风心病慢性房颤患者左右心房组织纤维化程度及TGF—β1的mRNA表达差异的研究

目的探讨风湿性心脏病（风心病）伴慢性心房颤动（房颤）患者左、右心房组织纤维化程度及转化生长因子β1（TGF-β1）的mRNA表达是否存在差异。方法选取接受瓣膜置换的风心病慢性房颤患者40例,风心病窦性心律患者10例。术中分别收取左、右心耳组织各约100mg。通过苦味酸天狼猩红染色法对心房组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原容量分数（CVF-I,CVF-Ⅲ）进行半定量分析;应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测心房组织中TGF-β1的mRNA表达水平。结果①与风心病窦性心律组（窦律组）相比,风心病房颤组（房颤组）患者左房内径显著扩大（P〈0．05）,左、右心房组织TGF-N的mRNA表达、CVF-I及CVF-I／CVF-Ⅲ比值明显增加（P〈0．05）,CVF-Ⅲ变化不明显（P〉0．05）。②窦律组患者左心房与右心房TGF-β1,的mRNA表达、CVF-I及CVF-I／CVF-Ⅲ比值无明显区别（P〉0．05）;而房颤组患者左心房较右心房组织中TGF-β1。的mRNA表达、CVF-I及CVF-I／CVF-Ⅲ比值明显增加（P〈0．05）。③相关分析发现无论在左心房还是右心房,TGF—β1的mRNA表达水平与心房组织CVF-I呈正相关（左：r=0．786,P〈0．05;右：r=0858,P〈0．05）。结论在风心病慢性房颤过程中,左心房组织纤维化程度及TGF-13,的mRNA表达较右心房更加明显,心房组织TGF-β1的mRNA表达增高可能是心房纤维化的分子机制之一。     

微小RNA-101在心房颤动心房纤维化中的作用

目的:探讨微小RNA-101(mi RNA-101)在心房颤动心房纤维化中的作用。方法:59例开胸手术患者(心脏瓣膜病47例,先天性心脏病12例),分为房颤组30例、窦律组29例。q PCR及锁定核苷酸原位杂交技术检测两组右心耳mi RNA-101表达;q PCR检测两组右心耳转化生长因子βⅠ型受体(TGFβRⅠ)、Ⅰ型胶原(COL1)m RNA表达;免疫印迹法检测两组右心耳TGFβRI、COL1蛋白表达;Masson染色观察两组右心耳胶原的沉积。结果:房颤组右心耳mi RNA-101表达明显低于窦律组(P<0.05),原位杂交显示mi RNA-101主要分布于心房结缔组织,房颤组mi RNA-101表达较窦律组下降24.9%;房颤组TGFβRⅠm RNA表达与窦律组无明显差异(P>0.05),但蛋白表达明显高于窦律组(P<0.05);COL1m RNA及蛋白表达均明显高于窦律组(P<0.05);房颤组右心耳胶原沉积明显多于窦律组(P<0.05)。结论:mi RNA-101下调在心房颤动心房纤维化过程中起重要作用,其可能通过调控TGFβRⅠ而参与心房纤维化。     

苦参碱对房颤犬心房肌胶原合成及TNF-α、TGF-β1和CTGF的影响

目的：探讨苦参碱对犬心房颤动（房颤）心房肌组织中胶原合成以及肿瘤坏死因子（TNF-α）、转化生长因子（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法健康比格犬10只采用快速右心室起搏造房颤模型,随机分成房颤组和房颤＋苦参碱组各5只。采用天狼星红染色,计算胶原容积分数（CVF）以测定纤维化程度;采用免疫组织化学法检测右心房TNF-α、TGF-β1和CTGF的蛋白表达情况;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测TNF-α、TGF-β1和CTGF的mRNA水平表达情况。结果与房颤组相比,房颤＋苦参碱组纤维化程度降低,CVF 明显下降（P＜0.05）,TNF-α、TGF-β1和 CTGF 蛋白表达水平下降,且TNF-α和TGF-β1的mRNA表达水平显著下降（P＜0.05,P＜0.01）。结论苦参碱可能通过抑制TNF-α、TGF-β1和CTGF的表达,抑制房颤心房肌胶原合成,改善心房组织纤维化程度。     

P53基因与风湿性心脏病心房颤动患者心肌纤维化的相关性研究

目的探讨P53基因对风湿性心脏病心房颤动(简称房颤)患者心房结构重构的影响以及可能发生的分子机制。方法 60例风湿性心脏病接受换瓣手术患者分为窦性心律组(SR)和房颤组(AF)。于术中获取右心耳组织、外周抗凝血及非抗凝血。采用实时荧光定量(FQ-PCR)法检测心肌组织中P53、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原m RNA的表达;ELISA法检测血清中人Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)、人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)的浓度,心肌组织行HE染色病理学检测,并对以上结果进行相关性分析。结果 (1)与SR组比较,AF组左心房内径(LAD)明显扩大;AF组心肌组织中Ⅰ型胶原m RNA水平明显增加(t=2.11,P<0.05);AF组Ⅲ型胶原m RNA表达量无统计学意义(t=0.187,P>0.05);AF组血清PⅠCP、PⅢNP含量明显增加(t=3.491,P<0.01;t=2.695,P<0.05)。(2)病理切片可见SR组心肌间质中仅有少量胶原纤维;AF组可见心肌间质中纤维组织增生,心肌肌束被大量条索状胶原纤维分隔。(3)AF组心肌组织中P53 m RNA水平明显增加(t=4.87,P<0.01);AF组心肌组织中P53 m RNA水平与左心房内径、心肌组织中Ⅰ型胶原m RNA、血清中PⅠCP、PⅢNP呈显著的正相关关系(r=0.776,P<0.01;r=0.765,P<0.01;r=0.798,P<0.01;r=0.615,P<0.05);且Ⅰ型胶原m RNA与PⅠCP成正相关(r=0.698,P<0.05)。结论 P53基因可能是参与房颤患者心房结构重构、心肌纤维化的分子机制之一,可能与房颤的发生和维持有关。     

经胸二维及三维超声心动图观察心房颤动患者左心房及肺静脉结构改变

目的 应用经胸二维及三维超声心动图观察心房颤动(房颤)患者左心房及肺静脉结构改变.方法 对126例患者进行检查,其中窦性心律(窦律)组64例,房颤组62例,房颤组依据病史进一步分为阵发房颤组及非阵发房颤组.首先进行二维超声检查,测量并计算左心房前后径(LAD)、左心房面积(LAA)、左心房容积(LAV).应用三维全容积显像测量肺静脉直径.结果 房颤组4支肺静脉直径较窦律组明显增宽,差异具有统计学意义(P＜0.05);在房颤患者中,非阵发房颤组4支肺静脉直径显著大于阵发房颤组(P＜0.05).窦律组、阵发房颤组、非阵发房颤组组内各支肺静脉比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).房颤组与窦律组比较、非阵发房颤组与阵发房颤组比较,LAD、LAA、LAV明显增大(P＜0.05).结论 房颤患者心房增大,肺静脉增宽,非阵发房颤患者肺静脉增宽更明显.经胸二维及三维超声心动图町以无创观察房颤患者左心房及肺静脉结构改变.     

慢性乙型肝病患者肝组织和血清TGF-β1的测定及临床意义

目的探讨慢性乙型肝病(CLD-B)患者血清TGF-β1水平变化在反映肝脏炎症和纤维化程度的诊断意义。方法采用ELISA法检测155例CLD-B患者血清TGF-β1水平,对其中31例患者的肝穿活体组织进行原位杂交检测TGF-β1 mRNA,HE染色和Van Gieson氏胶原染色进行炎症分级和纤维化分期。结果慢性乙型肝炎(CHB)及活动性肝硬化患者血清TGF-β1水平显著高于对照组(P0.01),TGF-β1水平在活动性肝硬化最高(P0.05),而静止性肝硬化升高不明显(P0.05)。CLD-B患者血清TGF-β1分泌水平与肝组织TGF-β1 mRNA表达强度展示良好的一致性。Spearman相关分析显示:CLD-B患者血清TGF-β1水平与肝组织炎症分级及早期肝纤维化分期呈正相关(r=0.721,r=0.683,均为P0.05)。结论 CLD-B患者检测血清TGF-β1对推断肝脏炎症和早期肝纤维化的程度具有临床诊断意义。     

转化生长因子-β1及其受体在免疫性血小板减少性紫癜症患者中的表达及意义

本研究通过检测外周血转化生长因子(TGF-β1)及其受体((TGF-βR)的表达探讨其在免疫性血小板减少性紫癜症(ITP)发病中的作用机制。以ITP患者为研究对象,健康人为对照,通过实时PCR方法检测外周血中TGF-β1及其受体(TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ和TGF-βRⅢ)的表达量,分析两组之间的差异。结果表明,ITP患者组TGF-β1和TGF-βRⅡmRNA的表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义,而TGF-βRⅠmRNA的表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义。TGF-βRⅢmRNA的表达在两组间无统计学差异。结论:TGF-β1及其受体TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ在ITP患者中表达异常,表明TGF-β1信号通路在ITP患者发病中可能具有一定的作用。     

心房颤动患者超速激活延迟整流性钾电流重构的研究

目的:探讨心房颤动(房颤)患者超速激活延迟整流性钾电流(ⅠKur)的改变及意义。方法:采用膜片钳全细胞法分别记录窦性心律(窦律)患者心房肌细胞(窦律组)和房颤患者心房肌细胞(房颤组)ⅠKur密度,并进行对比。结果:指令电位+20～+50mV时,房颤组ⅠKur密度均较窦律组明显降低(P<0.05)。结论:ⅠKur密度下调是房颤心房电生理重构的重要离子基础,可能对心房动作电位时程的缩短具有一定代偿意义。     

风湿性心脏病慢性房颤心房扩大与心房电生理的相关性研究

目的:探讨风湿性心脏病慢性房颤左房内径大小对心房电生理特性的影响。方法:选择风湿性心脏病慢性房颤患者16例,术前采用超声心动图测量左心房内径,采用心外膜标测技术测量心房有效不应期(AERP)和波长指数(WLI),并与左房内径行相关性分析。结果:慢性房颤患者左房内径和右房压力明显高于窦性心律患者(P<0.05),左房内径与AERP和WLI呈负相关(r=-0.882和-0.745)。结论:风心病慢性房颤左心房扩张影响心房的电生理特性,提示左心房的扩张引起心房结构重构,并影响心房的电生理重构而导致房颤的发生和维持。     

房颤犬心房组织转化生长因子β1和血管紧张素转化酶的表达及意义

目的探讨促心房纤维化因素转化生长因子β1(TGF-β1)和血管紧张素转化酶(ACE)与心房颤动(AF)的相关性。方法健康杂种犬16条,随机分为对照组(n=8)与AF组(n=8)。AF组置入永久起搏器,起搏时间24周。对照组不植入起搏器。制备AF犬模型。在左、右心房切取组织块,甲醛固定后,石蜡包埋保存。两组石蜡切片均行免疫组织化学检测TGF-β1和ACE,比较两组间TGF-β1、ACE的表达水平。结果以平均光密度表示各组TGF-β1、ACE的表达水平,进行定量分析。结果显示:AF组TGF-β1的平均光密度测定值明显高于对照组(19.00±6.44)%vs(11.07±6.27)%(P<0.01);AF组ACE的平均光密度测定值明显高于对照组(8.73±3.86)%vs(5.52±2.66)%(P<0.01)。结论TGF-β1和ACE是促进心房纤维化形成的重要因素,可能与AF的发生和维持密切相关。     

高血糖对肝纤维化大鼠血清中TGF-β1、CTGF含量的影响

目的观察高血糖对肝纤维化大鼠血清中转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)含量的影响,探讨高血糖与肝纤维化之间的相关性。方法将40只SD大鼠按照体重随机分为4组,每组10只,分别为对照组(C组)、高血糖组(H组)、肝纤维化组(M组)、高血糖+肝纤维化组(H+M组),其中用四氯化碳造肝纤维化模型,用链脲佐菌素诱导出现高血糖,8周后将动物处死,取血,采用酶联免疫分析法(ELISA法)检测4组动物血清中TGF-β1、CTGF的含量,采用实时定量RT-PCR检测4组动物血清中TGF-β1、CTGF mRNA的表达。结果 TGF-β1、CTGF含量及mRNA表达在H组与C组相比无显著差异(P0.05),M组及H+M组血清中上述指标明显高于C组(P0.05),而H+M组血清中上述指标升高更明显(P0.05);且TGF-β1与CTGF之间具有明显的正相关(r=0.812,P0.05)。结论高血糖能够增加肝纤维化大鼠血清中TGF-β1及CTGF的表达及含量,且TGF-β1与CTGF含量与肝纤维化程度呈正相关,可以作为评价肝纤维化的重要指标。     

卡配因参与风心病房颤患者心房纤维化过程

目的检测Calpain I、Calpain II、caspase-12在风湿性心脏病心房颤动患者心房组织中的表达,探讨其在心房纤维化发展中的作用及其对房颤发生、维持的作用。为临床慢性房颤患者心房纤维化及心房结构重构的防治提供新的靶点。方法取32例风湿性心脏病行外科换瓣手术患者左心房组织,分为A组：永久性房颤组（Permanent AF组）16例,B组：阵发性或持续性房颤组（Paroxysmal or persistent AF组）10例,C组：窦性心律组（Sinus rhythm组）6例。采用免疫组化法测Calpain I、Calpain II、caspase-12在左心房组织中的表达并计算其灰度值,心肌胶原染色采用VG染色,光镜下观察组织纤维化程度,并计算胶原容积积分（CVF）。结果风湿性心脏病心房颤动患者calpain I、calpain II、caspase-12在左心房组织表达明显增多（P〈0.05）,calpain I、calpain II与CVF呈正相关。结论 calpain I、calpain II通过促进心肌细胞凋亡促进了风湿性心脏病心房颤动心房纤维化过程。     

基质金属蛋白酶-9及组织抑制因子-1在老年犬持续性心房颤动心房组织中表达

目的探讨基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinase,MMP）-9及组织抑制因子（tissueinhibitorsofmetalloproteinase,TIMP）-1在老年犬持续性心房颤动（房颤）心房肌组织中表达变化及其与心房颤动及纤维化发生的关系。方法健康比格犬18只随机分为成年、老年窦性心律组各5只、成年、老年持续性房颤组各4只。采用Masson三色法染色,计算胶原容积分数以测定纤维化程度,采用RT-PCR检测左心房MMP-9及TIMP-1的mRNA水平表达情况,采用蛋白质印迹法测定其蛋白水平表达情况。结果与成年窦性心律组比较,其余3组心房肌组织纤维化程度明显增高（P〈0．01）;TIMP-1mRNA表达水平下降（P〈0．05）,MMP-9蛋白表达水平升高（P〈0．01）,TIMP-1蛋白表达水平下降（P％0．01）;老年窦性心律组及老年持续性房颤组MMP-9mRNA表达水平较成年窦性心率组升高（P〈0．05）;与成年持续性房颤组比较,老年持续性房颤组纤维化程度增加,胶原容积分数明显增高（P％0．05）,TIMP-l蛋白表达水平下降（P〈0．01）。结论心房组织中MMP9和TIMP1基因表达失衡可能是影响胶原代谢、造成增龄性心房颤动时心房肌纤维化的分子机制之一,与增龄性心房颤动的发生和持续有关。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯在二甲基亚硝胺诱导肝纤维化大鼠中的作用及机制

目的观察吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导肝纤维化大鼠肝组织核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Ⅲ型胶原(collagen typeⅢ,Col-Ⅲ)表达的影响,探讨PDTC抗肝纤维化的可能机制。方法 22只SD大鼠随机分为对照组6只,模型组8只和治疗组8只。模型组和治疗组腹腔注射质量分数0.5%DMN溶液2mL/kg,每2d注射1次,连续4周,诱导大鼠肝纤维化模型;对照组腹腔注射等量生理盐水。治疗组造模期间给予PDTC溶液150mg/(kg·d)灌胃,对照组、模型组给予等量蒸馏水灌胃。实验结束后处死大鼠,取肝左叶组织光镜下观察肝组织病理改变,采用电泳迁移率试验检测肝组织NF-κBp65活性,实时荧光定量PCR法检测肝组织NF-κBp65、TGF-β1和Col-ⅢmRNA表达,免疫组织化学法检测肝组织NF-κBp65着色细胞数目和Col-Ⅲ着色面积。结果对照组肝小叶结构正常,细胞排列规律,未见肝细胞变性、坏死;模型组肝细胞融合性坏死,胶原纤维明显增生,假小叶形成;治疗组肝细胞肿胀、变性及炎症细胞浸润程度均较模型组轻;模型组、治疗组肝组织NF-κBp65活性[(76.6±6.5)%、(51.2±4.6)%],NF-κBp65mRNA(0.019 3±0.005 0、0.009 5±0.002 1)、TGF-β1mRNA(0.017 5±0.001 2、0.009 7±0.001 1)及Col-ⅢmRNA表达(0.077 5±0.030 5、0.030 1±0.003 3)均高于对照组((28.5±3.3)%、0.003 0±0.001 4、0.004 7±0.000 9、0.015 2±0.005 5)(P0.05),NF-κBp65着色细胞数目[(68.60±4.65)、(49.65±3.60)个]均较对照组[(14.68±2.98)个]多(P0.05),Col-Ⅲ着色面积[(10.39±1.53)、(7.36±1.17)μm2]均较对照组[(2.46±0.31)μm2]大(P0.05);模型组肝组织NF-κBp65活性,NF-κBp65mRNA、TGF-β1mRNA及Col-ⅢmRNA表达均较治疗组高,NF-κBp65着色细胞数目较治疗组多,Col-Ⅲ着色面积较治疗组大(P0.05);Pearson相关分析结果显示,肝组织NF-κBp65活性与NF-κBp65mRNA、TGF-β1mRNA、Col-ⅢmRNA表达,NF-κBp65着色细胞数目,Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.884,P0.001;r=0.976,P0.001;r=0.769,P0.001;r=0.934,P0.001;r=0.942,P0.001),TGF-β1 mRNA与Col-ⅢmRNA表达及Col-Ⅲ着色面积均呈正相关(r=0.831,P0.001;r=0.918,P0.001)。结论PDTC可能通过抑制NF-κB活性,下调TGF-β1表达,抑制以Col-Ⅲ为主要成分的细胞外基质过度沉积,来发挥抗肝纤维化作用。     

DMN肝纤维化模型肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TIMP-1 mRNA表达及复方861的干预作用

目的研究二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化模型Ⅰ型胶原(CoL-1)、Ⅲ型胶原(CoL-Ⅲ)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1) mRNA表达以及复方861的干预作用.材料和方法采用1%DMN 1ml/kg腹腔注射模型组大鼠,复制DMN诱导的大鼠肝纤维化模型,同时复方861灌胃3g/kg,共8周,以RT-PCR法观察肝纤维化模型肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA表达水平.结果DMN大鼠肝纤维化模型组CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA分别为0.827±0.094、0.953±0.033及0.924±0.110,明显高于正常对照组(P＜0.01);复方861治疗组CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA为0.497±0.057、0.851±0.065和0.648±0.107,明显低于模型对照组(P＜0.01或P＜0.05).结论DMN肝纤维化模型肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA表达水平增高,复方861能够抑制肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA的表达,从而发挥其抗肝纤维化的作用.     

吲哚氰绿排泄试验与参与肝纤维化的细胞因子-TGF-β1mRNA的相关性研究

目的探讨吲哚氰绿(ICG)排泄试验与参与肝纤维化的细胞因子-TGFβ1mRNA表达相关性,验证ICG排泄试验可以作为诊断早期肝纤维化的一个敏感指标。方法 42只清洁级Wistar大鼠随机分为正常组(N组)和CCl4组(C组)。C组通过CCl4皮下注射造模,于造模后第2、4、6、8周分别测定ICG15分钟潴留率,用半定量RT-PCR法检测大鼠肝组织TGF-β1mRNA表达。结果成功建立肝纤维化模型,准确测定ICG15分钟潴留率。TGF-β1 mRNA量:正常组、第2、4、6、8周组间TGF-β1mRNA量差异具有显著性(P0.01);与正常组相比,第4、6、8周组TGF-β1mRNA量差异具有显著性(P0.01);第2周组TGF-β1mRNA量差异具有显著性(P0.05),余各组间差异均具有显著性(P0.01)。结论 ICG排泄试验与肝纤维化的细胞因子-TGF-β1mRNA表达具有良好相关性,该试验可以作为诊断早期肝纤维化的敏感指标。     

pcDU6质粒载体介导的TGFβ1shRNA及pcDNA3.1介导的TGF-β1反义RNA抑制人腹膜间皮细胞TGFβ1的表达及细胞外基质的分泌

目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)和TGF-β1反义RNA对体外培养的人腹膜间皮细胞(HPMC)TGF-β1表达及细胞外基质分泌的影响.方法利用带有U6启动子的pcDNA3.1(-)载体(命名为pcDU6)构建TGF-β1短发夹RNA的产生质粒,用pcDNA3.1(-)载体构建反义TGF-β1基因真核表达载体,采用胰蛋白酶消化法从人大网膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型.用脂质体转染表达转化生长因子β1shRNA的pcDU6载体质粒和表达反义TGF-β1RNA的pcDNA3.1(-)的载体质粒人高糖(4.25%D-葡萄糖)和细菌脂多糖(LPS)刺激下人腹膜间皮细胞.采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)半定量分析HPMC中TGF-β1mRNA的表达以及纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)和胶原Ⅰ(ColⅠ)的mRNA表达.采用双抗夹心法酶联免疫吸附实验检测HPMC培养液中TGF-β1蛋白质水平.结果HPMC在高糖(4.25%D-葡萄糖)和细菌脂多糖(LPS)的刺激下可明显上调TGF-β1的表达(P＜0.01),TGF-β1反义RNA转染HPMC后,与对照组相比,转染24小时后,FN、ColⅠ、PAI-1 mR-NA分别下调17.0%、26.0%、9.6%(P＜0.05).pcDU6载体质粒介导的转化生长因子β1shRNA干扰组较Gs LPS组及pcDU6空载体组明显下调TGF-β1的表达(P＜0.01),pcDNA3.1(-)的载体质粒介导的反义RNA组与pcDU6空载体组比较差异无显著性(P＞0.05),pcDU6载体质粒介导的转化生长因子β1shRNA干扰组较pcDNA3.1(-)的载体质粒介导的反义RNA组明显下调TGF-β1的表达(P＜0.01).结论pcDU6载体质粒介导的转化生长因子β1shRNA能够明显抑制在高糖(4.25%D-葡萄糖)和细菌脂多糖(LPS)的刺激下的HPMC转化生长因子β1的基因表达,可能为临床防治长期腹膜透析患者的腹膜纤维化提供一种较为有效的方法.     

(TGF)-β1、LECT2在胆道闭锁肝纤维化中的表达水平及诊断价值

目的探究转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞衍生趋化因子2(LECT2)在胆道闭锁肝(BA)纤维化中的表达水平及诊断价值。方法收集2019年2月-2020年8月期间我院收治的50例胆道闭锁患儿及30例胆管扩张症患儿的临床资料,另外选择无肝胆疾病的肝脏组织的28例患儿作为对照组,分别作为胆道闭锁组(n=50)、胆管扩张组(n=30)、对照组(n=28),术中取各组患儿肝右叶前缘为活检标本,HE及免疫组化染色显微镜下观察肝组织细胞发育、肝纤维化程度,进行定性分析、定量分析,取相同倍数显微镜下图片,图像分析软件IPP6.0分析每张图片5个视野,计算TGF-β1、LECT2的AOD。结果胆道闭锁组TGF-β1、LECT2阳性率较胆管扩张组及对照组高(P0.05),TGF-β1、LECT2表达水平较胆管扩张组及对照组高(P0.05),I级～II级患者TGF-β1表达水平明显升高,III级～IV级者TGF-β1表达水平明显降低(P0.05)。I级～IV级患者随着纤维化程度升高,LECT2表达水平逐渐升高(P0.05)。病情轻重概率模型为Logit (P)=(-2.954)+1.644BNP+1.843TGF-β1。结论在纤维化早期TGF-β1表达水平明显升高,在晚期TGF-β1表达水平明显下降,LECT2表达水平与肝纤维化程度间具有正向相关性,两者是评估BA患者肝纤维化程度的有效指标。     

支气管哮喘患者支气管肺泡灌洗液中IL-17、TGF-β1水平变化

目的探讨支气管哮喘患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-17(IL-17)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平变化。方法选取该院收治的支气管哮喘急性发作患者153例为观察组,根据病情严重程度分为轻度组(31例)、中度组(75例)和重度组(47例),选取同期体检健康者40例作为对照组。入院时(急性期)及治疗后(恢复期)采集患者BALF,检测IL-17、TGF-β1、IL-17 mRNA、TGF-β1 mRNA表达。结果急性期,观察组IL-17、TGF-β1水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);中、重度组IL-17、TGF-β1水平高于轻度组,重度组TGF-β1水平高于中度组,差异有统计学意义(P0.05)。急性期,观察组IL-17 mRNA、TGF-β1 mRNA明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);中、重度组IL-17 mRNA、TGF-β1 mRNA表达高于轻度组,重度组TGF-β1 mRNA表达高于中度组,差异均有统计学意义(P0.05)。恢复期,重度组IL-17水平仍高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),而轻、中度组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);中、重度组TGF-β1水平仍高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),而轻度组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论支气管哮喘急性发作患者IL-17、TGF-β1水平升高,且与病情严重程度有关。恢复期,轻、中度患者IL-17水平恢复正常,轻度患者TGF-β1水平恢复正常,重度患者IL-17、TGF-β1水平仍明显高于健康者。     

肾上腺髓质素和转化生长因子β_1对肺成纤维细胞增殖及c-myc表达的影响

目的探讨肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)促肺成纤维细胞增殖及c-myc基因表达的影响。方法体外原代培养人胚肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblasts,HFLFs),分为对照组、AM组、TGF-β1组和AM+TGF-β1组,采用MTT法观察各组光吸度(optical density,OD)值;各组提取细胞总RNA,采用反转录PCR观察c-myc基因mRNA表达情况。结果 AM+TGF-β1组HFLFs细胞培养24、48、72h时OD值(0.615±0.054、0.483±0.017、0.675±0.014)明显低于TGF-β1组(0.830±0.012、0.753±0.089、0.929±0.039)(P0.05),TGF-β1组HFLFs细胞培养72h时OD值(0.929±0.039)明显高于对照组(0.605±0.274)(P0.05),AM组HFLFs细胞培养24、48h时OD值(0.559±0.019、0.412±0.096)明显低于对照组(0.785±0.081、0.646±0.038)(P0.05);AM组c-myc mRNA相对表达量(0.450±0.025)明显低于对照组(P0.01);TGF-β1组c-myc mRNA相对表达量(1.160±0.100)高于对照组(P0.05);AM+TGF-β1组c-myc mRNA相对表达量(0.340±0.030)低于TGF-β1组(P0.01)。结论 AM能抑制肺成纤维细胞增殖和c-myc基因表达,AM可能具有抗纤维化作用。