灵芝三萜类化学成分指纹图谱研究

目的：建立灵芝药材三萜类化学成分高效薄层色谱(HPTLC),高效液相(HPLC)的指纹图谱,并以此评价灵芝药材的质量。方法：应用硅胶GF254高效预制薄层板,通过二次展开,10%硫酸乙醇溶液显色后获得薄层荧光色谱指纹图谱;同时建立灵芝药材HPLC指纹图谱,条件如下：Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈和0.8%高氯酸水溶液,梯度洗脱,流速0.9 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温为室温。灵芝药材的HPTLC和HPLC指纹图谱,分别经指纹图谱系统解决方案软件(Chromafinger^TM)生成共有模式,并进行相似度分析。结果：赤芝薄层荧光指纹图谱由9个特征荧光条斑组成,赤芝与紫芝HPTLC指纹图谱相差较大;赤芝HPLC指纹图谱共有18个特征峰,其中6个化学成分通过对照品得到指认。结论：该方法为综合评价灵芝的质量提供了科学的依据。     

灵芝三萜类化学成分指纹图谱研究

目的:建立灵芝药材三萜类化学成分高效液相(HPLC)指纹图谱,并以此评价灵芝药材的质量.方法:采用Diamonsil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈和0.8%高氯酸水溶液,梯度洗脱,流速0.9 mL·min~(-1),检测波长254 nm,柱温为室温.灵芝药材HPLC指纹图谱经指纹图谱系统解决方案软件(chromafinger~(TM))生成共有模式,并进行相似度分析.结果:赤芝HPLC指纹图谱共有18个特征峰,其中6个化学成分通过对照品得到指认.赤芝与紫芝HPLC指纹图谱相差较大.结论:该方法为综合评价灵芝的质量提供了科学的依据.     

灵芝及其近缘种高效薄层色谱指纹图谱的研究

 目的 以赤芝为基础建立灵芝三萜类化合物高效薄层荧光色谱指纹图谱,并与赤芝的近缘种无柄灵芝、 平盖灵芝 等的指纹图谱进行比较分析。 方法 硅胶 GF₂₅₄ 高效预制薄层板,以 正己烷 - 乙酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（ 30 ∶ 30 ∶ 2 ∶ 0.2 ）为展开剂展开,展至约 5 cm ,再以正己烷 - 乙酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（ 30 ∶ 30 ∶ 1 ∶ 0.2 ）为展开剂进行二次展开, 10% 硫酸乙醇溶液显色后获得 薄层荧光色谱指纹图谱,经指纹图谱系统解决方案软件（ Chromafinger^TM ）生成共有模式,并进行相似度和主成分分析。 结果 赤芝薄层荧光色谱指纹图谱由 9 个特征荧光条斑组成。荧光色谱图像与轮廓扫描图谱结合分析比较,建立了赤芝指纹图谱模式。赤芝与紫芝、无柄灵芝、 平盖灵芝、薄树芝、黑芝 等在三萜类化合物方面区别较大。 结论 通过指纹图谱考察,当前市场灵芝类型主要是赤芝、紫芝为主流,但两者区别较大,其他灵芝的近缘种均为代用品,不可做灵芝使用,应加以区别。     

对照提取物在浙贝母与湖北贝母高效薄层色谱指纹图谱分析中的应用

目的 使用浙贝母对照提取物（ZBM ERS）和湖北贝母对照提取物（HBBM ERS）对市场上的46批贝母药材进行高效薄层色谱（HPTLC）指纹图谱鉴别,对浙贝母和湖北贝母进行有效的区分。方法 采用薄层色谱法、硅胶高效薄层板,以乙酸乙酯-甲醇-三乙胺-水（17∶1∶1∶0.5）为展开剂,10%硫酸甲醇溶液为显色剂,进行高效薄层色谱指纹图谱鉴别。结果 HPTLC指纹图谱显示,浙贝母和湖北贝母样品分别具有各自的特征,可通过对照提取物作为参照物准确鉴别浙贝母和湖北贝母的差异。结论 ZBM ERS和HBBM ERS能有效鉴别浙贝母和湖北贝母,且使用方便,经济实惠。对照提取物具有中药整体性和复杂性的特点,在中药整体质量控制中应用更具优势。     

LC-MS分析当归六黄汤中主要成分

目的:建立当归六黄汤的HPLC指纹图谱分析方法,对色谱数据进行分析,并建立高效液相-质谱(LC-MS)法分析当归六黄汤汤剂中主要成分。方法:HPLC采用Agela Venusil XBP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),流动相乙腈(A)-0.3%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~10 min,5%~15%A;10~15 min,15%~20%A;15~35 min,20%~25%A;35~50 min,25%~31%A;50~62 min,31%~55%A;62~70 min,55%~60%A;70~75 min,60%~70%A),柱温30℃,体积流量0.8 m L·min-1;质谱采用电喷雾离子源,正负离子模式下全扫描检测,并通过[M-H]-,[M+H]+等离子信息推断化合物。结果:建立当归六黄汤汤剂的HPLC分析方法及指纹图谱,并建立当归六黄汤汤剂的LC-MS图谱,指认汤剂中主要的19个特征色谱峰。结论:当归六黄汤HPLC指纹图谱分析方法稳定可靠,具有较好的重复性;通过建立LC-MS图谱,更加有效的指认了当归六黄汤汤剂中的主要成分。     

不同产地赤芝药材的HPLC指纹图谱建立及聚类分析

目的:建立赤芝药材的高效液相指纹图谱并进行聚类分析。方法:收集不同产地、不同批号的10批赤芝药材,以灵芝酸A、灵芝酸G为参照物,采用ZORBAX SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.2%磷酸水,梯度洗脱;流速1.0 mL·min~(-1);检测波长254 nm。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A"建立指纹图谱,评价图谱的相似性,并进行聚类分析。结果:建立了10批赤芝药材的HPLC指纹图谱,共标定31个共有色谱峰,方法学考察结果符合指纹图谱的技术要求,相同产地的药材基本可以聚为一类。结论:该方法稳定、可靠、重复性好,为灵芝药材的质量评价提供了新的方法。     

基于对照制剂的灵芝制剂HPLC三萜指纹图谱化学计量学分析

目的建立基于对照制剂的三萜指纹图谱结合化学计量学分析的方法,测定89批样品以评价灵芝制剂的质量。方法样品经甲醇超声提取,采用Agilent TC C18(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.02%磷酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长为254 nm,并使用主成分分析和聚类热图分析方法对数据进行统计。结果建立的指纹图谱共计56个特征峰。样品指纹图谱经与对照制剂比对,发现基本上所有企业都使用赤芝生产灵芝制剂。经主成分分析、聚类热图分析和相似度分析,可将各企业样品分为三类,第一类特征峰种类和峰面积与对照制剂较一致,质量较好;第二类特征峰种类与对照制剂较一致但峰面积偏小,质量一般;第三类与对照制剂差异很大,为问题样品。区分各类样品的强特征峰为峰26、31、24、32和18。结论该法全面、准确,具有专属性,可用于灵芝制剂三萜成分的整体质量评价。     

茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱分析

目的:建立茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱并测定苍术苷A含量,为该药材的质量控制与资源开发提供参考。方法:利用HPLC建立茅苍术的指纹图谱并测定苍术苷A含量,流动相乙腈(A)-0.25%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~17min,2%~5%A;17~25 min,5%~12%A;25~35 min,12%A;35~50 min,12%~17%A;50~70 min,17%~34%A;70~80min,34%~40%A),检测波长221 nm,流速0.6 m L·min-1。采用外标法测定苍术苷A在10批茅苍术药材中含量。结果:建立了茅苍术水溶性成分的HPLC指纹图谱,检出共有峰18个,精密度、稳定性、重复性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均<3%。10批茅苍术水提物中苍术苷A含量较稳定,平均质量分数2.775 mg·g-1。结论:HPLC指纹图谱方法与苍术苷A的含量测定方法准确、稳定、简便,可有效控制茅苍术药材的内在质量。     

灵芝孢子油HPLC–ELSD指纹图谱建立及与植物油谱比较研究

摘要：目的 建立赤芝孢子油软胶囊中植物脂肪酸甘油酯的HPLC–ELSD指纹图谱,并与植物油HPLC色谱图进行比较,为全面、科学评价赤芝孢子油软胶囊的质量提供依据。方法 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC–ELSD)测定14批赤芝孢子油软胶囊与7种植物油样品。色谱柱为Diamonsil C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-异丙醇（体积比为51:49）,流速：1.0 mL/min,ELSD漂移管温度：47 ℃,载气流速：3.2 L/min。结果 建立了赤芝孢子油软胶囊中植物脂肪酸甘油酯的HPLC–ELSD指纹图谱,标定了10个共有色谱峰,采用对照品指认了其中4个峰。赤芝孢子油软胶囊HPLC–ELSD指纹图谱与植物油的液相色谱图存在明显的差异。结论 该方法简便、特异、重现性好,为赤芝孢子油软胶囊的质量控制提供参考。     

脱脂炒莱菔子提取物HPLC指纹图谱

目的：建立脱脂炒莱菔子提取物的HPLC指纹图谱。方法：依利特C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱（0~28 min,5%~30%A;28~30 min,30%~70%A;30~51 min,70%~88%A）,流速1.0 mL·min^-1,检测波长225 nm,柱温30 ℃。结果：建立了脱脂炒莱菔子提取物的HPLC指纹图谱,共标示出10个共有峰;不同产地脱脂炒莱菔子提取物的HPLC指纹图谱相似度>0.96。结论：该方法准确稳定,重复性好,可为脱脂炒莱菔子提取物的定性鉴别提供依据。     

高效液相色谱-电喷雾质谱法分析青木香及其发酵品中马兜铃酸类成分（英文）

目的：建立高效液相色谱-电喷雾高分辨质谱法（HPLC-ESI-TOF-MS）,鉴定青木香及其灵芝菌发酵品中马兜铃酸类成分。方法：采用Hanbon Phecda C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,以乙腈（A）和0.2%醋酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱,0-25min（15%→30%A）,25-45min（30%→50%A）,45-55min（50%→60%A）,55-75min（60%→80%A）75-80min（80%→15%A）,流速：1.0mL·mL-1。利用样品的色谱保留时间及质谱数据进行分离和分析,对其中马兜铃酸类成分的结构进行了鉴定。结果：7种马兜铃酸类成分分别被鉴定为马兜铃酸I（6）、马兜铃酸II（4）、马兜铃酸III（5）、马兜铃酸Ia或IIIa（1）、马兜铃酸IVa、Va、VIIa或VIIIa（3）、马兜铃酸IV或VII（7）和马兜铃酸VIa（2）。与青木香原药材相比,发酵品中这7种马兜铃酸类成分峰面积均有所下降,其中化合物1、2、4-7的下降率分别为93.5%、87.2%、94.1%、42.2%、86.2%和69.5%;而化合物3未能检出。与此同时,发酵品在色谱保留时间0-20min的范围内,明显出现了大量新的色谱峰（可能为马兜铃酸类成分经发酵转化后产生的极性物质）。结论：本方法对青木香及其发酵品中马兜铃酸类成分的指认有很大帮助,提示青木香通过灵芝菌发酵,可大大降低其中导致肾毒性问题的马兜铃酸类成分的含量。     

灵芝醇溶酸性组分的制备工艺与检测方法研究

目的 :研究灵芝子实体中醇溶酸性组分 (ethanol solubleandacidiccomponents ,ESAC)制备工艺 ,并建立一种定量测定EASC含量的方法。方法 :灵芝精粉用无水乙醇浸泡 ,碱提酸化和氯仿萃取得ESAC组分 ;利用ESAC与浓硫酸的特征性颜色反应进行定量测定。结果 :1 0 g级ESAC较优的制备工艺为 :灵芝精粉与无水乙醇的投料比 1 (g)∶1 5(mL) ,浸提时间 24h ,饱和NaHCO₃溶液和氯仿萃取量分别为 1300mL ,分 3次萃取。ESAC定量测定条件为 :样品量 1g ,溶剂 15mL ,浸泡 0.5h ,50%H₂SO4 乙醇溶液 ,100℃水浴加热 3min ,测定 490nm处光吸收值。结论 :本文提供的ESAC制备的工艺路线 ,具有设计合理、操作简便的特点 ,建立的ESAC含量的测定方法可以用于灵芝相关产品的质量鉴定。     

经典名方圣愈汤的UPLC指纹图谱建立及多成分定量分析

目的:建立圣愈汤的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱及其11个成分的定量分析方法.方法:采用UPLC-二极管阵列检测器(PDA)/蒸发光散射检测器(ELSD),根据化学成分极性不同使用不同的检测器,建立2种色谱条件,指纹图谱1选择ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),...     

固体灵芝精的制备及质量控制

 目的对固体灵芝精的制备及质量控制标准进行研究。方法固体灵芝精是由泰山赤灵经水提取、真空雾化干燥而制成;用可见 紫外分光光度法测定多糖,高速氨基酸自动分析仪测定各种游离氨基酸,高频等离子体发射光谱仪测定无机元素。结果：固体灵芝精所含的有效成分与泰山赤灵芝相同,且按相同重量计含量高得多,其总糖含量泰山赤灵芝为0.0018%,而固体灵芝精为20.5%,微量无素的含量比泰山赤灵芝高100～1000倍。结论提取工艺设计合理,制剂稳定,质量控制方法准确可靠。     

天麻饮片的HPLC指纹图谱鉴别

目的:研究建立天麻饮片的HPLC指纹图谱鉴别方法。方法:选择HPLC-UV指纹图谱法,Kromasil C18柱;流动相乙腈-0.5%冰醋酸溶液线形梯度洗脱,检测波长270 nm,流速1.0 mL.min-1。以指纹图谱软件计算相似度和图谱比较,以聚类分析比较不同来源饮片的差异。结果:建立了天麻饮片的标准指纹图谱,6个产地共10批次天麻饮片的指纹图谱基本一致,共能检出15个共有峰,10个样品的平均相似度>98%,但相对峰面积有较大差异;聚类分析结果与饮片产地基本一致。结论:该方法重复性好,结合聚类分析可用于天麻饮片的定性鉴别,为天麻饮片的质量控制提供了科学依据。     

灵芝液体发酵产漆酶最佳培养基和培养条件研究

目的研究灵芝液体发酵产漆酶的最佳培养基和培养条件。方法以灵芝S3号菌株为试验材料,以灵芝漆酶活性为衡量指标,通过正交试验分别对灵芝液体发酵培养基及培养条件进行优化筛选。结果筛出最佳培养基组成为葡萄糖30g/L、棉花0.2%、磷酸氢二铵0.66g/L、干酪素0.5%、聚山梨酯-800.15%;优化培养条件为初始pH5.5、装液量75mL、接种量12.5%、菌龄5×24h、培养时间9×24h。结论优化培养基及培养条件后,发酵液中灵芝漆酶活性显著提高。     

基于UPLC-Q-TOF-MS技术的霍山野生及栽培赤芝的代谢组学分析

目的:通过对霍山野生赤芝(HW)、仿野生赤芝(HI)和栽培赤芝(HC)的差异性研究,为进一步评价野生、仿野生和栽培的赤芝质量提供参考。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对HW、HI和HC进行代谢物测定,采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-法判别分析(OPLS-DA)等多变量统计分析方法进行HW和HC代谢组学分析,并对差异代谢物定性鉴定。结果:PCA结果显示,HW和HI、HC在t[2]主成分方向区分明显,差异大;HI与HC差异较小。OPLS-DA结果表明,HW中灵芝酸C2、灵芝酸D、灵芝酸A含量显著高于HC;而HC中赤芝酸A、赤芝酸E2和赤芝酸D 3种成分含量显著高于HW。结论:通过对霍山野生赤芝和霍山栽培赤芝的差异性分析,并对差异性化合物进行了定性研究,从而为野生和栽培的赤芝的品质鉴别提供参考。     

穿心莲药材不同提取方式的合理性评价

目的:比较不同穿心莲提取液中有效成分含量、指纹图谱和药效学活性。方法:采用减压提取法(VAE)、超声提取法(UAE)和传统提取法(HRE)制备提取液,利用HPLC对不同穿心莲提取物进行微观组分指纹图谱分析,流动相乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~20 min,10%~30%A;20~30 min,30%~35%A;30~40 min,35%~60%A;40~50 min,60%~85%A;50~60 min,85%~100%A),检测波长254 nm,结合DPPH自由基反应体系,考察不同工艺提取液的抗氧清除能力。结果:VAE对穿心莲药材中药效成分(穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯)提取效率显著高于传统方法。3种提取液的指纹图谱均含有17个特征峰,VAE,HRE及UAE的相似度分别为0.957,0.911,0.905。清除DPPH自由基能力强弱顺序为VAE>UAE>HRE,当质量浓度为20 g·L-1时,DPPH清除率分别为44.85%,25.29%,16.58%。结论:穿心莲不同工艺提取液中药效成分不存在显著性差异。与传统提取法相比,VAE具有提取时间短、效率高、无污染等优点。VAE液对DPPH自由基清除效果优于HRE液和UAE液。