补体活化与中性粒细胞生产活性氧之间的反馈调节作用

目的 在试管实验中证明补体系统的活化与中性粒细胞产生的活性氧间存在相互作用的反馈关系。方法 用菊糖活化的补体作用于中性粒细胞产生活性氧,并进一步通过测定吸光度以观察补体进一步活化情况。用佛波醇肉豆蔻醋酸酯激发中性粒细胞产生的活性氧作用于补体,并进一步采用发光测定仪测定活性氧来观察活经的补体对中性粒细胞释放活性氧的促进作用。结果 试管实验证明活化的补体能刺激中性粒细胞产生活性氧,而活性氧又能进一步活     

硒及维生素E抑制补体——中性粒细胞活化反馈机制参与炎症应答的调控

笔者发现并验证补体介导炎症操作的机制是补体活化激活中性粒细胞（ＰＭＮ）呼吸爆发所释放的活性氧自由基（ＲＯＳ）能再次活化补体,在补体－ＰＭＮ－ＲＯＳ之间形成的这一盯互反馈活化、增强炎症应答的辅助机制有其特殊的参与调节炎症应答的作用,即补体活化的抑制或ＲＯＳ的清除皆能阻滞此活化反馈机制而下调炎症应答。为验证此设想,笔者选择补体活化抑制剂亚硒酸钠（ＳＳ）、抗氧化剂维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）与甘草类黄酮（ＧＦ）抑制补体－ＰＭＮ－ＲＯＳ活化反馈机制,在试管实验中利用化学发光技术,在ＰＭＮ及补体混合培养液中以佛波酯（ＴＰＡ）或菊糖单独活化ＰＭＮ或补体后检测活性氧的产生量及补体的活化程度;并在小鼠体内实验中观察肺、肝及皮肤血管炎模型的发生率。结果证实此活化反馈上调炎症应答机制的存在;补体活化的抑制或ＲＯＳ的清除皆能抑制上调炎症应答     

亚硒酸钠及抗氧化剂抑制小鼠肺泡Arthus血管炎发生的机制

目的　以小鼠肺泡血管炎动物模型为研究对象,证明亚硒酸钠及其它抗氧化剂,可通过抑制补体—中性粒细胞（ＰＭＮ）—活性氧（ＲＯＳ）正反馈活化环的机制抑制炎症反应。方法　以牛血清白蛋白致敏昆明小鼠建立肺泡Ａｒｔｈｕｓ反应性血管炎（即急性肺泡炎）的动物模型,观察口服补体活化抑制剂亚硒酸钠或抗氧化剂类黄酮（ｆｌａｖｏｎｏｉｄ）和维生素Ｅ阻断补体活化正反馈环的运转,以抑制小鼠急性肺泡炎的发生（观察补体活化及释放的活性氧在炎症区ＰＭＮ上的荧光组化表现）。结果　以上３种补体活化抑制剂及抗氧化剂能在不同程度上抑制小鼠肺泡Ａｒｔｈｕｓ血管炎的发生,尤以３ 种抗氧化剂联合应用效果更佳,其抑制率可达７５％ （Ｐ＜ ０．０１）。结论　亚硒酸钠抑制补体的活化、类黄酮及维生素Ｅ的抗氧化作用可以通过抑制补体活化反馈机制控制炎症应答,从而进一步证明了补体—ＰＭＮ—ＲＯＳ正反馈活化环促进炎症反应机制的存在     

硒及抗氧化物抑制小鼠肺Arthus血管炎发生机制新概念的研究

本实验成功地建立了小鼠肺Ａｒｔｈｕｓ血管炎模型，并为研究免疫复合物性炎症损伤发生的机理提供了可靠的基础。通过给小鼠模型服用补体活化抑制剂兼有抗氧化作用的亚硒酸钠或不同的活性氧捕捉剂甘草类黄酮以及ＶｉｔＥ等，发现它们均能抑制小鼠肺Ａｒｔｈｕｓ血管炎的发生，并在动物体内实验验证了补体活化与活性氧的产生之间存在有通过多形核白细胞（ＰＭＮ）的呼吸爆发相互作用，反馈放大引发炎症和组织损伤的关系。这一新概念的     

活性氧类在慢性牙周炎所致骨吸收中的研究进展

牙周炎是导致牙齿支持组织渐进性破坏的炎症性疾病,由菌斑微生物及宿主免疫反应共同作用,导致牙周支持组织破坏.菌斑微生物引起的过度炎症反应导致中性粒细胞聚集,中性粒细胞释放的活性氧类(ROS)在牙周组织破坏中起关键作用.ROS通常参与正常的生理代谢,机体产生的抗氧化剂能够有效中和组织中细胞产生的ROS,但过量的ROS可发挥...     

C5a对血管内皮细胞表达P-选择素的影响

中性粒细胞与血管内皮细胞间的粘附及跨内皮移行是炎症反应的关键环节 ,选择素等粘附分子在其中发挥着重要的作用。炎症局部产生的ＴＮＦ、凝血酶、激活的补体片段等多种因素都能上调粘附分子的表达 ,但Ｃ5ａ对Ｐ 选择素表达的影响尚不十分清楚 ,本实验在体外用不同浓度Ｃ5ａ与培养的人脐静脉内皮细胞用 ,测定Ｐ 选择素及中性粒细胞粘附率的动态变化 ,研究Ｃ5ａ对Ｐ 选择素表达和对中性粒细胞粘附的影响。1　材料与方法1.1　材料　　人脐静脉内皮细胞株ＥＣＶ30 4:本室冻存 ;重组人Ｃ5ａ[美国ｓｉｇｍａ公司 ] ;小鼠抗人Ｐ 选择素单克隆抗体…     

干扰素抗HBV免疫应答及对CXC趋化因子表达的影响

CXC趋化因子是一类结构功能相似、具有趋化吸引和活化作用的小分子蛋白,在介导局部和全身炎症反应中起重要作用.干扰素(IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的可溶性糖蛋白,主要由单核细胞和淋巴细胞产生.IFN不仅可通过PKR、2'-5'OAS、Mx、ADAR1途径发挥抗病毒作用,还可作用于中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、T细胞等,影响部分趋化因子的分泌和表达,在局部、全身抗炎症反应中起重要作用.     

乳腺癌中肿瘤相关中性粒细胞与巨噬细胞的作用机制及交互反应

乳腺癌发病率和病死率均呈上升趋势,现居中国女性癌症发病首位。巨噬细胞和中性粒细胞在乳腺癌肿瘤免疫微环境(tumor microenvironment, TME)中扮演了重要角色,两者在炎症过程中互为功能搭档,在TME中被推测也具有协同及相互作用。文章简述了巨噬细胞和中性粒细胞在乳腺肿瘤微环境下以极化为主要特征的分子作用机制,并进一步分析两者间所存在的交互反应,指出了巨噬细胞与中性粒细胞共同成为乳腺癌免疫治疗新靶点的强大潜质,以期为解码乳腺癌免疫微环境提供参考,为乳腺癌诊治策略开拓思路。     

头孢地嗪对肺炎克雷伯杆菌诱导中性粒细胞功能的影响

目的：观察头孢地嗪(CDZ)对肺炎克雷伯杆菌(Kle.p)感染小鼠中性粒细胞释放活性氧以及细胞凋亡的影响。方法：用硝基四氮唑蓝还原实验检测中性粒细胞呼吸爆发释放活性氧的变化；透射电镜观察细胞凋亡情况以及CDZ对上述指标的影响。结果：CDZ处理加强了小鼠感染3h后的呼吸爆发，12h后降低其呼吸爆发强度，24h后几乎回落至感染前水平；CDZ对未感染小鼠的呼吸爆发无明显影响；CDZ处理可抑制小鼠感染Kle．p 3h后中性粒细胞的凋亡。结论：CDZ对Kle．p感染诱导的小鼠中性粒细胞呼吸爆发有调节作用，并抑制中性粒细胞凋亡。     

中性粒细胞来源微颗粒在脓毒症中的作用研究

脓毒症是具有感染证据的全身炎症反应综合征,可导致重度脓毒症及脓毒症休克,是危重症患者常见的并发症和主要死亡原因之一。其发病机制复杂,影响因素众多。中性粒细胞来源微颗粒是中性粒细胞活化和凋亡时产生的微小囊泡样物质,具有特殊的生物学特性。作为一种炎性介质,中性粒细胞来源微颗粒在炎症的发生、发展过程中起到快速抗炎反应、保护炎症血管及调节免疫等多样化的作用。     

The Observation of Complement Activation and Polymorphonuclear Neutrocytopenia during Cardiopulmonary Bypass

ＴｈｅＯｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆＣｏｍｐｌｅｍｅｎｔＡｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒＮｅｕｔｒｏｃｙｔｏｐｅｎｉａｄｕｒｉｎｇＣａｒｄｉｏｐｕｌｍｏｎａｒｙＢｙｐａｓｓＷＡＮＧＤｏｎｇｆａｎｇ（汪东仿）；ＦＵＰｉｎｇ（傅平...     

牙科粘结剂对人中性粒细胞的影响

目的:研究3种固定修复用粘结剂对人中性粒细胞(polymorph nuclear neutrophils,PMNs)相关活性以及致炎性等方面的影响?方法:在24孔板底部铺上玻璃离子水门汀?聚羧酸锌水门汀?光固化树脂水门汀,采集健康成人志愿者静脉血分离提纯PMNs,将PMNs与3种粘结剂接触培养4 h后,检测细胞的早期凋亡率?坏死率以及存活率的变化,产生的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)以及分泌白介素(IL)-8的量?结果:3组粘结剂的早期凋亡率?坏死率和存活率两两比较,差异有统计学意义(P < 0.05),其中聚羧酸锌水门汀组早期凋亡率?坏死率最高,存活率最低;玻璃离子水门汀组早期凋亡率?坏死率最低,存活率最高?玻璃离子水门汀组的早期凋亡率与存活率与空白对照组比较差异无统计学意义(P > 0.05),而3组粘结剂的坏死率均高于空白对照组(P < 0.05)?PMNs释放IL-8的量,3组粘结剂均高于空白对照组,其中聚羧酸锌水门汀组最高,玻璃离子水门汀组最低,差异有统计学意义(P < 0.05)?PMNs的ROS产生强度,只有玻璃离子水门汀组高于空白对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?结论:3种粘结剂对人中性粒细胞的相关活性以及致炎性均有影响,其中玻璃离子水门汀的致炎性相对较低,抗菌性能相对较高?     

Opsonic requirements for the respiratory burst of neutrophils against Giardia lamblia trophozoites

BACKGROUND: Giardia lamblia is an important cause of parasitic diarrheal disease worldwide. Occasionally, polymorphonuclear neutrophils (PMNs) may participate as effector cells against Giardia lamblia. The present study was performed in order to examine the role of specific antibody and complement components in promoting the respiratory burst (RB) of PMNs against Giardia lamblia. METHODS: PMNs from human adult volunteers were incubated with Giardia trophozoites in the presence of non-immune (NS) or hyperimmune (HS) serum (anti-Giardia titer, >1:1024). Adherence was scored visually on coverslide after staining with Giemsa. The ability of Giardia to trigger the oxidative response of PMNs was measured by the anion superoxide (O2(-)) production using a cytochrome C reduction method and by the luminol amplified chemiluminescence (CL) assay. RESULTS: Incubation with NS or HS increased Giardia adherence to PMNs from 6.9 +/- 3.2% (basal adherence of Giardia incubated in buffer) to 39 +/- 18.6% (p <0.01) and 76 +/- 19.5% (p <0.001), respectively. In absence of serum, Giardia failed to trigger an oxidative response of PMNs. Opsonization with NS or HS increased the PMN O2(-) production from 3.9 +/- 0.92 nmol/2.5 x 10(6) PMNs/10 min to 9.04 +/- 1.68 (p <0.05) and 17.9 +/- 1.32 (p <0.001), respectively. A similar enhancement of the CL response was also observed. The inactivation of complement activity by heat as well as the elimination of specific antibodies by absorption produced a significant abrogation of the oxidative response but in the case of HS heat inactivation alone did not abolish the response. Similar findings (variable abrogation of the oxidative PMN response) were observed when PMNs were incubated with monoclonal antibodies directed against complement C3, C3b or the low-affinity Fc receptors (CR1, CR3 or FcRlo). CONCLUSIONS: These results show that complement components and specific antibodies influence in the Giardia-PMN interaction. Although components of complement can contribute to the RB of PMNs, specific antibodies are critical for an optimal oxidative PMN response.     

Study of the loss of bactericidal capacity of PMNs induced by bypass－activated complement

ＳｔｕｄｙｏｆｔｈｅｌｏｓｓｏｆｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌｃａｐａｃｉｔｙｏｆＰＭＮｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｂｙｐａｓｓ－ａｃｔｉｖａｔｅｄｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔＷａｎｇＺｈｅｎｇｑｉｎｇ（汪正清），ＺｈｏｕＳｈａｎｚｈａｎｇ（周善章）（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ...     

甘露聚糖结合凝集素对人中性粒细胞功能的影响

目的研究甘露聚糖结合凝集素（MBL）对人中性粒细胞（PMN）功能的影响。方法采用ELISA和Dot blot检测MBL与微
生物的结合;应用流式细胞术检测及荧光显微镜观察MBL对PMN吞噬功能的影响;用qPCR分析MBL对PMN表达IL-1β、
TNF-α和CD11b mRNA的影响,以ELISA检测MBL对PMN分泌TNF-α和IL-6的影响;应用NBT还原法检测MBL对PMN呼
吸爆发的影响。结果MBL与微生物结合并呈浓度依赖关系。无人血清时,MBL对PMN吞噬C. albicans 和E.coli 无明显影
响。存在MBL缺陷人混合血清时,MBL可促进PMN对C. albicans的吞噬且这种作用可被甘露聚糖所阻断,上调PMN IL-1β、
TNF-α、IL-6及CD11b表达水平,刺激PMN呼吸爆发。结论MBL以补体凝集素途径依赖方式增强PMN吞噬功能,并促进炎性
细胞因子分泌。
     

PPE25蛋白在分枝杆菌感染中性粒细胞中的作用

目的 研究PPE25蛋白在耻垢分枝杆菌（M.smegmatis，MS）感染中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil，PMN）时所起的作用。方法 利用异源表达结核分枝杆菌（M.tuberculosis, Mtb）PPE25蛋白的重组MS（MS-ppe25组）感染人PMN，以空载体MS（MS-vec组）为对照菌，观察2种MS的菌落形成、单菌落大小、生长曲线，以了解PPE25蛋白对MS生长的影响；PMN感染MS后，以菌落形成单位(colony forming unit，CFU)计数了解细菌活力的变化；检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）释放百分比，以观察重组MS对PMN死亡的影响，流式细胞仪检测活性氧（reactive oxygen species, ROS），硝酸还原酶法检测一氧化氮（nitric oxide，NO）水平，ELISA检测细胞因子白细胞介素（IL）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的变化，分析PPE25蛋白在MS感染PMN中的作用。结果 PPE25蛋白对MS生长、菌落形成及单菌落大小无影响； MS感染PMN 2、6、12 h，MS-ppe25组CFU、LDH释放百分比均高于MS-vec组，两组LDH释放百分比差异有统计学意义（P<0.05）；MS感染PMN细胞后2 h， MS-vec组ROS、NO水平较MS-ppe25组高（P<0.01）； MS-ppe25组PMN细胞表达的TNF-α各时点均高于对照组（P<0.01），IL-1β在MS感染6 h后均高于对照组（P<0.01）。结论 PPE25蛋白能增加MS在PMN内的生存、诱导细胞坏死、抑制ROS和NO的表达，改变细胞因子的分泌，有利于病原体的播散及逃避宿主免疫。     

旁路活化补体降低宿主抗感染条件与机制的实验研究

目的 为证明旁路活化补体降低蚕噬细胞功能,了解宿主抗感染能力下降的条件与机制方法 分离人中性粒细胞和大鼠枯否细胞;ＰＭＮ和ＫＣ培养单层加上酵母多糖活化人血清;观测蚕噬细胞胞内杀菌力,超氧阴离子,酸性磷酸酶指标动态水平;以抗人Ｃ３Ｃ５血清中和阻断ＺＡＨＳ进行反证。     

旁路活化补体降低PMN吞杀绿脓杆菌力的实验研究

为证明论题,本文做了3项实验:(1)人血PMN培养单层加上酵母多糖活化人血清(ZAHS)。PMN的超氧离子(O_2~-)、特殊颗粒(SG)与胞内杀菌力(ICBA)明显平行下降,于6 h最低,0.05 ml的作用最强。(2)经小鼠尾静脉注射0.5ml ZAHS/鼠,6 h后活杀。肺和血内PMN的上述指标均明显降低;肺内病变明显:急性间质炎,灶性水肿出血和萎陷,肺血屏障亚微结构损伤。(3)经抗人C_3、C_5血清(AHC_(3.5)S)体外中和的ZAHS,在体内外实验中均失去其有害作用。提示:ZAHS的有害作用与C_3、C_5碎片有关,在剂量适中且吞菌前作用时间较长的条件下方显极效。有害作用的可能机制:杀菌且能致炎的O_2~-与SG大多已于吞菌前排放在胞外,所以PMN的ICBA下降;累积于组织内的则损害PMN自身及其邻近的肺血屏障。这便于MOF与感染发生。