中药材厚朴的DNA扩增产物指纹分析研究

采用DNA扩增产物指纹分析（DNA amplification fingerprinting,DAF)技术鉴别中药材厚朴、凹叶厚朴及其常见的伪品、混淆品、获得了清晰可靠的DNA指纹图谱。根据聚丙烯酰胺凝胶上显示的DNA带型差异可简便地区分出厚朴、凹叶厚朴和其它伪品、混淆品。证明DNF技术可以准确、快速地鉴别出中药材厚朴及其伪、混品、在正确引种方面具有较高的价值。     

中药材厚朴的随机扩增多态性DNA指纹图谱研究

目的:鉴别中药材厚朴及其伪品、混淆品.方法:采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增植物基因组DNA样品.结果:此种分子生物学鉴别方法可以获得清晰可靠的DNA指纹图谱,根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异可准确区分出厚朴、凹叶厚朴和其伪品、混淆品.结论:RAPD方法可以准确、快速、简便地鉴定中药材厚朴及其伪、混品,尤其在正确引种方面具有很高的价值.     

厚朴和厚朴习用品、混淆品及伪品的鉴别

目的鉴别厚朴和厚朴习用品、混淆品及伪品，方法 性状鉴别与按厚朴鉴别项2的试验法。结果厚朴及厚朴习用品均含厚朴酚及和厚朴酚成分，但厚朴混淆品及伪品不含厚朴酚及和厚朴酚成分。结论 厚朴和厚朴习用品，混淆品及伪品需仔细鉴别。     

中药材厚朴的X射线衍射Fourier指纹图谱分析

目的:建立中药材厚朴的鉴定分析新方法.方法:采用粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法.结果:通过对3个中药材厚朴、3个凹叶厚朴、14个厚朴的代用品和习用品、1个伪品厚朴进行实验、分析,获得了中药材厚朴和凹叶厚朴的对照X射线衍射Fourier指纹图谱.结论:粉末X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于中药材厚朴和凹叶厚朴的鉴定和识别.     

金钱白花蛇及其混淆品高特异性PCR的鉴别

目的：建立一种实用、简便的金钱白花蛇药材DNA分子标记鉴别方法。方法：根据金钱白花蛇及常见混淆品线粒体Cyt b基因序列,设计一对专门用于中药材金钱白花蛇的鉴别引物HJL-1和HJH-1。用不同的复性温度PCR扩增,确立特异性反应条件,并利用此方法鉴别从市场中购买的金钱白花蛇药材。结果：在67 ℃复性温度下进行PCR,正品金钱白花蛇均得到230 bp的扩增带,而混淆品在同样的条件下无扩增带。对市售金钱白花蛇药材随机选取18块进行PCR鉴别验证,其中正品14块,混淆品4块,检出率达100％。结论：设计的鉴别引物对正品金钱白花蛇有高度特异性。可用于市售金钱白花蛇药材的鉴定。PCR稳定性高,同种不同个体间的种内差异对鉴定结果不会有影响。     

上海中药市场北柴胡的真伪鉴别

柴胡为常用解表药之一,为中国传统中药,应用广泛,具有和解表里、疏肝、升阳之功效.近年来因市场需求量增大,市场上出现柴胡混淆品及掺伪品,不利于用药安全.笔者收集了上海地区中药材市场常见正品柴胡(野生及栽培),混淆品南柴胡及其伪品大叶柴胡、竹叶柴胡、藏柴胡、锥叶柴胡、小叶黑柴胡,并对其药材及饮片进行性状鉴别比较,为柴胡传统...     

蛇类中药饮片分子鉴别方法的研究进展

蛇类中药饮片具有较高的临床药用价值,具有抗炎、镇痛、通络等功效,药理作用明显。近年来,由于野生动植物资源匮乏、蛇类中药饮片价格昂贵,市场上出现了很多伪品和混淆品。传统的中药饮片鉴别方法包括基源、形态、显微、理化鉴别四大方法体系,但这些方法都存在一些弊端,包括对中药样本有较高的形态学要求、鉴别过程复杂、易受主观因素影响等。随着分子生物学研究的深入和分子遗传标记技术的发展,中药鉴别方法逐渐多元化,一些新兴的理论和技术被引入中药材鉴别领域,RAPD技术、PCR反应、DNA条形码分析等。该文将着重对当前蛇类中药饮片的分子鉴别方法作简要综述。     

基于ITS2条形码的两面针药材及其混伪品的鉴别

目的 利用ITS2条形码鉴别两面针药材及其混伪品,为两面针药材鉴定提供新方法.方法 采用PCR法扩增ITS2(转录第二间隔区)序列,双向测序后运用CodonCode Aligner、MEGA软件进行数据处理,构建系统聚类树(NJ树).结果 两面针药材及其混伪品基因组DNA降解明显,但不影响ITS2条形码的PCR扩增和测序,ITS2条形码序列分析表明种内与种间遗传距离具有较大差异,基于ITS2条形码构建NJ树可鉴别两面针药材及其混伪品.结论 ITS2条形码适用于两面针药材及其混伪品的鉴别,为两面针药材快速、准确鉴定提供新方法;为两面针基原研究提供重要的分子鉴定证据;同时为DNA条形码技术应用于其他根、茎类中药材的鉴定提供了示范作用.     

3种易混淆中药材鉴别技术进展分析

笔者通过查阅近十年的研究文献,对含有马兜铃酸类成分的三种易混淆中药材的鉴别技术的研究进展进行总结与分析,木通为关木通的替代品,混淆品有多种,目前已经有性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、光谱鉴别、DNA分子鉴别等方法对木通、关木通以及川木通进行鉴别;在广防己、防己以及其混淆品的鉴别上,已经有性状鉴别、紫外光谱鉴别以及DNA条形码鉴别等方法;在青木香及其混淆品的鉴别上,已经有性状鉴别、显微鉴别、HPLC指纹图谱以及UPLC指纹图谱等方法。     

基于DNA条形码分子技术的海龙及其混伪品鉴定研究

目的:基于DNA条形码分子技术对动物药海龙及其混伪品进行鉴别,建立一种统一的海龙鉴定技术手段。方法:对收集到的动物药海龙及其混伪品进行DNA提取、PCR扩增和双向测序检测,运用Codon Code Aligner进行序列拼接,采用MEGA 7.0软件进行序列比对分析,比较种内、种间序列差异,构建动物药海龙及其混伪品的系统发育树。结果:所有海龙药材及其混伪品均可以使用中药材DNA条形码分子鉴定技术进行鉴别,共得到7个物种129条序列,各物种之间序列区分明显。结论:中药材DNA条形码鉴定技术能够准确有效地鉴别动物药海龙及其混伪品,可以作为海龙类中药的统一鉴定方法,为海龙的临床用药安全提供了新的分子技术手段。     

凹叶厚朴细胞悬浮培养的研究

目的研究凹叶厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etils.Subsp.biloba（Rehd.etwils.）Law的细胞悬浮培养。方法以凹叶厚朴茎段诱导的愈伤组织为材料,应用L9（34）正交设计研究植物生长调节剂对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响,通过单因素试验,考察初始接种量、蔗糖浓度、pH值对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响。结果植物生长调节剂6-BA是影响凹叶厚朴悬浮细胞生长的主要因素;最佳初始接种量为8ml;最佳蔗糖浓度为30g/L;最佳pH值为6.5时。结论初步建立了适合凹叶厚朴悬浮细胞培养的体系。     

厚朴药材中厚朴酚与和厚朴酚的含量测定及化学模式识别

厚朴是我国传统中药,为木兰科植物厚朴或凹叶厚朴的干燥干皮、根皮及枝皮,具有燥湿消痰、下气除满之功效。此前已有很多文献采用气相指纹图谱法研究厚朴中挥发性成分的含量。采用甲醇超声提取、高效液相色谱法(HPLC)对厚朴有效成分(厚朴酚与和厚朴酚)进行了含量测定,用系统聚类分析对不同产地的样品进行了化学模式识别研究。     

厚朴及其炮制品中厚朴酚与和厚朴酚含量测定

采用薄层扫描法测定生品、炒黄、炒焦、姜炙厚朴及市售商品厚朴、姜炙厚朴中厚朴酚、和厚朴酚的含量，结果表明，厚朴炮制后，该2成分含量均有下降，炒焦降低3O％以上，炒黄、姜炙降低约20％。市售商品厚朴含量差异较大。     

厚朴内生真菌的研究(Ⅰ):菌种分离及其鉴定

从两个不同来源的厚朴Magnolia officinalisRehd.etW ils.的茎中,分离获得内生真菌48株,经显微形态观察,鉴定为1纲、3目、6科、16属。不同来源的厚朴内生真菌的种群、数量及分布部位存在显著差异。     

白及与其混伪品ITS2序列二级结构比较与鉴别

目的:利用DNA条形码技术通过ITS2序列对白及及其混伪品进行快速、准确鉴别。方法:采用植物基因组DNA提取试剂盒提取白及及其混伪品基因组DNA,对全部收集样品的ITS2序列进行PCR扩增和测序,所得序列经Codon Code Aligner拼接后,利用MEGA7.0软件进行数据分析计算物种种间种内Kimura2-parameter(K2P)遗传距离。采用最近距离法及基于ITS2序列构建Neighbor-joining(NJ)系统聚类树,结合ITS2序列二级结构相比对的方法鉴别分析。结果:K2P遗传距离及NJ聚类树均显示只能鉴别出白及属与其他科属物种,区分不开白及属内3个物种,结合ITS2二级结构进一步鉴定,可将白及属的各个种及其他科属混伪品准确地鉴别出来。结论:利用ITS2序列作为DNA条形码,结合ITS2序列的二级结构可以有效地鉴定白及及其混伪品。     

黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其同属近缘物种的ITS2条形码鉴定与分析

运用ITS2 DNA条形码技术鉴定中药材黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其近缘物种,以保证药材质量,确保用药安全.文中对采自西藏拉萨的黄花紫堇、多刺绿绒蒿等13个药材样品进行了DNA提取、PCR扩增和测序;对实验序列和GenBank下载的71条切除两端的5.8S,28S区域,使用MEGA 5.0进行多重序列比对,并进行种内、种间遗传距离计算和进化树构建;同时预测了黄花紫堇、多刺绿绒蒿与其近缘种ITS2序列的二级结构.结果表明,作为DNA条形码,ITS2序列能够有效地对黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其同属近缘物种进行分子鉴定.该研究不仅可为黄花紫堇、多刺绿绒蒿及其近缘物种、相关混伪品建立基于.ITS2序列的DNA条形码的规范和安全的检测技术及鉴别方法,也为其质量控制、安全用药及合理开发利用提供理论依据及数据支撑.     

黄杨醇提物的抑菌活性研究

目的：通过抑菌试验,了解黄杨醇提取物的抗菌活性。方法：采用试管比浊法测定其最小抑菌浓度和最低杀菌浓度;采用纸片扩散法测定黄杨醇提取物对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌（分离）、绿脓杆菌、变形杆菌的抗菌活性。结果：黄杨醇提取物对除绿脓杆菌之外的其他五种细菌均具有抗菌活性,且提取物浓度越高抑菌活性越强。     

气质联用研究厚朴及其炮制品中挥发油

研究厚朴炮制前后挥发油的变化。结果表明：总含量降低，炒黄与姜炙厚朴相似，降低26％，炒焦降低42％；而其化学成分未发生明显变化，气相色谱图基本一致。实验发现挥发油中含有发汗、祛痰、平喘的成分。