基于HPLC指纹图谱与核苷类成分含量测定的鸡内金质量评价研究

鸡内金为雉科动物家鸡Gallus gallus domesticus的干燥沙囊内壁,是中医临床常用的消食类中药。但由于质地和组成的特殊性,其有效成分至今未明确,也缺乏质量评价指标。该研究采用UPLC-Q-TOF-MS对鸡内金水提液的化学成分进行分析,首次从中鉴定出10种核苷类成分;采用HPLC建立了鸡内金水提液的指纹图谱,并对7种核苷类成分进行定量分析。40批鸡内金样品指纹图谱相似度为0.765～0.959,表明不同炮制方法的鸡内金饮片差异较大。进一步采用SPSS 22.0和SIMCA 14.1软件对鸡内金19个共有峰的峰面积进行聚类分析和主成分分析,40批样品可按生鸡内金、炒鸡内金、醋鸡内金明显分为3类;采用正交偏最小二乘法判别分析标记了鸡内金中8个差异性成分,其中2个为腺嘌呤和胸腺嘧啶。含量测定结果表明,7种核苷类成分总量在生鸡内金、炒鸡内金、醋鸡内金中分别为182.5～416.8、205.3～368.7、194.2～283.0μg·g^-1。次黄嘌呤、胸腺嘧啶和胸苷的含量在不同炮制方法的饮片间均存在显著性差异(P<0.05),从高到低排序均为炒鸡内金&g...     

冬虫夏草中主要核苷类成分测定

目的:通过使用灵敏、可靠的液相色谱-质谱联合同时进行分离和电喷雾电离质谱的方法(LC/ESI-MS)检测冬虫夏草中胸腺嘧啶、腺嘌呤、腺苷和虫草素。开发新的检测冬虫夏草中主要核苷类成分的方法。方法:使用液相色谱-质谱联合同时进行分离和电喷雾电离质谱的方法(LC/ESI-MS),检测冬虫夏草中胸腺嘧啶,腺嘌呤,腺苷和虫草素。结果:该方法成功用于同时检测冬虫夏草中核苷的成分。结论:LC/ESI-MS方法在中药活性成分的分析是一种非常有效的技术。     

疏血通注射液UPLC指纹图谱及5种核苷类成分含量测定研究

[目的] 建立疏血通注射液超高液相色谱（UPLC）指纹图谱及尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷和鸟嘌呤核苷含量测定的方法。[方法] 采用ACQUITY UPLC®BEH Amide色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温25 ℃,流速0.3 mL/min,检测波长254 nm。建立33批疏血通注射液的UPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件进行相似度分析,同时测定其中5种核苷类成分的含量。[结果] 疏血通注射液指纹图谱及5种核苷类成分含量测定方法的各项方法学考察结果均良好。不同批次疏血通注射液相似度均在0.998以上。33批样品标定了10个共有峰,其中有5个已知峰,分别为尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、肌苷、鸟嘌呤核苷。该5种核苷类成分的平均含量分别为34.57、153.50、52.76、53.23和14.46 μg/mL。[结论] 建立的疏血通注射液UPLC指纹图谱及含量测定方法稳定可靠、操作简便,可以为疏血通注射液的质量评价提供参考。     

三叶青HPLC指纹图谱研究及多成分含量测定

目的：建立三叶青HPLC指纹图谱,测定绿原酸、虎杖苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、白藜芦醇、槲皮素和山柰酚7种成分含量,为不同产地三叶青药效物质基础评价和质量控制提供参考。方法：采用Agilent C18柱色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.8mL/min;检测波长320nm;柱温25℃。结果：建立13批不同产地三叶青样品的指纹图谱,绿原酸在1.06～530μg/mL (R=0.999 2),虎杖苷在1.21～605μg/mL (R=0.999 8),山柰酚-3-O-芸香糖苷在5.4～1 060μg/mL (R=0.999 7),紫云英苷在2.36～472μg/mL (R=0.999 5),白藜芦醇在3.1～310μg/mL (R=0.999 2),槲皮素在8.3～1 660μg/mL (R=0.999 3),山柰酚在4.45～445μg/mL (R=0.999 1)范围内线性关系良好,可用于不同产地三叶青样品的含量测定。结论：该分析方法科学、准确、可靠且简便易行,可系统、全面地评价三叶青药材的质量。     

江枳壳HPLC指纹图谱及标志性成分含量测定研究

目的:为了控制江枳壳药材质量,建立了江枳壳药材的HPLC指纹图谱,同时测定江枳壳中橙皮苷及柚皮苷的含量,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法:采用kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),在检测波长254 nm、流速0.8 mL·min~(-1)的条件下,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,建立不同批次江枳壳的HPLC指纹图谱,并运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行数据分析。结果:不同批药材的指纹图谱共标示8个共有峰,各批药材的相似度均0.9,测定不同批次江枳壳中柚皮苷及橙皮苷的含量差别不大。结论:该方法简便准确、重复性好,为控制江枳壳药材的质量提供参考。     

冬虫夏草及人工菌丝体的核苷类成分的HPLC研究

冬虫夏草 Cordycepssinensis( Berk) Sacc.为麦角科虫草属的药用真菌 ,为冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科虫草蝙蝠蛾 H epialus armoricanusOberthus等幼虫尸体的复合体 ,具有广泛的药理作用。核苷类成分为虫草有效成分之一 ,具有扩张心脏和外周血管的药效作用 ,其中尤以腺苷的作用为显著 [1～ 3 ]。《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版对冬虫夏草中腺苷规定 ,不得少于 0 .0 1 0 %。目前核苷类分析方法有 HPLC法[4～ 6] 、薄层色谱法[7,8] 、高效毛细管电泳法[9～ 11] 等。高效液相色谱法主要针对单个指标进行评估 ,如以腺苷为指标作含…     

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定刘静明,刘岱,杨立新,钟裕容,崔淑莲(中国中医研究院中药研究所北京100700)蛹虫草CardycepsmiliLaris(L.)Link,为冬虫夏草同属真菌,近年来发现蛹草有重要的药用价值,越来越受到国内外的重视,国外报道从蛹虫草人工培养液中分离出虫草素,3′-氨基-3-去氧腺甙及肌氨酸氨基腺音。我们从蛹虫草菌丝中分离得6种成分:β-谷甾醇、麦角甾醇、D-甘露醇、腺嘌呤、腺苷和虫草素￣[1]。并对5批样品....     

蛇床子配方颗粒HPLC指纹图谱研究及6种香豆素类成分含量测定

目的建立蛇床子配方颗粒HPLC指纹图谱及花椒毒酚、花椒毒素、异茴芹素、佛手柑内酯、欧前胡素和蛇床子素6种香豆素类成分含量测定方法,为蛇床子配方颗粒物质基准的研究提供参考。方法采用HPLC法,色谱柱为Waters XBridge C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量为0.5 mL/min,进样量为10μL,柱温40℃。蛇床子配方颗粒HPLC指纹图谱及花椒毒酚、花椒毒素、异茴芹素、佛手柑内酯、欧前胡素、蛇床子素含量测定的检测波长为320 nm。采用国家药典委员会出版的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版),建立蛇床子配方颗粒指纹图谱,并使用HPLC法同时测定6种香豆素成分含量。结果对18批蛇床子配方颗粒进行了研究,其指纹图谱相似度均≥0.992,标定了19个共有峰,各峰分离度较好。含量测定结果表明花椒毒素与蛇床子素为蛇床子配方颗粒中含量较高的香豆素类成分。经方法学考察,方法精密度RSD值均小于1.6%,方法的重复性良好,样品在48 h内稳定;花椒毒酚、花椒毒素、欧前胡素、异茴芹素、佛手柑内酯和蛇床子素的加样回收率分别为100.69%、101.03%、99.48%、100.88%、101.27%、100.35%,RSD均小于2.5%;6种成分在一定质量浓度内线性关系良好;18批蛇床子配方颗粒中花椒毒酚、花椒毒素、异茴芹素、佛手柑内酯、欧前胡素、蛇床子素的质量分数依次为8.01～8.29、2.37～2.63、4.30～4.61、4.04～4.40、3.45～3.90、6.02～6.80 mg/g。结论建立了蛇床子配方颗粒的指纹图谱及同时测定其6种主要香豆素类成分含量的方法,操作简便,结果稳定、准确,对建立蛇床子配方颗粒的质量控制标准提供了依据,具有重要的应用价值。     

不同产地苍耳子HPLC指纹图谱及主要成分含量测定研究

目的:研究建立不同产地苍耳子的HPLC指纹图谱,并对不同产地苍耳子药材中4个主要成分进行含量测定,为制定苍耳子药材的质量标准提供参考。方法:采用高效液相色谱方法,测定了10批苍耳子药材样品,采用国家药典委员会的中药指纹图谱相似度计算软件进行数据分析,从而建立苍耳子药材的指纹图谱共有模式。结果:从不同产地苍耳子HPLC指纹图谱中,确定了16个指纹图谱共有峰,建立了指纹图谱共有模式;测定了不同产地苍耳子中4个主要成分含量。结论:本方法稳定,重现性好,所建立的对照指纹图谱和含量限度标准可以用于不同苍耳子药材的质量评价和质量控制。     

蛇床子香豆素类成分的含量测定及指纹图谱研究

[目的]采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同批次蛇床子中6种香豆素类成分的含量,并建立指纹图谱分析方法评价其质量。[方法]采用高效液相色谱法测定蛇床子中花椒毒素、异虎耳草素、佛手柑内酯、欧前胡素、蛇床子素与异欧前胡素的含量,并对17批蛇床子药材进行指纹图谱相似度分析。色谱条件为Hedra ODS-2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);甲醇-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.5 m L/min,检测波长为320 nm。[结果]测定了不同批次蛇床子中6种化学组分的含量,建立蛇床子HPLC指纹图谱,17批次药材与对照指纹图谱相似度均在0.980以上。[结论]建立的蛇床子中6种香豆素成分同时测定的HPLC方法及指纹图谱可用于蛇床子的质量控制。     

柔筋胶囊HPLC指纹图谱及指标性成分含量测定

目的:建立柔筋胶囊的HPLC指纹图谱,并测定其主要成分的含量,为柔筋胶囊的质量控制提供可靠方法。方法:采用Agilent TC-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长为220 nm,柱温为25℃,流速为1.0 mL/min。应用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2012版)对10批柔筋胶囊进行分析评价,建立柔筋胶囊的HPLC指纹图谱,并测定主要成分含量。结果:确定了15个共有峰,通过对照品比对指认了其中3个色谱峰,分别为没食子酸、大黄素和大黄酚,10批样品的相似度均大于0.99。定量测定的3种成分在各自线性范围内线性关系良好(r0.999,6),平均加样回收率99.54%～101.94%,RSD为0.92%～1.86%。结论:所建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法为柔筋胶囊的质量评价提供了科学依据。     

冬虫夏草及其混淆品HPLC指纹图谱研究及共有成分鉴定

目的建立冬虫夏草水溶性成分的HPLC指纹图谱方法,为冬虫夏草的真伪鉴别及质量评价提供依据。方法采用HPLC法建立冬虫夏草及其主要混淆品(凉山虫草、古尼虫草、蛹虫草)水溶性成分的指纹图谱,标记了16个共有峰,并通过超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF-MS)技术对指纹图谱中16个共有峰进行鉴定。结果建立了冬虫夏草水溶性成分的HPLC指纹图谱方法,该方法能区分冬虫夏草及其混淆品,鉴定出其中12个共有峰,分别为胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤+鸟嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷和虫草素。结论该方法简便易行,为冬虫夏草的真伪鉴别提供了科学依据。     

冬虫夏草中核苷类化学成分的含量测定研究进展

通过检索、阅读文献,分析与归纳文献内容,综述近年来冬虫夏草中核苷类物质的的含量测定研究进展。包括HPLC法、毛细管电泳法、薄层色谱扫描法,以上含量测定方法各有特点,均可用于冬虫夏草中核苷类物质的含量测定。     

合欢花HPLC指纹图谱模式识别及含量测定研究

目的:建立合欢花药材HPLC指纹图谱分析方法,结合模式识别与含量测定为其质量控制提供科学依据。方法:采用HPLC法,Waters CORTECS C18色谱柱(150 mm×4. 6 mm,2. 7μm),以乙腈-0. 1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1. 0 m L/min,检测波长270 nm。通过相似度分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析对16批合欢花指纹图谱进行评价,寻找合欢花的主要差异性化学成分,并测定其含量。结果:建立了合欢花药材的指纹图谱,确定12个共有峰,并指认了其中3个共有峰,16批药材相似度均大于0. 90。根据聚类分析结果,可将16批药材聚为2类,通过主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析确定槲皮苷为合欢花的主要差异性化学成分,方法学考察符合规定,RSD均小于3. 0%。结论:该方法精密度高、重现性好,可为合欢花药材质量控制与评价提供参考。     

HPLC法测定柴胡中柴胡皂苷的含量及皂苷类成分指纹图谱初步研究

目的 测定柴胡中柴胡皂苷的含量。方法采用HPLC法。结果柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的平均回收率为101．6％和98．05％，RSD分别为1.51％和1．60％。结论方法准确、快速、可靠；用本文的指纹图谱难以控制商品柴胡药材的质量。     

鹿角胶中氨基酸类成分的HPLC指纹图谱

目的：建立鹿角胶氨基酸类成分的高效液相色谱指纹图谱。方法：采用异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生法建立高效液相指纹图谱,梯度洗脱进行分离,选用Diamonsil C₁₈（2）（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,流动相为乙腈-醋酸钠缓冲液（pH 6.5）,检测波长254 nm,柱温43 ℃,流速1.0 mL·min^-1。结果：共指认13个共有峰,10批样品具有较高的相似度,其液相色谱指纹图谱可反映鹿角胶所含的18种氨基酸成分。结论：该方法稳定可靠,可为鹿角胶中氨基酸成分质量的全面控制提供依据。     

冷水花药材的HPLC指纹图谱研究及指标成分含量测定

目的:建立冷水花药材的HPLC指纹图谱及指标成分含量测定方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温:30℃,流速:0.8 m L/min,检测波长:330 nm,乙腈(A)-0.2%冰醋酸(B)梯度洗脱分析冷水花的指纹图谱;利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004 A版)软件,对24批冷水花药材进行比较分析,同时测定了冷水花中木犀草苷和大波斯菊苷的含量。结果:建立了冷水花药材的指纹图谱,其中有10个共有峰,利用对照品指认了2个主要共有峰,不同产地冷水花药材图谱及木犀草苷和大波斯菊苷的含量均存在一定的差异。结论:该方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,可用于冷水花药材的鉴别及质量控制。     

清热利胆片HPLC指纹图谱建立及多成分含量测定研究

[目的]建立清热利胆片高效液相色谱（HPLC）指纹图谱并测定清热利胆片中14个成分的含量,以评价清热利胆片的整体质量。[方法]采用Eclipse XDB-C18色谱柱（5μm,4.6 mm×250.0 mm）,以0.1%磷酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,柱温35℃,流速1.0 mL/min,检测波长294 nm,建立15批清热利胆片的HPLC指纹图谱,经中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）进行相似度分析,标定共有峰并进行指认,在此基础上,对指认出的成分进行含量测定。[结果]不同批次清热利胆片相似度均在0.983以上,共标定62个共有峰,并指认出14个成分,为绿原酸、金丝桃苷、槲皮素、山奈酚、芦丁、迷迭香酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、黄芩苷、厚朴酚、和厚朴酚,其14个成分的平均含量分别为（0.31±0.04）(0.04±0.01)(0.25±0.02)(0.20±0.06)(0.10±0.02)(0.23±0.05)(0.17±0.01)(0.19±0.02)(0.18±0.03)(0.56±0.08)(0.14±0.02)(1.98±0.17)(1.03±...     

LC-ESI-MS快速同时测定冬虫夏草中主要核苷类成分

目的:建立同时快速测定冬虫夏草中腺嘌呤、腺苷和虫草素含量的方法.方法:LC-ESI-MS法,采用选择性离子检测(SIM)和电喷雾离子化(ESI),色谱条件为shimadzu VP-ODS色谱柱;流动相为水-甲醇-甲酸(92∶7∶1),以甲醇为提取溶剂和2-氯腺苷为内标.结果:腺嘌呤线性回归方程为Y=0.072 64X+0.006 22,线性范围为0.8～130.0 mg·L~(-1),r=0.998 7;腺苷线性回归方程为Y=0.159 7X+0.014 6,线性范围为0.5～124.5 mg·L~(-1),r=0.9991;虫草素线性回归方程为Y=0.194 2X+0.018 6,线性范围为0.5～128.5 mg·L~(-1),r=0.999 4;腺嘌呤、腺苷和虫草素的加标回收率分别为98.76%,99.37%和99.26%.结论:方法灵敏、快速和选择性好,可用于同时快速测定冬虫夏草中腺嘌呤、腺苷和虫草素含量及质量控制.