CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与肿瘤免疫治疗

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tregs）于1995年由Sakaguehi等首次报道，将去除了CD25^＋细胞的CD4^＋单阳细胞过继转移给裸鼠，则裸鼠发生多种自身免疫疾病；而将CD4^＋CD25^＋T细胞CD4^＋T细胞共同转移，则不发生自身免疫疾病。此研究揭示CD4^＋CD25^＋T细胞具有维持自身免疫耐受的功能。肿瘤的形成和进展与机体的免疫功能密切相关，CD4^＋CD25^＋T细胞在肿瘤免疫逃逸中起重要作用。本文就调节性T细胞在肿瘤免疫调节中的研究进展进行综述。     

CD4+CD25+和CD8+调节性T细胞的作用机制

调节性T细胞（Treg）主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对CD4^＋和CD8^＋效应性T淋巴细胞的增殖起抑制作用,因此在移植物抗宿主病、自身免疫病、过敏性疾病等的发病机制和临床治疗中有潜在的应用价值.本文重点介绍CD4^＋CD25^＋Treg和CD8^＋Treg的作用机制,并简述调节性T细胞研究面临的挑战与展望.     

腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4^＋CD45RA^＋T和CD4^＋CD45RO^＋T细胞的影响

目的 探讨腔镜手术对直肠癌患者免疫平衡及CD4^＋ CD45RA^＋T细胞和CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达的影响.方法 67例直肠癌患者中,33例拟进行腹腔镜手术,设为L组,34例拟进行开腹手术,设为O组.观察术前1d、术后2d、术后7d患者Th1、Th2、CD4^＋ CD45RA^＋T、CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达水平.结果 L组患者术前和术后Th1、Th2、CD4^＋ CD45RA^＋T、CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达无显著差异（P＞0.05）.O组术后2d、术后7d患者Th1细胞表达水平显著下降（P＜0.01）,Th2细胞表达显著升高（P＜ 0.01）;CD4^＋ CD45RA^＋T细胞的表达显著升高（P＜0.01）,CD4＋ CD45RO＋T细胞的表达显著降低（P＜0.05）.结论 腹腔镜手术较开腹手术对直肠癌患者的免疫平衡、CD4^＋ CD45RA^＋T细胞和CD4^＋ CD45RO^＋T细胞表达的影响小,对机体细胞免疫功能干扰较轻.     

急性白血病儿童外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义

本研究观察急性白血病患儿外周血CD4^＋CCD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）及自然杀伤细胞（nature killer cell,NK）在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞和NK细胞的方法：检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明：初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋占CD4^＋T细胞的比例分别为（9．55±2．41）％,（8．54±2．51）％和（6．25±0．85）％,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组（P〈0．05）;同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照（4．11±3．87％和10．41±7．20％w14．06±5．95％,P〈0．05）。结论：联合应用CD4、CD25及cDl27检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4^＋CD25^＋CD127^＋T细胞可较好地反映CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜发病中的研究新进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是一群具有免疫抑制功能的T细胞亚群，在小鼠和健康人体中约占外周CD4^＋T细胞的5％-10％，占人体外周单个核细胞的1％-2％，其通过多种途径对免疫反应具有抑制效应，能维持内环境的稳定。特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopcnic purpura，ITP）是一种自身免疫性疾病，以皮肤、黏膜或内脏出血为主要表现。近年来研究发现，CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与ITP的发病有一定的联系，本文对CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特征和作用，特发性血小板减少性紫癜发病机制及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜发病中的作用等的研究新进展作一综述。     

炎症性肠病患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞的表达及意义

[目的]探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞在炎症性肠病（IBD）发病中的作用及其与疾病活动性的关系。[方法]采用三色流式细胞术检测40例IBD患者，其它肠病患者30例和健康对照者30例。IBD患者中活动期患者25例，缓解期患者15例，使用和未使用激素和／或免疫抑制剂活动期IBD患者分别为16例和9例。对以上各组外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞亚群的百分率进行测定。[结果]疾病活动期IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例明显低于其他肠病和正常对照组（P〈0．01），疾病活动期IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞比例明显低于疾病稳定期患者（P〈0．01）。活动期IBD患者中使用激素和／或免疫抑制剂与未使用激素和／或免疫抑制剂结果差异有统计学意义。IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞表达率与疾病活动指数评分呈负相关性。[结论]IBD患者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞异常表达，可能参与疾病的发生发展，与疾病的活动性密切相关。     

肺癌患者手术前后外周血CD3^＋和CD4^＋与CD16^＋及CD4^＋／CD8^＋T细胞的表达及临床意义

目的 研究肺癌患手术前后，外周血中CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等T淋巴细胞亚群的定量变化，并探讨其临床意义。方法 取肺癌术前及术后第10天外周血，用流式细胞仪检测CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等T细胞，进行定量分析，并与对照组比较。结果 肺癌患手术前CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等均低于对照组（P＜0．01）。肺癌未转移（淋巴结阴性）手术后CD3^ 等T细胞明显高于术前（P＜0．05）。但肺癌已转移（淋巴结阳性），手术后CD3^ 等T细胞继续下降，与术前无差异（P＞0．05）。结论 监测CD3^ 、CD4^ 、CD16^ 等淋巴细胞亚群，对肺癌患免疫功能的评价及判断预后有重要意义。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与自身免疫性甲状腺炎

调节性T细胞主要在机体免疫系统中发挥负向调节作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限定免疫应答的范围、程度及作用时间,对效应细胞的增殖、免疫活性的发挥起抑制作用。近年来,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在自身免疫性甲状腺疾病中的作用日益引起人们的关注,动物实验和人体研究发现CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数目和功能的异常与自身免疫性甲状腺炎（autoimmune thyroiditis,AIT）的关系密切,可能在AIT的发病机制中发挥关键作用。综述如下。     

Foxp3转染小鼠CD4^＋CD25^-T细胞抑制树突状细胞功能

为了研究Foxp3基因表达与CD4^＋T细胞免疫活性的关系,用逆转录病毒转染Foxp3基因,在幼稚CD4^＋CD25^-T细胞内强制性表达FOXP3蛋白,进而研究转染后的CD4^＋CD25^-T细胞对树突状细胞的免疫共刺激分子和免疫功能的影响,并通过Transwell试验研究转染Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞对树突状细胞的作用是否依赖于细胞之间的直接接触。结果表明：通过逆转录病毒载体转染,成功建立了表达Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞模型,转染后1周Foxp3阳性表达的T细胞比例为38%。强制性表达Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞可以在体外发挥免疫抑制作用,可以诱导树突状细胞表面免疫共刺激分子CD80和CD86表达水平的下调。体外淋巴细胞增殖试验结果表明,Foxp3转染小鼠CD4^＋CD25^-T细胞可以抑制树突状细胞对异基因淋巴细胞的活化。结论：转染Foxp3的CD4^＋CD25^-T细胞对树突状细胞发挥的作用依赖于细胞之间的直接接触。     

骨髓增生异常综合征患者CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞、调控基因FOXP3的表达及意义

目的探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞）和调控基因FOXP3的表达及意义。方法分离22例MDS患者[MDS组,根据MDS分型标准分为：难治性贫血组（RA组）6例、难治性血细胞减少伴有多系发育异常组（RCMD组）11例、难治性贫血伴原始细胞增多组（RAEB组）5例]和8例正常健康者骨髓单个核细胞,采用免疫荧光标记和流式细胞仪检测CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞占CD4^＋ T细胞比例;提取骨髓单个核细胞RNA,采用RT-PCR检测FOXP3基因的表达水平。结果MDS组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;RA组、RAEB组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;RCMD组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与正常对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;RCMD组、RAEB组CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例、FOXP3基因表达水平与RA组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）;RA组、RCMD组CD4^＋ CD25^＋ Treg比例、FOXP3基因表达水平与RAEB组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）。结论MDS患者CD4^＋ CD25^＋ Treg占CD4^＋ T细胞比例及FOXP3基因表达水平随预后危险级别的升高而升高,提示免疫异常是MDS疾病的发生、发展的一个促进因素。     

外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例变化在肾移植受者移植后免疫监测中的应用

背景：相关实验表明调节性T细胞在移植物免疫耐受中起重要作用。 目的：观察外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例变化与肾移植受者移植后免疫变化的相关性。 设计、时间及地点：回顾性病例分析,于2007-09／2008-07在广东省第二人民医院器官移植中心及其实验室完成。 参试者：52例病情稳定的维持性血液透析患者行同种异体肾移植治疗。 方法：肾移植后患者均服用三联免疫抑制剂。所有患者移植后发生急性移植肾排斥反应以及感染均按照相应指南诊断及治疗。分别于移植前和移植后1,2,4,8,12周以及发生排斥反应和感染时抽血检测外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞。按其免疫力恢复情况分为正常组26例,排斥反应组17例,感染组9例。 主要观察指标：用流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞的比例,所得结果进行相关分析。 结果：与正常组比较：排斥反应组CD4^＋CD25^highFoxP3／CD4^＋的比值降低（P〈0．05）,而感染组显著增高（P〈0．01）。与感染组比较：排斥反应组CD4^＋CD25^highFoxP3／CD4^＋的比值显著降低（P〈0．01）。 结论：肾移植后受者外周血CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例与受者免疫状态密切相关。CD4^＋CD25^high调节性T细胞比例的变化可以反应机体的免疫状态的变化,其升高或降低可以作为预测肾移植受者移植后发生感染或排斥反应的指标之一。     

CD4+ CD25+调节性T细胞

机体的免疫系统维持着对感染性抗原的反应和自身耐受的平衡,而对自身抗原产生免疫耐受则是防止发生自身免疫病的关键。阴性选择中的克隆清除、免疫无能和克隆忽略被认为是控制自身反应性T细胞的主要机制。近些年随着研究的深入,CD4^＋ CD25^＋调节性T细胞（Treg细胞）在维持自身耐受中的作用得到进一步的认识。     

LPS刺激来自人单核细胞的树突状细胞在调节自体CD4+CD25+T细胞活性作用研究

树突状细胞（DC）是现今被认为最具潜能的专职抗原呈递细胞.应用不同方法在体内诱导细胞毒T细胞（CTL）来识别肿瘤相关抗原的肿瘤免疫治疗研究已有报告.然而,在体内免疫治疗的有效性可能仅限制在局部或系统抑制CTL产生和功能.为了检测LPS刺激人单核细胞的DC来抑制自体CD4^＋CD25^＋T细胞能力,使用HLA-A2限制性p53264-272肽作为肿瘤抗原,用LPS（DC-LPS^＋）或不用LPS（DC-LPS^-）产生的DC分别与自体T细胞共同培养.结果显示：在DC-LPS^＋活化的T细胞的CD4^＋CD25^＋T细胞群比DC-LPS^-活化的T细胞要低.这个结果提示,DC-LPS^＋与CD4^＋CD25^＋T细胞群有关联,而且这种特性可能是由于T细胞对肿瘤相关抗原的调节作用.     

异基因造血干细胞移植中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与急性移植物抗宿主病的相关性

背景：CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是调节性T细胞的一个重要亚群,在诱导移植耐受方面起着重要作用。目的：综述CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特性、免疫调节作用机制及其与急性移植物抗宿主病的相关性。方法：应用计算机检索PubMed、Medline数据库1990-01/2010-02,维普数据库2000-01/2010-02以及运用Google网络数据库有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其他与急性移植物抗宿主病相关性研究的文献。结果与结论：CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后产生的急性移植物抗宿主病中起着重要作用,不仅能有效预防和治疗急性移植物抗宿主病,同时还能保留移植物抗白血病效应作用。随着研究的深入,发现CD4^＋CD25^＋调节性T细胞很有希望成为急性移植物抗宿主病早期风险预测的一项重要实验诊断指标,并且有可能通过调控移植后患者体内CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平来预防和控制急性移植物抗宿主病的发生。但是,要将CD4^＋CD25^＋调节性T细胞应用于临床尚有问题有待解决,例如CD4^＋CD25^＋调节性T细胞细胞表面特异性标志物是什么,如何提高CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在人体内的活性以及怎样充分发挥其免疫抑制功能等。     

CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞在重型乙型肝炎发病中的作用

目的探讨CD4＋、CD25＋调节性T细胞（CD4＋、CD25＋ Tr）在重型乙型肝炎病人发病机制中的作用。方法采用流式细胞术检测重型乙型肝炎病人及对照组外周血CD4＋、CD25＋ Tr的水平及应用PCR测定重型乙型肝炎病人及对照组外周血中HBVDNA滴度。结果重型乙型肝炎组外周血CD4＋、CD25＋ Tr的百分率为（2.63±0.83）%,较慢性乙型肝炎组的（4.15±1.17）%差异有显著性（P〈0.05）,较无症状HBV携带者组及健康对照组差异有非常显著性（P均〈0.01）;重型乙型肝炎组外周血HBVDNA滴度为1.2×10^4copies/ml,较慢性乙型肝炎组（2.3×10^6copies/ml）和无症状HBV携带者（7.8×105copies/ml）差异有非常显著性（P均〈0.01）;不同乙型肝炎病人外周血CD4^＋、CD25^＋ Tr的百分率与HBVDNA滴度正相关。结论CD4^＋、CD25＋^ Tr能抑制T细胞对HBV的免疫反应;重型乙型肝炎患者发病与CD4^＋、CD25^＋ Tr表达过低有关。     

外周血CD4^＋ CD8^＋双阳性T细胞计数增加在肝脏疾病中的回顾性分析

[目的]通过分析CD4^＋ CD8^＋（DP）T细胞在肝脏疾病中的病因构成比，探讨DPT细胞在肝脏疾病中的意义。[方法]CD4^＋CD8^＋T细胞计数采用流式细胞术方法，使用BD公司Multiset软件测定，回顾性分析我院门诊及住院患者中DPT细胞。异常在肝脏疾病中的病因构成。[结果]在71例DPT细胞计数增加的肝脏疾病患者中，前4位的疾病分别是：乙型病毒性肝炎慢性重型、慢性活动性肝炎、肝移植术后和肝炎后肝硬化，分别占26．8％、12．7％、11．3％和9．9％。在感染性疾病和非感染性疾病中分别占70．4％和29．6％。[结论]DPT细胞计数增加在乙型病毒性肝炎慢性重型、慢性活动性肝炎中的比例较高，进一步研究DPT细胞计数增加的机制对于揭示病毒性肝炎的免疫发病机制具有重要意义。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞表达的研究

[目的]探讨CD4^ CD25^ 调节性T细胞在慢性乙型肝炎发病中的作用。[方法]用流式细胞仪测定临床确诊的60例慢性乙型肝炎患者外周血中的CD4^ CD25^ 调节性T细胞。[结果]e系阳性组CD4^ CD25^ 调节性T细胞明显高于e系阴性组，e系阴性组明显高于正常对照组。[结论]慢性乙型肝炎患者存在免疫无能和免疫抑制特性，导致细胞免疫功能失调，提示CD4^ CD25^ 调节性T细胞在慢性乙型肝炎的病程中起着重要作用。     

CCL20抑制小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋天然调节性T细胞的发育

本研究探讨趋化因子CCL20对小鼠胸腺CD4^＋CD25^＋双阳性调节性T细胞发育的影响,为天然调节性T细胞调控的研究提供基础数据。采用14.5天龄胚鼠胸腺进行体外培养,以FACS检测不同时间点胸腺CD4^＋CD25^＋细胞的改变,同时计数每个胸腺小叶的细胞数变化。结果表明：体外胸腺培养的第1-6天胸腺细胞比例、细胞数量的变化趋势与胸腺体内发育的第14.5、15、16、17、18、19天CD4^＋CD25^＋双阳性T细胞的比例、细胞数量的变化趋势相似;在胸腺体外培养的第1-6天,CD4＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞的比例分别为58.29%、12.14%、6.08%、17.78%、9.06%、4.04%,占CD25^＋T细胞的比例分别为3.75%、10.81%、17.20%、51.93%、61.64%、80.06%,这一发育趋势与体内结果具有一致性。在4μg/ml的CCL20干预下,胸腺体外培养的第3、6天CD4^＋CD25^＋胸腺细胞分别从3.24±0.18、3.96±0.24下降至1.27±0.11、1.76±0.22（p值均〈0.001）。结论：体外培养的CD4^＋CD25^＋双阳性胸腺细胞数量和比例变化与体内发育变化趋势一致,CCL20明显下调胸腺CD4^＋CD25^＋的表达,这将为天然调节性T细胞的调控研究提供有效的参考依据。     

卡介苗免疫大鼠的抗结核发病和CD4^＋CD8^＋双阳T细胞

目的：探讨卡介苗（BCG）对大鼠结核感染及CD4^＋CD8^＋双阳（DP）T细胞的影响。方法：60只PPD皮试阴性SD大鼠随机分成（1）卡介苗免疫（BCG）组、（2）BCG免疫后结核分枝杆菌（Mtb）攻击（BCG-TB）组、（3）Mtb攻击后不化疗（TB）组。BCG组、BCG-TB组于观察开始接种BCG。BCG-TB组、TB组于3个月末接受Mtb攻击。比较全部大鼠接种Mtb后的死亡率；实验开始和其后3、4、5、6、8个月末检测外周血中T细胞亚群。结果：BCG组、BCG-TB组无死亡；TB组感染后5个月内死亡率45％（9／20）。TB组死亡率高于BCG组和BCG-TB组，P〈O．01。实验开始时3个组组间对应参数比较差异均无显著性（P〉0．05）；3个月末BCG组、BCG-TB组之间各对应参数比较差异均无显著性（P〉O．05）；BCG组和BCG-TB组第3个月末与接种前比较，CD8^＋、DP升高，且显著高于TB组（Mtb干预之前），P〈0．01或P〈0．05。BCG组DP细胞于接种BCG后第6个月后开始回落，但仍显著高于接种前；BCG-TB组于Mtb攻击1个月后CD8^＋、DP继续升高，观察的第8个月CD8^＋、DP回落，但仍显著高于BCG接种前；TB组Mtb攻击后1个月末CD8^＋、DP有升高但低于BCG组和BCG-TB组，同时伴有CD3^＋、CD4^＋降低，差异均有显著性，P〈0．05或P〈0．01，此后维持在相近水平。Mtb攻击2个月末BCG-TB组DP高于BCG组和TB组，P〈0．05或P〈0．01。Mtb攻击5个月后3个组间DP差异无显著性（P〉0．05）。结论：BCG预防接种可保护Mtb感染宿主免于发病和死亡，增强抗结核保护性细胞免疫力表现之一为DP细胞升高，DP细胞是抗结核保护性免疫相关T细胞。DP细胞的形成与CD4^＋SP细胞上CD8^＋抗原表达有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞与移植免疫耐受研究进展

CD4^＋CD25^＋T细胞是调节性T细胞（regulatory Tcells,Tr）的亚群之一,主要来源于胸腺,表达IL-10 mRNA,细胞表面表达白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）受体α链（CD25）,本身不产生IL-2,在体外为无能细胞（anergy cell）,在体内、外增殖需要外源性IL-2。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞具有免疫无能性和免疫抑制性两大功能特性。它能通过细胞间接触方式有效抑制免疫系统对外来器官产生排异反应的部位,使免疫系统的其他部位保持稳定,发挥正常的免疫功能,克服了机体在接受器官移植后出现的免疫排斥反应,从而在移植免疫耐受中发挥重要的作用。