Local IL-23 Expression in Murine Vaginal Candidiasis and Its Relationship with Infection and Immune Status

IL-12 is a heterodi meric cytokine which con-sist of p40 and p35 and plays a key role in the dif-ferentiation of T helper1 ( Th1)cells[1].Its func-tions in murine vaginal candidiasis have beenrepor-ted[2 ,3].IL-23 is a new member inthe IL-12 familyof heterodi meric cytokines which is composed ofp40 and p19[4]. IL-23 shares some features withIL-12 but they also differ ,functionally and struc-turally . Many of its biological features ,such as itsroleinthe development of murine vaginal candid…     

白念珠菌性外阴阴道炎患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的:观察白念珠菌性外阴阴道炎患者阴道分泌物Th1/Th2细胞因子水平,探讨其在阴道局部免疫功能中的作用.方法:采用ELISA检测阴道分泌物中细胞因子IFN-γ、IL-12、IL-4及IFN-γ,IL-4表达情况.结果:念珠菌性外阴阴道炎组(VVC组)阴道灌洗液细胞因子IL-12明显高于正常对照组及复发性念珠菌性外阴阴道炎组(RVVC组)(P<0.05),RVVC组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05);IFN-γ、IL-4在VVC组与RVVC组间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于正常对照组(P<0.05);VVC组与RVVC组IFN-γ/IL-4值均低于正常对照组(P<0.05).结论:VVC患者阴道局部存在Th2细胞极化,抑制Th1细胞增殖及免疫功能的发挥,局部免疫功能紊乱降低了对念珠菌感染的抵抗力.     

日本血吸虫感染小鼠肝肉芽肿与Th1／Th2细胞因子水平的动态变化

目的 观察小鼠感染日本血吸虫后急、慢性期肝肉芽肿病变与Th1/Th2细胞因子的动态变化,探讨Th1/Th2在肉芽肿形成及调节中的作用。方法 采用石蜡切片,HE染色后观察感染小鼠肉芽肿病变,用ELISA双抗夹心法测定小鼠感染后0、4、6、8和12周血清及脾淋巴细胞IL-2、IFNr和IL-4水平的动态变化。结果 小鼠感染后6周出现明显肉芽肿病变,8周肉芽肿反应达高峰;12周则明显缩小;感染小鼠血清及脾淋巴细胞的Th1细胞因子IL-2和IFNr在感染后4～6周开始上升,8周达高峰,随后下降;而Th2细胞因子IL-4在感染后8周时迅速上升且随感染时间延长而明显升高。结论 Th1细胞因子IL-2和IFNr与血吸虫卵肉芽肿的诱导和形成密切相关。而Th2细胞因子ILL-4可抑制Th1细胞因子在血吸虫病慢性期虫卵肉芽肿自发性免疫调节中起重要作用。     

初发SLE患者Th1/Th2及其调控因子基因的研究

目的：探讨未经药物治疗初发狼疮病人Th1/Th2细胞亚群分布及其调控细胞因子基因表达的差异。方法：运用三色荧光标记流式细胞术检测35例初发狼疮病人细胞亚群分布，并以10例正常人作对照；ABI 7700real-time PCR法同时检测38例病人和28例正常人IL－10、IL－12P40、IL18mPNA表达水平的差异。结果：1、初发狼疮病人Th1较正常人明显减低（P＜0．05），但Th1/Th2无显著性改变。2、与正常组相比，SLE组病人IL－12P35、IL－12P40、IL－18mRNA及其受体表达较正常人明显降低（P均＜0．05）；3、面部红斑组病人Th1/Th2、IL－12P35较正常组降低（P均＜0．05）；4、RNP阳性组病人IL－12P40较正常组升高，IL－12P35、IL－18较正常组降低（P均＜0．05）；5、有关节炎较无关节炎患者IL－18RmRNA表达升高（P＜0．05）。结论：SLE是一种以Th1细胞下降，Th2细胞相对占优势的自身免疫性疾病，源于诱导向Th1细胞分化的一系列细胞因子及其受体减少和细胞因子间失衡所致。     

食管鳞癌患者手术前后外周血Th1、Th2类细胞因子的变化及其临床意义

目的 探讨食管鳞癌病人外周血Th1和Th2类细胞因子的表达状况以及手术对该表达状况的影响。方法 采用ELISA法检测30例健康对照者和46例食管鳞癌病人术前、术后8 d、术后30 d的外周血单个核细胞(PBMC)培养液上清中Th1类细胞因子白介素2(IL-2)、γ干扰素(INF-γ)和Th2类细胞因子白介素4、6、10(IL-4、IL-6、IL-10)的表达情况。结果 食管鳞癌病人外周血Th1类细胞因子IL-2、INF-γ的表达明显低于对照组(P<0.05),Th2类细胞因子IL-6的表达明显高于对照组(P<0.05),表达趋势与肿瘤的TNM分期相关;手术后上述表达情况逆转。结论 食管鳞癌病人外周血Th2细胞功能增强,Th1细胞功能减弱;手术可逆转食管鳞癌病人Th1、Th2状态;Th1和Th2类细胞因子的动态检测可能为反映食管癌预后和转移或复发的指标。     

老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态与T-bet/GATA3基因表达的关系

目的探讨老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态及其与T-bet、GATA3基因表达的关系。方法选取老年非小细胞肺癌患者及健康受试者各120例,双抗夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测各组血浆中Th1类细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和Th2类细胞因子IL-4、IL-10的浓度;梯度离心法分离出单个核细胞(PB-MC),采用RT-PCR方法检测其T-bet、GATA3mRNA水平。结果老年非小细胞肺癌患者Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平与老年健康受试者比较明显下降[(10.28±0.88)pg/mL vs(16.94±1.05)pg/mL;(9.06±0.85)pg/mL vs(13.96±0.87)pg/mL)],差异均具有统计学意义;老年非小细胞肺癌患者Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平与老年健康受试者比较明显升高[(5.98±0.98)pg/mL vs(3.89±0.28)pg/mL;(47.59±2.89)pg/mL vs(40.47±1.28)pg/mL)],差异均具有统计学意义。老年非小细胞肺癌患者Th1型核转录因子T-bet mRNA的表达水平较老年健康受试者下降[(0.85±0.11)vs(1.46±0.09)];老年非小细胞肺癌患者Th2型核转录因子GATA3mRNA的表达水平较老年健康受试者明显增高[(1.51±0.12)vs(0.89±0.10)],差异均具有统计学意义。结论老年非小细胞肺癌患者存在着Th2漂移现象,该现象可能与影响Th1/Th2的极化状态的关键因子T-bet和GATA3的表达失常有关。     

女性生殖器尖锐湿疣患者外周血Th1/Th2水平的研究

目的观察女性生殖器尖锐湿疣（CA）患者外周血Th1/Th2细胞因子水平与其相应的组织内Th1/Th2细胞因子水平的相关性,探讨不同感染阶段外周血Th1/Th2细胞因子的变化。方法选取正常对照组20例,女性生殖器CA初发组37例,复发组25例,组织匀浆标本20例,用ELISA法测定各组血清标本和组织标本的细胞因子IL-2、IL-12、IL-4、IL-10的浓度,分析血清各细胞因子与其相应的组织内细胞因子的相关性,比较正常组与CA初发组和复发组的血清细胞因子水平的变化。结果CA组织内细胞因子IL-2、IL-12、IL-4、IL-10水平与相应的血清细胞因子水平密切相关（P〈0.05）;血清Th1细胞因子水平在CA初发组和复发组明显低于正常对照组,而Th2细胞因子水平明显高于正常对照组。结论CA患者血清Th1/Th2细胞因子水平能反映病灶局部的Th1/Th2细胞因子水平。CA患者血清Th1细胞因子水平明显下降,Th2细胞因子水平相对上升,Th1/Th2比值明显下降,导致Th1/Th2失衡。     

卡莫氟对强直性脊柱炎Th1/Th2类细胞因子表达影响的研究

目的：观察卡莫氟(1-hexylcarbamoyl-5-fluorouracil,HCFU) 和柳氮磺胺吡啶(sulfalazine,SSZ)治疗强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)后体内Th1/Th2类细胞因子的变化。方法：19例AS患者随机分为2组，分别给予HCFU(9例)和SSZ （10例），RT-PCR检测其治疗前后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）mRNA片段的表达。结果:HCFU治疗后AS患者PBMC中IFN-γ、TNF-α mRNA的表达率分别为33.33%、44.44%，与治疗前相比差异有统计学意义（P＜0.05），IL-2、IL-4及IL-6 mRNA的表达差异无统计学意义。SSZ治疗后AS患者PBMC中IFN-γ mRNA的阳性表达率为70%,半定量结果显示，治疗后PBMC中IFN-γ mRNA的表达水平明显降低（P＜0.05)。80% AS患者在治疗后PBMC中IL 4 mRNA呈阳性表达，较治疗前21.05%明显升高（P＜0.05）。IL-2、IL-6和TNF-α mRNA的表达无明显变化（P＞0.05）。结论：HCFU能使TNF-α mRNA表达降低，促进AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变，小剂量即可使病情缓解。SSZ未发现对TNF-α mRNA表达有明显影响，可促使AS患者的免疫应答从Th1型向Th2型转变。     

IL-1β 或TNF-α 干预的子宫蜕膜细胞对母胎界面Th1/Th2 及Th17/Treg 平衡的影响

目的：探讨IL-1β或TNF-α干预的子宫蜕膜细胞对母胎界面Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响。方法：子宫蜕 膜细胞经体外分离后,加入10–8 mol/L雌二醇(E2)+10–7 mol/L孕激素(P)培养7 d后,分别给予IL-1β或TNF-α干预24 h,收 集上清液,制备条件培养液。应用条件培养液刺激子宫蜕膜T细胞72 h后,收集上清液,ELISA 法检测上清液IFN-γ, IL-2,IL-17,IL-5,IL-10及TGF-1β的表达。收集子宫蜕膜T细胞,提取RNA,用实时定量PCR检测细胞因子mRNA的 表达。通过T细胞分泌的细胞因子水平来评估子宫蜕膜细胞对Th1/Th2及Th17/Treg平衡的影响。结果：IL-1β或TNF-α 干预子宫蜕膜细胞24 h后,其条件培养液能够促使子宫蜕膜T细胞Th1细胞因子IFN-γ分泌增加7~8倍,IL-2分泌增加 6~7倍,Th17细胞因子IL-17分泌增加15~19倍,Th2细胞因子IL-10和IL-5的分泌无差异,Treg细胞因子TGF-1β的分泌无 差异;其条件培养液促使IFN-γ和IL-17 mRNA表达增加,而IL-10及TGF-1β mRNA的表达无差异。结论：IL-1β或TNF-α 刺激的子宫蜕膜细胞改变母胎界面Th1/Th2及Th17/Treg细胞的平衡,向Th1及Th17偏移。     

ESA刺激华支睾吸虫感染小鼠脾细胞分泌Th1／Th2的动态观察

目的 观察华支睾吸虫分泌排泄抗原（ESA）刺激感染小鼠脾脏单个核细胞Th1／Th2细胞因子的动态变化。方法双抗体夹心ELISA法检测华支睾吸虫感染后不同时间小鼠脾细胞培养上清中IFN-γ,IL-4的动态变化。结果自感染后1w起IFN-1的表达量开始上升,第4w达高峰（P〈0．05）,此后开始下降,至第12w水平接近正常。与IEN-γ不同,IL4的表达自感染后第1w起持续升高,直至观察结束的12w（P〈0．05）。结论初步结果提示华支睾吸虫感染后急性期转向慢性期的过程中Th1／Th2细胞因子的表达经历了由Th1优势应答向Th2优势应答的转变。     

黄连阿胶汤对失眠大鼠血清Th1/Th2平衡的影响

目的观察黄连阿胶汤对失眠模型大鼠Th1/Th2平衡的影响。方法将36只SD大鼠随机分为3组,PCPA法复制失眠大鼠模型,ELISA法检测大鼠血清IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-10及IFN-γ/IL-4的水平。结果模型组大鼠IFN-γ、IL-1β的水平明显下降（P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达则明显升高（P〈0.01）,IFN-γ/IL-4比值降低（P〈0.01）;黄连阿胶汤组IFN-γ、IL-1β的表达有不同程度的升高（P〈0.05,P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达降低（P〈0.05）,IFN-γ/IL-4比值升高（P〈0.01）。结论黄连阿胶汤能提高失眠大鼠Th1细胞因子的表达,降低Th2细胞因子的表达,促进Th1/Th2平衡向Th1方向偏移,是其治疗失眠的可能机制之一。     

Susceptibility to Vaginal Candidiasis under Different Conditions in Mice

In order to study the susceptibility of murine vaginal mucosa to Candida albicans under different conditions, vaginal lavage fluid and vaginal tissue of mice were observed and compared between murine models with normal immune system （estrogen-treated mice） and immunosuppressed murine model, and between primary infection model of vaginal candidiasis and secondary infection one. The average level of colony forming unit （CFU） from the immuosuppressed group was higher than that from estrogen-treated group at each time point and the peak time was delayed. The differences between the two groups were statistically significant （P〈0.05） from the fourth day after inoculation. A significant difference existed in the average level of CFU between the control group and the estrogen-treated group （P〈0.05）, and between the control group and the immuosuppressed group （P〈0.01）. It was concluded that the vaginal mucosa from the immunosuppressed mice is more susceptible to Candida albicans and no difference is found in susceptibility between mice with primary infection and secondary infection.     

旋毛虫对三硝基苯磺酸诱导肠炎小鼠Th1/Th2类细胞因子基因表达的影响

目的：研究旋毛虫对三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的实验性小鼠肠炎模型Th1/Th2类细胞因子基因表达的影响。方法：雌性BALB/c小鼠随机分为50%乙醇对照组、旋毛虫（T. spiralis）应用组、 TNBS诱导肠炎模型组、预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组，（每组小鼠取材时保证6只以上）。采用RT-PCR方法观察感染旋毛虫和未感染旋毛虫小鼠于TNBS诱导肠炎后3 d和7 d时不同基因的表达变化，包括小鼠脾脏中IFN-γ、IL-4、IL-10 mRNA和结肠中IL-10 mRNA的表达量。结果：预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d脾脏中IFN-γ mRNA的表达量与模型组比较差异无显著性(P>0.05)，在造模后7 d脾脏中IFN-γ mRNA的表达量低于模型组（P<0.05）， IL-4 mRNA的表达量于3 d和7 d时均高于模型组（P<0.05）。预先感染T. spiralis后诱导TNBS模型组小鼠在造模后3 d和7 d脾脏和结肠中IL-10 mRNA的表达量均高于模型组（P<0.05）。结论：旋毛虫对TNBS诱导的实验性小鼠肠炎外周免疫作用机制可能通过下调炎症性肠病过度的Th1型免疫反应、上调Th2型免疫反应而实现；IL-10既作为Th2类细胞因子又作为Tr1型细胞因子对实验性小鼠的肠道局部和外周免疫均产生重要调节作用。     

肺炎支原体感染患儿Th1/Th2细胞免疫类型及SOCS1/3 mRNA的表达

目的:观察肺炎支原体(MP)感染患儿早期血清中IFN-γI、L-4的含量和单个核细胞(MNC)中SOCS1、SOCS3的表达,以探讨MP感染的免疫学机制。方法:选取MP感染患儿30例,留取其入院时血样,以健康体检儿童为对照。RT-PCR法测血样MNC中SOCS1,SOCS3的表达,采用ELISA法检测血清中IFN-γ,IL-4的表达水平,并分析其相互关系。结果:MP感染患儿早期IFN-γ的表达和IFN-γ/IL-4的比值比对照组明显增高(P<0.01),IL-4亦稍高(P<0.05);SOCS1的表达较正常对照高(P<0.01),SOCS3的表达较对照无明显差异(P>0.05)。结论:在MP感染早期Th1/Th2均参与了患儿机体的免疫应答,以Th1细胞为主;SOCS1、SOCS3参与了Th1/Th2细胞免疫调节。     

阴道上皮细胞先天免疫对阴道假丝酵母菌病影响的研究

目的通过用人阴道上皮细胞为模型,分析与阴道上皮细胞先天免疫有关的细胞因子在假丝酵母菌感染中的变化,探讨外阴道假丝酵母菌病（vulvovaginal candidiasis,VVC）的发病机制．方法用组织块法和含表皮生长因子的角化细胞无血清培养基体外培养人阴道上皮原代细胞,细胞传代后与白假丝酵母茵培养上清液共培养,设传代细胞加培养基培养为对照组,在0、3、6、12、24、48h收集各组的细胞上清液,用ELISA方法测定阴道上皮细胞分泌的人β防御素-1（human13defensin-1,HBD-1）、人β防御素-2（human13defensin-1,HBD-2）和白介素-10（IL-10）细胞因子的变化,对实验数据进行统计学分析．结果在人阴道上皮细胞模型组中,上清液的HBD-1、HBD-2、IL-10与同一时间对照组相比较表达均增加,至48h均有统计学意义（P〈0．05）．结论人阴道上皮细胞有先天性抗白假丝酵母菌作用,在白假丝酵母菌感染人阴道上皮细胞时,上皮细胞能分泌HBD-1、HBD-2和IL-10．     

Th1/Th2细胞因子对心脏移植大鼠NPC输注诱导免疫耐受的作用

目的探讨大鼠血清中Th1/Th2细胞因子表达与供肝非实质细胞(NPC)输注诱导心脏移植免疫耐受的关系。方法建立大鼠心脏移植模型,将40只大鼠随机分成排斥反应组、免疫耐受组,每组20只。观察移植心脏存活时间,并检测受者血清中Th1/Th2细胞因子白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)的表达水平。结果免疫耐受组供心存活时间为(30.83±2.55)d,排斥反应组为(8.15±2.08)d,差异有显著性(t=24.46,P<0.01)。术后7、14 d排斥反应组血清Th1细胞因子IL-2、IFN-γ水平均高于免疫耐受组,Th2细胞因子IL-4、IL-10表达水平均低于免疫耐受组,术后7 d血清IL-6表达水平显著高于免疫耐受组(t=4.50~16.20,P<0.01)。结论免疫耐受的形成与Th1/Th2细胞因子相互作用有关。     

小儿哮喘急性发作期诱导痰Th1/Th2细胞因子的研究

目的探讨儿童哮喘发作期诱导痰Th细胞亚群的变化。方法用双抗体夹心ELISA法对72例哮喘患儿和30例正常儿童分别测定IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10、IgE以及嗜酸细胞计数。结果①Th1类细胞因子（IFN-γ、IL-12）在变态反应哮喘患儿组与正常对照组无显著性差异；②哮喘组Th2类细胞因子（IL-4、IL-10）高于正常组，有显著性变化；③EOS％和IgE哮喘组高于正常组。结论儿童哮喘发作期存在免疫功能紊乱，表现为Th2亚群免疫应答优势。