不同产地的龙葵果中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定比较研究

目的比较不同采收期、同部位龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。方法采用高效液相色谱法测定不同产地龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。结果以吉林产的鲜龙葵果含含澳洲茄碱、澳洲茄边碱的量最高,安徽,辽宁,河北等地的龙葵干果的含量也较高。结论不同产地的龙葵果中鲜果与干果里面所含有澳洲茄碱以及澳洲茄边碱的含量存在显著性差异,应注意采时的产地和龙葵果的新鲜程度对龙葵药材质量的影响。     

龙葵不同采收期及不同部位中澳洲茄碱与澳洲茄边碱的含量分析

目的比较不同采收期、不同部位龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。方法采用高效液相色谱法测定不同采收期、不同部位龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量。结果 6~8月采集的样品中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量以7月份最高。龙葵全草、果实、茎、叶、果柄中,果实含量最高。结论不同采收期、不同部位龙葵中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量存在明显差异,应注意采收季节和药用部位对龙葵药材质量的影响。     

龙葵药材中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的含量测定

目的:寻找可以作为评价龙葵药材质量的指标成分,提高龙葵药材的质量标准。方法:采用柱层析方法分离化学成分,应用光谱法进行结构鉴定,用高效液相色谱法测定其在龙葵药材不同部位的含量。结果:从龙葵药材中分离并鉴定了2个含量较高的甾体类生物碱苷澳洲茄碱(solasonine)和澳洲茄边碱(solamar-gine);建立了龙葵药材中澳洲茄碱、澳洲茄边碱的HPLC含量测定方法。结论:这两种生物碱在龙葵药材中含量较高,可用于龙葵药材的质量控制。     

澳洲茄边碱提取纯化工艺及其抗肿瘤作用的研究

目的:从龙葵中提取纯化澳洲茄边碱,并探讨其抗肿瘤活性.方法:龙葵药材粗粉80％乙醇回流提取,以硅胶柱色谱和重结晶的方法纯化澳洲茄边碱,最后鉴定结构和检查纯度;MTT法筛选澳洲茄边碱对人肿瘤细胞的体外生长抑制作用,并研究其对肝癌H22和EAC小鼠移植瘤的作用.结果:澳洲茄边碱含量达到97.9％;体外对6种肿瘤细胞均具有明显抑制作用,并且在2.4 mg· kg-1的给药剂量下对肝癌H22和EAC小鼠移植瘤具有明显的抑制作用.结论:澳洲茄边碱具有较好的抗肿瘤效果.     

龙葵中澳洲茄边碱的提取工艺

目的:研究龙葵药材中澳洲茄边碱的最佳提取工艺。方法:以澳洲茄边碱提取率为指标,采用L9(34)正交试验,考察乙醇体积分数、料液比、提取时间及提取次数对提取率的影响,优选出最佳的提取工艺。用高效液相法测定澳洲茄边碱的含量。结果:优选出的澳洲茄边碱最佳提取工艺为用80%乙醇20倍量回流提取2次、每次4 h。结论:提取工艺合理可行,适用于龙葵中澳洲茄边碱的提取。     

龙葵药材质量标准

目的:修订和完善龙葵药材的质量标准.方法:依据2010年版《中国药典》附录药品标准研究方法对龙葵药材进行显微、薄层鉴别,对10批龙葵药材的水分、灰分、酸不溶性灰分进行检查,并测定其有效成分含量.结果:确定了龙葵药材的显微特征,并建立了其TLC鉴别方法;水分不得＞10.0％,酸不溶性灰分不得＞3.0％;澳洲茄碱进样量在1.002～20.04μg内呈良好线性关系,澳洲茄边碱进样量在1.023 ～20.46 μg内呈良好线性关系.结论:不同产地所含澳洲茄碱与澳洲茄边碱的总量差异较大,建立的方法能准确反映龙葵的内在质量,可作为龙葵药材质量标准的修订内容.     

假烟叶树叶中澳洲茄碱和澳洲茄边碱的HPLC-ELSD测定

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)测定假烟叶树叶中澳洲茄碱和澳洲边茄碱的方法。方法通过方法学要素考察检测方法的可行性。结果以0.1%三氟乙酸水溶液和乙腈作为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃;ELSD漂移管温度70℃,雾化管温度30℃,载气压力35psi,经梯度洗脱,澳洲茄碱和澳洲茄边碱达到良好分离;样品用质量50倍的1%甲酸甲醇在60℃超声提取30min,提取液直接进样。澳洲茄碱对照品在0.62～6.2g线性关系良好,加标回收率为100.95%;澳洲茄边碱在0.2～7.5g线性关系良好,加标回收率为95.34%。测定样品中澳洲茄碱含量为1.19mg/g;澳洲茄边碱含量为1.06 mg/g。结论该方法能准确快速地测定假烟叶中澳洲茄碱和澳洲茄边碱的含量。     

基于多指标结合化学计量学的龙葵果质量评价研究

目的 采用多指标结合化学计量学的方法综合分析龙葵Solanumnigrum果质量及关键指标,为其质量评价提供科学依据。方法 采用HPLC法建立龙葵果特征指纹图谱及澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定方法,并测定浸出物含量,使用SAS 14.0、SIMCA14.1软件对上述指标进行聚类分析（hierarchical clustering analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）及偏最小二乘判别分析（discriminant analysis of partial least squares analysis,PLS-DA）,通过对吉林产地25批不同产区、不同采收期药材的分析,综合评价龙葵果质量及标志性成分。结果 建立的特征指纹图谱及澳洲茄碱、澳洲茄边碱含量测定方法稳定性较好。HCA分析可将25批样品聚为2大类,分类主要与产区有关,I类药材为铁东区及梨树县的孤家子、榆树台产区;II类药材为梨树县的杏山、北夏家、泉眼沟、獾子洞产区。用3个主成分对龙葵果药材进行综合评价,结果表明I类药材综合得分及排名较高,质量较优。根据PLS-DA分析...     

龙葵药材质量标准的研究

目的修订和完善龙葵药材质量标准。方法参照2015版《中国药典》附录相关方法,采用TLC方法鉴别龙葵药材,利用HPLC-ELSD检测指纹图谱。采用HPLC-ELSD测定效应成分澳洲茄碱和澳洲茄边碱的含量,同时测定水分、总灰分、酸不溶性灰分和醇溶性浸出物的含量。结果建立了龙葵药材的TLC鉴别方法,获得了对照指纹图谱。10批药材中,澳洲茄碱和澳洲茄边碱含量范围分别为0.106‰~0.785‰和0.137‰~1.076‰;水分不得过11.6%,总灰分不得过13.2%,醇溶性浸出物不得少于10.6%。结论建立的方法能够准确反应龙葵的内在质量,可作为龙葵药材质量标准的修订内容。     

龙葵抗肿瘤成分及其作用机制研究进展

龙葵是治疗肿瘤的常用中药,含有多种抗肿瘤活性成分,如龙葵碱、澳洲茄边碱、龙葵酸、澳洲茄碱、澳洲茄胺、去半乳糖替告皂苷、槲皮素、薯蓣皂苷元等,可治疗胃癌、肺癌、大肠癌、乳腺癌、膀胱癌、肝癌、骨肉瘤、前列腺癌等恶性肿瘤。其抗肿瘤作用及机制主要包括抑制增殖生长、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、抑制上皮-间质转化和转移、逆转耐药、增强放化疗和靶向治疗疗效等。     

24个产地龙葵中澳洲茄碱的含量测定

目的:对来自10个省市、24个产地的不同生境、生长周期的龙葵中澳洲茄碱进行分析.方法:采用HPLC,AgilentTc-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm);以乙腈-0.5%磷酸水溶液作为流动相,梯度洗脱;检测波长为203 nm;体积流量:0.9mL/min;柱温为30℃.结果:龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地、生境及生长周期不同差异很大.尤以生境及生长周期对澳洲茄碱的含量影响最为显著.结论:龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地、生境及生长周期不同差异很大,因此控制龙葵药材的来源及最佳采收期,以保证龙葵药材的质量.     

龙葵中澳洲茄碱含量的动态规律

目的：通过研究龙葵不同产地、生长周期及药用部位中澳洲茄碱的动态规律,为进一步优化龙葵的采收期、药用部位及栽培提供依据。方法：采用HPLC,AgilentTC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm）;以乙腈-0.5%磷酸水溶液作为流动相,梯度洗脱;检测波长为203 nm;体积流量：0.9 mL·min-1;柱温为30 ℃。结果：龙葵药材中澳洲茄碱含量因产地不同差异很大。龙葵地上部分澳洲茄碱含量的高低主要取决于所结果实的多少,以盛果期含量最高;不同成熟程度果实中澳洲茄碱含量的规律为：成熟果实＜青果＜幼果。结论：在龙葵的生长过程中,龙葵中澳洲茄碱的含量随着其生长发育进程而发生变化。根据龙葵不同生长阶段所含澳洲茄碱在各器官中的含量变化,龙葵的最佳采收期为盛果期,最佳药用部位为幼果和青果。     

龙葵单体澳洲茄边碱对大肠癌HCT116细胞增殖和凋亡作用

目的:观察龙葵单体澳洲茄边碱对人大肠癌HCT116细胞增殖及凋亡作用。方法:不同浓度澳洲茄边碱作用HCT116细胞。CCK-8法检测细胞增殖,平板法检测克隆形成,Annexin V-APC/PI标记流式细胞仪检测细胞凋亡,试剂盒检测Caspase-3活性。结果:澳洲茄边碱可抑制HCT116细胞增殖,呈剂量与时间依赖性。澳洲茄边碱可抑制HCT116细胞克隆形成,呈剂量依赖性。澳洲茄边碱可促HCT116细胞凋亡。澳洲茄边碱同时可增强HCT116细胞Caspase-3活性。结论:澳洲茄边碱可以抑制HCT116细胞增殖和克隆形成,促HCT116细胞凋亡,其机制与活化Caspase-3相关。     

龙葵果的神经药理活性

龙葵Solanum nigrum L.是常用草药,其果实在墨西哥用作健神药,人们亦用它治疗神经官能症。从该植物中已分离鉴定澳洲茄次碱(solasodine)、澳洲茄碱(solasonine)、茄啶(solanidine)等化合物,但其神经药理作用尚未阐明。作者研究了龙葵果乙醇提取物的神经药理活性。将龙葵果碾碎并制成乙醇提取物,收率为7.9％。用大鼠观察其对戊巴比妥睡眠时     

龙葵愈伤组织生长特性及次生代谢产物积累研究

目的 建立龙葵Solanumnigrum愈伤组织最优培养体系，研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累，为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法 研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响，采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比，运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量，TTC还原法测定细胞活力，邻苯二酚法测定多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）活性，氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性，愈创木酚比色法测定过氧化物酶（peroxidase,POD）活性，硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量，高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量。结果 愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段，最适培养基为MS+1.43 mg/L NAA+2.15 mg/L 6-BA+2.48 mg/L KT，愈伤组织增殖最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。愈伤组织鲜质量增长量呈“S”型趋势，20 d时细胞活力达到最高峰...     

反相高效液相色谱法同时分析龙葵中3种甾体生物碱

目的:利用反相高效液相色谱法快速测定龙葵中3种甾体生物碱的含量.方法:采用Agilent Zorbax SB-C1s(4.6mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-1%磷酸为流动相,流速1.0 mL·min-1,进样量20μL,柱温30℃,205 nm条件下检测,以梯度洗脱方式在30 min内分离了澳洲茄碱、澳洲茄边碱和khasianine 3种生物碱.结果:澳洲茄碱含量测定的线性范围为0.860～10.320μg(r=0.999 7);澳洲茄边碱含量测定的线性范围为0.726～8.710μg(r=0.999 7);khasianine含量测定的线性范围为0.696～8.352μg(r=0.9998).方法的平均回收率分别为100.18%,99.08%,99.88%.结论:方法简便快速、准确度高,可用于龙葵药材的质量评价.     

龙葵果HPLC指纹图谱研究

目的:建立龙葵果的HPLC指纹图谱分析方法,为该药材的鉴别及质量评价提供依据。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温为25℃,流速为1.0 m L/min,检测波长为205 nm,进样量10μL,分析龙葵果的HPLC图谱;采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004 A版)进行相似度评价。结果:建立了10批龙葵果药材的指纹图谱,确定了12个共有峰,指认了澳洲茄碱、澳洲茄边碱2个特征峰。结论:建立的龙葵果HPLC指纹图谱可为该药材的鉴别及质量评价提供更全面的参考。     

RP-HPLC测定水茄果实不同提取物中澳洲茄碱含量

目的:建立水茄果实提取物中澳洲茄碱的含量测定方法,并比较不同提取物中澳洲茄碱的含量。方法:通过系统溶剂萃取法提取水茄果实中澳洲茄碱,比较不同提取部位中该成分含量。采用HPLC测定澳洲茄碱含量,流动相乙腈-0.2%磷酸溶液(15∶85),流速0.5 mL·min-1,检测波长250 nm,柱温30℃。结果:澳洲茄碱在2~80μg呈良好线性关系,平均回收率100.93%,RSD 0.60%。水洗脱部位、10%乙醇洗脱部位、30%乙醇洗脱部位、50%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位、95%乙醇洗脱部位、石油醚萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位和水相样品中澳洲茄碱分别为0.062 9,0.939 0,0.020 5,0.118 0,0.005 1,0.004 4,0.010 6,0.031 4,0.070 5,0.113 0 mg·g-1。结论:该方法简便、准确、专属性强,可作为水茄果实提取物中澳洲茄碱的含量测定方法,不同提取部位中该成分含量差异较大。     

澳洲茄碱和澳洲茄胺抑制肺癌细胞的构效比较

目的:探讨澳洲茄碱及其水解苷元澳洲茄胺对肺癌细胞抑制的构效关系。方法:MTT法检测澳洲茄碱及澳洲茄胺对A549和LLC细胞抑制作用;以20μg/m L的澳洲茄碱和8μg/m L澳洲茄胺分别处理A549细胞24h,观察细胞形态,并经定量PCR检测p53靶基因Bax和Puma表达水平。结果:对A549和LLC细胞,澳洲茄胺的24h IC_(50)大约都为7.5μg/m L,澳洲茄碱的大约都为19μg/m L。形态学观察表明澳洲茄胺和澳洲茄碱处理的A549细胞都呈现细胞膜皱缩的垂死形态。定量PCR数据显示,与溶媒相比澳洲茄碱及澳洲茄胺都显著提高了p53通路Puma基因表达水平(P0.001和P0.05)。结论:澳洲茄碱及澳洲茄胺对癌细胞抑制量效模式相同,有效部位是苷元,作用机制是诱导细胞死亡,分子机制可能是通过上调Puma表达而激活p53信号通路。     

薄层扫描法测定龙葵中澳洲茄胺的含量

 目的：探讨龙葵中澳洲茄胺的含量测定。方法：采用薄层扫描法进行含量测定。结果：龙葵全草中澳洲茄胺含量为0．0928％，果实中含量为1．16％。结论：本法灵敏，稳定，可用于龙葵的质量控制。