多抗甲素对食道癌患者淋巴细胞的促增殖作用

本文应用淋巴细胞增殖反应(LP)试验来研究多抗甲素(PAA)对25例正常人和22例食道癌患者外周血LP反应的影响。结果表明:食道癌患者LP反应显著低于正常人(低于正常者高达63.64％,P<0.001)、PAA 1000μg/ml体外单独应用对正常人和食道癌患者的外周血淋巴细胞(PBL)有刺激作用。在亚适浓度PHA(5μg/ml)刺激下,PAA对正常人和食道癌患者PBL促增殖作用的浓度分别为100—1000μg/ml和10—100g/ml。判定LP反应的三项参数(NCPm,SI,RPI)灵敏度差异比较的结果说明;增殖指数(RPI)是判定食道癌患者LP反应降低的最灵敏的参数。转化值(NCPm)次之,刺激指数(SI)最不灵敏。因此,PAA对食道癌患者外周血淋巴细胞促增殖起免疫调节作用。     

多抗甲素对人NK细胞活性作用的机理研究

本文应用单细胞细胞毒试验及形态学观察,研究PAA对人外周血NK细胞活性的作用机理。结果表明:正常人外周血淋巴细胞(PBL)与靶细胞在体外结合迅速,15分钟,2及4小时无明显差异。食道癌患者PBL与靶细胞结合迟缓,各时间点的结合率(B％)明显低于正常人。食道癌患者PBL的杀伤率(K％)明显低于正常人。经PAA预处理后能增强食道癌患者PBL明显低下的B％和K％,也可增强正常人PBL的K％,但对正常人PBL     

多抗甲素对人NK细胞活性的影响

本文应用~3H-TdR掺入法研究多抗甲素对人外周血 (PBL)NK细胞活性的影响。实验结果表明:食道癌患者外周血NK细胞活性明显低于正常人。多抗甲素不论与正常人还是食道癌患者PBL共孵时,都能明显增强NK细胞活性,分别上升12.39±4.5％和19.66±5.4％。对食道癌患者NK细胞活性促进作用明显高于正常人,并能使其NK细胞活性恢复到正常水平。当浓度为100μg/5×10~6 cell/     

多抗甲素对人NK细胞活性的影响

本文应用~3H-TdR掺入法研究成都利华药厂生产的外周血(PBL)NK细胞活性的影响。实验结果表明:食道癌患者外周血NK细胞活性明显低于正常人。多抗甲素不论与正常人还是食道癌患者PBL共孵时,都能明显增强MK细胞活性,分别上升12.39±4.5％和19.66±5.4％。对食道癌患者NK细胞活性促进作用明显高于正常人,并能使其NK细胞活性恢复到正常水平。当浓度为100u/5×10~6cell/ml,孵育时间     

FASL、TRAIL在慢性乙型肝炎患者外周血淋巴AICD中的作用

目的:探讨FASL、TRAIL在慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞(Peripheral blood lymphocytes,PBLs)活化诱导细胞凋亡(activation induced cell death,AICD)中的作用。方法:分离20例正常人、24例慢性乙型肝炎患者及24例慢性重型乙型肝炎患者的PBLs,体外单独或与植物血凝素(PHA)共同培养48小时,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫组化SABC法检测FASL、TRAIL.在慢性乙肝患者PBLs的表达。结果:PHA活化前,FASL.mRNA、TRAIL mRNA在上述3组研究对象外周血淋巴细胞均不表达;PHA活化后;二者表达明显上调,且慢性乙型肝炎组高于正常对照组,慢性重症肝炎组低于正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。正常人静息的外周血淋巴细胞不表达FASL和弱表达TRAIL,经PHA活化后,二者表达均明显上调(P<0.01)。结论:FASL、TRAIL参与了乙型肝炎患者外周血淋巴细胞AICD过程,并可能是其重要效应分子。     

烧伤病人外周血玻璃粘附细胞对自身PHA淋转的影响

测定了 21例烧伤患者外周血单个核细胞(MC)对 PHA的反应性。21例患者分成组Ⅰ(Ⅲ°面积≤10％)、组Ⅱ(Ⅲ°面积>10％)两组。组Ⅰ外周血 MC对PHA反应无显著改变;组Ⅱ在伤后 1～3天、伤后 2周时有显著降低(P<0.05,P<0.05)。去除 MC中的玻璃粘附细胞,两组对PHA反应都有增强趋势。提示烧伤后玻璃粘附的单核细胞可能有很强的免疫抑制作用。组Ⅱ患者的血浆抑制自身MC对PHA的反应性,但不抑制非粘附细胞(LC)的 PHA反应,提示烧伤后玻璃粘附的 MC可能介导自身血浆的免疫抑制作用。将体外分离出的玻璃粘附细胞加回到 LC中,反应无显著改变或反而增强。     

卡芬尼对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的免疫机制

本文研究了卡芬尼(CCA)治疗大鼠佐剂性关节炎(AA)的免疫调节机制。CCA 能使 AA大鼠低下的脾细胞刀豆素 A(ConA)反应、IL—2产生能力恢复正常,使外周血中减少的 Ts 细胞数目回升到正常水平,使 AA 大鼠腹腔 M(?)升高的 IL—1和 H_2O_2产生水平降至正常范围,还能明显减少 AA 大鼠炎性关节组织中 PGE_(?)的含量.研究 CCA 对体外正常大鼠淋巴细胞与 M(?)以及 AA 大鼠 M(?)功能的影响时发现,CCA 对 ConA 诱导的脾细胞增殖反应呈低浓度(0.1～1μg/ml)增强和高浓度(10μg/ml)抑制的双向作用;CCA(100μg/ml)对常大鼠腹腔 M(?)释放 H_2O_2无明显影响,但能显著减少 AA 大鼠腹腔 M(?)释放 H_2O_2.结果表明,CCA 对 AA 大鼠有明显的免疫调节作用,这种作用有明显的机能和剂量依赖性.CCA 对 AA 大鼠的治疗作用与其调整患鼠异常的免疫功能有关。     

C反应蛋白酶联免疫分析和化学发光免疫分析的建立及其初步应用

采用高纯度的C反应蛋白(CRP)免疫兔,获取高效价的CRP抗体.提取抗血清中IgG,包被酶标板.用生物素标记CRP抗原,辣根过氧化物酶标记亲和素,建立CRP的ELISA和化学发光免疫分析法(CLIA).用ELISA测定正常人80名,心梗患者43例和重症监护室(ICU)病人39例的血清CRP水平,发现心梗患者(27.21±38.67μg/mL)明显高于正常人(0.57±2.99μg/mL)(P《0.05);ICU病人(117.48±97.05μg/mL)明显高于正常人及心梗患者(P《0.001和P《0.01).用CLIA检测正常人68名,结果为0.77±3.29μg/mL.随机收集病人血清样品73份,分别用免疫比浊法、ELISA和CLIA检测,经统计三种方法高度相关.结果提示:ELISA和CLIA是一种简便、灵敏和特异的CRP测定方法,可用于人血清中CRP的测定.     

CD4 + CD25 + FoxP3 + regulatory T cells suppress specific cellular immune responses in active pulmonary TB patients

目的 了解结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞在抑制结核患者结核特异细胞免疫反应中的作用.方法 使用细胞分离、流式细胞分析、细胞增殖和细胞因子测定等方法,比较结核患者及健康正常人群外周血中CI4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞的量及功能特征的差异.结果 结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞数占CD4+细胞总数的比例显著高于健康正常人群；在BCG及ESAT-6的刺激下,结核患者外周血单个核细胞增殖能力和产生γ-干扰素的能力比健康正常人群明显增强.在BCG刺激下,结核患者外周血CI4-细胞产生γ-干扰素[(1 289.62 +519.01)μg/L]及白介素-10[(1 045.40±534.12) μg/L]的能力比结核患者外周血PBMCs细胞产生γ-干扰素[ (624.50 +261.13) μg/L]及白介素-10[ (377.00±249.56) μg/L]的能力显著增强(P＜0.05)；在BCG及ESAT-6的刺激下,结核患者外周血CI4+ CD25+调节T细胞显著抑制结核患者外周血CD4+ CD25 -细胞产生γ-干扰素及白介素-10.结论 结核患者CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞数量增多,抑制结核患者结核特异细胞免疫反应功能增强,可能与结核的发生、发展及转归有密切关系.     

恶性肿瘤患者血清内皮素含量的检测及其临床意义

目的探讨恶性肿瘤患者血清内皮素-1(ET-1)的水平及其临床意义。方法采用放射免疫法,检测了恶性肿瘤患者85例、非肿瘤患者30例和正常人32例血清ET-1的含量。结果正常人和非肿瘤患者血清ET-1的平均含量分别为(46.9±23.1)μg/L和(51.1±30.9)μg/L,不同恶性肿瘤患者为(190.1±135.2～382.4±190.1)μg/L。正常人与非肿瘤患者相比较,血清ET-1的平均含量无明显差异(P＞0.05);而恶性肿瘤患者血清ET-1的含量则明显高于前两者(P＜0.001)。以正常人血清ET-1的平均含量加两个标准差为阳性界值,则不同恶性肿瘤患者的阳性检出率为72％～100％。结论血清ET的含量是筛选和辅助诊断恶性肿瘤的一种良好肿瘤标志物。     

类风湿性关节炎患者外周血TH17细胞测定

目的 探讨新的效应T细胞TH17在类风湿性关节炎(RA)患者外周血的分布及意义.方法 选取PHA或PMA+Ion作为刺激剂,建立流式细胞术胞内细胞因子染色的方法,应用该方法检测了35例活动期、30例稳定期RA患者及正常人外周血TH17和TH1细胞百分率.结果 PlVIA+Ion联合刺激的效果优于PHA.RA患者及正常人T细胞经PMA+Ion刺激后,CD3+CD8-T细胞IL-17表达水平较相应未刺激组显著增加(P<0.05).而不论是否加刺激剂,活动期RA患者外周血CD3+CD8-IL-17+细胞明显多于稳定期,二者均多于正常对照组(P<0.05).RA患者外周血TH1细胞呈现与T<,H>17细胞类似的分布特点.结论 活动期RA患者外周血存在TH17细胞的分布异常,T1H17细胞可作为评价RA患者细胞免疫功能状态的新指标.     

SLE患者外周血单个核细胞分泌白细胞介素6和IgG的研究

我们研究了21例SLE患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC)体外培养自发和丝裂原刺激后细胞增殖、IL—6产生、IgG分泌的情况。发现SLE 患者PBMC经PHA和PWM刺激后,细胞增殖的指数降低;用IL—6细胞依赖株(MH_(60)·BSF_2)检测培养上清液中的IL—6,发现活动期SLE患者PBMC自发和PHA刺激后产生的IL—6明显高于缓解期SLE患者(P<0.001)和正常人(P<0.001);活动期和缓解期SLE患者PBMC体外自发分泌IgG量增高,分别为正常人自发分泌量的5.68倍和4.48倍;我们首次用统计学方法分析了SLE患者细胞培养上清液中的IL—6水平与分泌的IgG量的关系,发现两者有显著的相关性(r=0.7046,P<0.001)。     

Flt3配体促进再生障碍性贫血患者淋巴细胞向TH1表型分化

目的　探讨Flt3配体 (FL)对再生障碍性贫血 (AA)辅助性T细胞 (TH)分化的影响及与造血功能衰竭的相关性。方法　应用流式细胞仪分析AA患者骨髓及外周血中TH 亚群 ,并观察植物血凝素 (PHA)和白细胞介素 2 (IL 2 )对AA患者TH 亚群影响 ;体外培养研究FL对骨髓和外周血T细胞分化及细胞因子分泌的作用。结果　AA患者骨髓及外周血中TH1细胞比例明显增高 ,且以急性AA更为显著 (P <0 .0 1) ,TH1与TH2细胞比例失衡 ,TH1 TH2比例显著高于正常对照 (2 .1± 0 .8和 1.4± 0 .7,P <0 .0 5) ;AA及正常人淋巴细胞经PHA和IL 2激发后TH1比例并无明显变化 ,而正常人骨髓细胞经与FL共同孵育 10d后 ,培养上清中IFN γ含量增高 ,表型分析提示 ,除TH1细胞比例增加外 ,树突状细胞及自然杀伤细胞阳性率也有明显增加。结论　FL通过树突状细胞诱导淋巴细胞向TH1表型分化 ,是AA造血功能衰竭的原因之一。     

黄芪苷对人外周血自然杀伤活性影响因素的研究

应用~(51)Cr释放法研究黄芪苷ASI和SK对人外周血NK活性的影响。结果表明,高浓度(250 μg/ml)有抑制作用,在适当浓度范围内(5μg/～0.05μg/ml)有较显著的促进作用(P<0.05),当与PHA、rIFN α或rIL-2联合作用时对NK活性有明显的增强作用。本文还证明了黄芪苷对地塞米松抑制NK活性有一定的恢复作用。本研究证实黄芪苷是增强机体免疫功能的一种有效成分。它是一种免疫调变剂,其作用强弱与机体的免疫水平有关。本研究也为临床使用黄芪制剂提供一些依据。     

卡介苗多糖核酸对过敏性支气管哮喘外周血单个核细胞TH1/TH2反应的作用

目的观察卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)对支气管哮喘患者外周血淋巴细胞TH1/TH2反应的作用,并与结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)进行比较. 方法缓解期过敏性支气管哮喘患者16例,对照组健康成人13例,分离外周血单个核细胞(PBMC),分别加入不同浓度的BCG-PSN(1、10、100、1000 μg/ml)、TB-PPD(10 μg/ml)、尘螨抗原(DerP, 10 μg/ml)体外培养4 d,不加刺激剂者为阴性对照.收集培养上清,ELISA检测IFN-γ、IL-5浓度的变化. 结果 PSN(1～100 μg/ml)刺激正常人PBMC分泌IFN-γ水平均高于哮喘患者(P＜0.05).BCG-PSN(10 μg/ml)可以刺激哮喘患者PBMC分泌IFN-γ(358.7 pg/ml,范围0～2433.0 pg/ml),但显著低于同等浓度的TB-PPD刺激作用(13 036 pg/ml,范围600.5～35 100.0 pg/ml,P＜0.01).PSN刺激PBMC分泌IFN-γ呈浓度依赖性,当浓度达到100 μg/ml时,与低浓度相比刺激作用显著增强(P＜0.01),与TB-PPD的刺激作用类似.DerP刺激哮喘患者PBMC分泌IL-5水平显著高于正常人(P＜0.05).BCG-PSN刺激PBMC分泌IL-5的作用较弱,显著低于TB-PPD和DerP的刺激作用. 结论 BCG-PSN具有一定的TH1刺激作用,但低于TB-PPD的刺激作用,有待对BCG-PSN组分进一步优化以增强疗效.     

CTLA_4Ig抑制T细胞增殖的体外研究

目的观察 CTL A4Ig在人外周血 T细胞增殖反应中的作用。方法植物血凝素 (PHA )、脂多糖 (L PS)、金葡菌肠毒素 B(SEB)刺激 T细胞增殖 ,在加入或未加入 CTL A4Ig情况下 ,观察细胞形态并检测 3H- Td R掺入量。结果 CTL A4Ig对PHA、L PS的抑制作用呈剂量依赖关系 ;而 CTL A4Ig浓度只有高于 5μg/ m L时 ,对 SEB才有抑制作用 ,且可完全抑制。结论CTL A4Ig对 PHA、L PS、SEB刺激下的 T细胞增殖反应有明显的抑制作用 ,但反应模式不一致。     

法半夏对离体蟾蜍心功能的研究

目的:观察法半夏悬浊液对离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力的影响。方法:根据斯氏蛙心插管的方法,用0.033g·ml~(-1)、0.067g·ml~(-1)、0.133g·ml~(-1)和0.267g·ml~(-1)的法半夏悬浊液对离体蟾蜍心脏灌流,采用BL-420生物实验系统记录心率和心肌收缩力的变化。结果:灌注0.033g·ml~(-1)的法半夏悬浊液对离体蟾蜍心的收缩力和心率影响不大;分别灌注0.067g·ml~(-1)、0.133g·ml~(-1)和0.267g·ml~(-1)的法半夏悬浊液,离体蟾蜍心收缩力明显增强,心率减慢(P0.05)。结论:法半夏可以增强离体蟾蜍心的收缩力,对其心率影响不大。     

强直性脊柱炎及类风湿关节炎患者IL—2及IL—2受体测定

应用流式细胞仪检测强直性脊柱炎(AS)及类风湿关节炎(RA)患者外周血淋巴细胞(PBL)表面IL-2受体(IL-2R)及经PHA刺激、体外培养产生的IL-2。结果表明,AS患者PBL表达IL-2R无明显增加,而RA患者则明显高于正常人及AS患者(P<0.01);AS及RA患者PBL体外培养产生IL-2明显多于正常人(P<0.01),提示IL-2异常在AS及RA患者免疫功能失调中起重要作用。     

褪黑素对正常人外周血淋巴细胞和HUT78细胞株增殖的影响

目的 :观察褪黑素 (melatonin ,Mel)对正常人外周血淋巴细胞 (PBL)和HUT78细胞株增殖的影响。方法 :应用 3- (4,5 ) -双甲基 - 2 -噻唑 - (2 ,5 ) -二苯基溴化四氮唑蓝 (MTT)法观察不同浓度的Mel分别与人淋巴细胞和HUT78细胞作用不同时间后细胞增殖的情况。结果 :1 单纯应用Mel对正常人外周血淋巴细胞无促进增殖作用 ,而与PHA联合培养淋巴细胞则具有促进其增殖作用 ,且在 10 -9- 10 -5mol/L时具有明显差异 (P <0 0 5 ) ;2 单纯应用Mel已经能有效促进HUT78细胞株的增殖 ,其作用浓度在 10 -9- 10 -5mol/L时具有明显差异 (P <0 0…     

云芝丹参的体外促增殖试验及其临床应用研究

目的 通过云芝丹参的体外促增殖试验及对乳腺癌患者的临床应用研究,观察其对机体免疫调节活性的影响.方法 采用MTT比色法、流式细胞分析法和ELISA法,分别检测云芝丹参对PHA刺激后的健康成人外周血单个核细胞增殖作用及服用云芝丹参胶囊后的乳腺癌患者外周血淋巴细胞亚群和血浆sIL-2R的浓度.结果 体外实验,中低浓度的云芝丹参药液(6.25～200 μg/mL)对健康成人PBMC有促增殖作用,高浓度(400 μg/mL)时则产生抑制作用;而临床试验中,乳腺癌患者血浆sIL-2R浓度、CD8 细胞百分率均显著降低,而B淋巴细胞数量及百分率、CD4 /CD8 比值和Th细胞的百分率都明显升高.结论 云芝丹参胶囊对正常人及乳腺癌患者都具有免疫增强作用.