FcγRⅡB与系统性红斑狼疮

FcγRⅡB是相对分子质量为40 000的IgG低亲和力受体,FcγRⅡB的胞浆区含有以酪氨酸为基础的抑制小体ITIM(Immunoreceptor Tyrosinesed Inhibition Motif),有抑制淋巴细胞活化的作用。FcγRⅡB表达下降时产生免疫复合物的清除功能障碍,FcγRⅡB表达缺陷是系统性红斑狼疮(SLE)的重要易感因素。     

系统性红斑狼疮患者B细胞激活后FcγRⅡb1向脂筏信号域转移减少

目的观察系统性红斑狼疮(SLE)患者B细胞激活后FcγRⅡb1信号分子向脂筏信号域转移的改变。方法收集SLE患者和正常人外周血并分离出B细胞,分别用抗人μ链的F(ab’)2片段[F(ab’)2anti-μ]单独刺激B细胞抗原受体(BCR),或用抗人μ链的完整IgG(IgG anti-μ)激活B细胞、同时实现BCR与FcγRⅡb1的交联;采用密度梯度超速离心法提取B细胞膜脂筏;免疫沉淀及Western blot法分别检测膜脂筏中FcγRⅡb1的分布、脂筏FcγRⅡb1酪氨酸残基磷酸化水平、及脂筏FcγRⅡb1对含SH2结构域的肌醇磷酸酶(SHIP)的招募。结果 SLE患者B细胞经F(ab’)2anti-μ单独刺激BCR后,胞膜脂筏部位FcγRⅡb1的分布、脂筏FcγRⅡb1酪氨酸残基磷酸化水平、以及脂筏FcγRⅡb1对SHIP的招募,与正常对照组比较均无明显改变,但经IgG anti-μ激活B细胞以实现BCR与FcγRⅡb1的交联后,以上指标均显著低于正常对照组。结论 SLE患者B细胞经IgG anti-μ激活后,转移至膜脂筏部位的FcγRⅡb1、脂筏FcγRⅡb1酪氨酸残基磷酸化水平、以及脂筏FcγRⅡb1对SHIP的招募均显著减少。     

人类抗人CD40单克隆抗体免疫激活活性依赖于其Fc与FcγRⅡB相互作用

激动型抗CD40单抗能够激活APC表面CD40免疫共刺激信号,促进其成熟和交叉提呈抗原并激活抗原特异性CTL以杀伤肿瘤,多年来一直是肿瘤免疫治疗的研究热点。以鼠源抗体为基础的研究表明,激动型抗鼠CD40单抗的活性受到抑制性Fcγ受体(FcγRⅡB)的驱动,但尚不清楚这一调控机制是否影响人类抗人CD40(hCD40) IgG单抗。为此,作者研究了Fcγ受体(Fcγreceptor, FcγR)结合能力对人类抗hCD40单抗活性的影响,发现抗体恒定区(Fc)失去FcγR结合能力会严重削弱人类激动型抗hCD40 IgG1单抗活性;同时,FcγRⅡB特异性阻断抗体可以显著抑制人类激动型抗hCD40 IgG1单抗活性;此外,增强抗体Fc的FcγRⅡB结合能力能够提高抗体的激动活性。而且,多个抗原结合表位不同的人类抗hCD40单抗在实验中表现一致,说明抗CD40单抗的激动活性普遍依赖于FcγRⅡB。上述研究有助于探索激动型抗CD40单抗的活性调控规律,为设计更好的激动型抗hCD40抗体提供思路。     

猪FcγR ⅡB多种剪接异构体的基因克隆与序列分析

目的:研究猪FcγRⅡB受体基因选择性剪接的多样性。方法:根据GenBank中猪FcγRⅡB(swFcγRⅡB)cDNA基因序列(DQ026064),应用Primer5.0软件设计合成了一对特异性引物,应用RT-PCR技术,从不同个体的猪肺泡巨噬细胞中扩增FcγRⅡB基因并进行测序分析,在GenBank中查找猪FcγRⅡBDNA序列(NW-001886241.1),并用相关软件分析其外显子组成。结果:共克隆出6个转录体,其中转录体2,4在信号肽部分都有一个丙氨酸的缺失。转录体5,6是两个新型的FcγRⅡB转录体,转录体5胞外区只有一个Ig结构域,转录体6是一个只含有一个Ig结构域的推导性可溶性Fc受体。结论:猪FcγRⅡB的表达因RNA选择性剪接方式不同而呈现出多样性。     

含人FcγRⅡB基因慢病毒的制备及其在HT-1080细胞中的表达

目的构建FcγRⅡB慢病毒诱导表达载体,并鉴定其在细胞中的表达。方法以人mRNA为模板逆转录获得FcγRⅡB基因片段,并将其克隆入慢病毒表达质粒TRE,构建TRE-FcγRⅡB慢病毒表达重组质粒。将慢病毒表达重组质粒TRE-FcγRⅡB、慢病毒可诱导质粒Tet分别与慢病毒包装质粒共转染HEK293T细胞,分别包装表达病毒和可诱导病毒,分别测定表达病毒和可诱导病毒感染滴度。表达病毒和可诱导病毒共感染HT-1080细胞,经梯度浓度强力霉素(Dox)诱导,实时定量PCR检测FcγRⅡB mRNA表达,免疫荧光染色检测HT-1080细胞FcγRⅡB表达,Western blot法检测FcγRⅡB蛋白表达。结果重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定,测序结果显示插入片段碱基序列与GenBank提供FcγRⅡB基因序列同源性100%。表达病毒滴度达106TU/mL,可诱导病毒滴度达105TU/mL,感染性良好。HT-1080细胞被病毒感染后经Dox诱导表达FcγRⅡB,免疫荧光染色结果显示FcγRⅡB能够在HT-1080细胞中表达;实时荧光定量PCR和Western blot法结果显示FcγRⅡB表达水平与诱导剂浓度正相关。结论成功制备了FcγRⅡB慢病毒,感染HT-1080细胞后可实现FcγRⅡB的诱导表达。     

U937细胞ClqR介导对酵母多糖颗粒的吞噬及其与FcγR的协同作用

在证实了人Ｍφ系Ｕ９３７细胞ＣｌｑＲ在生理离子强度（Ｉ０．１５）下可与１２５Ｉ－Ｃｌｑ结合的基础上研究了ＣｌｑＲ对Ｕ９３７细胞吞噬酵母多糖颗粒（Ｚ）的调节作用。该细胞不吞噬Ｚ，但可吞噬Ｃｌｑ或ＩｑＧ调理的Ｚ（ＣＺ、ＩＺ），若以Ｃｌｑ和ＩｇＧ调理（ＩＣＺ），吞噬指数分别是ＣＺ和ＩＺ的６倍和２．５倍。将调理颗粒热灭活，或加入兔抗人ＣｌｑＦ（ａｂ’）２，或以高浓度Ｃｌｑ或抗人ＣｌｑＲｍＡｂＥ８预处理Ｕ９３７细胞，均可不同程度地抑制对ＣＺ或ＩＣＺ的吞噬，但Ｃｌｑ预处理却使对ＩＺ和Ｚ的吞噬增强。资料表明，Ｕ９３７细胞通过ＣｌｑＲ介导对酵母多糖颗粒的吞噬，且与ＦｃγＲ有协同作用。     

转染FcγRⅡb1基因纠正SLE患者B细胞的过度活化

目的观察转染FcγRⅡb1基因能否纠正SLE患者B细胞的过度活化。方法构建人FcγRⅡb1基因真核载体,通过电穿孔转染SLE患者B细胞。分别采用抗人μ链的F(ab’)2片段[F(ab’)2anti-μ]和抗人μ链的完整IgG(IgG anti-μ)2种抗体刺激B细胞,同时以正常人B细胞作对照。采用分光光度计检测激活B细胞胞内[Ca2+]i反应,3H-TdR掺入法检测B细胞的增殖能力,ELISA法检测B细胞分泌抗体的功能。结果分别以F(ab’)2anti-μ和IgG anti-μ激活SLE患者B细胞后,细胞内[Ca2+]i反应、cmp值及IgG分泌量的比值均显著低于正常人(P0.01),通过转染FcγRⅡb1基因后,这些比值均显著提高(P0.01或P0.05)。结论转染FcγRⅡb1基因能有效纠正SLE患者B细胞过度的活化、增殖及抗体分泌。     

FcγRⅡb调控浆细胞的存活和凋亡

大部分血清中的免疫球蛋白是由骨髓浆细胞产生的。血清免疫球蛋白是维持体液免疫极其重要的物质,调控其数量和特异性对于抗感染免疫和预防自身免疫性疾病具有重要医学意义。B细胞在与T细胞相互作用被激活后,除了产生记忆性B细胞外,还产生了两种类型的浆细胞,一种是浆母细胞,虽能分泌抗体,但存活期很短,凋亡半衰期为3d;另一种是浆细胞,成熟后主要居于骨髓微环境(niche)中,依赖微环境中的生长因子而长期存活。骨髓微环境的数目是有限的,当成年个体的具有过往免疫特异性的浆细胞占据了全部的骨髓微环境后,该个体接受疫苗免疫或被自然感染后,…     

FcγRⅡb基因多态性与常见风湿病发病相关性研究进展

FcγRⅡb属FcγR中的抑制性受体,编码基因位于染色体1 q23.多项研究认为其基因多态性与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE),类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA),强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)等风湿免疫病相关.而在不同种族的人群中研究结果不同,但仍可以认为,FcγRⅡb基因多态性在某些人群的常见风湿免疫病发病过程中起重要作用.

Abstract：

IgG Fc receptor Ⅱ b ( FcγR Ⅱ b ) is an inhibitory Fc receptor expressed on B cells and myeloid cells, and its coding gene is located on Chromsome 1 q23. These receptors are very important for the regulation of body' s responses to infection. The reduced expression of function of these receptors may predispose to autoimmunity. The FcγR Ⅱ b gene polymorphisms affect the affinity with which FcRs interact with immunoglobulin molecules. Correlation of the FcγR Ⅱ b polymorphisma with susceptibility of common rheumatic diseases, such as Systemic Lupus Erythematosus ( SLE ) , Rheumatoid Arthritis ( RA ) ,Ankylosing Spondylitis (AS) , has been reported in various populations, but the results were inconsistent.     

Fcγ受体Ⅱ A基因多态性与冠心病和扩张型心肌病的关系

目的 炎症和免疫机制参与冠心病（CHD）和扩张型心肌病（DCM）的心肌损害。免疫球蛋白Fc受体（FcR）家族的FcγRⅡ参与免疫球蛋白介导的损伤过程,且与C反应蛋白结合,在炎症和免疫损害中起重要作用。有报道显示FcγRⅡ基因氨基酸编码131位置上的组氨酸(H/H)和精氨酸(R/R)多态性与某些炎症性和自身免疫性疾病有关。本研究旨在探讨该多态性与CHD和DCM的关系。方法 正常对照组199名,冠脉造影证实的CHD患者324名,DCM患者116名,采用PCR和变性高效液相色谱仪分析（DHPLC）研究基因多态性。结果 ①按显性效应遗传模型（HH +HR 与 RR）,DCM患者FcγRⅡA的 H显性效应频率为0.92, 较对照组0.78明显增高（P<0.001）;②按加性效应遗传模型(HH 与RR 和 HR 与RR),DCM患者H加性效应频率也明显高于对照组（P<0.01和P<0.001）;③DCM患者和对照组H等位基因频率分别为0.63和0.55,有显著性差异（P<0.05）。而CHD患者与对照组基因频率无显著差异。结论 H等位基因可能是DCM患者的易感基因,但并不是冠心病的易感基因。     

Fcγ受体Ⅱa多态性与系统性红斑狼疮关联性及连锁证据研究

目的：探讨中国南方汉族人群中Ｆｃγ受体Ⅱａ（ＦｃγＲⅡａ）多态性与系统性红斑狼疮的关联及连锁关系。方法：应用聚合酶链反应－特异性寡核苷酸杂交的方法,对７１例系统性红斑狼疮（ｓｙｓｔｅｍ ｌｕｐｕｓ ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ,ＳＬＥ）患者、６４名健康对照和１５例ＳＬＥ患者及其父母进行了基因分析。对ＦｃγＲⅡａ１３１基因多态性进行了研究。结果：⑴携带ＦｃγＲⅡＡ－Ｒ１３１等位基因和ＦｃγＲⅡａ－Ｒ／Ｒ１３１基因型者发生ＳＬＥ的危险性大（ＯＲ＝２．０６,Ｐ＜０．０１;ＯＲ＝４．１７,Ｐ＝０．０１３５）;⑵种族间ＦｃγＲⅡａ－１３１多态性存在差异,中国汉族人与日本人等位基因频率相似;⑶家系关联分析和传递不平衡分析结果无统计学意义,可能与样本量小有关。结论：ＦｃγＲⅡａ－１３１多态位点是中国南方汉族人群中ＳＬＥ患者的易     

FcγR基因多态性与系统性红斑狼疮相关性研究进展

FcγR家族有三群 (CD6 4、CD32、CD16 ) ,其中FcγRIIa、IIIa、IIIb存在基因多态性 ,并因此影响FcγR对抗体的亲和力 ,被认为与SLE发病过程中免疫复合物清除障碍有关 ,导致SLE和狼疮肾炎的发生。在不同种族人群中的研究存在不同的结果 ,但仍然可以认为 ,FcγR基因多态性在某些种群的SLE发病过程中起到重要作用     

IgG受体FcγRⅡB调节实验性自身免疫性脑脊髓炎致神经元损伤及Th17/Treg免疫平衡的作用研究

目的：探究IgG受体FcγRⅡB对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型小鼠神经元损伤与Th17/Treg失衡的作用。方法：C57BL/6小鼠随机分组为对照组、EAE组、FcγRⅡB组、EAE+FcγRⅡB组,每组15只,皮下注射MOG35-55肽诱导EAE模型,并给予FcγRⅡB慢病毒液处理;造模后每日称量小鼠体质量,进行神经功能评分,持续30 d;30 d后处死小鼠,HE染色观察脑组织病理形态学变化,LFB染色评估脊髓髓鞘结构变化,免疫荧光染色检测脊髓大脑皮质神经元核抗原（NeuN）和Caspase-3表达,TUNEL染色检测神经元细胞凋亡,ELISA检测血清IL-6、IL-17、IL-10及TGF-β水平,流式细胞术分析脾脏Th17、Treg细胞比例分布,Western blot测定脊髓组织维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)与Forkhead家族转录因子3(Foxp3)蛋白表达。结果：与对照组比较,EAE组小鼠体质量下降,神经功能评分升高,脑组织内炎症细胞浸润明显,脊髓中出现脱髓鞘迹象,NeuN荧光表达强度减弱而Caspase-3荧光表达强度增强,TUNEL阳性着色细胞多,细胞...     

FcγR与自身免疫性疾病的相关性及免疫靶向干预治疗

IgG Fc受体（FcγR）是免疫应答中重要的膜性调节分子,表达于几乎所有白细胞的表面,是连接体液免疫和细胞免疫的桥梁。FcγR不仅介导免疫细胞的活化和效应的发挥,而且在特定条件下参与免疫损伤,构成某些免疫相关性疾病的病理机制。近年来,FcγR及其基因多态性在自身免疫性疾病发生发展中的作用及免疫靶向干预引起了国内外学者的关注。     

FcγR基因多态性与系统性红斑狼疮发病相关性研究进展

FcγR家族属于免疫球蛋白超家族，分三群，其中FcγRⅡa、 IIb 、IIIa 和 IIIb存在基因多态性，并因此影响FcγR和IgG各亚型的亲和力，被认为与SLE发病过程中免疫复合物清除有关，导致SLE和狼疮肾炎的发生。FcγR基因多态性与SLE发病关系在不同种族人群中的研究结果不一致，但仍可认为FcγR基因是某些种群SLE发病的易感基因。     

正常和过敏性哮喘儿童外周血FcεRⅡ阳性细胞与IgE关系的探讨

本文应用单克隆抗体间接免疫荧光染色和流式细胞仪分析技术，对１８名正常儿童和１３名过敏性哮喘儿童外周血淋巴细胞膜表面低亲和力ＩｇＥ受体（ＦｃεＲⅡ）进行测定。结果显示：ＦｃεＲⅡ主要分布于外周血Ｂ淋巴细胞表面。过敏性哮喘儿童外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）和Ｂ细胞中ＦｃεＲⅡ阳性细胞数高于正常对照，并与血清ＩｇＥ浓度呈显著相关。结果表明ＦｃεＲⅡ参与过敏性哮喘儿童体内ＩｇＥ合成的调节过程。     

TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病病人T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,10例健康成人作为对照;采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达水平。结果 TCRζ缺陷的AML病人外周血T细胞中Elf-1基因的表达水平(中位数8.526%)明显低于健康对照组(中位数33.237%)(P<0.001),而FcεR Iγ基因的表达水平(中位数2.571%)则高于健康对照组(中位数0.958%)(P=0.019),Zap-70基因在两组中的表达水平没有显著性差异,但均与TCRζ基因的表达水平呈正相关。结论 TCRζ缺陷的AML病人T细胞中Elf-1基因的低表达可能是导致AML病人TCRζ基因缺陷性表达的原因之一,而FcεR Iγ基因的高表达则可能是在一定程度上缓解了TCRζ基因缺陷性表达所带来的T细胞免疫异常。     

FcεRⅡ／CD23在支气管哮喘发病中作用的研究

本文以急性发作期病人和缓解期病人及正常人各２０例为研究对象，探讨ＩＬ－４－ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３－ＩｇＥ在支气管哮喘中的调节作用。结果表明，急性发作期病人的ＩＬ－４分泌细胞、ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３阳性淋巴细胞和血清总ＩｇＥ水平均明显高于缓解期病人和正常对照组。在急性发作时，ＩＬ－４和ＣＤ２３之间存在着正相关。进一步表明病人体内ＩＬ－４水平升高可以诱导淋巴细胞表面ＦｃεＲⅡ／ＣＤ２３分子表达的增强，并在ＩｇＥ抗体形成中起着重要作用。     

FcεRⅠ信号传导途径与过敏性疾病的治疗

IgE的高亲合力受体FcεRⅠ在过敏性疾病中充当重要角色。FcεRⅠ所介导的信号传导途径是引起过敏症状的一条主要通路。通过阻断信号通路以治疗过敏性疾病已成为研究的一个焦点 ,本文就FcεRⅠ信号阻断方面的研究进展作一综述。