丹参发状根再生植株的研究

丹参发状根再生植株的研究上海中医药大学黄炼栋，胡之璧，刘涤（２０００３２）关键词丹参，发状根，再生植株植物再生植株的发生一般需要外源激素的调控［１，２］。而我们发现，丹参发状根在无外源激素条件下可自发形成再生植株，这对研究植物的分化具有重要的意义。材...     

农杆菌转化后丹参植株再生

用发根农杆菌15834,LBA9402株和根癌农杆菌C58株感染丹参无菌苗,完成质粒转化后诱导出毛状根和冠瘿瘤。毛状根和冠瘿组织在无激素的培养基上于光照条件下分化出转化后的丹参再生植物,再生植物移植到土壤中能够成活。用发根农杆菌转化后的再生植物的具有节间缩短,植株矮化、地下部毛状须根发达等特征。用根癌农杆菌转化后的再生植物生长旺盛,地上部分较原植物高大,根系发达,根产量和丹参酮含量都高于原植物。     

竹节参离体培养及植株再生

目的:探索竹节参离体培养与植株再生技术及优化培养条件。方法:以竹节参的胚、茎、叶作为外植体,应用正交的方法,筛选出竹节参最佳的愈伤组织诱导和分化培养基。结果:竹节参不同外植体的最优消毒方法分别为,种子消毒采用75%酒精浸泡60 s,0.1%氯化汞浸泡12 min;茎和叶片采用75%酒精浸泡15 s,5%次氯酸钠浸泡5 min。光照条件下愈伤组织诱导的最佳培养基配方是,胚用MS+1.5 mg/L NAA+1.5 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT;茎用MS+1.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT,叶为MS+1.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D+0.2mg/L KT;黑暗条件下,胚为MS+1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L KT,茎为MS+1.5 mg/L NAA+1.5mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT,叶为MS+1.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L KT。丛芽诱导最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA3。生根诱导最佳培养基为MS+...     

野生独一味的离体培养及植株再生

目的研究利用组织培养技术快速获得独一味组培苗的方法。方法以野生独一味为外植体,MS为基本培养基,研究不同浓度激素对叶片愈伤组织诱导及分化的影响。结果适宜野生独一味叶片愈伤组织诱导的培养基为MS+NAA0.2mg/L+2.4-D 1.0mg/L+6-BA 2.0mg/L;适宜不定芽分化的培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L;适宜生根培养基为MS+IBA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L。结论通过研究组织培养中不同激素配比,获得了独一味组培苗,初步建立了独一味快繁技术。     

裕丹参愈伤组织诱导、继代及植株再生的研究

目的 建立裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生体系.方法 比较不同的外植体基本培养基及植物生长调节剂对裕丹参愈伤组织的诱导、继代及植株再生的影响.结果 MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L有利于叶柄和叶片愈伤组织的诱导,其出愈率均为100%,但叶柄出愈量更大;MS 6-BA 2 mg/L有利于叶片芽的分化,其分化率达55.6%,并有直接成芽现象;B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L是愈伤组织继代培养的最佳培养基.结论 愈伤组织诱导的最佳外植体为叶柄,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2～2 mg/L;诱导芽分化的最佳外植体为叶片,最佳培养基为MS 6-BA 2 mg/L;愈伤组织继代培养的最佳培养基为B5 6-BA 1 mg/L 2,4-D 1 mg/L.     

羌活植物离体培养及植株再生研究

目的:建立羌活植物的离体培养方法及植株再生体系,为保护羌活野生植物资源和发展人工育种技术提供新的途径。方法:通过组织培养方法,对羌活根茎、幼叶、幼芽及芽鞘进行研究,并研究不同植物激素对最佳外植体形成愈伤组织、分化不定芽和诱导不定芽生根形成完整植株的影响,筛选出最佳培养基配方。结果:羌活芽鞘是诱导愈伤组织的最适外植体,芽鞘愈伤组织诱导最佳培养基为MS+2,4-D 1.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+NAA 0.4mg/L,30 d后诱导率为73.33%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,30 d后诱导率为65.54%;诱导无根苗生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L+IBA 0.3 mg/L,30 d后生根率为81.11%;选取根系生长良好的组培苗,先在沙砾基质中栽培1周,再移栽到有机质土壤中,30 d后成活率100%。结论:在筛选出最佳外植体的基础上,通过诱导出愈伤组织,并进一步完成对不定芽的诱导及无根苗生根培养,筛选出培育羌活组培苗的最佳条件。     

土贝母组织培养及植株再生

用土贝母茎段和叶片作外植体培养,可获得大量的试管苗。茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 2,4-D 2.0 mg/L NAA 0.5 mg/L BA 1.0 mg/L(单位下同);叶片愈伤组织诱导的最佳培养基配方为MS 2,4-D0.5 NAA 2.0。叶片接入MS BA 3.0 NAA 1.0培养基可直接产生不定芽;愈伤组织用MS BA 2.0 IAA 1.0培养基也可产生不定芽。MS BA 2.0 IAA 0.1适于腋芽发育、增殖。壮苗生根培养基为1/2 MS IBA 1.0。诱导愈伤组织和不定芽,选用pH 6.0,琼脂0.8%~1.0%;诱导生根选用pH 5.8,琼脂0.6%~0.7%。经炼苗后,组培苗移栽成活率达90%。     

红大戟的组织培养及植株再生

目的研究红大戟快速繁殖技术,为人工栽培提供种源。方法以野生红大戟的茎尖作外植体,通过不同的培养基进行诱导培养获得丛生芽,进而生根获得再生植株。结果M S BA 2.0 m g/L NAA 0.1 m g/L适合红大戟的丛生芽继代增殖。1/2M S NAA 1.0 m g/L适宜诱导生根获得健全再生植株。移栽成活率70%。结论本研究得出的方法可为人工栽培红大戟提供种源。     

萱草组织培养及植株再生的研究

目的:研究药用植物萱草的组织培养技术,为工厂化育苗提供科学依据。方法:以萱草的幼嫩花梗为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验。结果:愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS 6-BA1.0mg.L-1 NAA0.1mg.L-1,不定芽诱导的最佳培养基配方是MS 6-BA1.0mg.L-1 NAA0.1mg.L-1,不定根诱导的最佳培养基配方是1/2MS IBA0.1mg.L-1 NAA0.1mg.L-1。结论:以幼嫩花梗为外植体,通过诱导愈伤组织途径可以达到快速繁殖的目的。     

高山红景天叶肉原生质体分离培养与植株再生

目的 利用高山红景天组培苗叶片分离得到原生质体,经培养后获得再生植株.方法 研究了外植体前期预处理、外植体大小、酶液配比、酶液中甘露醇浓度等影响原生质分离的相关因素,确定最优分离条件.结果 用于原生质体分离的外植体无需黑暗预培养便可进行原生质体分离,外植体叶片长度大于1.5 cm为宜.获得原生质体的酶液组成为:1.0%纤维素酶Onzuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+10 mmol/L CaCl2·2H2O+0.1%MES+0.7 mmol/L KH2PO4+0.5 mol/L甘露醇,在25℃条件下酶解4 h,原生质体最高产量为39.43×106个/g鲜质量.原生质体活力为78.6%.原生质体培养基为1/2MS+1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/LZT+0.5 mol/L甘露醇+500 mg/L水解酪蛋白.浅层培养40 d时形成小愈伤组织.愈伤组织在MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA诱导产生不定芽,不定芽转入1/2MS基本培养基可获完整再生植株.结论 本研究为高山红景天多倍体育种提供了科学依据.     

菱叶红景天组织培养及植株再生

目的:探索菱叶红景天组织培养与植株再生技术并优化体外繁殖体系。方法:采用正交试验设计分别研究外植体种类、植物生长物质种类和浓度对菱叶红景天愈伤组织的诱导、丛生芽的产生以及生根诱导的影响,实验数据进行极差和方差分析。结果:影响菱叶红景天愈伤组织诱导的因素依次为外植体2,4-D6-BA,叶片产生愈伤组织最佳的培养基为MS附加2,4-D 1.5 mg.L-1和6-BA0.5 mg.L-1;影响菱叶红景天丛生芽诱导的因素依次为外植体NAA6-BA,茎段产生丛生芽最佳的培养基为MS附加6-BA1.5 mg.L-1和NAA1.0 mg.L-1;试管苗生根的最佳培养基为1/2MS附加IBA1.0 mg.L-1,生根率可达90%以上,生根试管苗移栽成活率达98%以上。结论:本试验初步建立了菱叶红景天组织培养与植株再生的基本体系。     

金樱子组织培养及植株再生研究

目的对金樱子茎段进行离体培养研究,为金樱子人工培育种苗提供依据。方法用带腋芽的茎段作外植体,采用不同激素配比的MS培养基进行诱导培养。结果金樱子丛生芽诱导用MS+6-BA1.8mg·L-1+KT0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1培养基较佳;芽继代增殖用MS+6-BA1.5mg·L-1+KT0.2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1培养基,其增殖系数达12.0;诱导生根用1/4MS+NAA0.2mg·L-1+IBA0.2mg·L-1培养基,根多、粗壮,生根率达100%。结论本研究结果对人工培育金樱子种苗是可行的。     

青天葵组织培养及植株再生的研究

目的:对青天葵进行组织培养并获得再生植株。方法:考察不同外植体、植物生长调节剂、添加物等对根状茎及再生植株生成的影响。结果:以球茎为外植体效果最好,6-BA2mg·L^-1诱导球茎生成根状茎的效果优于6-BA1mg·L^-1,椰汁、活性炭对根状茎的生长有促进作用。结论:青天葵球茎接种于1/2MS+6-BA2mg·L^-1培养基上,能够诱导出芽,芽接种于添加了10%椰汁和1‰活性炭的培养基中能够生成大量的根状茎,将白色的根状茎接种于1/2MS+1‰活性炭的培养基中能够先形成球茎,并进一步形成再生植株;将绿色的根状茎接种于1/2MS+6-BA2mg·L^-1+NAA2mg·L^-1的培养基上能够直接形成再生植株。     

粗茎秦艽组织培养及再生植株

用粉茎秦艽Gentianacrassicaulis子叶和下胚轴为材料。在MS＋2mg／L2，4－D＋0．5mg／LBA的培养基上进行培养，子叶及下胚轴的出愈率为100％。愈伤组织继代培养于MS＋0．5mg／L2，4-D＋0．5mg／LBA＋0．5mg／LNAA＋500mg／LLH＋3倍MS有机物和维生素的培养基上生长旺盛。愈伤组织转入分化培养基MS＋1mg／LNAA＋2mg／LBA＋3mg／LZT＋3mg／LGA＋500mg／LLH＋6％蔗糖＋3倍MS有机物和维生素＋3倍FeSO4（Na2－EDTA）上培养，其中40％形成体细胞胚。体细胞胚在无激素MS培养基上发育成苗。     

麻花秦艽组织培养及植株再生的研究

目的：研究药用植物麻花秦艽组织培养技术,为工厂化育苗提供科学依据。方法：以麻花秦艽根、茎育出的无菌苗为外植体,采用MS培养基,附加不同的植物激素进行实验。结果：以MS培养基为基本培养基,附加BA 0.5～1.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,适于丛生芽的诱导与增殖；附加IAA 1.0 mg·L^-1+BA 3 mg·L^-1,适于愈伤组织的诱导；附加IAA 1.0 mg·L^-1+BA 2.0～3.0 mg·L^-1适于愈伤组织继代培养,附加BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1适于愈伤组织的分化。结论：通过诱导愈伤组织途径可以达到快速繁殖的目的。     

不同产地博落回离体培养与植株再生研究

目的:探索不同产地的博落回离体培养效果差异,为筛选最适博落回植株再生材料提供研究基础。方法:采用植物组织培养技术对博落回叶片组织进行愈伤诱导及胚状体分化,并对结果进行分析。结果:安徽祁门、湖南炎陵和湖南高坊产地分别在不同培养阶段与其他产地比诱导率和分化率最高。结论:湖南高坊和安徽祁门的愈伤组织和胚状体的诱导及分化能力优于其他产地的样本。因此,不同产地叶片离体培养效果差异显著。     

明党参愈伤组织诱导及植株再生

目的:通过愈伤组织的增殖与分化实现快速繁殖,以建立明党参愈伤组织培养体系.方法:以明党参的嫩茎为外植体,在不同激素组合的脱分化、分化培养基上培养.结果:MS培养基附加NAA 0.5～1 mg/L,KT 0.1 mg/L适合于愈伤组织的诱导和培养;附加6-BA 1～2 mg/L适合愈伤组织芽的分化;附加IBA 0.5～1 mg/L适合根的诱导.结论:在一定培养条件下,通过愈伤组织的再分化是实现明党参植株再生的有效途径.     

贯叶连翘组织培养及植株再生研究

在国内首次研究了贯叶连翘胚轴和子叶的培养方法,分别通过器官型和器官发生型途径获得了大量再生植株,部分可移栽成活,实验表明,在ＢＡ和２,４－Ｄ不同组合的ＭＳ培养基上,愈伤组织易于诱导,繁殖速度快,并且通过初步检测证明了愈伤组织中金丝桃素存在的可能性,再生植株产生极容易,繁殖系数高。