用聚合酶链反应检测生殖器疱疹中单纯疱疹病毒DNA

用聚合酶链反应检测生殖器疱疹中单纯疱疹病毒ＤＮＡ袁钟岱胡春梅易来龙袁星颜小武周耀湘王康生（广东省东莞市慢性病防治院５１１７００）朱文元（指导）骆丹李晓捷（南京医科大学一附院皮肤科２１００２９）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测单纯疱疹病毒ＤＮＡ，从分子水...     

聚合酶链反应检测多形红斑皮损中单纯疱疹病毒DNA

为了研究多形红斑（ＥＭ）与单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）之间的关系，特别是探讨与疱疹相关的ＥＭ的临床特点及其在ＥＭ发病中所占比例，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了６０例ＥＭ的典型皮损的活检组织和３２例正常组织及疾病对照标本中的ＨＳＶＤＮＡ。结果显示：２１例（３５％）ＥＭ患者检测出ＨＳＶ特异ＤＮＡ，对照标本（１６份正常皮肤组织和１６份其它皮肤病的皮损标本）中未发现ＨＳＶＤＮＡ。根据病史提供，６０例ＥＭ中有５例是药物相关的ＥＭ，８例是病毒相关的ＥＭ，其余４７例为特发型ＥＭ。研究表明：２１例ＰＣＲＨＳＶＤＮＡ阳性的ＥＭ患者中，仅有２例发病前有口唇疱疹病史，１５／２１例（７１．４％）是复发性ＥＭ，发病高峰在冬季。尽管临床上无明显ＨＳＶ感染史，多数特发性ＥＭ也与疱疹病毒感染有关。ＰＣＲ技术是检测ＥＭ皮损中ＨＳＶ的快速、有效的方法，它可以决定病因上和ＨＳＶ感染有关的病例。     

疑似生殖器疱疹患者标本中单纯疱疹病毒的检测

生殖器疱疹的典型症状为水疱和溃疡,但症状不典型的生殖器疱疹患者也不少,亦有女性宫颈感染单纯疱疹病毒(HSV)的报道。国内实验室诊断生殖器疱疹的方法有细胞培养法、血清抗体测定,而HSV抗原检测的报道甚少,为了解疱疹感染情况及特征,我们对疑似生殖器疱疹患者进行HSV抗原检测。     

复发性多形红斑与单纯疱疹病毒

一般认为多形红斑(EM)是宿主对多种抗原刺激物的特异性免疫应答,一些药物及许多感染因子如单纯疱疹病毒(HSV)与其发病有关.复发性EM可能是EM的一种独特亚型,因其可能与单纯疱疹病毒感染有关,此种相关性在临床上已被证实.1985年Leigh等发现65%的复发性EM患者有唇疱疹史,     

用聚合酶链反应检测多形红斑皮损中单纯疱疹病毒的DNA

用聚合酶链反应检测２３例多形红斑石蜡组织切块中ＨＳＶ－ＤＮＡ，１６例为阳性（６９．５６％），其中ＨＳＶ－Ⅰ型１３例（８１．２５％），ＨＳＶ－Ⅱ型３例（１８．７５％）。对照组为银屑病３例，大疱性类天疱疮５例，扁平苔藓３例均为阴性。对于探讨ＨＳＶ在多形红斑发病机理中的作用有重要意义。     

聚合酶链反应检测生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒

近年来,生殖器疱疹(ＧＨ)在国内外的发病人数日益增多。由于其反复发作,给病人带来一定痛苦,且其病原体单纯疱疹病毒Ⅱ(ＨＳＶ2)与生殖器恶性肿瘤有密切关系[1],因此,越来越受到人们的重视。我们对64例临床诊断为ＧＨ的患者做聚合酶链反应(ＰＣＲ)检测。现报告如下。病例和方法一、病例　患者组:64例患者均为我科性病专科门诊病人。男58例,女6例。年龄21～63岁,其中21～24岁12例,25～29岁12例,30～39岁24例,40～49岁14例,大于49岁2例。已婚42例,未婚22例。病程2天～3年。初发者22例(34.38%),复发者42例(65.62%)。男性在阴茎包皮、龟头、冠状…     

Kaposi肉瘤患者血清人疱疹病毒8型抗体和DNA的检测

有报道从Kaposi肉瘤(KS)患者血清中检出较高比率的人疱疹病毒8型(HHV-8)DNA,说明该病毒在KS中起重要作用。血清流行病学研究表明,HHV-8抗体在普通人群中有较高的阳性率,这与KS发病在全世界均较低不一致。我们对新疆维吾尔族普通人群和KS患者分别进行了血清中HHV-8抗体和DNA检测,初步分析其临床意义。     

女性非淋菌性尿道炎患者生殖道单纯疱疹病毒的检测

为了解泸州地区女性非淋菌性尿道炎(NGU)患者感染HSV情况,我们用FQ-PCR法对128例NGU女性生殖道标本和50名健康体检妇女生殖道标本进行HSV检测,现报道如下.     

原位聚合酶链反应技术检测结节性红斑皮损中Ⅱ型单纯疱疹病毒DNA

目的　探讨结节性红斑（ Ｅ Ｎ） 的发病与Ⅱ型单纯疱疹病毒（ Ｈ Ｓ Ｖ２） 的关系。方法　用原位聚合酶链反应法（ Ｉ Ｓ Ｐ Ｃ Ｒ） ,对３５ 例 Ｅ Ｎ 皮损组织及１４ 例正常皮肤组织切片中的 Ｈ Ｓ Ｖ２ Ｄ Ｎ Ａ 进行扩增, Ｓ Ｐ 免疫组化染色, Ａ Ｅ Ｃ 显色。结果　 Ｈ Ｓ Ｖ２ Ｄ Ｎ Ａ 在 Ｅ Ｎ 及正常皮肤中的检出率分别为５７ ．１ ％ （２０／３５） 、８ ．３ ％ （２／１４） , Ｐ＜ ０ ．０１ ,阳性信号主要位于皮损部位,以小血管为著,细胞内的分布以核内型为主,亦有核浆混合型。结论　 Ｅ Ｎ 的发病与 Ｈ Ｓ Ｖ２ 有关。     

生殖器溃疡中单纯疱疹病毒的检测和分型

目的：了解性病门诊生殖器溃疡患者中单纯疱疹病毒（HSV）感染情况，并评价聚合酶链反应（PCR）－微孔板反向杂交检测和分型方法在生器疱疹诊断中的意义。方法：采用病毒分离培养、普通PCR和PCR－微孔板反向杂交法同时对200份生殖器溃疡标本作了HSV检测与分型。结果：PCR－微孔板反向杂交法的敏感性和特异性分别为98．1％和95．9％，PCR－微孔板杂交法分型结果与病毒分离培养法和普遍PCR的分型结果完全相符。生殖器溃疡中HSV检出率为30％（60／200），其中HSV－2感染占96．7％（58／60）。结论：HSV－2是性病门诊患者生殖器溃疡的主要病因之一，PCR－微孔板反向杂交法是一种适用生殖器溃疡标本中HSV的检测与分型的快速、敏感和特异的诊断方法。     

278例单纯疱疹病毒检测分析

目的:了解生殖器溃疡患者中单纯疱疹病毒(HSV)感染情况。方法:采用免疫酶技术对278例、6个病种生殖器溃疡标本作HSV检测。结果:278例生殖器溃疡患者HSV检出率36.70%(102/278)。其中男性HSV检出率34.86%(76/218),女性HSV检出率43.33%(26/60)。糜烂性龟头炎125例,不典型硬下疳50例,药物性皮炎27例,接触性皮炎40例,糜烂性扁平苔癣8例,机械性损伤28例,HSV检出率分别为16.20%(45/278),7.20%(20/278),3.20%(9/278),5.40%(15/278),1.10%(3/278)和3.50%(10/278)。结论:生殖器溃疡的HSV感染率升高。女性HSV检出率明显高于男性,加强对女性患者的HSV主动检测是防治生殖器溃疡的重要环节。并提示对高危人群的不典型生殖器溃疡,及时做HSV检测是早期诊断和鉴别生殖器疱诊的重要手段之一。     

治愈后的复发性单纯疱疹皮损处的皮肤和多形红斑皮损内发现单纯疱疹病毒DNA

一般认为在复发性单纯疱疹的间歇期,单纯疱疹病毒(HSV)居留于神经内呈潜伏状态。此时抗病毒治疗对其几乎不起作用。当单纯疱疹(HS)复发时,其经增殖并迁移至皮肤引起皮损。近年来,人们越来越关注HSV居留于神经外组织的可能性的研究。此外,也有人估计15%～63%的多形性红斑(EM)是继发于HSV感染,以及大多数特发性EM是与HSV亚临床感染相关。然而,EM皮损的病毒培养通常是阴性。所     

疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒抗原检测结果分析

为了解生殖器疱疹感染情况及特征,我们对海南省皮肤病医院2004年1月至2007年6月性病门诊疑似生殖器疱疹(GH)的患者进行单纯疱疹(HSV)抗原检测,现将检测结果报道如下.     

疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒抗原检测结果分析

目的了解生殖器疱疹疑似患者不同类型皮损中单纯疱疹病毒(HSV)抗原感染情况。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行HSV抗原检测。结果不同类型皮损HSV抗原检出率有差异,水疱、溃疡、结痂、丘疹红斑和裂隙的HSV抗原检出率分别为83.1%,66.8%,34.6%,11.1%和9.8%。结论疱液阳性率最高,说明早期采样的重要性。而临床表现不典型的皮损如红斑、裂隙HSV抗原的检出率低(11.1%,9.8%),提示应加强对此类患者皮损中HSV抗原的检测。     

单纯疱疹病毒Ⅱ型新型DNA疫苗的构建

目的：针对Ⅱ型单纯疱疹病毒（HSV-2）包膜糖蛋白gD以及包膜糖蛋白gB的CTL表位,构建重组真核表达质粒pVAX—gD—CTL。方法：根据GeneBank提供的HSV-2G株糖蛋白D基因（gD）序列设计PCR引物,以已构建好的pc—gD为模板,特异性扩增HSV-2gm片段,将其克隆于pVAX1载体中构建成质粒pVAX—gD,再将其双酶切后引入CTL片段构建重组真核表达质粒pVAX—gD—CTL。结果：将重组的pVAX—gD—CTL真核表达质粒转化大肠杆菌后,筛选阳性克隆进行酶切及测序鉴定。结论：初步构建HSV-2 pVAX—gD—CTL重组真核表达质粒。     

荧光多重实时PCR检测单纯疱疹病毒

目的建立单纯疱疹病毒的荧光多重实时PCR检测及分型技术，为生殖器疱疹的诊断及病毒分型提供快捷、敏感、特异的方法。方法以细胞培养法为对照，用Smart Cycler System作为实验平台，以DNA探针荧光标记技术建立荧光多重实时PCR，用于检测生殖器疱疹患者临床标本中的1型和2型单纯疱疹病毒(HSV1、HSV2)DNA。结果荧光多重实时PXR检测HSV1和HSV2 DNA的敏感性和特异性均为100％，可检测出低至1～5拷贝的HSV DNA，30min左右即可完成整个检测过程．而细胞培养的敏感性和特异性分别为70．10％和100％。结论基于Smart Cycler System的荧光多重实时PCR是一种易于操作、扩增效率高、封闭式的核酸扩增技术，可用一次PCR反应就能快速、敏感、准确地对临床标本中的单纯疱疹病毒进行检测和分型。     

非淋菌性尿道炎患者中单纯疱疹病毒感染的流行病学分析

为探讨非淋菌性尿道炎（NGU）患者中单纯疱疹病毒（HSV）感染的流行病学特征,用聚合酶链反(PCR)检测患者尿道或宫颈分泌物中的HSV－2,并对阳性患者用盐酸万乃洛韦（明竹欣）作抗病毒治疗7－10天,作追踪观察。结果发现约20．8％的NGU患者HSV－2阳性,经治疗后HSV－2均转阴性,但仅2例患者同时伴临床症状的消失。女性、性伴数＞5、伴其它STDs、病程长及抗生素疗效不佳等特征的NGU患者感染HSV的可能性大。     

复发性阿弗他口腔炎与单纯疱疹病毒感染关系初探

复发性阿弗他口腔炎(RAS)目前病因尚未完全明了。我们应用荧光定量PCR法检测了90例RAS患者口腔脱落上皮细胞中的Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)、Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)，并与一般人群进行了比较，现报道如下。     

单纯疱疹病毒IgM抗体检测方法的比较

目的:了解两种不同血清学检测方法检测单纯疱疹病毒IgM抗体的敏感性。方法:收集2018年5-6月50例生殖器疱疹高危人群,分别采用酶联免疫法及化学发光免疫法检测血清中单纯疱疹病毒IgM抗体,统计比较两种方法检测结果。结果:50例高危人群中:化学发光免疫法检测单纯疱疹IgM阳性12例,阳性率24.00%,其中1型IgM阳性4例,阳性率8.00%,2型IgM阳性8例,阳性率16.00%;酶联免疫方法检测IgM阳性4例,阳性率8.00%,其中1型IgM阳性2例,阳性率4.00%,2型IgM阳性2例,阳性率4.00%。化学发光免疫法IgM阳性检测率高于酶联免疫法(2=8,P<0.05)。化学发光免疫法检测HSVIgM、HSV-1型IgM、HSV-2型IgM的结果相对酶联免疫法的特异度分别为82.61%、95.83%、87.50%,灵敏度均为100%。结论:化学发光免疫法检测生殖器疱疹高危人群单纯疱疹病毒IgM抗体阳性率高于酶联免疫法,且操作简单、所需时间短。     

宫颈炎患者单纯疱疹病毒感染状况分析

为了解急、慢性宫颈炎患者HSV在宫颈感染的状况。选择无GH病史、外阴无皮损的140例急性宫颈炎患者、134例慢性宫颈炎患者及105例正常宫颈者，行宫颈HSVⅠ／Ⅱ抗原检测。结果：140例急性宫颈炎患者中HSVⅠ／Ⅱ阳性53例，阳性率37．86％；134例慢性宫颈炎患者中HSVⅠ／Ⅱ阳性52例，阳性率38．8l％与105例正常宫颈者中HSVIⅠ／Ⅱ阳性27例，阳性率25．71％，差异有显著性。因此，HSV可侵犯宫颈组织，表现为宫颈炎症状，临床上不可忽视对宫颈炎患者HSV的检测。