳性率（45．5％）高于AFP〉200μg／L的阳性率（18．2％）。结论：HS—AFP对肝癌的诊断价值优于AFP浓度。对肝癌高危人群监测HS—AFP有助于肝癌的早期诊断。对血清AFP中低浓度升高的良恶性肝病有较高的鉴别诊断价值、     

联合检测血AFP、CA19-9和CA125对原发性肝癌诊断的意义

目的研究联合检测血清AFP、CA19-9和CA125对原发性肝癌诊断的临床价值.方法采用回顾性分析的方法对76例原发性肝癌患者的临床资料进行分析.结果单独检测血AFP、CA19-9、CA125对原发性肝癌诊断的阳性率分别为72.4%、53.9%和47.4%,联合检测三种肿瘤标志物的阳性率为92.1%(P＜0.05).结论三种肿瘤标志物的联合检测有助于提高原发性肝癌患者诊断的阳性率,特别对AFP阴性和低阳性度肝癌的诊断有一定的帮助.     

血AFP、CEA、CA-50、CA-199联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的　探讨肿瘤标志物AFP、CEA、CA -5 0、CA -199联合检测对原发性肝癌的诊断价值。方法　选择原发性肝癌 32例 ,行血清AFPRIA、CEARIA、CA -5 0IRMA、CA -199IRMA检测。结果　原发性肝癌 32例血AFP、CEA、CA -5 0、CA -199四项联合检测阳性符合率 10 0 % ,而各单项检测AFP为 6 8 8% (P <0 0 1) ,CEA 15 6 % (P <0 0 0 1) ,CA -5 0 78 1% (P <0 0 5 ) ,CA -19975 % (P <0 0 5 )。在原发性肝癌AFP阴性 10例中 ,血CEA值增高 2例 (2 0 % ) ,血CA -5 0值增高 9例 (90 % ) ,血CA -199值增高 8例 (80 % )。结论　血AFP、CEA、CA -5 0、CA -199四项标志物联合检测优于各单项检测 ,CA -5 0、CA -199对血AFP阴性原发性肝癌阳性符合率高 ,血CEA原发性肝癌诊断性符合率低 ,诊断意义较小。     

人肝癌、癌旁组织中AFPmRNA的差异性分析

本研究用RT-PCR方法检测52例原发性肝癌(HCC)病人手术标本中AFPmRNA转录水平,结果发现,AFPmRNA在肝癌组织中阳性率为76.9%;有慢性肝病(尤其是中重度肝硬化)的病人癌组织中AFP表达的阳性率可达88.8%,癌旁为69.4%;无慢性肝病(肝硬化)的病人中,其癌组织中AFPmRNA阳性率为50%,癌旁组织中无AFP表达.由此可见,AFP蛋白是由肝癌细胞特异表达的,或由正发生突变的肝细胞表达的.另外,本文还研究了AFRmRNA与肿瘤大小、包膜、肝内转移以及与血清AFP水平的关系.     

联合检测血清GP73和AFP对原发性肝癌诊断价值的探讨

目的:探讨血清高尔基体糖蛋白(GP73)对原发性肝癌的诊断价值,分析GP73和甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌诊断的临床意义。方法:应用双抗体夹心酶联免疫定量测定方法,检测144例原发性肝细胞癌、50例肝硬化、100例乙型肝炎、50例其他恶性肿瘤、26例肝良性肿瘤、84例HBV携带者和50名健康体检者血清中GP73的浓度,应用临床电化学发光法测定AFP作为参照。结果:原发性肝细胞癌患者血清GP73水平明显高于肝硬化、乙型肝炎、其他恶性肿瘤、肝良性肿瘤、HBV携带者和正常人对照组,P<0.05。通过ROC曲线设定GP73浓度,GP73为64ng/mL作为肝癌诊断的临界值切点(cut-off)时,GP73检测原发性肝细胞癌的敏感度和特异度达到最高,分别为83.3%和88.3%。在原发性肝细胞癌组,GP73诊断肝癌的敏感度和特异度与AFP比较差异有统计学意义(83.3%vs 72.2%,88.3%vs 76.7%),P<0.05;GP73+AFP联合检测可使敏感性提高到94.4%,特异性为65.6%。结论:GP73诊断原发性肝细胞癌有较好的敏感性和特异性,而GP73与AFP联合检测的敏感性比单项检测均高。联合检测血清中的GP73和AFP可提高原发性肝细胞癌的诊断价值。     

肝细胞癌端粒酶活性及hTERT mRNA表达与术后早期复发的关系

目的：研究肝细胞癌端粒酶活性及人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达与肝细胞癌术后早期复发的关系。方法：采用ELISA—TRAP法检测60例肝癌组织及其癌旁组织端粒酶活性，RT—PCR法检测hTERT mRNA表达，5例正常肝脏组织作为对照。分析端粒酶活性及hTERT mRNA表达与临床病理之间的关系。结果：肝癌组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达阳性率分别为86．7％（52／60）及90％（54／60），癌旁组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达阳性率分别为40％（24／60）及43．3％（26／60）。正常肝脏组织均未检测到端粒酶活性及hTERT mRNA表达。癌旁组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达与术后早期复发及包膜浸润、门静脉侵犯、肝内转移等恶性肿瘤的恶性生物学行为有关。结论：癌旁组织端粒酶活性及hTERT mRNA表达可能是肝细胞癌术后早期复发的预后指标。     

血清F对AFP阴性或低浓度原发性肝癌的诊断分析

为了探讨血清F对AFP不同浓度的原发性肝癌的诊断意义，自1993年1月至1994年12月，对243例原发性肝癌和46例健康对照组进行了血清AFP、F的检测。结果显示：原发性肝癌的血情AFP（＞400μg/L）、F（男＞250μg/L、女>150μg/L）的阳性率分别为47．7%,72．4%，与对照组比较二者差异均有高度显著性（P均＞0．01）。在AFP阴性、低浓度和阳性中F阳性率分别为73．2%（93／127）和71．6（83／116），二者比较差异无显著性（P＞0．05）。结果表明：F对原发性肝癌有诊断意义，尤其对AFP阴性、低浓度的原发性肝癌的诊断具有重要价值。     

血清肿瘤标志物联合检测在原发性肝癌诊断中的价值

目的探讨血清甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原199(CA199)和癌胚抗原(CEA)联合检测在原发性肝癌诊断中的价值。方法选择2010年9月至2013年12月间收治的原发性肝癌患者60例作为观察组,选取同期健康体检者60例作为正常对照组,两组均进行了血清AFP、CA199和CEA检测,并进行了诊断判断。结果观察组患者的血清AFP、CA199和CEA含量明显高于对照组,阳性率也均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,CA199和CEA的诊断敏感度高,而AFP的诊断特异度高。联合检测显示,观察组的诊断阳性率为98.3%,而对照组的诊断阳性率为0。结论血清AFP、CA199和CEA联合检测能提高原发性肝癌检出率,有助于肝癌的早期诊断、疗效判断及随访预后。     

肝癌特异GGTⅡ快速测定法的建立及初步临床应用

目的　研究建立一种肝癌特异 GGT 快速测定方法用于肝癌的早期诊断或作为其它肝癌标志物的补充。方法　利用免疫学和生物化学方法将肝癌特异 GGT 抗体吸附并固定到醋酸纤维薄膜上 ,对患者血清中 GGT 进行定性检测。结果　本法对原发性肝癌 (PHC)诊断敏感性为 84.82 % ,特异性为 96.4% ,对继发性肝癌 (MHC)诊断阳性率为 45.78% ;本法对 AFP阴性的 PHC病人检测阳性率可达 60 .61 % ,可有效补充 AFP阳性率较低的不足 ;本法检测不需要贵重仪器设备 ,仅需指端采血即可进行 ,1 0分钟出结果。结论　本法简便、快速、微量、灵敏、经济 ,可用于 PHC的诊断 ,鉴别诊断以及 PHC的早期发现 ,也可作为其它肝癌标志物的补充在临床应用。