辛伐他汀对成骨细胞分化和成骨基因的影响

目的 探讨辛伐他汀对成骨细胞分化及成骨基因表达的影响.方法 选取成骨肉瘤细胞株 MG-63,采用不同浓度辛伐他汀（0.0625、0.125、0.25、0.5和 1.0 μmol/L）处理成骨细胞,ALP活性检测辛伐他汀对成骨细胞分化作用的影响;实时定量 RT-PCR和免疫印迹检测细胞成骨基因 mRNA的表达.结果 通过不同浓度辛伐他汀处理成骨细胞后,不同浓度辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞ALP 活性差异均有统计学意义 （ P〈0.05）,其中 0.25 μmol/L 浓度组作用对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响最为显著.采用 0.25 μmol/L辛伐他汀处理成骨细胞后,辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞骨钙蛋白、ALP、I型胶原 mRNA表达差异均有统计学意义 （ P〈0.05）.结论 辛伐他汀可能通过上调成骨基因mRNA的表达水平来促进其分化,这为他汀类药物治疗骨质疏松症提供新的干预靶点.     

二苯乙烯苷对大鼠成骨细胞增殖及分化的影响

目的研究二苯乙烯苷（THSG）对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响。方法体外分离、培养SD大鼠成骨细胞,M1rr法检测成骨细胞增殖活性;碱性磷酸酶（ALP）活性试剂盒检测成骨细胞AIJP活性比;Elisa方法检测成骨细胞c-fos和c—ju．蛋白表达水平。结果0．03—10rag／mr的THSG干预成骨细胞24h成骨细胞活性较对照组明显增强（P〈0．05或〈0．01）;在二苯乙烯苷干预细胞后第3天时,二苯乙烯苷组成骨细胞ALP活性较对照组明显增加（P〈0．05或〈0．01）,成骨细胞c-fos和c-jun表达均较对照组明显增强（P〈0．05或〈0．01）。结论二苯乙烯苷能显著促进成骨细胞发育成熟。     

金属离子刺激单核—巨噬细胞核因子kB受体活化子的研究

摘要：[目的] 探讨Cr3+ 、Co2+对体外培养的小鼠单核/巨噬细胞(RAW264.7) 的细胞毒性以及刺激单核/巨噬细胞表达RANK在人工关节术后引起骨溶解的分子生物学机制。[方法] 在体外培养单核/巨噬细胞(RAW264.7)。用Co2+、Cr3+分别干预单核/巨噬细胞,不同时间用MTT方法检测其细胞活性。将细胞分为5组：A:单纯单核/巨噬细胞; B:单核/巨噬细胞+500 ppm 铬离子;C:单核/巨噬细胞+500ppm铬离子+ 20μΜ SP600125;D:单核/巨噬细胞+10ppm 钴离子;E:单核/巨噬细胞+10ppm 钴离子+ 20μΜ SP600125; 用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法在24h、48h检测各组细胞的RANK mRNA 的表达量。[结果] MTT显示与对照组相比,钴和铬离子都能使单核/巨噬细胞的细胞活力明显下降。在24h、48h时,Co2+ 和Cr3+均能刺激单核/巨噬细胞使其细胞RANK mRNA表达量增强（P<0.05）且SP600125（JNK抑制剂）可抑制钴和铬离子刺激单核/巨噬细胞表达RANK mRNA（P<0.05）。[结论]金属离子对单核/巨噬细胞有细胞毒性,且能够诱导单核/巨噬细胞RANK mRNA 的表达,此外JNK通路参与金属离子刺激单核/巨噬细胞表面RANK的表达。     

血府逐瘀胶囊联合非洛地平治疗老年冠心病心绞痛的临床研究

目的 观察重楼皂苷I（PPI）对磷酸三钙（TCP）磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤的影响,并探讨其调控机制。方法 通过消化法从SD大鼠颅骨中获得原代成骨细胞,应用碱性磷酸酶（ALP）染色鉴定成骨细胞。TCP磨损颗粒（0.1 mg/mL）与成骨细胞共孵育48 h制备成骨细胞损伤模型,实验随机分为对照组、模型组和PPI（30、100 μg/mL）组。CCK-8和化学比色法分别测定成骨细胞活力和上清液中乳酸脱氢酶（LDH）水平;实时荧光定量PCR法检测成骨细胞中ALP、I型胶原（Collagen I）和Runt相关转录因子2（RUNX2）mRNA水平;Annexin-V/PI染色经流式细胞术定量分析成骨细胞凋亡情况;应用茜素红S染色观察成骨细胞矿化结节形成;Western blotting法检测成骨细胞中Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-3、Atg5、p62和微管相关蛋白1轻链3（LC-3）蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组成骨细胞活性降低,特征蛋白ALP、Collagen I、RUNX2 mRNA水平及矿化结节形成显著减少,LDH释放量、细胞凋亡和Bax、cleaved Caspase-3、Atg5和LC-3等蛋白表达及LC-3II/LC-3I值明显增加,而Bcl-2和p62蛋白表达显著减少;与模型组比较,PPI各组成骨细胞活性升高,ALP、Collagen I和RUNX2 mRNA水平和矿化结节形成明显增加,LDH释放和细胞凋亡显著减少,Bax、cleaved Caspase-3、Atg5和LC-3蛋白表达及LC-3II/LC-3I值也明显减少,而Bcl-2和p62蛋白表达显著增加。结论 PPI可通过抑制自噬的活化而减轻TCP磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤。     

2,3-二氢-7-甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-异烟腙抗骨质疏松作用的体外活性研究

目的：在已有的研究基础上,从我们合成的一系列化合物中筛选出具有抗骨质疏松活性的化合物I（2,3-二氢-7-甲氧基-4H-1-苯并吡喃-4-异烟腙）,对其体外活性进行研究。方法：以雌二醇（E2）作为阳性对照,以细胞增殖作用、碱性磷酸酶（ALP）活性和骨钙素（OCN）分泌为指标考察该化合物对成骨细胞系MC3T3-E1细胞的增殖和分化的影响。结果：化合物I在10^-6mol/L浓度时对体外培养的细胞有较好的促进作用,显著增加细胞数量（125.73%,与对照组比较P〈0.05）,提高ALP活性（108.49%,与对照组比较P〈0.05）,且能够促进骨钙素分泌（109.00%,与对照组比较P〈0.05）,以上作用均可被雌激素受体（ER）阻断剂tamoxifen阻断。结论：化合物I具有促进成骨细胞增殖分化的作用,其机制可能与ER激动有关。     

人甲状旁腺素(1-34)对新生大鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性影响

目的：研究外源性hPTH(1-34)对原代培养成骨细胞ALP活性影响。方法：新生大鼠头盖骨中取成骨细胞,改良Gomori氏钙钴法染色鉴定,磷酸苯二钠法测定ALP活性,RT-PCR检测ALP mRNA表达。结果：10^-8 mol.L^-1 hPTH(1-34)以48 h为一循环,在每一循环的前12 h作用于细胞时,可使成骨细胞ALP活性较对照组增加最明显,hPTH(1-34) 48 h作用组,与对照相比细胞ALP活性无显著差异。hPTH(1-34) 12 h作用组,成骨细胞ALP mRNA表达最高。结论：hPTH(1-34)刺激成骨细胞内ALP活性升高与给药方式及药物浓度有关,间歇性给药成骨细胞内ALP活性升高。     

淫羊藿甙对体外培养大鼠成骨细胞Cbfa1基因表达的影响

目的观察淫羊藿甙对体外培养大鼠成骨细胞功能及对转录因子核心结合因子a1（Cbfa1）mRNA表达的影响,探讨淫羊藿甙抗骨质疏松的作用机制。方法用酶消化法获得新生（〈24 h）SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行体外原代培养。将不同浓度的淫羊藿甙（1,10,100 ng/ml）分别加入培养液中,观察成骨细胞的形态、增殖和分化功能。用RT-PCR法测定成骨细胞Cbfa1、碱性磷酸酶（ALP）和Ⅰ型胶原（ColⅠ）mRNA表达水平的变化。结果 1、10和100 ng/ml淫羊藿甙均可促进Cbfa1、ALP和ColⅠmRNA表达（P〈0.05）,且以10 ng/ml组作用最显著。结论淫羊藿甙能促进体外培养成骨细胞增殖与分化,通过提高成骨细胞转录因子Cbfa1的基因表达水平诱导骨形成,是其抗骨质疏松作用机制之一。     

帕米磷酸钠对大鼠成骨细胞RANKL/OPGmRNA表达的影响

目的观察帕米膦酸钠对新生大鼠成骨细胞核因子κβ受体活化受体配体（RANKL）／护骨素（OPG）mRNA表达的影响。方法 体外分离培养新生大鼠成骨细胞,分别观察不同浓度帕米膦酸钠或用帕米膦酸钠处理不同时间对成骨细胞RANKL／OPG mRNA表达的影响。采用半定量RT-PCR方法检测RANKL／OPG mRNA表达。结果帕米膦酸钠呈浓度依赖性降低RANKL mRNA的表达,干预24h,10^-5M抑制作用最大,约为对照组表达量的40％（P〈0．01）。同时帕米膦酸钠呈浓度依赖性增加OPG mRNA表达,10^-6M时增加最明显,约为对照组表达量的2．2倍（P〈0．01）,而在10^-5M时又明显降低。10^-6M帕米膦酸钠呈时间依赖性抑制RANKL mRNA和促进OPG mRNA表达,分别于24h抑制RANKL mRNA表达、48h促进OPG mRNA表达且达最大效应（P〈0．01）。结论帕米膦酸钠可能通过调节成骨细胞RANKL／OPG的基因表达,而抑制破骨细胞介导的骨吸收。     

骨金散对去卵巢大鼠Ⅰ型胶原交联N-端肽、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的：复制去卵巢大鼠骨质疏松动物模型,探讨中药骨金散对去卵巢雌性大鼠血清Ⅰ型胶原交联N-端肽（NTX）和骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法：6月龄雌性SD大鼠40只,随机分为去势组和假手术组。去势组切除双侧卵巢,假手术组切除部分脂肪。大鼠去势后1个月,将去势组随机分为3组：模型组、雌激素组和骨金散组,雌激素组每日灌服己烯雌酚0.05m g/kg,骨金散组按1.8g/kg剂量灌服骨金散,其余各组灌服等量生理盐水。2个月后,酶联免疫吸附法测量血清碱性磷酸酶（ALP）、NTX水平,RT-PCR方法检测右侧股骨骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达水平。结果：与假手术组比较,模型组血清ALP、NTX含量明显升高（P〈0.01）,Ⅰ型胶原mRNA水平显著下降（P〈0.01）。雌激素组和骨金散组大鼠体内的ALP、NTX水平显著低于模型组（P〈0.01）,骨金散组大鼠体内的ALP水平高于雌激素组（P〈0.05）。雌激素组和骨金散组实验大鼠骨组织中Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达含量明显高于模型组（P〈0.01）。结论：骨金散可减轻去卵巢大鼠ALP、NTX水平的提高,上调骨组织Ⅰ型胶原mRNA的表达水平,这可能与其治疗骨质疏松的机制有关。     

罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响

目的 研究不同分子量的罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对体外培养新生小鼠颅骨MC3T3-E1细胞增殖与I型胶原蛋白分泌及I型胶原蛋白mRNA表达的影响.方法 采用WST-8法测定胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖的影响,ELISA法检测胶原蛋白多肽对MC3T3-E1细胞I型胶原蛋白分泌的影响,采用real-ti...     

α-玉米赤霉醇对成骨细胞增殖、分化以及OPG和RANKL mRNA表达的影响

目的:探讨α-玉米赤霉醇(α-zearalanol,α-ZAL)对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1增殖、分化及护骨素(osteoprotegerin,OPG)和NF-кB受体活化配体(receptor activator of nuclear factor-кB ligand,RANKL)mRNA表达的影响。方法:传代培养小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1,采用不同浓度的α-ZAL作用于细胞72 h后,MTT法检测细胞增殖活性,PNPP法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,RT-PCR法检测ALP,OPG及RANKL mRNA的表达水平。结果:10-6～10-12mol·L-1的α-ZAL可显著抑制成骨细胞的增殖(P<0.05);显著增加ALP活性(P<0.05),但不同剂量间存在作用时间差异;并且可显著上调成骨细胞内OPG/RANKL mRNA的比值(P<0.05)。结论:α-ZAL可抑制成骨细胞的增殖、促进其分化,并可通过上调OPG/RANKL mRNA表达比值抑制破骨细胞的形成,有望作为骨质疏松症的治疗药物。     

镁离子对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响 , 镁离子对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响

目的 探讨不同浓度镁离子对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响。方法 原代培养获取 VSMCs,进行形态学及免疫细胞鉴定,后将VSMCs随机分为阴性对照组、高磷组、镁干预组。阴性对照组采用含10%胎牛血清培养,高磷组采用高磷培养基培养,镁干预组在高磷培养基的基础上分别加入不同浓度氯化镁,使镁离子终浓度分别为1、2、3 mmol/L（镁干预组1~3）,刺激7 d后行钙化检测,测定钙含量及碱性磷酸酶（ALP）活性,并行反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞内核心结合因子α1（Cbfα1）mRNA的表达。结果 高磷组和镁干预组VSMCs均有钙盐沉积,其钙含量均高于阴性对照组;镁干预组随镁离子浓度增大钙化结节逐渐缩小,除镁干预组1钙含量与高磷组无差异外,镁干预组2和镁干预组3均低于高磷组（均P＜0.05）。VSMCs ALP活性和Cbfα1 mRNA的表达除镁干预组3与阴性对照组无差异外,其余组均高于阴性对照组（P＜0.05）。镁干预组随镁离子浓度增大,ALP活性和Cbfα1 mRNA的表达水平均逐渐降低,且均低于高磷组（P＜0.05）。结论 镁离子可在一定程度上抑制高磷诱导的VSMCs钙化和成骨样转分化,其可能是通过降低VSMCs中Cbfα1的表达来实现的。     

淫羊藿苷对脂多糖诱导成骨细胞凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路的影响

摘 要 目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对脂多糖（LPS）诱导成骨细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78/蛋白激酶R样内质网激酶/C/EBP同源蛋白（GRP78/PERK/CHOP）通路的影响。 方法: 采用大鼠骨髓基质干细胞定向诱导分化为成骨细胞的方法,将成骨细胞随机分成5组：对照组（只含成骨细胞）、LPS组（成骨细胞中加入终浓度为500 ng·ml-1 LPS）、ICA低、中、高剂量组（分别在LPS组基础上加入终浓度为1,10,100 μmol·L-1 ICA）。采用CCK 8法检测细胞增殖情况,采用对硝基苯棕榈酸酯（PNPP）法检测成骨细胞碱性磷酸酶（AKP）活性的变化情况,采用ELISA法检测成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白表达情况,采用AnnexinV/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用Western blot检测凋亡及GRP78/PERK/CHOP通路相关蛋白表达情况。 结果: 骨髓基质干细胞经定向诱导后,符合成骨细胞形态学表现,AKP染色呈阳性反应,Ⅰ型胶原蛋白免疫组织化学染色结果显示：细胞质染色呈棕黄色;与对照组相比,LPS组细胞48 h时的吸光度（A）值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和B淋巴细胞瘤 2基因（Bcl 2）蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 3（cleaved caspase 3）、Bax、GRP78、磷酸化的PERK（p PERK）、磷酸化α亚基的真核起始因子2（p eIF2α）、CHOP蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;与LPS组相比,ICA各剂量组细胞48 h时的A值、AKP活性、Ⅰ型胶原蛋白和Bcl 2蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）,细胞凋亡率、cleaved caspase 3、Bax、GRP78、p PERK、p eIF2α、CHOP蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。     

低分子牛骨多肽制备及对大鼠成骨细胞的影响

目的从牛骨制备低分子多肽,并观察其对体外培养新生大鼠的成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法采用冷冻离心、等电点沉淀方法去除骨胶原,超滤法得到相对分子质量(Mr)10000以下的牛骨多肽,经Sephadex G-10脱盐,浓缩后用Tricine-SDS-PAGE电泳对Mr进行检测。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定牛骨多肽对成骨细胞增殖的影响,ALP检测试剂盒测定细胞的ALP活性,RT-PCR法检测细胞中Ⅰ型胶原mRNA表达。结果建立了牛骨多肽的制备方法。低浓度牛骨多肽组与实验对照组相比对成骨细胞的增殖不显著(P>0.05),高浓度具有显著的增殖作用(P<0.05),并呈现出剂量依赖性;中、高浓度(50~400μg/mL)牛骨多肽组可提高成骨细胞ALP的活性(P<0.05),低浓度组(10μg/mL)提高ALP的活性不显著(P>0.05);牛骨多肽能提高Ⅰ型胶原mRNA表达。结论牛骨多肽的制备工艺简单,适合规模化生产;牛骨多肽能促进成骨细胞增殖、ALP活性和Ⅰ型胶原mRNA的表达。     

靶控输注异丙酚不同麻醉深度对兔脑神经元型一氧化氮合酶mRNA水平的影响

目的：研究异丙酚不同麻醉深度对兔脑神经元型一氧化氮合酶（nNOS）mRNA水平的影响。方法：30只日本大耳兔,随机分为3组：对照组,浅麻醉组,深麻醉组,每组10只。浅麻醉组、深麻醉组予以异丙酚靶控输注,达到所需麻醉状态后1h断头处死。对照组行耳缘静脉注射空气造成空气栓塞后致死。动物处死后0-4℃分离取脑,原位杂交法测定小脑皮质、大脑顶叶皮质nNOS mRNA表达水平。结果：与对照组比较,异丙酚麻醉状态下明显抑制兔大脑顶叶皮质、小脑皮质nNOS mRNA表达水平（P〈0.05）。随麻醉深度的加深,小脑皮质nNOS表达水平进一步明显降低（P〈0.05）,但大脑顶叶皮质nNOS表达水平并未进一步降低（P〉0.05）。结论：异丙酚可能通过抑制nNOS活性,降低NO、环磷酸鸟苷（cGMP）水平,从而发挥麻醉作用。异丙酚对nNOS活性的抑制存在脑区差异。     

脂联素对高糖环境下hRPE活性及VEGF mRNA表达的影响

目的观察脂联素对高糖环境下人视网膜色素上皮细胞（hRPE）活性及血管内生长因子（VEGF）mRNA表达的影响,探讨脂联素对糖尿病视网膜病变（DR）可能具有的保护机制。方法①将hRPE随机分为对照组、高糖组、甘露醇组、脂联素组,培养48h后MTT法测定细胞活性。②再将hRPE分为对照组、高糖组、脂联素组,分别培养24、48、72h后用荧光定量PCR测定VEGF mRNA的表达。结果与对照组相比,甘露醇组细胞活性无明显改变（P〉0．05）,高糖组明显降低（P〈0．01）;加入脂联素后,细胞活性显著升高（P=〈0．01）。高糖组与对照组相比,mRNA表达明显上调,加入脂联素后表达呈时间依赖性下调,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论脂联素可以促进hRPE增殖,下调VEGF mRNA的表达。提示脂联素可通过下调hRPE VEGF mRNA的表达来抑制DR中病理性新生血管的形成。     

成骨生长肽对MC3T3-E1成骨细胞增殖的影响及其可能机制

目的探讨成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)对MC3T3-E1成骨细胞的增殖的影响及其机制。方法常规培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分为OGP高、中、低剂量组(1×10-8、1×10-10、1×10-12mol/L)以及对照组,利用MTT法检测OGP作用24 h、48 h以及72 h对MC3T3-E1成骨细胞增殖作用,利用免疫化学染色法检测成骨细胞I型胶原蛋白水平,ELISA法检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)含量。结果在24 h时,各剂量OGP对MC3T3-E1的增殖无影响;作用48、72 h,OGP 10-10mol/L以及OGP 1×10-8mol/L显著促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05),其中OGP 1×10-8mol/L 48 h促进MC3T3-E1细胞增殖作用最强。作用24 h,各组成骨细胞I型胶原蛋白IOD值差异均无统计学意义;作用48 h,OGP 1×10-8mol/L组细胞I型胶原蛋白IOD值显著高于对照组(P<0.05);作用72 h,OGP 1×10-10mol/L组以及OGP 1×10-8mol/L组细胞I型胶原蛋白IOD值均显著高于对照组(P<0.05)。作用24 h,各组成骨细胞OPN OD值差异均无统计学意义;作用48 h、72 h,OGP 1×10-10mol/L组以及OGP1×10-8mol/L组细胞OPN OD值显著高于对照组(P<0.05)。结论 OGP能够明显促进MC3T3-E1成骨细胞的增殖,其可能的作用机制是增加成骨细胞I型胶原蛋白的表达以及OPN的表达,且其作用与浓度密切相关,在1×10-8mol/L时,其促成骨细胞增殖作用最强。     

IL-17在幽门螺杆菌不同亚型菌株感染AGS细胞中的表达

目的：探讨人白介素-17（IL-17）在幽门螺杆菌（HP）不同亚型菌株感染AGS细胞中的表达情况,并探讨可能的作用机制。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）法检测IL-17的表达,并分析其与HP不同亚型间的关系。结果HP I型与II型分别感染AGS细胞24 h、48 h后较空白对照组差异具有统计学意义（P〈0.05）, HP I型与II型感染AGS细胞24 h后比较差异具有统计学意义（P〈0.05）, HP I型与II型感染AGS细胞48 h后比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论HP不同亚型均可诱导IL-17的表达,且HP I型更易诱导IL-17的表达。     

高糖环境中吡格列酮对MC3T3-E1成骨细胞的作用及其机制

目的观察高糖环境下吡格列酮对MC3T3-E1成骨细胞的作用并探讨其可能机制。方法高糖(22.5 mmol·L~(-1))环境培养MC3T3-E1细胞,分为对照组,吡格列酮2.5、5、10μmol·L~(-1)组,干预24、48 h。检测细胞增殖活性、凋亡率、骨钙素和碱性磷酸酶(ALP)分泌水平,以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、成骨因子runt相关基因2(Runx2)和骨形态蛋白2(BMP-2)mRNA的表达水平。并分析PPARγ、Runx2的表达与骨钙素、ALP、BMP-2的相关性。结果在相同干预时限,吡格列酮各组MC3T3-E1成骨细胞增殖活性、骨钙素和ALP的分泌水平、Runx2 mRNA和BMP-2 mRNA的表达均低于对照组,凋亡率和PPARγmRNA的表达高于对照组(P<0.05)。随吡格列酮浓度增加,细胞增殖活性、骨钙素和ALP的分泌、Runx2 mRNA和BMP-2 mRNA的表达均降低,而细胞凋亡率和PPARγmRNA的表达增高(P<0.05)。与干预24 h相比,干预48 h时相同浓度吡格列酮组细胞增殖活性,骨钙素和ALP的分泌水平,PPARγ、Runx2、BMP-2 mRNA的表达或无变化或略增加。结论高糖环境下吡格列酮对成骨细胞有损害作用,促进PPARγ表达、抑制Runx2的表达可能为其作用机制之一。     

柚皮苷对乳鼠成骨细胞增殖及c-fos、c-jun表达的影响

目的研究柚皮苷(naringin)对体外培养的小鼠成骨细胞增殖及c-fos和c-jun表达的影响。方法取第1代BALB/c小鼠颅盖骨成骨细胞,将柚皮苷以0.1、1、10μmol·L-1 3种浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,MTT法观察各组对成骨细胞的增殖作用并绘制细胞生长曲线,用PNPP法测定成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphos-phatase,ALP)活性,RT-PCR法检测成骨细胞c-fos和c-jun的转录水平。结果细胞生长曲线显示各组成骨细胞数量均随时间延长而增加,中、高浓度的柚皮苷能提高成骨细胞的ALP活性,促进c-fos mRNA表达(P<0.01),对成骨细胞c-jun mRNA表达增强作用不明显(P>0.05)。结论低浓度柚皮苷(0.1μmol·L-1)对骨更新作用不明显,而中、高浓度的柚皮苷(1、10μmol·L-1)能通过上调c-fos mRNA表达,促进成骨细胞的生成功能,增强骨更新。柚皮苷不是通过促进c-jun表达来促进成骨细胞增殖与分化的。