新疆珍稀药用植物厚叶岩白菜离体快繁研究

目的建立厚叶岩白菜离体快繁技术方法。方法以厚叶岩白菜的茎尖为外植体,以MS培养基为基本培养基,通过附加激素NAA、IBA、6-BA、GA3,设置不同组合及浓度配比,诱导厚叶岩白菜茎尖植株再生、增殖和幼苗生根,筛选最佳激素组合及浓度配比。结果单独使用NAA有利于厚叶岩白菜茎尖再生植株诱导,最佳配方为MS+NAA0.5 mg/L;6BA与NAA组合可提高幼苗增殖倍数,最适配方为MS+NAA0.5 mg/L+6BA 0.4 mg/L;在1/2MS培养基中添加NAA0.5 mg/L或IBA1.0 mg/L,诱导幼苗生根效果最佳,附加碳(C)粉有利于幼苗根的生长。结论利用厚叶岩白菜茎尖离体快繁,植株遗传性状稳定,增殖倍数高,可为厚叶岩白菜的再生体系研究提供技术理论依据。     

滇杠柳茎段和顶芽组织培养及植株再生研究

目的:建立滇杠柳(Periploca forrestii Schlt)茎段和顶芽快速繁殖体系,为其推广种植提供可行性。方法:利用植物组织培养技术,将滇杠柳茎段和顶芽插入含有不同浓度6-BA(6-苄基腺嘌呤)、NAA(萘乙酸)和2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)的MS培养基中培养,诱导其成为完整植株。结果与结论:顶芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,其中芽的诱导率可达到86.29%;茎段诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,芽的诱导率可达到56.67%;增殖的最佳培养基配方都为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系数达到2.10;生根培养基最好为1/2 MS+IBA(吲哚丁酸)0.5 mg/L,生根率达到53.33%。     

甘西鼠尾草愈伤组织诱导、增殖及分化研究

目的考察不同质量浓度激素组合对甘西鼠尾草愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。方法以甘西鼠尾草叶片为外植体,采用正交试验研究2,4-D、NAA、6-BA、KT对愈伤组织诱导及增殖的影响,并探讨适宜愈伤组织分化的培养条件。结果以诱导率和相对生长速率为指标,6-BA和2,4-D均对甘西鼠尾草细胞脱分化和细胞增殖具有显著影响,愈伤组织诱导的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,增殖的最佳激素组合为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.1 mg/L,MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的培养基有利于不定芽的分化,而1/2 MS+IBA 1.0 mg/L的培养基则有利于不定根的分化。结论本实验所建立的组织培养体系,适宜甘西鼠尾草的植株再生。     

植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响

目的:研究植物生长物质对地榆不同性质芽体诱导分化及增殖的影响,建立地榆无性系快繁技术体系。方法:采以地榆叶茎和花茎为外植体,接种到添加不同激素的培养基上,分别进行丛生芽途径和愈伤组织植株再生的组培快繁。结果:花茎在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA培养基中诱导丛生芽的生长情况最好,在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中次之;叶茎在4种诱导丛生芽培养基中均不能诱导出丛生芽。继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,丛生芽均生长情况良好。结论:建立了地榆无性系快速繁殖技术体系。     

金铁锁体外高效再生体系的建立

目的:建立金铁锁体外高效再生体系。方法:以无菌实生苗带叶茎尖、带芽茎段和叶片为外植体,MS为基本培养基,在单因素预实验基础上,通过L9(34)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、芽丛发生及植株再生的影响。结果:3种外植体中,带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 1.0 mg/L中得愈率和芽丛分化率均为100%,30 d后不定芽分化系数达16.65,增殖系数达35.78;带叶茎尖则为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养30 d后,以"微扦插"形式进行生长,增殖系数亦可达15.45。试管苗生根则在1/2MS+6-BA0.05 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率97.50%;再生苗移栽成活率达90%以上。结论:完善了金铁锁体外快繁条件,建立了高效的植株再生体系。     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

云南珍稀民族药黑蒴茎芽组织培养快繁体系研究

目的建立黑蒴茎芽愈伤组织诱导、分化及生根组织培养快繁体系。方法以黑蒴带节嫩茎芽为外植体,以MS(1/2MS)为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤组织诱导、分化及茎芽生根的影响。结果芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,愈伤诱导率71.2%;愈伤分化不定芽最佳培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,芽诱导率为84.2%;茎芽生根培养基为1/2MS+NAA 0.1~0.3 mg/L+Bn80g/L+Pt50g/L+25g/L蔗糖+6g/L琼脂,生根率超过87.2%。结论筛选出茎芽诱导愈伤、分化不定芽、生根的培养基,建立了黑蒴嫩茎芽组织培养快繁体系。     

川牛膝组织培养快繁技术研究

从组培建立的无菌实生苗上截取腋芽和茎尖,诱导丛生芽并育成完整小植株.试验表明,以腋芽作外植体比茎尖好,较适宜的诱导培养基组成为MS＋NAA 0.1～0.2 mg/L＋6-BA 0.5～1.0 mg/L;根分化培养基为MS＋NAA 1.0 mg/L＋Kt 2.0mg/L,适宜培养条件为25℃1500 Lx光照10 h/d和18℃黑暗14 h/d.     

黑果枸杞基茎丛生芽诱导及植株高效再生体系的建立

目的优化黑果枸杞Lycium ruthenicum离体培养方法及条件,探索有效增殖方式,筛选适宜的植株再生途径,建立其人工高效繁殖技术体系。方法以无菌实生苗带1～2个节的茎段为材料,采用MS、改良的MS1以及改良的MS2为基本培养基,通过单因素、完全组合及L_9(3~4)正交试验研究不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、腋芽萌发、基茎不定丛芽诱导及植株再生的影响。结果在MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L培养基中,可诱导出大量愈伤组织,但其再分化能力较弱,培养35 d后最高增殖系数仅为4.36;而在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.5 mg/L中培养,随着腋芽萌发,茎段与培养基接触的节处开始膨大并出现不定芽点,萌发出基茎丛生芽,发生率达100%,培养45 d增殖系数最高可达到42.84;试管苗生根的适宜培养基为改良的MS1+NAA 1.0 mg/L,培养40 d后生根率达98.9%;试管苗经炼苗后移栽成活率90%以上。结论研究通过基茎丛生芽这一全新的增殖途径,成功建立了黑果枸杞体外高效再生体系,不仅大大提高了试管苗的产量及品质,也为枸杞属其他植物的体外快繁提供了另一思路。     

铁皮石斛原球茎高效再生体系的研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale实生种子为外植体,研究铁皮石斛原球茎的增殖、分化、诱导生根等条件,筛选出适宜铁皮石斛原球茎高效再生的诱导条件,建立高效的再生体系。方法以铁皮石斛种子为外植体,在培养基上诱导产生原球茎,经过增殖培养后,转移到分化培养基中诱导芽苗分化,待分化的芽苗长到1~2 cm时,转移到生根培养基诱导生根,最终长成完整的再生植株。结果适宜铁皮石斛生长的基本培养基为1/2 MS;原球茎诱导的培养基为1/2 MS+1.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA+50 g/L土豆泥;原球茎增殖的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高增殖系数达23;最佳分化培养基为1/2 MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,平均分化率最高达95%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.3mg/L NAA+50 g/L土豆泥,生根率达100%。结论铁皮石斛实生种子是铁皮石斛离体繁殖的优良外植体来源。以铁皮石斛种子诱导获得的高效再生技术体系可以为铁皮石斛快速繁殖和工厂化生产提供理论基础。     

短瓣石竹茎段诱导及植株再生研究

目的:建立短瓣石竹组织培养及植株再生体系。方法:以短瓣石竹幼嫩茎段为外植体,进行不定芽诱导、增殖、壮苗生根及驯化移栽等组织培养试验研究,探讨了不同生长阶段、不同的基本培养基、不同浓度的生长调节剂等因素对短瓣石竹离体培养再生体系的影响。结果:茎段诱导最佳培养基为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;在试管苗繁殖培养中,应同时添加6-BA、NAA和IAA,较好的激素配比为6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+IAA0.3 mg/L,短瓣石竹培养30 d繁殖系数为6.1;在壮苗培养中,激素组合为6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.0 mg/L效果较为理想,培养30 d二次繁殖系数为2.9;生根壮苗培养基以1/2MS+IBA 0.1 mg/L+NAA 1.0 mg/L效果最好,组培苗生根率为100%;以珍珠岩∶泥炭土∶黄土(1∶1∶1)作为移栽基质效果最好,30 d移栽成活率为89.41%以上。结论:筛选出各个组织培养阶段的最佳激素组合,总结出短瓣石竹幼苗快速繁殖的方法,促进短瓣石竹离体再生技术的完善。     

金线莲试管苗高效快繁技术研究

目的建立高效的金线莲组培快繁体系。方法以金线莲茎尖、茎节和叶片为外植体,研究不同植物生长调节剂处理对丛生芽诱导、继代培养及生根的影响。结果以茎节为外植体诱导效果最好;丛生芽诱导最适培养基为MS+1 mg/L6-BA+1 mg/L NAA;继代培养较佳培养基为MS+1 mg/L IBA+3 mg/L 6-BA;适宜的生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA。结论过上述技术应用,可实现金线莲的快速繁殖,增殖系数可达5.2。     

药用植物黄花乌头植株再生系统的建立

目的:通过茎尖培养实现药用植物黄花乌头Aconitum coreanum (Levl.)Rpaics的快速繁殖,建立黄花乌头植株再生系统.方法:以黄花乌头茎尖为外植体,用不同的培养基和激素组合培养.结果:MS培养基是不定芽分化和增殖的最佳基本培养基,附加6-BA 2～5 mg/L适合于不定芽的诱导,附加赤霉素1～5mg/L和腺嘌呤1～5mg/L能促进芽的生长与增殖,附加IBA 0.5～1.0 mg/L适于根的诱导.结论:在一定培养条件下,茎尖培养是实现黄花乌头植株再生的可行方法.     

滇龙胆丛芽高效诱导与植株再生体系的建立

目的以滇龙胆Gentiana rigescens带叶茎尖、带芽茎段、叶片、根为外植体,建立滇龙胆高效、稳定的丛芽诱导体系,筛选出适宜的植株再生途径。方法以MS为基本培养基,在单因素实验的基础上,通过L16(45)正交及完全组合实验研究不同外植体和不同植物激素种类及其质量浓度对愈伤组织诱导、丛芽发生及植株再生的影响。结果带芽茎段为间接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L中培养10 d、节上腋芽开始萌发后,基部可诱导出再分化能力极强的愈伤组织,得愈率为97.73%;15 d后愈伤组织开始分化出绿色丛芽,分化率100%;30 d后不定芽分化系数达18.65,增殖系数可达63.58。带叶茎尖为直接器官发生最佳材料,其在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+KT 0.5mg/L中培养30 d后,增殖系数亦可达44.36。2种材料培养获得的试管苗茎细瘦弱,不利于生根培养,试管苗在MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L+KT 0.05 mg/L+PP333 10 mg/L中培养60 d后可获得健壮度大为改善的复壮苗。复壮苗生根则在1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 2.0 mg/L中进行,45 d后可获得生长健壮的再生植株,生根率100%。再生苗移栽成活率达95%以上。结论建立的滇龙胆无性快速繁殖体系,为保护滇龙胆野生资源、优质种苗繁育提供了有效途径,也为其遗传转化研究奠定了实验基础。     

菊叶薯蓣茎段离体快速繁殖技术研究

目的:建立菊叶薯蓣茎段快速繁殖体系,为其推广种植提供可行性。方法:利用植物组织培养技术,将菊叶薯蓣带腋芽的茎段斜插入不同培养基中培养,诱导其成为完整植株并进行炼苗和移栽。结果:在诱导培养基MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA中,芽苗诱导率达93.33%,效果最佳;生根诱导用1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.5mg/L KT培养基,生根率可达89.73%;试管苗移栽成活率达98%以上。结论:所建立的菊叶薯蓣快速繁殖体系是高效可行的。     

丹参茎段组培快繁体系的建立与优化

目的:建立并优化丹参茎段组培快繁体系。方法:以丹参春生幼嫩枝条为外植体,利用正交试验等方法筛选优化丹参茎段消毒、丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根培养的适宜方案。结果:最适的消毒方案是用70%~75%乙醇浸泡30 s,0.1%升汞浸泡8 min,萌芽率为85%;适宜丛生芽诱导的培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L;丛生芽增殖的最适培养基是1/2~2/3MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05~0.2 mg/L+GA30.1mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,平均丛生芽增殖系数为11.95;适宜生根的培养基是1/4~1/2MS+2,4-D 0~0.1mg/L+IBA 0.1~0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L,2 w后生根率为100%,平均生根数达2.3条以上,平均根长达0.83 cm以上;炼苗、移栽成活率达95%以上。结论:筛选出了丹参含顶芽茎段最适的增殖和生根培养基配方,建立并优化了丹参茎段组培快繁体系。     

道地中药颖半夏组培快繁优化研究

目的:建立并优化道地中药颖半夏的组培快速繁殖体系。方法:将不同大小的茎尖接种于培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L,考察最适宜大小的外植体;以MS培养基为基本培养基,通过不同种类和浓度的植物生长调节剂配比试验,筛选颖半夏试管苗快速繁殖与生根的最佳培养基组成。结果:最适宜的外植体为直径0.4mm的茎尖,诱导丛生芽的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT 0.1 mg/L;诱导试管苗生根的最适培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+PP333 0.2 mg/L。结论:采用组织培养方法可进行颖半夏的快速繁殖,为后续的道地药材种质资源保护奠定了基础。     

滇桂艾纳香组培快繁技术体系的研究

目的:探索滇桂艾纳香组培快繁技术体系的最佳培养条件。方法:以滇桂艾纳香的嫩茎段为外植体,采用正交试验设计方法优化增殖培养基,建立组培快繁体系。结果:0.1%Hg Cl2溶液灭菌10 min效果最佳;茎段丛生芽诱导培养基以MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最佳,诱导率达90%;6-BA是影响增殖的主要因素,达显著水平,NAA与KT效应不显著;芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+KT 1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,增殖系数为7.12;生根培养基用1/2MS+NAA 0.5 mg/L最好,生根率100%,移栽成活率93.33%。结论:该试验得到的组培快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为规模化生产种苗提供技术指导。     

波棱瓜愈伤组织诱导及植株再生研究

目的研究波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的条件,探讨波棱瓜快速繁殖新途径,为波棱瓜组织培养与离体植株再生奠定基础。方法以波棱瓜幼嫩茎段和叶片为材料,比较不同外植体、基本培养基及植物生长调节剂对波棱瓜愈伤组织诱导、分化及生根的影响。结果幼嫩茎段作为外植体时,其出愈率较叶片高,愈伤量大;MS基本培养基能够产生明显的愈伤组织,出愈率较高;幼嫩茎段愈伤组织诱导适宜的培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.5 mg/L,出愈率达93.3%。愈伤组织的最佳分化培养基为MS+6-BA2 mg/L+NAA0.1 mg/L+KT 3.0 mg/L,分化率达87.2%。生根培养的适宜培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L,生根率达95%。结论波棱瓜幼嫩茎段在适宜的培养基中可通过愈伤组织途径分化不定芽,且极易生根,能够得到正常生长发育的再生植株。     

紫背金盘愈伤组织诱导与再生体系的建立

目的 建立紫背金盘Ajugae nipponensis愈伤组织诱导体系,筛选出具较高再生率的植株发生途径,旨在构建高效、稳定的再生体系。方法 MS为基本培养基,添加不同种类和浓度配比的植物生长调节剂,以茎尖、带芽茎段和花序为外植体进行实验。结果 花序是较适宜诱导愈伤组织的外植体,在MS+6-BA 0.1 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L中可在1周内诱导出愈伤组织,2周后即分化出绿色小芽丛;丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织芽丛再生率高达100%,再生系数为4.10,4周后增殖倍数5.0以上;生根的适宜培养基为1/2 MS+NAA 1.0 mg/L,3周后即可获得再生植株,生根率100%;生根苗移栽至排水良好的沙土中,成活率100%。结论 紫背金盘不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中花序愈伤发生率最好,是最适宜的外植体;为保护紫背金盘野生资源和发展人工栽培奠定了良好基础,也为遗传转化研究提供重要的科学依据。