麻黄汤及拆方对哮喘小鼠5-脂质氧合酶激活蛋白、白介素4基因的表达和白三烯C4的影响

目的:通过对麻黄汤(Herba Ephedrae decoction,HED)各拆方配伍组对哮喘小鼠5-脂质氧合酶激活蛋白(FLAP)、白介素4(IL-4)基因的表达和白三烯C₄(LTC4)的影响来探讨其配伍规律。方法:建立小鼠卵蛋白哮喘模型,除正常对照组和模型组外其余各组分别灌胃给予麻黄汤及拆方(以麻黄生药剂量2 500 mg.kg^-1)和阳性药地塞米松(2 mg.kg^-1),连续用药7 d后用实时荧光定量PCR方法检测肺组织中5-脂质氧合酶激活蛋白、白介素4mRNA表达的变化,用ELISA方法检测支气管肺泡灌洗液中LTC₄含量。结果:哮喘小鼠肺组织中FLAP,IL-4基因表达水平、支气管肺泡灌洗液(BALF)中LTC₄水平均较正常对照组显著升高。麻黄汤及拆方组可以不同程度抑制小鼠肺组织中FLAP,IL-4基因表达水平,BALF中LTC₄水平。结论:麻黄汤具有明显抗过敏哮喘的作用,拆方分析显示麻黄汤全方效果最佳,从分子水平验证了麻黄汤组方的科学性和合理性。     

从祛瘀化痰法探讨平喘方及拆方对哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的干预机制

目的研究平喘方及拆方干预哮喘小鼠Th1/Th2免疫失衡的作用机制,并探究"化痰"与"祛瘀"两种治法干预气道炎症的疗效。方法对60只BALB/c雄性小鼠按随机数字表分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组、平喘方组、拆方1(祛瘀方)组、拆方2(化痰方)组共6组,每组10只,运用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝腹腔注射致敏并雾化吸入激发,建立小鼠支气管哮喘模型,末次激发后给药7 d并杀检取材,运用HE染色观察各组小鼠气道及肺组织病理改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中白介素4(IL-4)、干扰素γ(INF-γ)、白介素17(IL-17)、白介素10(IL-10)表达,蛋白质印迹法法(Western Blot)检测肺组织中转录因子GATA结合蛋白3(GATA-3)、T盒子转录因子(T-bet)蛋白表达。结果与空白组比较,模型组病理染色显示炎症细胞侵润明显,管壁及肺组织结构受到破坏,周围组织伴有炎性物质渗出,IL-4、IL-17、GATA-3表达增高(P<0.05),INF-γ、IL-10、T-bet表达减低(P<0.05)。与模型组对比,平喘方及拆方组可显著减少病理染色中的气道炎症程度,减低IL-4、IL-17、GATA-3表达(P<0.05),升高INF-γ、IL-10、T-bet表达(P<0.05),拆方组间比较祛瘀方在改善气道病理优于化痰方,在降低IL-4、IL-17、GATA-3因子水平具有优于化痰方的统计学趋势。结论:平喘方及拆方可减少哮喘小鼠IL-4、IL-17、GATA-3表达,升高INF-γ、IL-10、T-bet表达,改善Th1/Th2免疫失衡,祛瘀与化痰两种治法相比较,祛瘀法在改善气道炎症方面疗效较优。     

朝医补肺元汤对哮喘模型小鼠肺组织中p38蛋白激酶表达的影响

目的:探讨朝医补肺元汤对小鼠哮喘模型肺组织中p38蛋白激酶表达的作用及其可能机制。方法:雄性BALB/c小鼠40只随机分成5组。支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-5、IL-13的含量采用酶联免疫吸附法(ELISA)测出,并对支气管肺泡灌洗液中炎症细胞的病理学改变进行观察。应用免疫蛋白质印迹(Western blot)测小鼠肺组织中磷酸化的p38MAPK表达作用强弱。结果:相较于正常对照组,哮喘模型组小鼠BALF中IL-5、IL-13以及肺组织中的磷酸化p38MAPK表达增强(P0.05)。相比较于小鼠哮喘模型组,朝医补肺元汤低、高剂量组小鼠肺泡灌洗液中的IL-5、IL-13、肺组织磷酸化p38MAPK表达水平显著降低(P0.05)。综上可证明朝医补肺元汤能显著改善哮喘小鼠肺组织的病理学上的改变。结论:朝医补肺元汤显著治疗哮喘的功效密切相关于阻碍哮喘小鼠p38MAPK信号通路的表达。     

小青龙汤对支气管哮喘小鼠肺泡灌洗液中炎性细胞及IL-4,IFN-γ水平的影响

目的:探讨中药方剂小青龙汤对小鼠哮喘模型气道炎症白介素-4(IL-4)及干扰素(IFN-γ)表达的影响.方法:30只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、小青龙汤治疗组(C组).B,C组采用卵白蛋白(OVA) ip致敏与雾化吸人激发制作哮喘模型,在实验21 ～28 d,A,B组以生理盐水15 mL· kg-1 ig,C组激发前1 hig小青龙汤15 g·kg-1.于OVA激发结束后24 h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)计数炎性细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)数目,并测定BALF上清液中IL-4和IFN-γ水平变化.结果:小青龙汤的干预治疗能显著降低小鼠BALF中炎性细胞总数及嗜酸粒细胞数量;BALF上清液中IFN-γ水平明显升高,IL-4水平显著下降.C组与A组、B组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:小青龙汤能明显降低哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量,影响细胞因子水平变化,从而改善哮喘气道炎症.     

大黄素对哮喘小鼠肺组织形态及BALF中炎性细胞因子分泌水平的影响

目的:研究大黄素对哮喘小鼠肺部炎症及肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞因子分泌水平的影响,初探其作用机理。方法:采用卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏加激发法建立支气管哮喘小鼠模型。20只雌性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、大黄素组及阳性药对照组,实验结束后观察各组小鼠整体情况和肺组织病理学改变,收集肺泡灌洗液进行细胞因子检测。结果:模型组小鼠可见呼吸急促、喘息、打喷嚏、抓耳挠鼻、弓背、大小便失禁等症状,BALF中白介素(Interleukin,IL)-4、IL-5、IL-17A含量明显升高(P0.01);肺组织病理学结果为支气管及血管周围大量炎性细胞浸润,肺泡结构不完整,伴支气管上皮损坏甚至纤维化等明显改变。经大黄素治疗后,哮喘小鼠上述症状、体征及病理改变均有所改善,且炎性细胞因子水平明显降低。结论:大黄素能够在一定程度上改善支气管哮喘小鼠肺部的症状及病理变化,抑制IL-4、IL-5、IL-17A的分泌。     

平喘方对哮喘模型小鼠气道平滑肌内TLR4mRNA和蛋白及相关炎症因子水平的影响

目的:通过研究平喘方对哮喘模型小鼠支气管平滑肌Toll样受体4(Toll-likereceptors,TLRs) mRNA及蛋白和肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BA LF)中白介素6(Interleukin 6,IL-6)、白介素10(Interleukin 10,IL-10)、白介素17(Interleukin 17,IL-17)因子水平的影响,进一步探索平喘方治疗哮喘和干预气道炎症的作用机制。方法:对40只BALB/c雄性小鼠用卵蛋白(ovalbumin,OVA)和氢氧化铝腹腔注射致敏并雾化吸入激发,建立小鼠支气管哮喘模型。40只小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组、平喘方组4组,每组10只。给药期间记录并观察各组小鼠基本情况,给药28天后取材,运用逆转录PCR法(Realtime-PCR)及蛋白质印迹法法(Western Blot)检测哮喘模型小鼠支气管平滑肌TLR4的mRNA和蛋白水平表达,酶联免疫吸附法(Elisa)检测BALF中IL-6、IL-17、IL-10的因子水平。结果:治疗28d后,哮喘模型组TLR4mRNA水平高于明显高于其他各组(P 0. 01);空白组水平与平喘方组mRNA水平无差异(P 0. 05)。哮喘模型组TLR4蛋白WB灰度值高于平喘方组(P 0. 05);平喘方组TLR4蛋白WB水平高于地塞米松组(P 0. 05)。哮喘模型组IL-6、IL-17因子水平明显高于其他组(P 0. 01);平喘方组IL-6、IL-17因子水平明显高于地塞米松组(P 0. 01)。哮喘模型组IL-10因子水平明显低于其他组(P 0. 01);空白组IL-10水平明显高于其他组(P 0. 01);平喘方组IL-10与地塞米松组因子水平无差异(P 0. 05)。结论:平喘方可以减少气道平滑肌内TLR4mRNA的表达,以降低TLR4蛋白水平,进而影响肺内炎症因子IL-6、IL-17、IL-10的分泌,缓解哮喘模型小鼠的气道炎症。     

小青龙汤、射干麻黄汤及其合方对大鼠哮喘模型肺泡灌洗液IL-4/INF-γ影响的实验研究

目的:通过对小青龙汤、射干麻黄汤及其合方对大鼠哮喘模型肺泡灌洗液IL-4/INF-γ影响的研究,阐明小青龙汤、射干麻黄汤及其合方治疗哮喘的疗效与机理。方法:将90只大鼠随机分为6组,以卵蛋白致敏、激发的方式建立大鼠哮喘模型,予相应药物干预,用酶联免疫吸附法检测大鼠肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ的含量。结果:小青龙汤组与射干麻黄汤合方组较两单方组BALF中IFN-γ含量均明显降低,IL-4含量显著上升。结论:小青龙汤、射干麻黄汤及合方并用均能有效缓解哮喘模型大鼠临床表现及气道炎症,纠正哮喘模型大鼠肺泡灌洗液中Th1/Th2类细胞因子水平失衡,且小青龙汤与射干麻黄汤合方并用组比单方应用疗效更显著。     

神香草提取物防治支气管哮喘的作用机制

目的研究神香草提取物对支气管哮喘小鼠的防治作用。方法采用卵白蛋白致敏和滴鼻激发建立小鼠哮喘模型,给予神香草提取物进行干预后,检测小鼠外周血中白细胞总数(Leu)、嗜酸性粒细胞数(Eos)和中性粒细胞数(Neu)。用ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素4(IL-4)和干扰素(IFN-γ)以及血清中特异性免疫球蛋白(IgE)的水平。观察不同剂量的神香草提取物对哮喘小鼠肺组织病理变化的影响。结果神香草提取物可剂量依赖性的显著降低外周血中Leu、Eos、Neu数量,能显著降低小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-4和血清中IgE的含有量,升高IFN-γ的含有量,减小IL-4/IFN-γ比值,并改善肺组织病理学的炎症。结论神香草提取物对支气管哮喘小鼠炎症因子的释放,Th1/Th2免疫应答的失衡具有一定的调节作用。     

麻黄汤拆方对过敏性炎症的抑制作用

目的通过对麻黄汤各拆方配伍组合对嗜酸性粒细胞和肥大细胞的抑制作用探讨其配伍规律。方法采用在体试验观察致敏小鼠抗原攻击后肺灌洗液(BALF)和外周血中的嗜酸性粒细胞聚集反应,采用离体试验观察致敏大鼠抗原攻击后腹腔肥大细胞脱颗粒反应。结果麻黄汤及拆方减少BALF和外周血中嗜酸性粒细胞的浸润不完全相同;麻黄汤及拆方也不同程度抑制致敏大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒反应。结论麻黄汤对嗜酸性粒细胞和肥大细胞具有抑制作用,拆方分析显示麻黄汤全方效果最佳,并初步验证了麻黄汤组方的科学性和合理性。     

升气壮阳膏方联合特异性免疫对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的观察中药膏方联合特异性免疫治疗(SIT)对小鼠支气管哮喘的治疗作用。方法将BALB/c小鼠按随机数字表法随机分为空白对照组、哮喘模型组、SIT组、SIT联合中药膏方组,采用卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发构建支气管哮喘小鼠模型,给予SIT及中药膏方灌胃治疗,进行肺泡灌洗液细胞计数和分类,用ELISA法测定血清IgE、肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ含量,用HE染色法检测小鼠肺组织病理学改变。结果 SIT、中药膏方联合SIT治疗组小鼠肺组织炎症细胞浸润程度减轻,其中后者作用更显著,血清IgE水平较哮喘组下降(P0.05),中药膏方组联合SIT组较SIT下降显著;SIT、中药膏方联合SIT组在肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸性粒细胞总数均减少,BALF的IL-4下降、IFN-γ上升(P0.05),但两者间差异无统计学意义(P0.05)。结论中药膏方联合特异性免疫治疗可以降低小鼠血清IgE水平,减轻肺部炎症细胞浸润程度。     

4-色酮类和4-色满酮类化合物生物活性研究概况

 目的　综述4-色酮类和 4-色满酮类化合物生物活性的研究概况。方法　以国内外有代表性的论文为依据 ,进行分析、整理和归纳。结果与结论 4-色酮类和4-色满酮类化合物具有抗炎和抗变态反应、抗血小板聚集、抗癌和抗精神病等生物活性 ,随着人们对这两类化合物研究的深入 ,将会有更多的有关新药被开发。     

4-氧和4-羟四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物抗脂质过氧化作用研究

 目的:对6种四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物(4-TEMPO)抗脂质过氧化作用进行了实验研究,为其进一步研究及应用于临床作为抗自由基损伤药物提供依据。方法:用Fe²⁺-VitC引发大鼠肝细胞膜、心肌细胞膜、肝线粒体的脂质过氧化,通过TAB比色法测定丙二醛(MDA)含量观测了4-TEMPO抗脂质过氧化作用。结果:OTMPO(4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基)、HTMPO(4-羟-2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧自由基)、HTMPOH(4-羟-2,2,6,6-四甲基羟哌啶)、OTMPOH(4-氧-2,2,6,6-四甲基羟哌啶)有较强的剂量依赖性抑制MDA产生的作用,且OTMPOH,HTMPOH较OTMPO,HTMPO作用强,而OTMP(4-氧-2,2,6,6-四甲基哌啶)、HTMP(4-羟-2,2,6,6-四甲基哌啶)无效。结论:4-TEMPO有较明显的对抗脂质过氧化作用,作为一种临床抗自由基引起的脂质过氧化损伤的药物研究及开发利用,可能有广泛的前景。     

六种苦豆子生物碱对炎症介质白三烯的影响

目的：研究苦参碱(matrine MT)、氧化苦参碱(oxymatrine OMT)、槐果碱(sophocarpine SC)、氧化槐果碱(oxysophocarpine OSC)、槐定碱(sophoridine SRI)、氧化槐定碱(oxysophoridine OSRI)6种苦豆子类生物碱对炎症介质白三烯巴和白三烯134的影响，来研究其抗炎作用机制。方法：以大鼠腹腔白细胞为材料，采用高效液相色谱法(HPLC)测定白细胞内白三烯C4和白三烯B4水平。结果：SRI对LTC4的生物合成影响很小，但对LTB4的生物合成有明显的抑制作用。其余5种生物碱对LTC4和LTB4的生物合成均有明显的抑制作用，且有良好的剂量-效应关系。结论：6种苦豆子生物碱对白三烯(LTC4和LTB4)的生物合成均具有不同程度的抑制作用，这可能是它们抗炎作用的机制之一。     

Safety of 4-week indirect-moxibustion therapy at CV4 and CV8

PurposeMoxibustion therapy is a commonly used treatment in Oriental medicine. Here, we provide evidence for the safety of long-term moxibustion therapy.Subjectsand design: Forty-five subjects (10 men and 35 women) who complained of chronic fatigue were divided into control (5 men and 15 women) and experimental groups (5 men and 20 women) in a randomized double-blind setting. The experimental group was treated with moxibustion to CV4 and CV8 for 4 weeks (administered three times per week); the control group was exposed to simulated burning of moxibustion. Complete blood counts, blood chemistry, and urinalysis results were analyzed before and after each trial.ResultsThe absolute and relative number of peripheral blood cells did not differ between the pre- and posttreatment measurements of either group. No significant changes in blood chemistry or urinalysis data were observed in either group.ConclusionsThese results suggest that indirect moxibustion has no effect on blood chemistry or urine and is safe for clinical use. These data could be used as reference data for further moxibustion studies.     

白细胞介素-4的研究进展

 目的综述白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的研究进展。方法对近年来的文献进行整理归纳。结果IL-4在介导炎症以及过敏性疾病的发生发展中起着极其重要的作用,因此寻找高效IL-4抑制剂或拮抗剂是此类疾病药物研究的有效途径;同时IL-4及其结构修饰物在肿瘤、自身免疫性疾病等方面研究中显示出一定的效果。结论IL-4在免疫网络调节中作用复杂,在不同的疾病治疗中应进一步明确其作用机制,进行合理药物设计、改造或采用更有效的治疗方案以提高治疗效果、减小不良反应。     

4'-去甲基表鬼臼毒素的酶法糖基化

4'-去甲基表鬼臼毒素(4'-demethylepipodophyllotoxin,DMEP)的糖苷衍生物具有多种药理活性,但其化学合成面临位置及立体选择性和基团的保护与脱保护等诸多挑战。该研究从库拉索芦荟Aloe barbadensis中克隆得到1个新颖糖基转移酶(glycosyltransferase,GT)基因Ab GT5,并成功进行了外源表达及蛋白纯化。重组Ab GT5能够催化4'-去甲基表鬼臼毒素进行糖基化,获得的产物经MS,~1H-NMR,~(13)C-NMR,HSQC以及HMBC等波谱技术鉴定为4'-去甲基表鬼臼毒素-4'-O-β-D-葡萄糖苷。酶学性质研究发现AbGT5的最适反应温度为20℃,最适pH 9.0,且不依赖金属离子。在最适反应条件下,4'-去甲基表鬼臼毒素的转化率可达80%。该研究表明利用新颖糖基转移酶AbGT5可实现4'-去甲基表鬼臼毒素的高效酶法糖基化,为其糖基化提供新方法。     

Antitumor agents, 130, Novel 4 beta-arylamino derivatives of 3',4'-didemethoxy-3',4'-dioxo-4-deoxypodophyllotoxin as potent inhibitors of human DNA topoisomerase II.

A series of ortho-quinone analogues 1-28 of podophyllotoxin possessing various C-4 beta-aniline moieties have been synthesized and evaluated for their inhibitory activity against human DNA topoisomerase II, their activity in causing cellular protein-linked DNA breakage, and their cytotoxicity against KB cells. Compounds 8-12, 15, 19, and 23-28 are better than or comparable to etoposide in their inhibition of the human DNA topoisomerase II, while compounds 8-10 and 22 are comparable to or more potent than etoposide in causing DNA breakage. There is an apparent lack of correlation between cytotoxicity and the ability of these compounds to cause protein-linked DNA breaks or inhibit DNA topoisomerase II. This suggests that in addition to the mechanism of the topoisomerase II involving DNA breakages, other mechanisms of action, such as the radical mechanism or the direct adduct formation of the ortho-quinone with DNA or protein, may also involve and account for the apparent KB cytotoxicity. Two different modes of DNA topoisomerase II inhibition for 8-28 were proposed.     

经方新用四则

1五苓散治闭经 杜某，女，24岁，农民，2005年6月20日就诊。经期下水劳动，适逢暴雨侵淋，是夜即恶寒战栗，经血骤停。继而小腹冷痛，全身浮肿，曾经多方医治，中西药迭进，不惟肿胀不减，且闭经已半年余。     

4’-去甲峨参内酯对四种肿瘤细胞凋亡的作用及机理研究

目的:探讨4’-去甲峨参内酯(0号衍生物)作用于Hela、MG-63、Hep G2、A549四种肿瘤细胞后,对Bcl-2、Bax基因表达、细胞周期及凋亡产生的影响。方法以0号衍生物作为观察组,0.1%DMSO作为空白对照组,紫杉醇作为阳性对照组,分别作用48 h后采用ELISA试剂盒检测对四种肿瘤细胞Bcl-2、Bax表达的影响;采用流式细胞仪PI单标法检测细胞周期进程及凋亡的影响。结果 ELISA试剂盒检测表明,观察组及阳性对照组与空白对照组比较Bcl-2/Bax比值均明显降低,具有显著性差异(P0.05);流式细胞仪检测0号衍生物作用四种肿瘤细胞48h后对细胞周期进程及凋亡的影响,结果表明G0/G1期细胞百分数降低,G2/M期细胞百分数基本不变,而S期细胞百分数上升,说明0号衍生物阻滞肿瘤细胞于S期,且sub-G1细胞亚二倍体凋亡峰增加,进一步说明其诱导凋亡的作用。结论 0号衍生物通过上调Bax、下调Bcl-2,促进肿瘤细胞凋亡;阻滞肿瘤细胞于S期,sub-G1峰增加,显示其具有诱导细胞凋亡的作用。     

临床验案4则

1 龙胆泻肝汤治遗精 李某,男,21岁,未婚。1980年4月10日初诊。主诉：遗精数月,每3天～5天1次,既往身体健壮,近年时常头晕,乏力,经用各种中西补养药品,亦曾服用汤剂参、茸、巴戟之类,其症未见改善。证见遗精频作,口苦口干,口渴欲饮,心烦易怒,小便短赤,大便如常,饮食尚可。诊见：形体壮实,脉象弦数有力,舌质红,苔薄黄。