肾癌组织中细胞凋亡及相关基因bcl-2和bax表达的研究

目的探讨肾癌的发病机制。方法采用原位ＤＮＡ片断末端标记和免疫组织化学方法,检测４８例肾癌组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因ｂｃｌ２和ｂａｘ蛋白的表达。结果４８例肾癌组织中ｂｃｌ２蛋白低表达２２例,凋亡指数（ＡＩ）均值为１３５;高表达２６例,ＡＩ均值为１０４。两组ＡＩ均值间统计学分析差异有显著意义（Ｐ＜００５）。ｂａｘ蛋白低表达３４例,ＡＩ均值为１０３;高表达１４例,ＡＩ均值为１６３。两组ＡＩ均值间统计学分析差异有非常显著意义（Ｐ＜００１）。ｂｃｌ２蛋白表达越强,ｂａｘ蛋白表达越弱,凋亡细胞数就越少。结论ｂｃｌ２和ｂａｘ蛋白均参与了肾癌组织中细胞凋亡的调节,并在肾癌的发生和发展中发挥着重要作用     

阻塞性黄疸大鼠肝组织细胞凋亡及相关基因bcl-2、bax的表达

目的　探讨阻塞性黄疸肝损害的调控机制。方法　用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记(TUNEL)技术和免疫组织化学方法检测 4 0只阻塞性黄疸大鼠肝脏组织细胞凋亡状态及凋亡相关基因bcl 2和bax蛋白的表达。结果　胆总管结扎后 ,随结扎时间的延长细胞凋亡增加 ,结扎 14d后细胞凋亡达高峰 ,凋亡指数 (AI)达 5 8.2 3± 1.5 8,各组AI差异有显著性 (P <0 .0 5 )。在阻塞性黄疸过程中 ,bcl 2蛋白表达越强 ,bax蛋白表达越弱 ,AI亦越少。结论　bcl 2和bax蛋白均参与了阻塞性黄疸肝组织中细胞凋亡的调节。     

凋亡相关基因 bcl-2、bax、bad与乳腺癌

目的探讨乳腺癌发生、发展过程中bcl-2、bax及bad基因表达水平变化及与乳腺癌其他生物因素的相关性。方法复习国内、外相关文献并进行综述。结果在从正常乳腺组织到乳腺癌逐渐演化的过程中凋亡抑制基因bcl-2的表达水平变化尚有待进一步研究,而凋亡促进基因bax、bad的表达水平呈递减趋势。bcl-2基因表达水平与乳腺癌中一些公认的正性因子如雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)呈正相关,与其他一些负性因子如p53、表皮生长因子受体、c-erbB-2、腋窝淋巴结转移情况等呈负相关。bax基因的表达水平与乳腺癌ER、PR水平以及p53表达水平等无关。对于bad基因与乳腺癌其他生物因素的相关性尚未见报道。结论乳腺癌中bcl-2基因表达水平的变化对乳腺癌预后以及治疗的作用尚存在争议,bad基因与乳腺癌预后的关系亦不清楚,而bax基因表达水平与乳腺癌的预后呈正相关。对于它们的研究将为我们评价乳腺癌的预后提供新的指标,为乳腺癌的治疗开辟新的思路。     

肝癌细胞中端粒酶逆转录酶与c-myc表达的关系

目的探讨肝细胞肝癌（HCC）中端粒酶逆转录酶（hTERT）与C—myc蛋白表达情况及其相关性。方法采用免疫组化SP法检测52例HCC癌组织及相应癌旁组织中hTERT与c—myc蛋白表达,并用TRAP—ELISA法检测上述组织中的端粒酶活性。结果HCC组织中hTERT与C—myc蛋白阳性率分别为86．5％（45／52）和78．8％（41／52）,它们与相应癌旁组织比较差异有统计学意义（P〈0．01）;HCC癌组织中端粒酶活性阳性率为80．8％（42／52）,明显高于相应癌旁组织（15．4％,8／52）;HCC癌组织中端粒酶活性、hTERT及C—myc蛋白阳性表达率两两均呈显著正相关（r=0．761,P〈0．001;r=0．654,P〈0．001;r=0．486,P〈0．001）。结论HCC癌组织中hTERT与C—myc蛋白过度表达,两者相互作用而共同参与肝癌端粒酶活性的调控。     

急性胰腺炎大鼠肾上腺损伤中bax与bcl-2表达的研究

目的 观察急性胰腺炎(AP)大鼠肾上腺损伤时细胞凋亡及调控基因bcl-2和bax蛋白的表达及作用.方法 采用牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射法建立AP模型.术后3、6、12 h检测血皮质酮水平,观察肾上腺病理,TUNEL检测细胞凋亡,免疫组织化学检测bcl-2和bax蛋白表达.结果 与SO组比较,AP3 h组血清皮质酮显著增高,随后逐渐降低(P＜0.05).随病程延长,肾上腺细胞凋亡指数增高,bax蛋白表达增强,bax/bcl-2比值亦逐渐升高(P值均＜0.05),并与凋亡指数(AI)呈正相关(r =0.759,P＜0.05).结论 bax和bcl-2可能参与了AP肾上腺损伤的发病过程.通过激活bcl-2和抑制bax的蛋白表达,减少细胞凋亡发生从而保护肾上腺结构和功能,可能为今后AP及相关肾上腺损伤的药物及基因治疗提供依据和新思路.     

纳米羟基磷灰石介导靶向hTERT的RNA干扰可有效抑制人肺癌A549细胞增殖

目的 探讨纳米羟基磷灰石(nHAP)介导靶向端粒酶逆转录酶(hTERT)的RNA干扰对人肺癌A549细胞的影响.方法 采用均相沉淀法制备nHAP.分为nHAP-PLL组、脂质体组、nHAP组及对照组,分别配制转染复合物并转染人肺癌A549细胞.MTT法测定细胞生长活力;Western Blot检测hTERT蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 nHAP-PLL组、脂质体组与nHAP组的A549细胞增殖受到抑制,较对照组差异有统计学意义(P<0.05);nHAP-PLL组抑制细胞增殖较脂质体组及nHAP组明显,差异均有统计学意义(P<0.05).各组的hTERT蛋白表达的变化趋势与人肺癌A549细胞的增殖情况一致.流式细胞仪检测nHAP-PLL组、脂质体组及nHAP组均有不同程度的细胞凋亡,凋亡率与对照组差异有统计学意义,P<0.05.结论 nHAP本身能诱导人肺癌A549细胞凋亡,经PLL修饰后能有效地结合保护DNA并介导人肺癌A549细胞的基因转染,介导靶向hTERT的RNA干扰可有效抑制人肺癌A549细胞增殖.     

人端粒酶逆转录酶基因在骨巨细胞瘤组织的表达及其临床意义

目的 观察骨巨细胞瘤组织中人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,并探讨其临床意义.方法 选择我院2008年1月至2011年12月病理科保存的标本,标本中骨巨细胞瘤84例、骨质增生骨组织32例、异位骨化组织28例,对照组为正常骨组织20例;采用原位分子杂交技术检测和定位标本中的端粒酶hTERT基因,并用图像分析系统分析其表达水平.、结果 端粒酶hTERT基因在骨巨细胞瘤组织中的表达阳性率为46.4％(39/84),表达强度与骨巨细胞瘤的分化程度明显相关(P＜0.05),表达水平与肿瘤细胞的分布定位一致;端粒酶hTERT基因在骨质增生、异位骨化和正常骨组织中的表达均为阴性.结论 骨巨细胞瘤组织的恶化可能与端粒酶hTERT基因相关.     

睾丸肿瘤bax和bcl-2蛋白的流式细胞定量研究

目的研究bax和bcl-2蛋白表达在睾丸肿瘤发生发展中的作用。方法应用流式细胞术和细胞免疫荧光技术检测56例睾丸肿瘤bax和bcl-2蛋白的表达。结果bax阳性48例(85.7%),bcl-2阳性40例(71.4%);bax和bcl-2蛋白表达与肿瘤的病理类型、临床分期和淋巴结转移无明显相关(P>0.05)。结论bax和bcl-2蛋白的异常表达尚不能成为睾丸肿瘤发生发展的预后参数。     

胰腺癌细胞凋亡与bcl-2,bax基因的表达

目的探讨胰腺癌组织中的bcl-2和bax的表达及bcl-2/bax比值与胰腺癌细胞凋亡的关系.方法对30例胰腺癌标本应用免疫组化SP方法测定胰腺癌切片中的凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因bax的表达;同时应用TUNEL法测定胰腺癌细胞原位凋亡情况.结果高分化腺癌的凋亡指数(AI)为(5.70±1.21)%;中低分化腺癌为(6.80±2.01)%.AI与bcl-2/bax比值呈负相关关系(r=- 0.5583,P<0.05 ).结论 bcl-2和bax在胰腺癌细胞凋亡调节过程中起着重要作用.     

低温保存不同时间大鼠带瓣管道活性与bax、bcl-2基因表达的关系

目的 观察低温保存不同时间大鼠带瓣血管活性及bax和bcl-2基因的表达,探讨基因检测是否能成为带瓣血管活性指标.方法 Wistar大鼠80只,体质量250～350 g,分为新鲜组A组,-196 ℃液氮冻存3、6、9个月为B、C、D 3组.检测细胞结构、糖代谢及bax、bcl-2基因的变化.结果 大鼠带瓣血管的各组葡萄糖代谢率测定,A组(4.365±0.784)与B(4.383±0.548)、C组(4.446±0.608)、D组(4.090±0.657)差异无统计学意义(P＞0.05);bax基因的表达分别为20%、45%、60%和85%,差异有统计学意义(P＜0.05);bcl-2基因表达分别25%、30%、20%和35%,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经冻存后的大鼠带瓣血管活性良好,提示bax基因可作为检测带瓣血管活性的指标,bcl-2的表达或高表达可能是细胞能耐受冻存打击的原因之一.

Abstract：

Objective To study the expression of bax and bcl-2 genes and activity of valved conduit in rats by cryopreservation for different lengths, and to probe whether genetic detection will become one of the indexes of valved conduit activity. Methods Eighty Wistar rats were divided into four groups: 20cases of fresh blood vessels ( group A ), 20 cases of frozen vessels for 3 months ( group B ), 20 for 6months ( group C), and 20 for 9 months ( group D). The changes in cellular structure, gluoce metabolism and the expression of bax and bcl-2 proteins were observed. Results The glucose metabolism rate of the rate valved conduit in groups A, B, C and D was 4. 365 ± 0. 784, 4. 383 ± 0. 548, 4. 446 ± 0. 608, and 4. 090 ± 0. 657 respectively, with the difference being not significant ( P ＞ 0. 05 ). The positive expression rate of bax protein in groups A, B, C and D was 20%, 45%, 60% and 85% respectively (P＜0. 05).The positive expression rate of bcl-2 in groups A, B, C and D was 25%, 30%, 20% and 35% respectively ( P ＞ 0. 05 ). Conclusion The frozen rat valved vascular showed good activity. bax gene can be regarded as one of the indicators for detecting valved vessel activity. The expression or over-expression of bcl-2gene may be one of the reasons why the cells can tolerate the frozen preservation.     

血管瘤组织中端粒酶逆转录酶基因表达与端粒酶活性的关系

目的　探讨端粒酶逆转录酶 (hTERT )基因在血管瘤组织中的表达及其与端粒酶活性的关系。方法　采用原位逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )和链霉抗生物素蛋白 过氧化物酶(SP)免疫组织化学方法分别检测 40例 (增生期 2 0例、退化期 2 0例 )血管瘤组织及 2 0例正常皮肤组织中hTERTmRNA表达 ,并采用端粒重复序列扩增 (TRAP)法测定血管瘤组织中端粒酶活性。结果　增生期血管瘤组织中hTERTmRNA阳性表达率为 80 .0 % ,退化期血管瘤组织中hTERTmRNA阳性表达率为 15 .0 % ,而正常皮肤组织中hTERTmRNA无阳性表达 ,增生期血管瘤与退化期血管瘤hTERTmRNA表达率差异具有显著性 (P <0 .0 1)。增生期血管瘤组织中端粒酶活性为81.4% ,退化期血管瘤组织中端粒酶活性 2 1.6% ,正常皮肤组织中无端粒酶活性 ,增生期血管瘤与退化期血管瘤组织中端粒酶活性比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　端粒酶活性与血管瘤内皮细胞增殖状况和hTERTmRNA表达密切相关 ,在血管瘤的发生和发展中起着重要的作用。     

野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶mRNA转录的影响

目的 研究野生型p53基因对人胃癌细胞端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA转录及端粒酶活性的影响。方法 将含人野生型p53基因的pcDNA3—p53转染人胃癌细胞系BGG—823，通过半定量逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)检测转染后细胞hTERT基因mRNA的转录，聚合酶链式反应结合酶联免疫吸附(PCR ELISA)方法检测端粒酶活性。结果 转染野生型p53基因后48、72h BGC-823细胞的hTERT基因mRNA转录量由对照组的( )下降为( )和( )；转染前BGC—823细胞表达高水平的端粒酶活性(3．049)，而转染48、72h后的端粒酶活性分别为1．678和0．757。结论 野生型p53基因能够显著抑制人胃癌细胞hTERT基因mRNA的转录，通过下调hTERT、基因mRNA的转录来抑制胃癌细胞的端粒酶活性。