非小细胞肺癌CK19及CEA淋巴结微转移与肿瘤复发相关性的研究

目的通过检测非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）患者淋巴结中细胞角质蛋白（CK19）及癌胚抗原（CEA）的阳性表达,以确定淋巴结微转移与肿瘤复发转移的相关性。方法收集30例患者的135枚淋巴结标本,进行CK19及CEA标记并与随访结果进行对照。结果 30例患者的135枚淋巴结中,CK19阳性表达8例,CEA阳性表达有7例,其中CK19阳性患者中6例复发转移,CEA阳性患者中4例复发转移,CK19阴性患者中6例复发转移,CEA阴性患者中8例复发转移。结论 CK19及CEA免疫组化标记物是检测非小细胞肺癌淋巴结微转移的有效指标,其可作为非小细胞肺癌术后复发转移预测的参考指标。     

CK19mRNA检测在判断IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结微转移中的作用

目的检测CK19mRNA在IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结中的表达,探讨其在判断早期宫颈癌淋巴结微转移中的作用。方法应用荧光定量PCR检测CK19mRNA在IA2-IB2期宫颈鳞癌前哨及非前哨淋巴结中的表达,比较CK19mRNA检测与常规组织病理学检查检出前哨淋巴结微转移的阳性率;分析前哨淋巴结中CK19mRNA的阳性表达与宫颈癌患者临床、病理参数的关系;比较CK19mRNA在前哨与非前哨淋巴结中的阳性表达率。结果 30例IA2-IB2期宫颈鳞癌患者共检出前哨淋巴结86枚,荧光定量PCR与常规组织病理学检测前哨淋巴结微转移的阳性率分别为32.6%和12.8%(P﹤0.05);前哨淋巴结CK19mRNA的阳性表达与宫颈癌患者的临床分期、肿瘤浸润深度、肿瘤直径大小及脉管间隙浸润有关(P<0.05),与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P>0.05);前哨淋巴结中CK19mRNA的阳性表达率明显高于非前哨淋巴结中CK19mRNA的阳性表达率(32.6%和4.5%,P<0.05)。结论与传统组织病理学检查比较,检测CK19mRNA在IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结中的表达能显著提高微转移检出率,可能成为准确评估早期宫颈癌患者淋巴结微转移的指标和方法,进而能更恰当地指导术后辅助治疗并改善患者的预后。     

SCCAg、CK19mRNA与早期宫颈癌前哨淋巴结微转移的相关性研究

目的 探讨鳞状细胞癌抗原（SCCAg）联合细胞角蛋白（CKs）19mRNA在预测IA2-IB2期宫颈癌前哨淋巴结微转移中的价值及相关性.方法 IA2-IB2期宫颈癌患者为研究组,CIN患者及健康妇女为对照组.用ELISA法检测宫颈癌患者术前及对照组血清中SCCAg含量,荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测宫颈癌患者前哨淋巴结CK19mRNA的表达,分析两项指标的临床价值及两者间的关系.结果 宫颈癌组血清SCCAg较CIN组及健康体检组明显增高;荧光定量PCR检测CK19mRNA检出前哨淋巴结微转移的阳性率（32.6%）比常规病理检查（12.8%）高;血清SCCAg与CK19mRNA表达呈正相关.结论 检测CK19mRNA能显著提高IA2-IB2期宫颈癌前哨淋微转移的检出率;联合检测IA2-IB2期宫颈癌患者血清SCCAg及前哨淋巴结CK19mRNA可能成为预测早期宫颈癌前哨淋巴结发生微转移的一种有价值的方法.     

CK19在口腔鳞状细胞癌转移淋巴结中的表达研究

目的：检测口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者淋巴结标本中细胞角蛋白19（CK19）的表达情况,寻找发现OSCC淋巴结转移及微转移的有效分子生物学手段。方法应用荧光定量RT- PCR检测8例OSCC患者的119枚淋巴结标本中CK19 mRNA表达水平,并与HE染色及免疫组化进行比较。结果 HE染色及免疫组化同时检测到CK19阳性淋巴结24枚,荧光定量RT- PCR检测到CK19阳性者48枚,HE染色及免疫组化结果CK19阴性而定量RT- PCR阳性的微转移淋巴结主要分布于颈Ⅱ区。淋巴结总体微转移率为20.17%。荧光定量 RT- PCR检测的CK19阳性淋巴结与 HE染色及免疫组化比较有统计学差异（χ2=22.04,P＜0.01）。结论对于OSCC淋巴结转移与微转移的检测,荧光定量RT- PCR对CK19 mRNA的检测较HE染色和免疫组化敏感,分子病理检测方法的应用可以有助于肿瘤的分期判断、预后评估及治疗方案的抉择。     

细胞角蛋白在检测胃癌淋巴结微转移中的应用价值

方法：选取50例经常规病理学检查无淋巴结转移的胃癌根治术后患者的胃周淋巴结的常规石蜡包埋组织块242个,分别应用免疫组织化学方法检测HE染色和癌胚抗原（CEA）、细胞角蛋白（CK19、CK20）的表达。随访患者28例,随访时间48～90月。结果：242个淋巴结常规HE染色均为阴性。经免疫组织化学染色后,有11例患者（22%）、18个淋巴结（7.44%）发现微转移,CEA、CK19、CK20表达阳性的淋巴结数分别为10、17、16个。CEA检出微转移患者6例。CK19和 CK20检出微转移患者均为10例。28例随访患者中,复发及死亡组微转移阳性率（3/7）明显高于无复发组（2/21）。微转移阳性组无病生存期明显短于阴性组,而总生存期无显著性差异。结论：CEA、CK均可用来检测胃癌淋巴结微转移,但CK比CEA敏感性高。CK20与CK19在检测淋巴结微转移方面有相同的敏感性,CK20具有更强的特异性。胃癌淋巴结微转移阳性者复发和死亡率高。     

Hp感染与胃癌患者阴性淋巴结中CK19和CK20表达的相关性研究

目的 研究幽门螺杆菌（Hp）感染与胃癌患者阴性淋巴结微转移的相关性.方法 随机选取我院确诊术前未经放、化疗的胃癌患者64例,术前检测Hp并依照结果分为Hp（＋）组与Hp（-）组,术后行常规病理检查阴性淋巴结,用CK19、CK20单克隆抗体进行免疫组织化学染色,比较两组淋巴结微转移检出率.结果 Hp（＋）组胃癌患者阴性淋巴结CK19、CK20阳性表达率分别为11.8％、9.2％,Hp（一）组胃癌患者阴性淋巴结CK19、CK20阳性表达率分别为6.3％、4.8％,Hp（＋）组阴性淋巴结CK19、CK20表达高于Hp（-）组（P＜0.05）.结论 Hp感染可能促进胃癌患者阴性淋巴结中细胞因子高表达,即胃癌微转移的发生。     

CK19和EMA在Ⅰ～Ⅱ期宫颈鳞癌淋巴结的表达及其相关性

目的:研究CK19(cytokeratin19)和EMA(epithelial membrane antigen)在Ⅰ～Ⅱ期宫颈鳞癌盆腔淋巴结中的表达,探讨与宫颈鳞癌盆腔淋巴结微小转移的相关性.方法:采用免疫组化法检测76例Ⅰ～Ⅱ期宫颈鳞癌患者盆腔淋巴结中CK19和EMA的表达.结果:①免疫组化结果显示:11例经常规HE病理检测阳性的盆腔淋巴结13枚,皆呈强阳性表达,CK19、EMA阳性表达率均为100％.65例经常规HE病理检测阴性的盆腔淋巴结中CK19呈阳性表达23例,阳性淋巴结33枚(33/241),阳性表达率13.7％,EMA呈阳性表达21例,阳性淋巴结31(31/241)枚,阳性表达率为12.9％,两组差异显著(P＜0.05).②宫颈鳞癌盆腔淋巴结微转移检出率与年龄、FIGO分期、病理分级无关(P＞0.05),与有无淋巴结转移有关(P＞0.05).结论:①在淋巴结中CK19、EMA表达,可以作为Ⅰ～Ⅱ期宫颈鳞癌盆腔淋巴结微转移的生物学指标,提示可能存在宫颈鳞癌淋巴结微转移.     

联合检测外周血 CK19和SCCAg mRNA对早期宫颈癌患者微转移的诊断价值

［摘要］目的　采用qRT-PCR技术检测早期宫颈癌患者根治术术前外周血中CK19和SCCAg mRNA表达水平的变化,研究联合检测外周血 CK19和SCCAg mRNA对早期宫颈癌患者微转移的诊断价值．方法　昆明医科大学第三附属医院妇瘤科30例早期（ⅠA2～ⅡA）宫颈癌患者为实验组,15例子宫肌瘤患者和15例健康志愿者为为阴性对照组,15例晚期（ⅡB～ⅢB）宫颈癌患者为阳性对照组．收集外周血样本,qRT-PCR技术检测外周血CK19和SCCAg mRNA表达水平的变化．结果　实验组外周血中CK19和SCCAg mRNA表达水平与阴性对照组、阳性对照组比较,差异有明显统计学意义（P＜0.01）; 30例宫颈癌患者手术前外周血CK19和SCCAg mRNA阳性检出率分别为30%（9/30）和20%（6/30）,手术前联合检测二者的表达可使阳性检出率提高至43.3%,联合检测2种标志物的阳性检出率高于检测单一标志物,差异有统计学意义（P＜0.05）．结论　外周血CK19和SCCAg mRNA表达水平均可能作为诊断早期宫颈癌微转移的标志物．qRT-PCR技术联合检测两项指标,可提高诊断微转移的敏感度和特异性     

卵巢癌腹后腔淋巴结微转移的检测及临床意义

目的：探讨以CK18、CA125为指标进行卵巢癌腹后腔淋巴结微转移检测的临床意义。方法：选取清扫淋巴结部位记录详细的病例60例,针对原发灶与淋巴结进行CK18与CA125免疫组化检测。结果：卵巢癌原发灶CK18、CA125蛋白的阳性表达率（分别为82.93%和87.80%）显著高于其淋巴结转移灶（P〈0.05）,腹膜后各组淋巴结CK18、CA125阳性表达率均显著高于临床病理检测阳性表达率（P=0.001～0.007 6）。结论：对卵巢癌腹后腔淋巴结进行CK18、CA125免疫组化检测,可以作为病理诊断有益的补充应用于卵巢癌淋巴结微转移的诊断。     

结直肠癌淋巴结微转移的检测及其临床意义

目的 探讨结直肠癌淋巴结微转移的发生率,研究淋巴结微转移与结直肠癌转移复发的关系。方法 应用免疫组化LSAB法检测结直肠癌肿瘤组织和淋巴结 癌胚抗原（CEA）的表达,并采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法检测结直肠癌淋巴结癌胚抗原（CEA）的表达。结果 免疫组化法示50例Dukes‘B期患者128枚淋巴结中发现10枚淋巴结CEA表达,有淋巴结CEA表达的6例患者全部在术后5年内出现肿瘤转移或复发,而其他44例患者只有5例出现肿瘤转移或复发。RT－PCR法示11例肠癌的44枚淋巴结中有12枚淋巴结CEA mRNA表达,而病理组织学检查（HE染色）仅发现3枚淋巴结存在肿瘤转移,免疫组化法发现4枚淋巴结CEA表达。结论 存在淋巴结微小转移的大肠癌患者预后较差,基于RT－PCR的CEA检测可作为早期检测结直肠癌淋巴结微小转移的一种手段,为结直肠癌术后辅助化疗提供理论依据。     

病检阴性胃癌淋巴结转移的检测:免疫组化和RT-PCR的比较

目的：比较免疫组化和RT-PCR方法对常规病检阴性(pN0)胃癌淋巴结微转移的检测价值。方法：研究pN0胃癌14例249枚淋巴结，分别用癌胚抗原和CKl9作为标记物，用免疫组化和RT-PCR方法检测淋巴结微转移。结果：在6例患者的淋巴结中发现微转移，免疫组化和RT-PCR法分别发现11枚和19枚微转移淋巴结，2种方法发现的微转移阳性率分别为4．4％和7．6％。在免疫组化检测阳性的11枚淋巴结中，8枚用CK19和癌胚抗原的抗体染色均为阳性，另3枚仅在CKl9抗体染色时阳性而癌胚抗原的抗体染色阴性。在19枚RT-CPR检测阳性的淋巴结中，15枚用CK19和癌胚抗原作为标记物检测均为阳性，另4枚仅在用CK19检测阳性而用癌胚抗原作为标记物检测为阴性。所有用免疫组化检测为阳性的淋巴结用RT-PCR检测均为阳性，但19枚RT-PCR检测阳性的淋巴结中枚有10枚被免疫组化证实为阳性。结论：RT-PCR是比免疫组化更为敏感的检测胃癌淋巴结微转移的方法，而CK19作为检测标记物比癌胚抗原更敏感。     

细胞角蛋白19基因诊断淋巴结微转移癌灶的意义

目的研究淋巴结转移情况以判断肿瘤预后,指导综合治疗。方法应用细胞角蛋白19（cyto－keratin19,CK19）RT－PCR方法对上皮性肿瘤及淋巴结进行CK19mRNA检测。结果5例正常淋巴结无CK19mRNA表达;15例乳腺癌、10例胃癌、11例大肠癌均表达CK19mRNA;82个淋巴结中,组织学检查11个有肿瘤转移,其CK19RT－PCR也为阳性,其余71个无肿瘤浸润淋巴结,经CK19RT－PCR发现16个表达CK19mRNA。结论CK19RT－PCR方法提高了淋巴结转移的检出率,在上皮性肿瘤患者的其它部位（外周血、骨髓）微转移癌灶的检测中有推广应用价值。     

细胞角蛋白及CD68在胃肠道淋巴结微小转移癌中的表达及意义

目的旨在研究细胞角蛋白(CK)及CD68对胃肠道淋巴结微转移的诊断价值。方法采用免疫组织化学PV-9000法检测41枚微小转移癌胃肠癌淋巴结(实验组)和28枚正常淋巴结(对照组)中的CK及CD68蛋白的表达。结果 CK在实验组的阳性率为85%(35/41),显著高于对照组14%(4/28)(P<0.01);CD68在实验组的阳性率为20%(8/41),显著低于对照组68%(19/28)(P<0.01)。Spearman分析提示在胃肠癌淋巴结微小转移组织中CK表达与CD68表达呈高度负相关(r=-0.841,P<0.01)。结论免疫组织化学法检测淋巴结微转移可以作为肿瘤细胞淋巴播散的指标。CK及CD68两者联合检测可应用于胃肠道淋巴结微小转移癌的检测。     

卵巢癌淋巴结微转移的检测及临床意义

目的：检查卵巢癌患者淋巴结内有无微小转移。方法：33例原发性卵巢癌共获淋巴结187个，将石蜡包埋癌组织块和淋巴结连续切片2张，分别作H－E染色及用抗细胞角蛋白（cytokeratin,CK）单克隆抗体进行免疫组化染色。结果：34例中33例原发灶呈CK阳性反应，CK染色发现33例187例淋巴结中12例（36.4%）31个淋巴结（16.6%）CK阳性，有微转移者12例（36.4%）17个淋巴结（8.0%）；而H－E 色仅发现7例（21.2%）14个淋巴结转移（7.5%），其中有微转移者仅2例（6.1%）2个淋巴结（1.1%）（P＜0.01），H－E阳性者CK全部阳性，H－E阴性的32例中用CK－IHS检出5例有淋巴结微转移。淋巴结微转移与卵巢癌患者的临床期别、细胞分化和生存时间有关。结论：CK染色可大大提高淋巴结微转移的检出率，对卵巢癌患者具有预后意义。     

CK19检测乳腺癌前哨淋巴结微转移的价值

目的 :探讨检测乳腺癌HE阴性的前哨淋巴结微转移对SNB预测腋淋巴结状态准确性的价值。方法 :以细胞角蛋白 19作为组织特异性标志 ,采用免疫组化的方法 ,对 32例HE阴性的 6 8枚前哨淋巴结的微转移灶进行检测。结果 :5例病人的 9个前哨淋巴结有微转移灶 ,其中 1例假阴性的 2枚前哨淋巴结均发现微转移灶。前哨淋巴结微转移灶的检出率是 13.2 % (9/ 6 8)。从而可使SNB预测腋淋巴结状态的敏感性从 95 .8%(2 3/ 2 4)提高到 10 0 % (2 8/ 2 8) ;准确性从 98.2 % (5 4/ 5 5 )提高到 10 0 % (5 5 / 5 5 )。结论 :应用CK19单抗检测乳腺癌HE阴性的前哨淋巴结微转移可提高SNB预测腋淋巴结状态的准确性     

pN0胃癌淋巴结微转移的研究

目的：证实常规病理检查（HE染色）结果全部阴性的胃癌淋巴结（pN0）存在微转移（MM）,探讨pN0胃癌淋巴结微转移与胃癌临床病理学的关系。方法：选取行胃癌根治术,常规病理检查（HE染色）证实淋巴结转移全部阴性的胃癌（腺癌）病例40例,收集其淋巴结蜡块146个,淋巴结共298枚。分别用鼠单抗CK7和鼠单抗CK19行免疫组织化学染色,确定其有无微转移。结果：两组有10例（25%）共计26枚淋巴结（8.72%）发现微转移。其中CK7组6例,阳性率15%,CK19组4例,阳性率10%。胃癌微转移淋巴结的检出数量分别为：CK7组16枚（5.37%）,CK19组10枚（3.35%）。胃癌淋巴结微转移的存在与肿瘤的侵及深度有关（P〈0.05）,与患者的性别、年龄,肿瘤部位、大小等无关（P〉0.05）。结论：常规病理学检查全部阴性的胃癌淋巴结存在微转移,CK7和CK19均是免疫组化检测胃癌淋巴结微转移的理想指标,对指导胃癌的手术治疗具有积极意义。     

SLN 检测结果对早期子宫颈鳞癌行子宫颈广泛性切除术的指导意义

目的通过前哨淋巴结（SLN）的检查结果,预测早期子宫颈鳞癌患者盆腔淋巴结转移情况,以期对子宫颈广泛性切除术（RAT）的安全可靠性进行指导。方法选取2010年3月至2013年3月间收治的早期子宫颈鳞癌患者42例,术前利用核素检测法对患者的SLN进行检测,术中对SLN进行原位切除,同时清扫盆腔淋巴结,术中利用快速冰冻病理检查,确定SLN未发生转移后,行RAT术;术后将盆腔淋巴结和SLN石蜡包埋进行抗角蛋白免疫组化检测和常规病理检查。最后观察患者术中的出血量、手术时间、住院时间及术中术后并发症等指标,评价检测SLN对早期子宫颈鳞癌患者行RAT手术安全可靠性的指导作用。结果收治的42例早期子宫颈鳞癌患者均有SLN检出,共检出140枚SLN,每例患者检出（3．3±1．4）枚,其检出率为100％（42／42）;其中3例患者经SLN检测发现淋巴结转移,放弃行RAT术。SLN及其他部位盆腔淋巴结抗角蛋白免疫组化检测未检出HE染色病理检查漏诊的微转移灶。病理证实,未发现非SLN有转移的假阴性及SLN阳性实际无转移的假阳性患者,其阴性预测率高达100％。患者术中平均出血量335ml,手术平均时间238min,平均住院时间10．5d,术中术后共14例出现并发症。结论SLN检测在早期子宫颈鳞癌患者盆腔淋巴结转移的诊断中有一定价值,对于希望保留生育能力的年轻女性患者在SLN检测结果指导下行RAT手术安全、可靠。     

肝外胆管癌淋巴结微转移的检测及其对预后的影响

目的 观察CK19和CK20在肝外胆管癌(EHCC)淋巴结微转移中的表达,探讨淋巴结微转移与临床病理特征和CA19-9、癌胚抗原(CEA)的关系,以及淋巴结微转移对预后的影响.方法 选取59例行手术切除EHCC患者的279枚淋巴结,分别以CK19、CK20单克隆抗体进行免疫组化染色和常规HE染色,确定有无淋巴结转移与微转移,并与各病例的临床病理及随访资料进行比较,分析微转移与临床病理因素的关系及对生存率的影响.结果 59例患者的淋巴结转移率,HE诊断仅23.72%(14/59),而CK诊断为35.59%(21/59,P<0.05);淋巴结转移发生率由HE染色的5.37%提高到CK染色的13.98%(P<0.05);在常规HE染色诊断没有淋巴结转移的45例患者中,微转移的发生率为15.56%(7/45).淋巴结微转移术前血清CA19-9浓度显著高于无淋巴结微转移者(对照组)(P<0.05);淋巴结微转移与血清CA19-9浓度呈正相关(r_s=0.371,P<0.05).对12个因素进行Logistic回归分析,结果显示肿瘤的组织学类型和淋巴浸润对淋巴结微转移有重要影响(P<0.05).结论 CK免疫组化染色能检测出HE染色阴性淋巴结中隐匿的癌细胞,淋巴结微转移能够更准确地判断EHCC患者的预后.     

早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义

目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义.方法:采用RT - PCR技术对47例Ⅰ a～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测.结果:在Ⅰ a～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89％ (7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0％ (0/37).在Ⅰ a～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P＜0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P＞0.05).结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关;推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标.