人血浆中去甲万古霉素质量的HPLC法检测

目的:建立内标法测定人血浆中去甲万古霉素质量的HPLC检测方法。方法:采用20%(200mg/mL)硫酸锌溶液直接沉淀血浆蛋白,以万古霉素为内标,HPLC法测定人血浆中去甲万古霉素的质量。结果:人血浆中杂质不干扰样品峰和内标峰,在低浓度(2.00μg/mL)、中浓度(20.00μg/mL)、高浓度(200.00μg/mL)的回收率分别为90.50%,93.70%和96.40%;批内精密度3种(低、中、高)浓度分别为8.50%,6.40%和5.30%,批间精密度分别为9.40%,7.50%和6.70%,最低检测限为0.50μg/mL,线性范围为1.00~300.00μg/mL。结论:本法稳定、便捷、精密度好,准确可靠,适用于去甲万古霉素血药浓度测定。     

高效毛细管电泳测定血浆中复方头孢羟氨苄胶囊方法的研究

目的采用毛细管区带电泳法(CZE)测定血浆中头孢羟氨苄、甲氧苄啶的含量。方法以20mmol/L硼砂(pH=7.5)为背景电解质,35 cm×75μm(i.d)未涂层毛细管为色谱柱,于267nm处检测,操作温度为25℃,分离电压为20kV,采用峰面积内标法定量。结果头孢羟氨苄和甲氧苄啶的线性范围分别为0.4~4.0μg/mL,0.25~4.0μg/mL,该方法测得头孢羟氨苄和甲氧苄啶在低、中、高浓度下的回收率均在97%以上,迁移时间的RSD分别为1.23%,2.41%;峰面积的RSD分别为2.23%,1.60%,日内、日间精密度均符合方法学要求。结论该方法用量少,简便,快速,准确,可作为该药品生物等效性研究中的有效分析方法。     

头孢克洛胶囊及分散片在健康人体内的生物等效性研究

目的评价头孢克洛胶囊及分散片在健康人体内相对生物利用度及生物等效性。方法受试者采用3处理、3周期、随机、自身交叉对照方法口服受试制剂头孢克洛胶囊、头孢克洛分散片和参比制剂500mg，采用反相高效液相色谱（RP—HPLC）法测定血浆中药物浓度，药代动力学参数采用DAS软件处理。结果头孢克洛胶囊、分散片及参比制剂分散片峰浓度（Cmax）分别为（11．79±2．85）μg／mL，（13．07±3．53）μg／mL和（12．59±3．34）μg／mL；达峰时间（kmax）分别为（0．75±0．20）h，（0.62±0．17）h和（0．55±0．11）h；半衰期（tin）分别为（0．60±0．11）h，（0．56±0．08）h和（0，57±0．10）h；0→t药-时曲线下面积（AUC0→t）分别为（15．37±2．23）μg·h／mL，（16．15±3．75）μg·h／mL和（15．66±2．98）μg·h／mL；0→∞药-时曲线下面积（AUC0→∞）分别为（15．67±2．26）μg·h／mL，（16．43±3．74）μg·h／mL和（15．93±3.02）μg·h／mL；受试制剂的相对生物利用度F0→t和F0→∞分别为（100．51±19．19）％，（100．70±19．00）％和（105．96±29．16）％，（105．87±28．52）％。受试制剂与参比制剂符合生物等效标准。结论头孢克洛胶囊、头孢克洛分散片与参比制剂具有生物等效性。     

用HPLC法测定人血浆中头孢吡肟的浓度

目的:建立测定人血浆中头孢吡肟浓度的HPLC法。方法:色谱柱为Kromasil C_(18)柱(250 mm×4．6 mm, 5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(5:4:91),流速1．0 mL/min,检测波长254 nm。以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品用高氯酸沉淀蛋白质后取上清液进样分析。结果:头孢毗肟峰面积与血药浓度在1．0～200．0μg/mL范围内线性关系良好(r=0．9999)。日内RSD＜6％(n=5),日间RSD＜10％(n=5)。低、中、高3种浓度(2．0、50．0、150．0μg/mL)的方法回收率分别为(111．33±2．36)％、(100．95±0．51)％和(98．50±0．91)％,提取回收率分别为(104．21±2．15)％、(96．67±0．49)％和(94．72±0．87)％。结论:本方法简便、快速、准确、精密度好,可用于头孢吡肟的临床药动学研究。     

反相高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、苯妥英和卡马西平的血药浓度

目的建立同时测定人血清中苯巴比妥（PB）、苯妥英（PT）和卡马西平（CBZ）质量浓度的反相高效液相色谱（RP—HPLC）法。方法色谱柱为C18柱（150mm×4．6mm,5μm）,柱温30℃,检测波长243nm,流动相为甲醇-乙腈-水（27．5：27．5：45）,流速为0．8mL／min,内标物为艾司唑仑。结果PB,PT,CBZ的质量浓度线性范围分别为1．50～80．00μg／mL,1．12～59．96μg／mL,0．50～26．60μg／mL,最低检测质量浓度分别为1．0,0．5,0．2μg／mL,萃取回收率和方法回收率分别为97．9％,96．3％,98．2％和97．8％,97．8％,98．9％,日内及日间精密度RSD均小于5％。结论该法操作简便、快速、准确．可满足临床快速检测抗癫痫药血药浓度的需要。     

离子对色谱法测定保健食品中左旋肉碱的含量

目的建立一种离子对高效液相色谱方法,简便、快速检测减肥类保健食品中左旋肉碱含量。方法采用ODS柱进行分离,以40mmol／L磷酸二氢钾缓冲溶液-乙腈（95：5）（含0．1％己烷磺酸钠,用0．1mol／L盐酸调节pH值至2．6）为流动相,流速：0．8mL/min,检测波长：220nm定量管进样20μL。结果在20-200μg／mL的浓度范围内,峰面积与进样浓度呈良好的线性关系,相关系数r=0．9996,加样回收率为98．5％,峰面积和保留时间日内精密度RSD分别为1．7％、0．9％;日间精密度RSD分别为3．8％、1．2％。结论方法简便、快速,可用于含左旋肉碱保健食品的含量检测。     

头孢羟氨苄甲氧苄啶胶囊溶出度测定

目的：建立头孢羟氨苄甲氧苄啶胶囊溶出度测定方法。方法：以盐酸溶液（9→1000）为溶出介质,采用高效液相色谱法测定其溶出度。结果：头孢羟氨苄的浓度在38．6～192．8μg·ml^-1内呈良好的线性关系,r=1．0000,平均回收率为99．1％（RSD=0．3％,n=10）;;甲氧苄啶的浓度在7．8～39．0μg·ml^-1内呈良好的线性关系,r=0．9999,平均回收率为98．9％（RSD=0．5％,n=10）.结论：方法准确、简便,可作为制剂的溶出度测定方法。     

用HPLC法和微生物法测定人血浆中头孢丙烯浓度的比较

目的:比较用HPLC法和微生物法测定人血浆中头孢丙烯浓度的差异。方法:10名健康志愿者单剂量口服头孢丙烯片500 mg,分别用HPLC法和微生物法测定血浆中药物浓度。结果:HPLC法线性范围为0．143～14．300μg／mL,低、中、高浓度(0．357 5、1．430 0、7．150 0μg／mL)的回收率分别为(101．75±7．71)％、(96．89±2．55)％和(98．70±1．67)％(n= 6);3种浓度的日内、日间RSD分别为7．58％0、2．63％、1．69％和7．11％、3．77％、2．01％(n=6)。微生物法线性范围为0．25～3．00μg／mL,低、中、高浓度(0．50、1．75、3．00μg／mL)的回收率分别为(96．37±5．99)％、(108．26±8．39)％和(105．12±10．35)％(n=5);3种浓度的日内、日间RSD分别为9．84％、7．75％、6．22％和10．05％、8．31％、7．87％(n=5)。结论:两种方法回收率和精密度均符合要求,受试者各时间点平均血药浓度测定值无显著性差异。     

头孢妥仑测定方法的建立及胆汁排泄机制研究

目的：建立高效液相色谱内标法测定大鼠血浆、胆汁、尿液中头孢妥仑含量,阐明多药耐药相关蛋白2（Mrp2）是否与头孢妥仑胆汁排泄有关。方法：用4-二甲氨基安替比林作内标。色谱柱为Capcellpak C18 UG120（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为0．1％醋酸铵-甲醇（67：33,V/V）,流速为0．8mL／min,进样量为25皿;用肝灌流法探讨头孢妥仑是否经Mrp2转运。设立对照组（头孢妥仑1μmol／L）和实验组（头孢妥仑1μmol／L加Mrp2抑制剂丙磺舒20μmol／L）,在设定时间点于灌流的大鼠肝脏收集出口灌流液和胆汁样品,高效液相色谱法测定样品中头孢妥仑含量,考察实验组和对照组中肝摄取率和胆汁累积排泄率的差异。结果：血浆样品中头孢妥仑在0．1～4μg／mL范围内、胆汁样品中头孢妥仑在0．1～5μg／mL范围内、尿液样品中头孢妥仑在0．1～5μg／mL范围内线性关系良好。回收率为85％～115％,日内、日间RSD均小于13．5％。实验组和对照组相比,肝摄取率变化无统计学意义上的差别;实验组中,肝灌流25min后,头孢妥仑胆汁累积排泄率减少至对照组的40．0％。结论：本方法经济、简单、灵敏、快速,可用于头孢妥仑血浆、胆汁、尿液样品中药物浓度检测和药物代谢动力学研究;头孢妥仑是Mrp2的底物,Mrp2与头孢妥仑的胆汁排泄有关。     

高效液相色谱法测定人血浆中头孢克洛浓度

目的建立测定人血浆中头孢克洛含量的高效液相色谱（HPLC）法,用于人体药代动力学研究。方法色谱柱为Zichrom ODS柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为pH=4．2的缓冲溶液（于500mL水中加入2．1g醋酸钠、8mL醋酸及2mL三乙胺）一甲醇（79：21）,流速1．0mL／min,检测波长265nm。结果头孢克洛的质量浓度线性范围为0．06～20．0μg／mL,r=0．9997（n=7）,最低检测质量浓度为0．06μg／mL,日内、日间精密度的RSD在5．03％～6．26％之间,平均回收率为（100．77±3．17）％。结论该方法操作简便、灵敏、准确,适用于头孢克洛的血药浓度监测及药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定兔血浆中盐酸氯胺酮含量

目的建立高效液相色谱法测定兔血浆中盐酸氯胺酮含量。方法采用岛律LC-6A液相色谱仪,色谱柱:Diamonsil C18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相:甲醇:水(50∶50),流速:1.0mL/min,柱温:25℃,检测波长:275nm。用高氯酸沉淀血浆蛋白,以非那西丁为内标,测定血浆中盐酸氯胺酮的浓度。结果血浆中杂质不干扰样品峰和内标峰,1.0、10.0、100.0μg/mL的回收率分别为93.9%,88.1%,85.6%;批内精密度均小于8.0%,批间精密度均小于9.0%,最低检测限为0.1μg/mL,线性范围为1.0～100.0μg/mL。结论该方法稳定且精密度好,准确可靠,适用于盐酸氯胺酮血浆浓度测定。     

氘代内标液质串联法测定血浆中沙丁胺醇的浓度

目的:建立液相-质谱串联法测定人血浆中的沙丁胺醇含量.方法:血浆离心后过玻璃纤维滤膜,经酶解加入氘代沙丁胺醇内标溶液,用C18小柱净化后以3%的氨水甲醇溶液对Oasis MCX小柱进行洗脱,吹干,以0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液(95∶5)溶解残余物,用液相质谱串联法测定,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱.结果:沙丁胺醇在0.25～10.00 μg·kg-1线性关系良好,检出限0.1μg·kg-1.结论:本法灵敏准确、重现性与特异性强、干扰少,可用于人体内沙丁胺醇药动学与生物利用度研究.     

Development and validation of rapid and sensitive HPLC method for the quantitative determination of doxorubicin in human plasma

An isocratic reversed-phase high-performance liquid chromatographic method with ultraviolet detection at 254?nm has been developed for the determination of doxorubicin in human plasma. Plasma samples were extracted by a selective one-step liquid–liquid extraction using dichloromethane. Doxorubicin and the internal standard epirubicin were separated using a column packed with C₁₈ material, using a mobile phase consisting of water:acetonitrile (75:25v/v). The calibration graph for doxorubicin was linear in the range 0.2–10?μg/mL, with a correlation coefficient, R²?=?0.9986. Lower limit of quantitation was 0.2?μg/mL, using 1?mL plasma samples. The extraction recovery ranged from 98.5–101.1%, and the recovery rate was consistent for drug and internal standard examined at each level. The interday and intraday precision values ranged between 0.5–2%. Validation data showed that the assay for doxorubicin is sensitive, selective, accurate, and reproducible. The assay has been used in population pharmacokinetics study.     

正负离子切换液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中头孢他啶和他唑巴坦

目的:建立灵敏、专属的液相色谱-串联质谱法同时测定人血浆中头孢他啶和他唑巴坦,并用于临床药代动力学研究。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,以乙腈-5 mmol.L-1醋酸铵-甲酸(20∶80∶0.16,v/v/v)为流动相,使用VenusilASB-C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离。采用电喷雾电离源,多反应监测模式(MRM),以正负离子切换同时测定头孢他啶和他唑巴坦,切换时间在进样后3.8 min。头孢他啶采用正离子检测,用于定量的离子反应分别为m/z 547→468(头孢他啶),m/z 364→208(内标头孢羟氨苄),头孢他啶和内标头孢羟氨苄的保留时间分别为3.0 min和2.8 min;他唑巴坦采用负离子检测,用于定量的离子反应分别为m/z 299→138(他唑巴坦),m/z 232→140(内标舒巴坦),他唑巴坦和内标舒巴坦的保留时间分别为4.4 min和4.9 min。结果:头孢他啶和他唑巴坦的线性范围分别为0.250～250μg.mL-1和0.0250～25.0μg.mL-1,日内、日间精密度(RSD)均小于10.8%,准确度(RE)在-7.6%～2.1%之间。本法被成功应用于健康受试者静脉滴注不同剂量头孢他啶/他唑巴坦钠(6∶1)注射液(头孢他啶/他唑巴坦含量分别为1 g/0.167 g,2 g/0.333 g,4 g/0.667 g)的药动学研究。结论:该方法专属性强,灵敏度高,操作简便,适用于注射用头孢他啶/他唑巴坦临床药代动力学研究。     

两种头孢羟氨苄胶囊的药代动力学与生物等效性研究

目的 :研究两种头孢羟氨苄胶囊在正常人体的药代动力学与生物等效性。方法 :22名健康志愿受试者随机交叉口服1000mg头孢羟氨苄胶囊和仙逢久胶囊后 ,采用高效液相色谱 (HPLC)法 ,以阿莫西林作内标 ,测定头孢羟氨苄(CFO)血浆药物浓度。结果 :两种胶囊剂均符合一级吸收开放性一室模型 ,主要药代动力学参数 :T1/2ke分别为 (1.40±0.15)h、(1.44±0.23)h ;Tmax分别为(2.3±0.5)h、(2.2±0.3)h ;Cmax分别为 (30.59±4.25) μg/ml、(30.57±4.24) μg/ml;AUC分别为 (99.31±14.50) μg/(ml·h)、(99.22±15.11h) μg/(ml·h)。结论 :两种胶囊剂生物利用度为(100.42±7.62) % ,具有生物等效性     

Determination of plasma and brain levels of isotretinoin in mice following single oral dose by high-performance liquid chromatography

An isocratic reversed-phase high-performance liquid chromatographic method was established and validated according to FDA's Guidance for Industry, "Bioanalytical Method Validation", for the determination of isotretinoin in plasma and brain tissue from mice following single and multiple oral doses of Accutane. Plasma sample preparation included deproteination with acetonitrile-perchloric acid followed by centrifugation. Brain tissue was homogenized and extracted with acetonitrile-perchloric acid followed by centrifugation. The supernatants were analyzed by high-performance liquid chromatography (HPLC). Benz[alpha]anthrancene-7,12-dione was used as the internal standard. Chromatographic separation was achieved on a C18 column using an acetonitrile-aqueous 0.5% acetic acid (85:15, v/v) elution. The average extraction efficiency was >95% for plasma and >82% for brain. The lower limit of quantification was 30 ng/mL for plasma and was 30 ng/0.1g for brain tissue, respectively. The linear range for plasma was 30-600 ng/mL, and 15-300 ng/0.1g for brain. Maximum concentrations of isotretinoin in both plasma and brain were observed at 1h after single oral dosing (25 mg/kg). The maximum concentrations in plasma and brain were 2.36 microg/mL and 0.34 microg/g, respectively. The mean area under curve (AUC) in plasma was 6.13 microg h/mL. The mean eliminate half-life in plasma was estimated as 46 min.     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中奥洛他定的浓度

目的建立人血浆中奥洛他定浓度测定的液相色谱-串联质谱（LC—MS／MS）定量方法。方法以地氯雷他定为内标,血浆样品经蛋白沉淀处理后,在0．2mL·min^-1的流速下以乙腈-甲醇-0．1％甲酸水溶液（25：5：70,V／V／V）为流动相进行等度洗脱,采用CAPCELLPAKC18柱（50mm×2．1mm,3．5μm）分离。样品经电喷雾离子源（ESI）正离子化后,通过三重四极杆串联质谱仪,采用多反应离子检测方式测定奥洛他定（m／z338．2／165．2）和内标地氯雷他定（m／z311．1／259．1）的浓度。结果奥洛他定质量浓度在1～200μg·L^-1内线性良好,定量下限为1μg·L^-1,方法回收率为85％-115％,批内、批间RSD均〈10％。结论本方法专属性强、灵敏度高,操作简便、快速,符合生物样品分析要求,适用于临床药动学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中比阿培南的浓度

目的建立人血浆中比阿培南的高效液相检测方法。方法色谱柱为Waters ACQUITY○RBEH C18柱（250×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈∶水（15∶85,v/v）;流速1.0 mL·min^-1;检测波长为300nm,血浆样品处理选用亚胺培南为内标,采用乙腈沉淀蛋白。结果比阿培南在0.05-25.0μg.mL-1范围内线性良好（r=0.9988,加权系数为1/C2）,HPLC测定定量限为0.05μg.mL-1,比阿培南浓度分别为0.1,5.0 and 20.0μg·mL^-1血浆样本绝对回收率分别为94.28%,95.07%,93.96%,相对回收率分别为99.87%,102.55%,98.64%,精密度试验日内和日间RSD均小于15%,稳定性试验结果表明血浆样品在样品处理过程中较稳定（RSD〈15%）。结论本方法灵敏度高,操作简便、快速,重复性好,适用于比阿培南血浆浓度测定。     

Development and validation of a bioanalytical method using automated solid-phase extraction and LC-UV for the simultaneous determination of lumefantrine and its desbutyl metabolite in plasma

A bioanalytical method for the determination of lumefantrine (LF) and its metabolite desbutyl-lumefantrine (DLF) in plasma by solid-phase extraction (SPE) and liquid chromatography has been developed. Plasma proteins were precipitated with acetonitrile:acetic acid (99:1, v/v) containing a DLF analogue internal standard before being loaded onto a octylsilica (3 M Empore) SPE column. Two different DLF analogues were evaluated as internal standards. The compounds were analysed by liquid chromatography UV detection on a SB-CN (250 mm × 4.6 mm) column with a mobile phase containing acetonitrile–sodium phosphate buffer pH (2.0; 0.1 M) (55:45, v/v) and sodium perchlorate 0.05 M. Different SPE columns were evaluated during method development to optimise reproducibility and recovery for LF, DLF and the two different DLF analogues. The within-day precisions for LF were 6.6 and 2.1% at 0.042 and 8.02 μg/mL, respectively, and for DLF 4.5 and 1.5% at 0.039 and 0.777 μg/mL, respectively. The between-day precisions for LF were 12.0 and 2.9% at 0.042 and 8.02 μg/mL, respectively, while for DLF 0.7 and 1.2% at 0.039 and 0.777 μg/mL, respectively. The limit of quantification was 0.024 and 0.021 μg/mL for LF and DLF, respectively. Different amounts of lipids in plasma did not affect the absolute recovery of LF or DLF.