骨保护蛋白-核因子-κB受体活化因子配体-核因子-κB受体活化因子系统与牙萌出

牙萌出是一个复杂而且被严密调控的生理现象,需要分化成熟的破骨细胞作用于牙胚方向的牙槽骨使之形成萌出通道,而骨保护蛋白-核因子-κB受体活化因子配体-核因子-κB受体活化因子系统则可通过调节破骨细胞来调节骨的代谢。巨噬细胞集落刺激因子-1和甲状旁腺激素相关蛋白则可使核因子-κB受体活化因子配体蛋白更好地发挥促破骨细胞的分化和激活作用,以保证牙萌出时牙槽骨能被正常吸收。     

骨保护素/核因子-κB受体活化因子/核因子κB-受体活化因子配体信号分子调控牙萌出的研究进展

牙萌出是牙胚、牙槽骨以及多种类细胞系及多条通路信号分子相互作用共同调控的、复杂有序的生理过程。牙齿萌出需要在牙胚的方形成萌出通道,穿过牙槽骨和口腔黏膜到达功能位置。这一过程主要由破骨细胞直接执行,而骨保护素/核因子-κB受体活化因子/核因子κB-受体活化因子配体信号分子(OPG/RANK/RANKL)信号分子则可通过调节破骨细胞的分化与成熟来调控牙槽骨的改建,以保证牙萌出时方牙槽骨能被正常吸收。牙萌出的具体调控机制尚不明确,该文就OPG/RANK/RANKL信号分子调控牙萌出的研究现状作一综述。     

骨保护蛋白-核因子-κB受体活化因子配体-核因子-κB受体活化因子系统及其在颞下颌关节中的作用

骨保护蛋白(OPG)是骨代谢中重要的调节因子,已成为近年来的研究热点。它与核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和核因子-κB受体活化因子(RANK)构成一个关联系统,即OPG-RANKL-RANK系统,对于骨、软骨的形成、发育以及发病等起着很重要的调节作用。颞下颌关节对于维持口腔颌面部的正常形态和功能至关重要,而骨、软骨结构又是颞颌关节的重要组成成分,因此,OPG-RANKL-RANK系统对于颞颌关节的影响也不容忽视。     

核转录因子-κB受体活化因子及其配体和骨保护蛋白系统在骨构建与骨改建中的作用

核转录因子-κB受体活化因子配体(RANKL)-核转录因子-κB受体活化因子(RANK)-骨保护蛋白(OPG)系统是近年发现的调节骨吸收的关键信号通路.RANKL与RANK结合在正常骨构建与骨改建中调节破骨细胞生成、活化和存留,在多种病理状况下增加骨吸收.OPG与RANK竞争性地结合RANKL,以防止骨组织的过度吸收.笔者分别就RANKL、RANK和OPG及其在骨构建与骨改建中的作用作一综述.     

核因子-κB受体活化因子配体在大鼠正畸牙压力侧牙周组织中的表达

目的：探讨正畸牙移动中，压力侧牙周组织中核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的表达在破骨细胞诱导和骨改建中的作用。方法：建立大鼠正畸牙移动模型，对压力侧牙周组织中RANKL蛋白的表达及破骨细胞的生成进行检测。结果：TRAP( )破骨细胞在牙移动第3、5和7天时数量明显增多；免疫组化检测显示牙周成骨细胞、骨衬里细胞、牙周纤维细胞和位于骨陷窝内的破骨细胞，是表达RANKL的主要细胞。与对照组RANKL持续弱阳性表达比较，实验组RANKL在正畸牙移动第3、5和7天时出现强阳性表达，其表达变化与破骨细胞的数量变化较为一致。结论：在大鼠正畸牙移动中，RANKL可能在压力侧牙周组织破骨细胞的形成和骨改建中发挥了重要作用。     

核因子κB受体活化因子配体、护骨素在不同年龄男性下颌骨的表达

目的:观察核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、护骨素(OPG)在不同年龄男性下颌骨的表达。探讨RANKL、OPG与男性牙槽骨骨质疏松的关系。方法:选取湘雅医院2008年5月—2009年7月口腔门诊拔牙去骨及病房正颌外科手术男性患者46例。排除牙周病、影响骨代谢的全身系统性疾病及药物服用史,无抽烟、酗酒等不良生活习惯。分为3组,其中青少年组10～29岁,17例,中年组30～59岁,15例,老年组60～89岁,14例。采用RT-PCR方法,观察下颌骨RANKL、OPG的表达。采用SPSS16.0软件包对数据进行总体方差分析和组间比较。结果:①与青少年组相比,中年组和老年组RANKL mRNA分别升高2.1倍和5.3倍,OPG mRNA分别升高3.3倍和4.8倍,差异具有显著性(P<0.05)。RANKL和OPG值与年龄呈正相关。②中年组RANKL/OPG比值低于青少年组和老年组,差异无显著性(P>0.05)。结论:①男性下颌骨RANKL mRNA和OPG mRNA水平随年龄增长而升高,RANKL和OPG值与年龄呈正相关。②中年组颌骨改建活跃,与青少年组相比,骨形成大于骨吸收;③老年组颌骨吸收与骨形成均处于低水平,骨吸收大于骨形成。     

抑制核因子-κB受体活化因子及其配体通路治疗牙周炎的研究进展

核因子-κB受体活化因子（RANK）及其配体（RANKL）在牙周炎患者的牙槽骨吸收中具有重要的作用,抑制RANKL／RANK通路,可有效抑制破骨细胞的分化和激活,从而抑制牙槽骨的吸收。骨保护蛋白（OPG）和RANKL结合,干扰RANKL和RANK的结合,从而防止骨组织的过度破坏。本文就RANKL／RANK／OPG轴、RANKL／RANK／OPG与牙周炎、抑制RANKL／RANK通路治疗牙周炎的可行性等研究进展作一综述。     

抑制核因子-κB受体活化因子及其配体通路治疗牙周炎的研究进展

核因子-κB受体活化因子(RANK)及其配体(RANKL)在牙周炎患者的牙槽骨吸收中具有重要的作用,抑制RANKL/RANK通路,可有效抑制破骨细胞的分化和激活,从而抑制牙槽骨的吸收。骨保护蛋白(OPG)可和RANKL结合,干扰RANKL和RANK的结合,从而防止骨组织的过度破坏。本文就RANKL/RANK/OPG轴、RANKL/RANK/OPG与牙周炎、抑制RANKL/RANK通路治疗牙周炎的可行性等研究进展作一综述。     

骨保护素/核因子κB受体活化因子配体在甲状旁腺激素调控下颌骨牵张成骨中的表达效应

目的 研究甲状旁腺激素（PTH）调控下颌骨牵张成骨中骨保护素（OPG）和核因子κB受体活化因子配体（RANKL）的表达,探讨PTH促进牵张成骨的作用机制。方法 建立兔下颌骨牵张成骨模型,随机分为实验组和对照组。实验组隔日皮下注射不同剂量PTH,对照组隔日皮下注射生理盐水。酶联免疫吸附法检测血清中OPG的水平,免疫组织化学法研究OPG、RANKL在下颌骨牵张成骨新骨中的表达。结果 在牵张期血清OPG水平逐渐升高;在牵张结束时,实验组OPG表达最强,与对照组比较差异有统计学意义。随固定期的延长,OPG的表达逐渐下降,而RANKL的表达逐渐增强。结论 间隙性皮下注射PTH可上调OPG表达,加速骨代谢,促进下颌骨牵张区新骨生成。     

核因子-κB受体活化因子配体在大鼠正畸牙压力侧骨改建中的作用

目的：初步探讨在正畸牙移动压力侧核因子-κB受体活化因子配基(receptor activator of nuclearfactor-κB ligand，RANKL)的表达在破骨细胞诱导和骨改建中的调节作用。方法：建立大鼠正畸牙移动模型，利用免疫组化的方法对压力侧RANKL的表达及其变化进行检测；并进一步观察了RANKL对大鼠骨髓破骨细胞形成的影响。结果：正畸牙移动压力侧组化结果显示，RANKL阳性表达位于牙周膜细胞和位于骨陷窝内的破骨细胞中，在正畸牙移动第3、5和7天时呈强阳性表达。体外破骨细胞诱导实验结果显示，在巨噬细胞集落刺激因子(macrophage clone stimulating factor，M-CSF)协同作用下，RANKL呈剂量依赖型诱导TRAP阳性细胞生成。结论：大鼠正畸牙移动中，RANKL在压力侧的表达上调有诱导破骨细胞形成的作用，并导致牙槽骨吸收。     

间歇力引起人体牙周膜细胞核因子κB受体活化因子配体高表达

正畸治疗中,间歇力因提供了牙周组织重建的调整时间而有利于牙齿的移动。为了明确间断力的作用机制,本研究观察了牙周膜细胞在间歇力和持续力作用下核因子κB受体活化因子配体(receptor activatator of NF-κB ligand,RANKL)、骨保护因子和IL-1β mRNA的表达,并通过IL-1β信号传导途径研究了压力大小与RANKL表达之间的联系。     

白细胞介素22对人牙周膜成纤维细胞核因子κB受体活化因子配体、骨保护素表达的影响

目的探讨白细胞介素22（IL-22）对人牙周膜成纤维细胞（hPDLF）表达核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、骨保护素（OPG）的影响;并进一步研究IL-22是否与牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg-LPS）具有协同刺激作用。 方法酶消化法结合组织块法原代培养hPDLF,免疫细胞化学染色法鉴定其来源;取第3~ 5代细胞给予不同浓度（0、5、10、25、50、100 ng/mL）IL-22刺激,培养24、48、72 h采用细胞计数试剂盒（CCK-8）进行细胞毒性实验;采用5、10、25 ng/mL IL-22作用于hPDLF 72 h,实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测RANKL、OPG mRNA的表达;随后选择最佳刺激浓度10 ng/mL IL-22,与1 μg/mL Pg-LPS分别或协同刺激hPDLF 72 h,实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测RANKL、OPG mRNA和蛋白水平的表达。采用单因素方差分析对数据进行统计分析。 结果50、100 ng/mL IL-22刺激hPDLF后,细胞活力明显下降（F_{24 h}= 15.17,F_{48 h}= 76.37,F_{72 h}= 24.409,P<0.05）;5、10、25 ng/mL IL-22均可上调hPDLF RANKL mRNA表达（F= 32.88,P<0.05）,但是对OPG mRNA表达无明显影响（F= 0.719,P= 0.555）;10 ng/mL组和25 ng/mL组上调RANKL mRNA表达较5 ng/mL组显著（P<0.05）;1 μg/mL Pg-LPS亦可显著上调hPDLF RANKL mRNA和蛋白水平的表达;而10 ng/mL IL-22与1 μg/mL Pg-LPS协同作用下RANKL mRNA和蛋白表达可进一步显著上调（F_mRNA= 36.67,F_蛋白= 41.24,P<0.05）,但是对OPG的表达无明显影响（F_mRNA= 0.652,P= 0.593;F_蛋白= 1.271,P= 0.313）。 结论IL-22可通过影响hPDLF表达RANKL/OPG参与牙周炎骨破坏,并且与Pg-LPS具有协同作用。     

核因子κB受体活化剂研究进展

核因子κB受体活化剂，是肿瘤坏死因子受体超家族成员，是骨保护素配体在破骨细胞上的受体，骨保护素配体通过与核因子κB受体活化剂结合，将细胞分化等信号传人破骨细胞前体内，促进其分化、融合，并促进成熟破骨细胞的激活过程。     

骨化三醇对人牙周膜细胞维生素D受体、RANKL和骨保护因子表达的调节

目的 探讨骨化三醇(又称1α,25-二羟维生素D3,以下简称VD3)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)和骨保护因子(osteoprotegerin,OPG)表达的调节作用及相关机制.方法 原代培养12个供体来源的hPDLC群,传代培养至第3代,分别以10-8 mol/L VD3(VD,组)和0.1%无水乙醇处理(对照组),6 d后用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测VDR、RANKL和OPG mRNA的表达水平.分析12个细胞群RANKL基因转录起始位点上游调控区DNA碱基序列.结果 VD3组与对照组相比,VDR mRNA表达水平显著上调(P=0.003),为对照组的(3.04±1.06)倍;RANKL mRNA表达水平显著升高(P=0.001),为对照组的9.82(0.75～119.18)倍;OPG mRNA表达水平为对照组的(94.48±39.15)%,P=0.136;OPG/RANKL比值显著下调(P=0.003),为对照组的10.36%(1.01%～138.00%).未发现RANKL基因上游调控区序列突变位点;-1832(m7984870,C/G)多态性位点基因型与RANKL mRNA的表达和调节之间无显著相关性.结论 在hPDLC中,VD3可以促进VDR mRNA的表达;VD3可显著上调RANKL mRNA的表达从而降低OPG/RANKL比值,而对OPG mRNA的表达水平影响较小.在VD3作用下,细胞群间RANKL mRNA表达的差异性可能与RANKL基因上游调控区碱基序列无关.     

核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化

目的　慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见,牙周膜干细胞（PDLSCs）的外泌体（Exo）对骨吸收的作用和影响尚不明确,本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法　分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs,通过流式细胞术检测表面标记物;通过差速离心分别提取2种细胞的Exo,即Exo-WT和Exo-CP,并通过Western blot、透射电子显微镜（TEM）、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征;通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分;通过酶联免疫吸附（ELISA）验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、白细胞介素（IL）-1α、转化生长因子β（TGF-β）、骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达水平;将10、100、1 000 μg·mL^-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨分化相关指标表达情况;采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果　Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关;ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α,低表达TGF-β1、BMP-2（P<0.05）;Exo-CP作用于RAW264.7,显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平,TRAP染色可见分化的破骨细胞,且呈现浓度依赖性,100、1 000 μg·mL^-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL^-1浓度组（P<0.05）。结论　慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起,Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α,本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。     

甲状旁腺激素对人牙囊前体细胞核因子κB受体激活因子配体和骨保护素mRNA表达的影响

目的:研究不同浓度、不同作用时间的甲状旁腺激素(Parathyroid Hormone,PTH)对体外培养的人牙囊前体细胞表达核因子κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)mRNA的影响。方法:原代培养和纯化人牙囊前体细胞,取生长状况良好的第3～5代人牙囊前体细胞,与不同浓度(0.1、1、10、100 ng/mL)重组人PTH共孵育,分别用RT-PCR检测不同浓度PTH作用2 h和100 ng/mL PTH作用不同时间点人牙囊前体细胞RANKL、OPG的mRNA表达,以GAPDH作为内参,进行灰度值比较。结果:随着PTH浓度(0.1、1、10、100 ng/mL)和PTH作用时间(2、4、8 h)的增加,人牙囊前体细胞RANKL mRNA的表达逐渐增高,OPG mRNA的表达逐渐降低。不同浓度组间和不同时间之间相比,RANKL和OPG mRNA表达量均有显著性差异(P<0.05)。结论:PTH可增强体外培养的人牙囊前体细胞RANKL mRNA的表达,降低OPG mRNA的表达。     

骨保护素的生物学特性及其在口腔领域的研究进展

骨保护素(osteoprotegerin,OPG)是1997年Simonet等发现的一种能阻止破骨细胞分化,促进骨形成的关键因子。骨保护素及其配体核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL),阐明了破骨     

破骨细胞核因子κB受体活化因子配体和骨保护素在根尖周囊肿和肉芽肿中的表达及意义

目的检测破骨细胞核因子κB受体活化因子配体（RANKL）和骨保护素（OPG）在根尖周囊肿及根尖周肉芽肿中的表达水平,探讨RANKL和OPG在不同根尖周疾病周围骨质破坏机制中的作用。方法收集根尖周囊肿组织20例为囊肿组,根尖周肉芽肿组织20例为肉芽肿组,正常牙的牙周膜组织20例为对照组。采用免疫组织化学法检测RANKL和OPG在根尖周囊肿、根尖周肉芽肿和正常牙周膜组织中的阳性表达。结果在囊肿组、肉芽肿组、对照组中,RANKL的表达分别为75.00±7.54、68.40±6.74和29.40±2.46,OPG的表达分别为38.10±7.09、47.65±13.85和58.60±5.88,3组间的差异均有统计学意义（P<0.01）。相关性分析表明,囊肿组中RANKL与OPG呈负相关关系（r=-0.56,P=0.01）,肉芽肿组和对照组中RANKL和OPG无相关关系（P>0.05）。结论RANKL与OPG参与了根尖周病变引起的骨吸收过程。在根尖周病变中,RANKL和OPG的表达失调,RANKL增加而OPG减少,骨吸收活跃,导致溶骨性病变。根尖周囊肿的骨吸收活动较根尖周肉芽肿更活跃。     

核因子κB受体活化剂配体对乳牙根吸收的影响

核因子κB受体活化剂配体（RANKL）是新近发现的破骨细胞活化因子，它与核因子κB受体活化剂（RANK）、骨保护素（OPG）组成一个具有调节破骨细胞增殖、分化、融合、激活和凋亡的相关细胞因子系统。与破骨细胞生物学行为相似的破牙质细胞调节乳牙根生理性吸收，表达于该过程中的RANKL对乳牙根吸收起到一定的促进作用，且对乳恒牙替换具有调控作用。本文就RANKL对乳牙根吸收所起的作用作一综述．