金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫病循环抗原的研究

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针,以抗猪囊尾蚴抗原的McAb为联桥,建立了非常规Dot-IGS用于检测脑囊虫病患者CAg的方法,用4G_2McAb检测84例脑囊虫病人脑脊液(CSF),CAg阳性率为88.09％。检测63例其他疾病患者,出现2例假阳性。以1F_(11)McAb检测14例脑囊虫病人,13例检出CAg,阳性率为92.86％。检测其他疾病患者36例,均为阴性。用4G_2与1F_(11),株McAb可分别检出最小抗原量为1ng/ml和0.25ng/ml。本法敏感、特异、操作简单,可用于脑囊虫病的诊断。     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫…

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针，以抗猪囊尾蚴抗原的ＭｃＡｂ为联桥，建立了非常规Ｄｏｔ－ＩＧＳ用于检测脑囊虫病患者ＣＡｇ的方法，用４Ｇ２ＭｃＡｂ检测８４例脑囊虫病人，１３例检出ＣＡｇ，阳性率为９２．８６％。检测其他疾病患者３６例，均为阴性。用４Ｇ２与１Ｆ１１株ＭｃＡｂ可分别检出最小抗原量为１ｎｇ／ｍｌ和０．２５ｎｇ／ｍｌ。本法敏感、特异、操作简单，可用于脑囊虫病的诊断。     

McAb检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制

本文报道了McAb(4F_2)ELISA检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制。实验对227例脑囊虫病患者脑脊液进行检测,循环抗原阳性率为84.58％,其中活动型脑囊虫病患者171例,循环抗原阳性率为93.57％。56例非活动型脑囊虫病患者,循环抗原阳性率为57.14％,前者的循环抗原强度也明显高于后者。83例患有其它中枢神经系统疾病的患者,1例阳性,阴性符合率为98.80％。本试验方法简便,结果客观,对脑囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高、特异性强。     

囊虫病快速免疫色谱测试法的建立和初步应用

目的：建立一种敏感，特异，简便快速的囊虫病免疫诊断方法。方法：以胶体金标记抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体，将另一抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体在硝酸醋酸混合纤维素膜上固定成一条线，制成免疫测试条，待测抗原与金标单克隆抗体结合后沿着硝酸醋酸混合纤维素膜移动，与膜上的特异性单克隆抗体结合形成肉眼可见的褐红色线，结果：当猪囊尾蚴囊液抗原量为5ng时，测试条仍呈阳性反应，检测脑囊虫病患者脑脊液（CSF）的阳性率为82．60％，检测健康人CSF的阴性符合率为100％，将本法检测CSF结果与ELISA比较，两方法的敏感性和特异性相似，结论：本方法敏感，特异，操作简便快速，试剂稳定，重复性好，在囊虫病的诊断中具有很好的应用前景。     

IFAT和McAb-LAT诊断囊虫病的研究

本文采用猪囊尾蚴冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）和抗猪囊尾蚴单克隆抗体胶乳凝集试验（ＭｃＡｂ－ＬＡＴ）对囊虫病患者进行特异性抗体和抗原的检测，囊虫病患者抗体检出率为８３．７１％，分型抗体检测，混合型及脑型检出率明显高于皮肌型（Ｐ＜０．０１）；患者循环抗原的检出率为７３．０５％，脑型患者囊虫活动期的循环抗原的阳性率明显高于囊虫钙化期（Ｐ＜０．０１），药物治疗３个月以上患者循环抗原的阳性率降为４４．１１％。ＩＦＡＴ和ＭｃＡｂ－ＬＡＴ在囊虫病临床诊断中具有较高价值，循环抗原的检测在脑型囊虫病活动期诊断和疗效考核中具有重要意义     

斑点ELISA在脑囊虫病免疫诊断中的应用

本文以猪囊尾蚴囊液为抗原作斑点 ELISA,105例脑囊虫病人血清和脑脊液的阳性率分别为93.3%(84/90)和93.4%(57/61),107例健康人血清均为阴性,与丝虫病、疟疾和华支睾吸虫病人血清无交叉反应。其他脑部疾病脑脊液的检测,全部阴性。结果表明此法诊断脑囊虫病具有较高的敏感性和特异性。     

IFAT和McAb—LAT诊断囊虫病的诊断

本文采用猪囊尾蚴冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）和抗猪囊尾蚴单克隆抗体乳胶凝集试验（ＭｃＡｂ－ＬＡＴ）对囊虫病患者进行特异性抗体和抗原的检测，囊虫病患者抗体检出率为８３．７１％，分型抗体检测，混合型及脑型检出率明显高于皮肌型（Ｐ〉０．０１）；患者循环抗原的检出率为７３．０５％，脑型患者囊虫活动期的循环抗原的阳性率明显高于囊虫钙化期（Ｐ〈０．０１），药物治疗３个月以上患者循环抗原的阳性率降为     

近期在委内瑞拉印第安人中发生猪带绦虫感染的血清学证据

猪囊尾蚴病特别是脑囊尾蚴病是拉美地区一种重要的寄生虫病。该病主要流行于牲猪放养且卫生条件较差的地区。作者在委内瑞拉亚马孙河附近的一个印第安人聚居地进行了猪带绦虫感染的血清流行病学调查 ,并与临床确诊的一批脑囊虫病患者的血清学检查结果作比较。实验共分 3组 ,A组是从参与免疫接种计划的印第安人中随机抽取的 6 8例血清样本 ;B组 2 6例 ,为临床脑囊虫病患者血清 ;C组为对照 ,为 2 8例健康者和 2 0例其他疾病患者的血清。用ELISA分别检测血清中囊尾蚴循环抗原 (Ag ELISA )和抗体 (Ab ELISA) ,并用酶联免疫电转移印迹 (…     

猪囊尾蚴蛋白水解酶的初步研究

猪带绦虫病是人畜共患病。迄今国内外对囊虫病的研究主要报道特异性的诊断方法[1 ,2 ] 和诊断抗原[3 ,4] 。Ｍａｎｏｕｔｃｈａｒｉａｎ等[5 ] 克隆了肥头绦虫囊尾蚴囊液蛋白编码 5 6、74和 78ｋＤａ的保护性抗原基因。孙树汉等[6 ] 以囊虫病患者血清和病猪血清为探针筛选猪囊尾蚴ｃＤＮＡ文库 ,克隆了用于诊断的人特异性抗原、猪特异性抗原及人、猪共同抗原。关于猪囊尾蚴蛋白水解酶 ,目前尚未见研究报道。本文从猪囊尾蚴体内提取蛋白酶 ,研究其对各种底物的分解活性及酶抑制剂和二价阳离子对酶活性的影响。 河北省自然科学基金资助项目 (…     

猪囊尾蚴液、固相多种抗原对囊虫病免疫诊断效果评价

目的　筛选适合多种寄生虫病流行区使用的特异性较高的囊虫病免疫诊断抗原。　方法　制备猪囊尾蚴各类型液相抗原和固相抗原 ,用ELISA或IEST检测囊虫病流行区患者阳性血清抗体 ,比较各种抗原的敏感性和特异性。　结果　猪囊尾蚴全囊及囊液尿素溶性抗原与水溶性纯化抗原ELISA检测囊虫抗体的特异性差异无显著性 (P >0 .0 5 )。固相抗原IEST有敏感性好、操作简易的特点。　结论　猪囊尾蚴全囊尿素溶性纯化抗原是较理想的囊虫病ELISA诊断抗原 ,有诊断应用价值。固相石腊切片抗原IEST较为适合流行区现场或基层应用。     

应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原的研究

为探讨应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原（CAg）诊断囊虫病的价值，应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人及非囊虫病人血清中的CAg，并将该方法与ELISA作了比较。检测78份囊虫病患者血清，56例显示为阳性，阳性率为71．79％。其中52份活动型脑囊虫病人血清的阳性率为80．77％；20份非活动型脑囊虫病人血清的阳性率为55％；6份单纯皮肌型囊虫病血清的阳性率为50％。检测40份健康人血清，阴性符合率为87．5％。检测10份包虫病患者血清、10份吸虫病患者血清的交叉反应率分别为20．00％和10％。10份毕支睾吸虫病人血清均为阴性反应。23例其他脑疾患（脑肿瘤、脑脓肿、脑结核、脑外伤）患者血清的交叉胍应率为11．32％。本方法的敏感性和特异性与ELISA相似。应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人血清CAg具有较高的敏感性和特异性，操作简便快速，无需特殊仪器设备，具有较好的应用前景，值得进一步研究。     

曼氏裂头蚴可溶性抗原DIGFA法快速检测特异性抗体的潜在诊断价值

目的 探索曼氏裂头蚴可溶性抗原金标免疫渗滤法快速检测曼氏裂头蚴特异性抗体的免疫诊断价值。方法 从自然感染的青蛙中分离出曼氏裂头蚴，经口感染小鼠；于感染后第7周剖杀小鼠，收集鼠血清和虫体并计数。以曼氏裂头蚴可溶性抗原（PsA）为探针建立PsA—DIGFA，分别检测曼氏裂头蚴感染小鼠、健康小鼠、健康人群及其他寄生虫感染者血清中特异性抗体，并与常规ELISA法进行平行检测和比较。结果 DIGFA法检测感染小鼠血清中特异性抗体的敏感性为100％（49／49）、特异性为100％（30／30），与ELISA法检测结果相同；不同虫荷数感染鼠间抗体水平差异无显著性（P〉0．05），感染鼠与正常鼠之间抗体水平差异有显著性（P〈0．01）。PSA—DIGFA检测健康人群血清100人份均为阴性，检测囊虫、包虫、旋毛虫、肺吸虫、华支睾吸虫病病人血清的阳性率分别为42．5％（17／40）、10．0％（2／20）、20．0％（5／25），80．0％（8／10）、8．0％（2／25）。结论 用曼氏裂头蚴粗抗原检测感染动物血清中特异性抗体具有较好的敏感性和特异性，但与其他蠕虫感染存在较高的交叉反应。不同虫荷数感染鼠均产生较高水平抗体，组间差异无显著性。DIGFA法与ELISA法检测的敏感性和特异性相同，但前者更为简便、快速，无需特殊仪器设备，可单份检测，适合寄生虫病的临床检验和流行病学调查。若能进一步纯化检测用抗原，减少与其他蠕虫间的交叉反应，有潜在的应用价值。     

快速检测抗日本血吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立及应用

以血吸虫虫卵浸出液为抗原，金标记兔抗人ＩｇＧ为显示剂，建立了检测抗血吸虫抗体的金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。以该法检测血吸虫病患者血清８７份，阳性检出率为９８．９％；非流行区血清１００份，阴性符合率为１００％；１５例肺吸虫病患者血清，１例出现阳性反应，交叉反应率为６．７％；１０例华支睾吸虫病患者和２５例乙型肝炎患者，均无交叉反应。本法与ＥＬＩＳＡ比较，符合率达９６．７％。揭示ＤＩＧＦＡ的敏感性和特异性与ＥＬＩＳＡ相近，但方法简便、快速、试剂稳定，且无需特殊设备，适合于基层单位和现场应用     

斑点金免疫渗滤法检测肺吸虫抗体的评价

目的　为寻求简便、可靠的方法 ,用于诊断肺吸虫感染。方法　采用肺吸虫成虫可溶性抗原 ,金标记兔抗人IgG显色 ,建立检测肺吸虫抗体的DIGFA。用该法检测痰检肺吸虫虫卵阳性血清 82份 ,其他各类血清 2 0 1份 ,并与ELISA平行对照。结果　两法检测肺吸虫抗体的敏感性分别达 98 8% (81/ 82 )和 97 6 % (80 / 82 ) ;特异性 92 % (185 / 2 0 1)和 93% (187/2 0 1) ;youden’s指数为 0 90 8和 0 90 6。两法差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　实验提示DIGFA的各项检测指标与ELISA相近 ,而且无需特殊设备 ,且快速、简便 ,适合临床查病和血清流行病学调查。     

双抗体夹心斑点金免疫渗滤法检测血吸虫循环抗原的现场应用

目的 探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法（S－DIGFA）在现场的应用价值。方法 在原已建立的以抗26kDaGST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的S－DIGFA的基础上，应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清共1388份，并以双抗体夹心ELISA（S－ELISA）作对照。结果 用S－DIGFA和S－ELISA平行检测血吸虫病中度流行区人群血清300份，阳性检出率分别为15．7％和17．3％；两法检测血吸虫病传播阻断地区人群血清1088份，阳性检出率分别为3．9％和3．7％。结论 S－DIGFA检测循环抗原可在现场扩大和作血清流行病学调查。     

金标渗滤法快速检测曼氏裂头蚴病患者血清IgG

目的探索简易、快速的人曼氏裂头蚴病血清学免疫诊断方法。方法将曼氏裂头蚴可溶性抗原点样于硝酸纤维素膜上,以胶体金-SPA为检测标记物,采用垂直流渗滤装置检测病人血清中曼氏裂头蚴特异性IgG抗体。结果曼氏裂头蚴病病人血清阳性检出率为92.0%(23/25),健康人群血清假阳性率为2.0%(2/100);与囊虫病、肺吸虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病、旋毛虫病病人血清的交叉反应率分别为40.0%(16/40)、52.0%(13/25)、13.3%(4/30)、8.0%(2/25)、6.7%(2/30),未发现与广州管圆线虫病、结核病病人血清有交叉反应;与ELISA平行检测74人份血清,两种方法检测结果的一致性有极显著性意义(К=0.871,P<0.001)。结论金标渗滤法检测曼氏裂头蚴病病人血清中特异性IgG,不仅简易、快速而且检出率高,但与肺吸虫病、囊虫病病人血清存在较高的交叉反应,需根据病人饮食史等流行病学资料进行鉴别诊断。     

应用特异单克隆抗体测定猪囊尾蚴病人血清和脑脊液中的循环抗原

我们应用特异的抗猪囊尾蚴抗原的单克隆抗体(CCy1),建立了单克隆抗体抑制性ELISA方法以测定囊尾蚴病患者的循环抗原(CAg)。测定灵敏度为ng水平。83例囊尾蚴病患者血清的CAg阳性率为71.1％。其范围为0.16-128μg/ml。对41例囊尾蚴病患者,同时测定了血清和脑脊液中的CAg。单项或两项阳性的总阳性率为90.2％。114例正常人血清、107例其它寄生虫病患者(包括30例包虫病患者)的血清及10例非寄生虫病患者的脑脊液的CAg量均为零。有23例囊尾蚴病患者治疗半年到1年后,有21例抗原浓度为零。另2例分别为0.64μg/ml和1.6μg/ml。表明测定CAg不仅可以确定活动性囊尾蚴感染,而且可考核疗效。     

抗旋毛虫肌肉期幼虫排泄分泌物中46-58kDa蛋白IgM和IgG抗体的研究

目的寻求简便、快速、可靠的方法,用于旋毛虫病的诊断及疗效考核。方法建立检测抗旋毛虫肌肉期幼虫排泄分泌物(TsL1-ES)中46-58kDa蛋白抗体的斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),并对患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果旋毛虫病患者治疗前血清中特异IgM和IgG抗体的检出率分别为94.83%(55/58)和91.38%(53/58);正常人血清(100份)、囊虫病(25份)、血吸虫病(20份)、肺吸虫病(20份)及蛔虫病(22份)病人血清均未检出该两类特异性抗体。52例两类抗体均阳性的旋毛虫病患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1.5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3月的阴转率达46.15%(24/52),1年的阴转率可达88.46%(46/52);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1.5年的阴转率仅为23.08%(12/52)。结论DIGFA为检测抗TsL1-ES中46-58kDa蛋白抗体的有效方法,检测IgM抗体可用于诊断及疗效考核,而IgG抗体的检测不宜用来判断疗效。     

斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫病患者血清抗体的研究

目的　建立一种检测华支睾吸虫病血清抗体的简便、快速、敏感和特异的新方法。方法　以华支睾吸虫成虫抗原为包被抗原 ,金标记葡萄球菌A蛋白 (SPA)为显色剂 ,建立检测华支睾吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以dot ELISA作平行对照。结果　DIGFA和dot ELISA分别检测 119例华支睾吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 96 6 %和 92 4% ,两法差异无显著性。DIGFA分别检测正常人血清 40例、囊虫病患者血清 2 0例、日本血吸虫病患者血清 2 5例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 5 %和 4%。DIGFA与dot ELISA两法的符合率达 90 9%。结论　DIGFA的敏感性和特异性与dot ELISA相近 ,且具简便、快速及不需特殊设备等优点 ,是一种检测华支睾吸虫病患者血清抗体的新方法。     

人体囊虫病诊断试剂盒的效果评价

目的评价囊虫IgG抗体检测试剂盒的诊断效果,为临床应用提供参考。方法按照囊虫IgG抗体检测试剂盒说明书,采用ELISA法检测囊虫病、包虫病、带绦虫病及健康人血清。结果在30例活动期脑囊虫病病人中,28例呈囊虫IgG抗体阳性,敏感性为93.33%。100份健康人血清均无阳性反应。在42例带绦虫感染者,2例囊虫抗体阳性,阳性率为4.76%。在60份包虫病血清中,阳性41份,该试剂盒与包虫病的交叉反应率为68.33%。结论所评价试剂盒敏感性较好,但特异性差,与包虫病的交叉反应率高。以上提示国内囊虫病免疫学诊断试剂的质量有待提高。