沙眼衣原体感染的HeLa细胞分泌IL-8和IL-10

沙眼衣原体 (ＣＴ)是一种严格的细胞内生长微生物 ,ＣＴ的致病机理涉及机体免疫防御和免疫病理反应。体外研究发现 ,ＣＴ能诱导外周血单核细胞和Ｕ937产生ＩＬ 1、ＩＬ 6、ＩＬ 8、ＩＬ 10和ＴＮＦ α等。感染ＣＴ的上皮细胞系ＨｅＬａ细胞分泌细胞因子的报道较少 ,ＩＬ 8是一种重要的炎性因子 ,具有化学趋化作用 ,并且能激活白细胞使白细胞聚集到感染部位发挥作用。ＩＬ 10为免疫活性因子 ,参与机体的免疫反应和免疫调节。本研究意在就感染ＣＴ的ＨｅＬａ细胞产生ＩＬ 8和ＩＬ 10能力进行研究 ,为防治和研究沙眼衣原体提供新思路。采用细胞…     

原发性肝癌患者IL-6、IL-8和TNF水平的观察

白细胞介素 -６（ＩＬ -６）、白细胞介素 -８（ＩＬ-８）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）为一组多功能细胞因子 ,在抗肿瘤免疫和炎症反应中起着十分重要的作用［１］。细胞因子网络及其受体之间的调节失常常与免疫性疾病和肿瘤的发生有关［２］。本文报道原发性肝癌患者血清中这三种细胞因子水平的相关研究 ,现报告如下。对象和方法一、对象 :（一）正常人 :３５人。均为我院预防保健科体检合格的健康人 ,心、肝、肺、肾等重要脏器无疾患 ,经临床检查除外炎症、免疫性疾病和肿瘤 ,肝、肾功能试验正常。（二）病人组 :３３人。均经临床明确诊断的…     

肝硬化患者血清IL-6、TNF和尿液IL-6、IL-8的检测

近年研究表明，免疫调节功能异常在肝硬化的发病中有十分重要的临床价值，特别是体液免疫亢进，产生过量的抗原抗体复合物，继发免疫反应；Ｔｓ细胞功能低下，Ｔｓ阳性细胞明显增多，细胞免疫调节失常［１，２］。笔者应用ＥＬＩＳＡ法检测了肝硬化患者血清中ＩＬ－６和ＴＮＦ及尿液中ＩＬ－６、ＩＬ－８含量，以探讨其在肝硬化发病中的作用。 对象和方法 一、对象：肝硬化病例均为我院和市第四人民医院传染科提供。其中肝硬化无腹水组３９例，肝硬化有腹水组２６例，全部病例均经临床、Ｂ超和实验室各项检测指标进一步地明确诊断，部分病例…     

C1q诱导Raji和U937细胞产生IL—1ra

Ｃ１ｑ刺激Ｒａｊｉ和Ｕ９３７细胞２４ｈ，其上清中含ＩＬ－１抑制活性。抗人ｒＩＬ－１ｒａ抗血清能识别上清中一个约２２￣２４ＫＤ的蛋白分子，并可中和其ＩＬ－１抑制活性，证实上清中的活性成份是ＩＬ－１ｒａ。Ｃ１ｑ以特异、剂量依赖及可饱和的方式诱导这些细胞产生ＩＬ－１ｒａ，表明是Ｃ１ｑ／Ｃ１ｑＲ系统介导了ＩＬ－１ｒａ的产生。资料提示：Ｃ１ｑ／Ｃ１ｑＲ系统在炎症、免疫应答及细胞因子网络的调节中起重要作用。     

甲亢、甲减患者血清TNF、IL-6和IL-8水平观察

本文对甲亢与甲减患者进行血清中ＴＮＦ(肿瘤坏死因子 )、ＩＬ - 6 (白细胞介素 - 6 )和ＩＬ - 8(白细胞介素 - 8)的测定 ,从而探讨自身免疫性甲状腺疾病的发生、发展与细胞因子的内在联系。材料和方法一、对象 :甲状腺机能亢进组 37例 (男 17,女 2 0 ) ,年龄 13～ 6 1岁 ;甲状腺机能减退组 32例 (男 10 ,女 2 2 ) ,年龄 2 2～ 5 5岁 ;正常对照组 35例 (男 15 ,女 2 0 ) ,年龄 19～ 4 5岁 ,均为身体健康 ,无甲状腺疾患及其它脏器病变。二、方法 :(一 )受试者清晨空腹采取静脉血 ,立即分离血清 ,置 -2 0℃保存 ,待一次检测。(二 )ＴＮＦ、Ｉ…     

rhC5a诱导人前单核细胞系U937产生IL—8条件探讨

Ｕ９３７细胞、经ＰＭＡ及ｄｂｃＡＭＰ预处理的Ｕ９３７细胞，用ｒｈＣ５ａ、ＭＰＡ、Ａ２３１８７分别诱导，以ＥＬＩＳＡ法测定细胞培养上清中ＩＬ－８，证实：ｒｈＣ５ａ不能诱导Ｕ９３７细胞产生ＩＬ－８，但可诱导经ＰＭＡ、ｄｂｃＡＭＰ预处理的Ｕ９３７细胞产生ＩＬ－８；用ＰＭＡ激活ＰＫＣ和（或）以Ａ２３１８７提高细胞内Ｃａ＾２＋２可使ＩＬ－８分泌水平增高。研究结果有助于加深对补体系统与细胞因子之间关系的认识，     

铜绿假单胞菌活菌诱导不同分化状态的U937细胞表达IL-8的研究

目的探讨铜绿假单胞菌（Pseudomonas aenginasa，Pα）活菌对不同分化状态的U937细胞表达IL-8的诱导作用及通过蛋白激酶C（PKC）和核因子κB（NF-κB）的调控机理。方法采用ELISA和RT-PCR法，分别对Pα诱导不同分化状态的人单核白血病细胞系U937细胞分泌IL-8及U937细胞IL-8 mRNA表达进行研究，应用Western blot检验IκB及NF-κB的蛋白表达，观察PKC和NF-κB活化抑制剂对IL-8表达的影响。结果Pα可促进U937细胞及佛波酯（PMA）分化的U937细胞IL-8 mRNA的表达及IL-8的分泌，而且具有明显的量效和时效关系。Pα能直接诱导并迅速活化NF-κB，1h达到高峰，以后逐渐下降。PKC阻断剂calphostin C及NF-κB阻断剂PDTC均能显著抑制NF-κB的活化及IL-8的表达（P〈0．01）。结论IL-8的产生可能与U937细胞的分化状态有关；Pα可能通过PKC信号通路促进NF-κB的活化，从而启动IL-8的高效表达和分泌。     

Clq诱导Raji和U937细胞产生IL－1ra

Ｃｌｑ刺激Ｒａｊｉ和Ｕ９３７细胞２４ｈ，其上清中含ＩＬ－１抑制活性。抗人ｒＩＬ－１ｒａ抗血清能识别上清中一个约２２～２４ＫＤ的蛋白分子，并可中和其ＩＬ－１抑制活性，证实上清中的活性成份是ＩＬ－１ｒａ。Ｃｌｑ以特异、剂量依赖及可饱和的方式诱导这些细胞产生ＩＬ－１ｒａ，表明是Ｃｌｑ／ＣｌｑＲ系统介导了ＩＬ－１ｒａ的产生。资料提示：Ｃｌｑ／ＣｌｑＲ系统在炎症、免疫应答及细胞因子网络的调节中起重要作用。     

过敏性紫癜患儿血清TNF-α,IL-6和IL-8变化的意义

ＴＮＦα,ＩＬ６和ＩＬ８是具有多种生物学活性的细胞因子,也是重要的炎症因子,可参与许多变态反应性疾病和自身免疫性疾病的发病机制。我们对６８例过敏性紫癜(ＨＳＰ)患儿血清ＴＮＦα,ＩＬ６和ＩＬ８水平的变化及相关性进行了研究,旨在探讨它们在ＨＳＰ的毛细血管炎和过敏性紫癜性肾炎(ＨＳＰＮ)形成中的作用。１材料和方法１．１材料按１９９０年,美国风湿病协会制定的诊断标准〔１〕,选择１９９７-０６～１９９９-０１,我院确诊为ＨＳＰ的住院患儿共６８例,男３９例,女２９例,年龄５～１４岁。其中单纯型１３例,关节型和／或腹型１７例…     

ＩＬ—６在Ｕ９３７细胞中特异、持续激活ＳＴＡＴ３

目的 探讨ＩＬ－６在Ｕ９３７细胞中产生生物学效应的信号转导基础。方法 检测ＩＬ－６对Ｕ９３７细胞生长与分化的影响。并采用凝胶阻滞电泳法,检测ＩＬ－６在Ｕ９３７细胞中激活核因子的情况。结果 ＩＬ－６可诱导Ｕ９３７细胞向巨噬细胞方向分化。分化的细胞酸性醋酸酯酶（ＡＮＡＥ）活性、硝基蓝四唑（ＮＢＴ）还原能力及ＣＤ５４表达增强,ＳＴＡＴ３可被ＩＬ－６显著激活,其活性呈一定的剂量与时间依赖性;而ＮＦ－ＩＬ６、ＮＦ－kB、ＡＰ－１及其它ＳＴＡＴ家族成员则无明显激活。结论 Ｕ９３７细胞的终分化可能是ＪＡＫ－ＳＴＡＴ３通路介导的。     

白细胞介素-27对白血病细胞株U937细胞生物学行为的影响

目的: 探讨白细胞介素-27(IL-27)对人单核细胞白血病细胞株U937细胞的影响及其机制。方法: 用不同剂量的重组人IL-27和U937细胞分别共培养24h和48h,用荧光定量PCR测定细胞中促凋亡基因 p53、bax 及caspase-3、主要组织相容性复合物Ⅰ(MHCⅠ)类分子、协同刺激分子CD86和黏附分子CD54的表达,流式细胞仪检测U937细胞表面CD86和CD54的表达,并用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定IL-27对细胞增殖的影响。结果: PCR结果显示经过不同剂量IL-27刺激后,U937细胞中促凋亡基因 p53和bax表达增加,同时,U937细胞中凋亡相关蛋白caspase-3的表达及活性也有相应增加;MTT结果显示,IL-27可以抑制U937细胞增殖并和抗肿瘤药物阿糖胞苷产生协同作用;IL-27可以诱导U937细胞中的MHCⅠ类分子(HLA-A,B,C)、表面的协同刺激分子CD86和黏附分子CD54的表达增加。结论: IL-27可以诱导U937细胞中促凋亡基因的表达,直接抑制细胞增殖,对细胞中MHCⅠ、CD86和CD54的表达有诱导作用。这可能是IL-27抗肿瘤作用的重要机制。     

Induction of CD 14 antigen on the surface of U937 cells by an interleukin-6 autocrine mechanism after culture with formalin-killed Gram-negative bacteria

ABSTRACT: In order to better understand the regulation of CD 14 antigen on the surface of the monocyte-like cell line U937 in response to bacteria, the expression and regulation of CD 14 antigen on these cells when cultured with formalin-killed bacteria were determined using the monoclonal antibody MY-4 and analyzed by means of the indirect immunofluorescence method. CD14 expression was induced on the U937 cells after about 48 hours of culture with all of the formalin-killed Gram-negative bacteria used in this study but with none of the Gram-positive bacteria. Maximum expression was obtained after culture with formalin-killed Salmonella enteritidis strain 116–54. Various cytokines such as interleukin-1β, interleukin-2, interleukin-6, interferon-γ and tumor-necrosis factor-α were assayed in the culture supernatant of U937 cells cultured with or without formalin-killed Salmonella enteritidis 116–54 using an enzyme-immunoassay or radioimmunoassay system. The U937 cells were found to produce a large amount of interleukin-6 in response to formalin-killed Salmonella enteritidis 116–54. On the other hand, culture supernatant (referred to as conditioned medium) obtained from the U937 cells after 72 h of culture with formalin-killed Salmonella enteritidis 116–54 also induced strong expression of CD 14 antigen 48 to 72 h later, and this was blocked by the addition of anti-human interleukin-6 antibody. These findings suggest that the expression of CD 14 antigen on the surface of U937 cells cultured with formalin-killed Gram-negative bacteria is induced by interleukin-6 and can be explained on the basis of the autocrine mechanism of interleukin-6.     

上调c-myc基因的表达对U937白血病细胞的影响

 目的：构建稳定表达外源c-myc基因的人单核细胞白血病细胞株U937,并初步分析其特性。方法：首先构建重组质粒MSCV-c-myc-IRES-GFP （MMIG）载体,分别用MMIG及空载体MSCV-IRES-GFP（MIG）包装病毒,并感染U937细胞,用流式细胞术分选绿色荧光细胞,获得 U937/GFP和U937/MYC细胞,用荧光显微镜及流式细胞术检测GFP阳性率,用Western blotting测定细胞中c-Myc、survivin、X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）和Bcl-2的蛋白表达水平,流式细胞术检测U937/GFP和U937/MYC细胞周期,并用MTT法测定U937/GFP和U937/MYC细胞的生长情况,克隆形成实验检测克隆形成能力。结果：荧光显微镜观察,MIG和MMIG病毒感染后,2种细胞均表达绿色荧光蛋白;流式细胞术结果显示,MIG病毒感染的细胞荧光率为26.0%,MMIG病毒感染的细胞荧光率为277%;Western blotting的结果显示,c-Myc蛋白在MMIG病毒感染的细胞中表达水平升高。流式细胞术分选后,荧光显微镜观察可见绿色荧光蛋白表达明显增多,U937/GFP和U937/MYC细胞绿色荧光蛋白表达率分别达98.7%和93.7%。 U937/MYC细胞中c-Myc蛋白表达较U937/GFP细胞显著升高,c-Myc蛋白下游的survivin表达增多,而凋亡相关蛋白XIAP及Bcl-2的表达则没有明显变化。细胞周期检测显示,U937/MYC细胞处于S期的细胞数增多。MTT实验结果显示,U937/MYC细胞的生长速率较U937/GFP细胞增快。U937/MYC细胞的克隆形成能力较U937/GFP细胞强。结论：成功构建了c-myc基因高表达的U937稳定细胞株U937/MYC。在U937/MYC细胞中,c-Myc及其下游的survivin表达明显上调,处于细胞周期S期的细胞数增多、细胞生长加快、克隆形成能力增强,提示c-Myc可能通过增强自我更新能力、加快细胞周期、促进相关抗凋亡蛋白表达从而提高细胞的存活率。     

槲皮素对U937细胞系抑制增殖和诱导凋亡作用的研究

目的 探讨黄酮类化合物槲皮素（Que）对人类单核细胞白血病U937细胞系的抑制增殖和诱导凋亡的作用。方法 应用MTT法检测不同浓度槲皮素对U937细胞的增殖抑制作用；AO／PI荧光染色后倒置荧光显微镜下观察细胞形态学变化；琼脂糖凝胶电泳测定细胞DNA的片段化；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布。结果槲皮素能明显抑制U937细胞增殖，并存在剂量-效应关系和时间-效应关系；诱导U937细胞出现凋亡所具有的形态学和生化特征；随着槲皮素浓度升高，凋亡细胞和坏死细胞比例增加；将细胞特异性地阻滞在S期，出现凋亡峰。结论 槲皮素能抑制U937细胞增殖，诱导细胞凋亡，并具有细胞周期特异性。     

Escherichia coli-induced expression of IL-1 alpha, IL-1 beta, IL-6 and IL-8 in normal human renal tubular epithelial cells

The aim of the present study was to investigate whether the IL-1 family cytokines, in addition to IL-6 and IL-8, could be induced in normal human cortical epithelial cells in response to bacterial stimuli. Human renal tissue was obtained from 9 patients undergoing elective tumour nephrectomy. Renal cortical epithelial cells of tubular origin were prepared from the unaffected tissue. The proximal tubular cells were stimulated for 2, 6 and 24 h with a heat-inactivated pyelonephritogenic Escherichia coli strain DS-17. Cultured unstimulated tubular cells served as controls. IL-1 alpha, IL-1 beta, IL-1 receptor antagonist, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-alpha, G-CSF and GM-CSF were analysed using immunohistochemistry at the single cell level. The nonstimulated cells were found to express low levels of IL-6 and IL-8 (mean value < 3% of total cells). In contrast, E. coli exposure resulted in significantly increased incidences of IL-6 and IL-8 expressing cells (mean values approximately 18% of total cells) peaking within two hours of stimulation (P < 0.008 and P < 0.02 versus non-stimulated cells, respectively). A gradual decrease was thereafter observed at 6 and 24 h, respectively, although persistently higher compared to controls. A different kinetic response was found for IL-1 alpha, IL-1 beta and IL-1 receptor antagonist-expressing cells, which peaked 24 h after E. coli stimulation (mean values 3--10%) (P < 0.008, P < 0.02, P < 0.02 versus non-stimulated cells, respectively). Low levels of TNF-alpha and GM-CSF were found in 3 of the 9 donated epithelial cells, peaking at 2 h, and IL-10 and G-CSF producing cells in 1 patient each. In conclusion we found that heat-inactivated pyelonephritic E. coli induced a proinflammatory cytokine response in the normal human proximal tubular cells including the IL-1 family, IL-6 and IL-8.     

TM-TNF-α介导的反向信号协同增强sTNF-α对U937细胞的激活作用

目的用sTNFRⅠ预先激活TM-TNF-α介导的反向信号，观测其对sTNF-α激活单核细胞系U937细胞的影响。方法预先用sTNFRⅠ与U937细胞作用30min，洗涤后加入sTNF-α作用不同时间，观测预激活反向信号对sTNF-α刺激U937产生活性氧、胞内促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-8 mRNA的转录及IkB-α水平(Western blot)的影响。结果单独用sTNFRⅠ激活的反向信号并不影响U937细胞的功能，而预激活反向信号能协同增强sTNF-α刺激U937细胞产生活性氧，且呈sTNFRⅠ浓度、sTNF-α浓度依赖关系；预激活反向信号协同增强sTNF-α刺激U937炎性细胞因子mRNA(TNF-α、IL-1β、IL-8等)的转录水平；并促进U937细胞IkB-α的降解。结论预先激活TM-TNF-α介导的反向信号协同增强sTNF-α对U937的激活作用，提示反向信号可能参与机体对早期炎症反应的调节。     

氧化苦参碱对肝纤维化患者IL-6、IL-8、IL-10水平影响

目的：探讨氧化苦参碱对肝纤维化患者血清IL－6、IL－8、IL－10水平影响。方法：采用ELISA法分别测定肝纤维化患者治疗前后的IL－6、IL－8、IL－10水平。结果：肝纤维化病人的IL－6、IL－8水平较正常对照组显著升高、IL－10水平则较正常对照组显著降低。采用氧化苦参碱治疗3月后肝功能好转者IL－6、IL－8水平较治疗前有显著降低，IL－10水平升高，但无显著差异。结论：IL－6、IL－8、IL－10水平与肝纤维化患者预后相关，其血清水平可作为判断肝纤维化患者预后的指标之一，氧化苦参碱对肝纤维化有抑制作用。     

冬凌草甲素增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用

目的：研究具有诱导肿瘤细胞凋亡活性的冬凌草甲素，促进巨噬细胞对因凋亡的肿瘤细胞的吞噬作用。 方法： DNA凝胶电泳检测UV照射（2.4 J/cm2, 4 min）的人组织淋巴瘤U937细胞凋亡；Giemsa染色，Hoechst 33258染色，镜下检测计数吞噬作用。 结果： UV照射（2.4 J/cm2, 4 min）诱导U937细胞发生凋亡，琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带。2.7 μmol·L^-1的冬凌草甲素具有增强U937分化的巨噬细胞对UV照射诱导凋亡的U937细胞的吞噬作用，并呈时间剂量依赖性，但对非特异性荧光颗粒的吞噬效果较弱。加入抗TNFα和抗IL-1β的抗体，培养12 h, 吞噬增强作用明显受抑制。冬凌草甲素在人外周血来源的巨噬细胞吞噬凋亡的U937细胞过程中同样发挥增强吞噬的效果。 结论： 冬凌草甲素可特异地增强巨噬细胞对凋亡的U937细胞的吞噬作用，其吞噬机制是通过诱导巨噬细胞TNFα和IL-1β的释放。