CXCL12/CXCR4轴通过调节自噬促进乳腺癌细胞对多柔比星的化疗抗性北大核心CSCD

目的:探究CXCL12/CXCR4轴在乳腺癌细胞多柔比星(Dox)化疗抗性中的作用及相关机制。方法:体外培养乳腺癌细胞系MCF-7,通过MTT实验检测在CXCL12作用下乳腺癌细胞对Dox的敏感性变化,RT-PCR和Western blot检测上述细胞中CXCL12受体CXCR4与CXCR7的mRNA及蛋白的表达水平;采用siRNA干扰技术靶向沉默乳腺癌细胞中CXCR4表达,RT-PCR和Western blot检测转染效率后,依次使用MTT、Annexin V-FITC/PI流式细胞术及Western blot明确在CXCL12作用下沉默CXCR4表达对Dox介导的乳腺癌细胞的抑制率,凋亡、自噬及PI3K/Akt信号通路表达的影响。结果:CXCL12能够通过促进CXCR4的表达,提高乳腺癌细胞对Dox的化疗抗性;转染siRNA能够显著抑制乳腺癌细胞中CXCR4的mRNA及蛋白的表达水平;而沉默CXCR4能显著改善CXCL12作用下的乳腺癌细胞对Dox的敏感性,提高Dox诱导的细胞凋亡率,并通过抑制自噬相关蛋白LC3B与Beclin1表达,下调乳腺癌细胞中的自噬水平;同时,沉默CXCR4能通过抑制PI3K/Akt信号通路中PI3K蛋白表达及Akt蛋白磷酸化水平,下调抗凋亡蛋白BCL-2,促进凋亡相关蛋白Bax与cleaved Caspase-3表达。结论:CXCL12/CXCR4在乳腺癌细胞Dox耐药性中具有重要作用,而沉默CXCR4表达能通过下调MCF-7细胞的自噬水平,提高Dox诱导的细胞凋亡,从而改善肿瘤细胞对Dox的敏感性。     

CXCL12、CXCR4、MMP-2在宫颈鳞癌组织的表达及意义

目的探讨趋化因子CXCL12与其受体CXCR4及金属蛋白酶MMP-2在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测50例宫颈鳞癌组织及50例癌旁正常组织中CXCL12、CXCR4、MMP-2的表达。结果 CXCL12、CXCR4、MMP-2在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率(68.0%、72.0%、78.0%)明显高于正常宫颈组织(12.0%、24.0%、30.0%),在中/低度分化的宫颈鳞癌组织阳性表达率分别为84.4%、75.0%、87.5%。CXCL12、CXCR4、MMP-2在宫颈鳞癌淋巴结转移组中阳性表达率(86.2%、82.8%、79.3%)也明显高于无淋巴结转移组(52.4%、57.1%、52.4%)。在宫颈鳞癌组织中CXCL12与CXCR4、MMP-2表达都呈正相关(r=0.355,P=0.004;r=0.310,P=0.036);MMP-2与CXCR4表达也呈正相关(r=0.297,P=0.042)。结论 CXCL12和受体CXCR4、MMP-2与宫颈鳞癌的病变进展和转移密切相关,可能对宫颈鳞癌的预后和复发具有指导意义。     

CXCL12／CXCR4对胰腺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨CXCLl2／CXCR4生物轴对胰腺癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响。方法体外培养胰腺癌细胞系Miapaca-2,将其分为对照组、CXCLl2组和AMD3100组。（1）采用RT—PCR检测胰腺癌细胞中CXCLl2、CXCR4、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和人尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）mRNA的表达水平;（2）采用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;（3）采用Transwell侵袭实验检测CXCLl2／CXCR4对胰腺癌细胞趋化活性的影响。结果胰腺癌细胞系Miapaca-2中CXCLl2mRNA未见表达,而CXCR4mRNA在胰腺癌细胞中有表达。MMP-2、MMPO和uPAmRNA在AMD3100组、对照组和CXCLl2组中的表达水平呈递增趋势,差异具有统计学意义（P〈0．05）。胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力在CXCLl2组明显增强,而在AMD3100组得到了有效的抑制,组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论趋化因子CXCLl2及其受体CXCR4所构成的生物轴对胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力发挥着重要的作用。     

CXCL12(SDF-1)-CXCR4及CXCL12-CXCR7与胃癌相关性研究进展

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,远处转移是其预后不良的主要原因.既往研究认为CX-CR4是趋化因子CXCL12的唯一受体,CXCL12/CXCR4轴在胃癌的发生发展过程中起着重要作用,然而最近研究表明CXCL12尚存在CXCR7这一新的受体,并且CXCL12/CXCR7轴同样对肿瘤的发生发展起重要作用.     

胃癌组织中CXCL12和CXCR4的表达及意义

目的观察趋化因子CXCL12及其特异性受体CXCR4在人胃癌组织中的表达,探讨其与临床病理参数、预后的关系。方法选择120例胃癌标本,应用免疫组化SP法检测CXCL12和CXCR4在人胃癌组织中的表达,分析CXCL12和CXCR4的表达与患者临床病理参数、术后生存率之间的关系。结果胃癌组织及正常胃黏膜组织中均可检测到CXCL12、CXCR4的表达,但胃癌组织中的表达水平均明显高于正常胃黏膜组织,表达差异有显著性(P<0.05)。CXCL12阳性与CXCR4阳性呈正相关(r=0.276,P<0.05)。胃癌CXCL12和CXCR4的表达水平与肿瘤细胞淋巴结转移及分化程度密切相关(P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤的大小、浸润深度及远处转移等无关(P>0.05)。CXCL12和CXCR4阳性表达的患者其五年生存率明显低于其阴性表达的患者。结论胃癌中CXCL12和CXCR4的高表达与胃癌的生物学行为及预后密切相关,检测其表达对预测胃癌的转移及判断预后有一定价值。     

CXCL12/CXCR4生物学轴对骨髓间充质干细胞修复脊髓损伤的影响

背景：研究发现不同途径移植骨髓间充质干细胞均能向脊髓损伤部位迁移,进而发挥治疗作用。 目的：探讨CXCL12/CXCR4生物学轴对骨髓间充质干细胞趋向脊髓损伤部位迁移的作用。 方法：采用改进的脊椎骨破坏法制备脊髓损伤模型。假手术组只打开皮肤,不损伤脊髓且不作任何干预;模型组于造模后第2天采用腰骶鞘内注射5 μL生理盐水;细胞移植组于造模后第2天采用腰骶鞘内移植5 μL骨髓间充质干细胞。 结果与结论：①荧光显微镜下可见,横切的脊髓损伤局部有大量的标记细胞聚集,而在损伤部位远端1 cm处,仅见少量的标记骨髓间充质干细胞。②骨髓间充质干细胞表达中等水平的趋化因子CXCL12,其特异性结合受体CXCR4也有低水平表达。③脊髓损伤7 d后,局部CXCL12表达增强,主要集中在脊髓损伤部位的皮质区域,而在损伤部位1 cm以外的脊髓组织未见大量表达的CXCL12。CXCR4蛋白表达没有明显的时间效应。④检测CXCL12 mRNA的转录水平发现细胞移植组的CXCR4转录水平明显高于假手术组和模型组,损伤后14 d脊髓损伤局部CXCL12的转录水平最强,21 d时降低,CXCL12的局部转录水平明显高于远端。⑤脊髓损伤部位也表达趋化因子CXCR4,但其表达水平没有时程差异。损伤局部的CXCR4转录水平略高于远端,但差异无显著性意义。说明CXCL12/CXCR4生物学轴参与骨髓间充质干细胞向脊髓损伤区域迁移。     

CXCL12α和CXCL12β促进培养的LX-2肝星状细胞迁移

目的探讨C-X-C趋化因子配体12α(CXCL12α)和CXCL12β对肝星状细胞迁移的影响。方法体外培养LX-2肝星状细胞,分为正常对照组、10ng/mL血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)组、(50、100、200)ng/mL CXCL12α组、(50、100、200)ng/mL CXCL12β组。采用TranswellTM法检测CXCL12α和CXCL12β对LX-2细胞迁移能力的影响;外源性CXCL12刺激LX-2细胞,用Western blot法检测C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达。结果 TranswellTM实验结果显示各组迁移的LX-2细胞个数分别为:正常对照组(66.33±11.43)、PDGF-BB组(127.47±31.68)、50ng/mL CXCL12α组(106.13±12.94)、100ng/mL CXCL12α组(125.87±17.00)、200ng/mL CXCL12α组(137.07±21.03)、50ng/mL CXCL12β组(103.80±11.26)、100ng/mL CXCL12β组(122.33±19.46)、200ng/mL CXCL12β组(124.40±15.16)。CXCL12α和CXCL12β均可促进LX-2细胞迁移;且随着CXCL12α和CXCL12β浓度增加,LX-2细胞迁移增强。LX-2细胞可表达CXCR4蛋白,外源性CXCL12刺激LX-2细胞后,CXCR4蛋白表达无变化。结论 CXCL12α和CXCL12β均可促进肝星状细胞迁移。     

CXCR4与肿瘤的发生和发展

趋化因子受体-4（chemokinereceptor-4,CXCR4）属趋化因子家族,为G蛋白偶联的7次跨膜受体蛋白,基质细胞衍生因子-12是该受体的唯一配体。目前发现CXCR4在23种不同类型肿瘤中均有表达,与肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移及预后密切相关,针对CXCR4靶向治疗可望成为肿瘤基因治疗研究的新热点。     

CXCL12-CXCR4/CXCR7轴信号传导通路与肿瘤细胞生物学特性的关系

越来越多的研究表明CXCR4与CXCR7在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用,CXCR4与CXCR7作为G蛋白藕联受体介导的信号传导通路及其在胞内激化级联信号通路与肿瘤发生发展的分子机制有密切关系。本文将对它们各自介导的信号通路及其在胞内的级联信号通路与肿瘤细胞的生长、增殖、黏附和迁移等生物学特性的关系进行综述。     

二十碳五烯酸对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响

目的:探讨二十碳五烯酸（EPA）对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响。方法:用EPA处理HER2阳性乳腺癌细胞,检测EPA对HER2阳性乳腺癌细胞的细胞毒性作用。Annexin V/PI分析EPA诱导的细胞存活率下降是否因细胞死亡增加而发生。EPA处理后检测细胞焦亡通路中关键分子标志物的表达状态。结果:EPA处理HER2...     

乳腺癌病人抗HER2／neu阳性血清的筛选

ＨＥＲ2 /ｎｅｕ是一种原癌基因 ,编码的ｐ185跨膜糖蛋白具有受体酪氨酸激酶活性 ,属于表皮生长因子 (ＥＧＦ)受体家族中的成员。ＨＥＲ2 /ｎｅｕ基因的扩增和 /或ｐ185蛋白的过度表达可见于 2 0 %～ 4 0 %的乳腺癌病人[1] 。抗ＨＥＲ2 /ｎｅｕ胞外区的抗体可抑制肿瘤细胞的生长 ,而用于临床乳腺癌的治疗[2 ,3] 。本文旨在探索乳腺癌病人体内对ＨＥＲ2 /ｎｅｕ蛋白的体液免疫应答 ,分析其对细胞增殖的影响。1　材料与方法1 1　细胞株　见参考文献 [2 ]。1 2　研究对象　住院手术确诊为乳腺癌患者 14例 ,均为女性 ,其中 12例为浸润性导管癌 ,…     

CXCL12对大鼠海马培养细胞GABA和乙酰胆碱分泌的影响及其机制

目的:观察CXCL12对体外培养的海马神经细胞神经递质γ-氨基丁酸(GABA)和乙酰胆碱分泌的影响,并探讨其受体机制。方法:通过免疫荧光组织化学染色方法观察CXCL12和其受体CXCR4在细胞内的定位;ELISA方法分别检测海马神经细胞在体外培养过程中CXCL12的分泌变化、CXCL12对海马神经细胞神经递质分泌的影响、以及用CXCR4阻断剂(AMD3100)阻断CXCR4后神经递质释放的变化。结果:CXCL12主要分布在海马神经细胞的细胞浆内,细胞膜上也有表达,其受体CXCR4主要表达在海马神经细胞的细胞膜上;在海马神经细胞体外培养过程中,随时间延长(1、3、5、7、10 d),CXCL12的分泌逐渐减少;采用50 ng/ml的CXCL12作用于海马神经细胞后,随着培养时间的延长,GABA和乙酰胆碱的分泌出现不同的变化,其中乙酰胆碱的分泌逐渐增加,而GABA的分泌则呈现一过性下降又短暂轻微升高的趋势;通过AMD3100阻断其受体CXCR4,则乙酰胆碱分泌减少,但GABA的分泌增加。结论:CXCL12通过CXCR4受体引起乙酰胆碱分泌增加,GABA分泌减少。这些现象表明CXCL12可以作为一种重要的神经生长因子刺激GABA和乙酰胆碱的分泌。     

IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡能力的影响北大核心CSCD

目的:探究过表达IL-24对乳腺癌细胞CXCR4表达及肿瘤细胞侵袭、迁移及凋亡的影响与机制。方法:免疫组织化学染色(IHC)检测乳腺癌与癌旁正常乳腺组织CXCR4与其配体CXCL12表达,并分析其相关性;Western blot检测CXCR4在人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453和MDA-MB-231中的表达;采用慢病毒稳转技术在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中过表达IL-24,免疫荧光显微镜、RT-PCR和ELISA检测感染效率;将细胞分为5组:LV-IL-24组(感染过表达IL-24慢病毒)、LV-NC组(感染阴性对照慢病毒)、AMD3100组(采用CXCR4/CXCL12轴阻滞剂AMD3100进行培养)、LV-IL-24+AMD3100组(采用AMD3100进行培养的感染过表达IL-24慢病毒的细胞)、阴性对照组(正常培养的MDAMB-231细胞);Transwell、划痕实验和Annexin V-FITC细胞凋亡实验检测上述各组细胞侵袭、迁移及凋亡;Western blot检测各组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平及凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达。结果:CXCR4与CXCL12在乳腺癌组织中的表达均显著高于正常乳腺组织,且二者表达呈正相关;与MCF-10A细胞相比,CXCR4在乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-453及MDA-MB-231中表达明显增加(P<0.05),以MDA-MB-231最为显著(P<0.01)。转染过表达IL-24的慢病毒后,MDA-MB-231细胞IL-24 mRNA与蛋白表达均显著增加(P<0.05);与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞侵袭、迁移能力均显著降低(P<0.05),而凋亡率明显提高(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01);Western blot结果显示,与阴性对照组相比,LV-IL-24组、AMD3100组和LV-IL-24+AMD3100组细胞CXCR4、AKT与mTOR蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.05),而凋亡相关蛋白Bax与cleaved-Caspase-3表达明显增加(P<0.05),LV-IL-24+AMD3100组变化最为显著(P<0.01)。结论:乳腺癌细胞中过表达IL-24可抑制CXCR4表达,通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路降低肿瘤细胞侵袭、迁移能力,促进其凋亡,联合使用CXCR4/CXCL12阻滞剂AMD3100可显著提高IL-24的上述抑癌效应。     

同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响

背景:趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在狼疮肾炎的发病中起到一定作用,探究骨髓间充质干细胞对狼疮小鼠肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响对于进一步研究狼疮肾炎的发病机制以及骨髓间充质干细胞对狼疮肾炎的治疗机制有一定意义。目的:探讨同种异体骨髓间充质干细胞输注对MRL/lpr狼疮鼠外周血和肾脏CXCL12/CXCR4表达的影响。方法:分离培养C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,扩增至第3代,细胞浓度为1×10⁹ L^-1。选取四五周龄雌性MRL/lpr小鼠15只,分为MRL/lpr组(未进行尾静脉输注)、PBS组(12周龄末注射PBS)、骨髓间充质干细胞组(12周龄末注射骨髓间充质干细胞),每组5只,另选取5只C57BL/6小鼠为正常对照。各组小鼠在20周龄末处死,采用ELISA法检测各组小鼠外周血血浆中CXCL12的表达;流式细胞分析外周血、肾脏中B淋巴细胞表面CXCR4的表达;免疫组化染色观察肾脏中CXCL12的表达;苏木精-伊红染色观察肾脏病理变化。结果与结论:(1)与C57BL/6组相比,MRL/lpr组狼疮鼠外周血血浆和肾脏中C...     

趋化因子基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4

趋化因子及其受体在免疫和炎症反应、造血以及HIV感染等方面发挥重要作用,其中基质细胞衍生因子-1SDF-1及其受体CXCR4由于在造血干细胞迁移、归巢以及HIV感染中的作用而受到关注,并对其作用机制进行了探讨,现就SDF-1及其受体CXCR4的有关内容作一综述。     

Roles of Chemokine Receptor 4 （CXCR4） and Chemokine Ligand 12 （CXCL12） in Metastasis of Hepatocellular Carcinoma Cells

Chemokines are involved in human hepatocellular carcinoma （HCC） carcinogenesis. However, the exact mechanism of chemokines in HCC carcinogenesis remains unknown. Here we investigated the roles of chemokine receptor 4 （CXCR4） and chemokine ligand 12 （CXCL12） in the metastasis of HCC. We found that the expression levels of CXCR4 mRNA in HCC tissues, MHCC97 cells, and HUVEC cells were 2.52 ±1.13, 2.34 ±1.16 and 1.63 ±1.26, respectively and that the CXCR4 protein levels were 1.38 ± 0.13, 1.96± 0.32 and 1.86 ±0.21, respectively. In contrast, CXCR4 was not detected in normal hepatic tissues. In 78 HCC patients, we also found that the concentration of CXCL12 in cancerous ascitic fluid was 783-8,364 pg/ml and that CXCL12 mRNA level in HCC metastasis portal lymph nodes was 1.21 ± 0.87 but undetectable in normal hepatic tissues. Finally we discovered that recombinant human CXCL12 could induce MHCC97 cells and HUVEC cells to migrate with chemotactic indexes （CI） of 3.9 ±1.1 and 4.1± 1.6, respectively. Cancerous ascitic fluid could also induce the migration of MHCC97 cells with a CI of 1.9 ± 0.8. Thus, our data suggest that CXCR4 and CXCL12 may play an important role in the metastasis of HCC by promoting the migration of tumor cells.     

CXCL12/CXCR4在胶质瘤侵袭性生长中的作用

胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤,约占成人颅内肿瘤的45％-60％,呈侵袭性生长并且术后容易复发,病死率较高。随着分子病理学的发展,对胶质瘤细胞的表面受体、趋化因子、生长因子、癌基因、抑癌基因等的变化及其引起的信号转导和效应都有了进一步的认识。研究表明趋化因子及其受体在乳腺癌、卵巢癌等多种肿瘤有表达,与肿瘤的生长、侵袭、转移、血管形成存在密切关系,其中CXCL12／CX—CR4生物学轴（CXCL12／CXCR4 biological axis）在肿瘤发生发展中起主要作用。现将CXCL12／CXCR4在脑胶质瘤侵袭性生长中作用的研究进展综述如下。     

趋化因子CXCL1及受体CXCR2在骨癌痛小鼠背根神经节中的表达变化

目的:观察骨癌痛小鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中趋化因子CXCL1和受体CXCR2的表达变化。方法:单侧股骨内注射前列腺癌细胞RM-1诱导小鼠产生骨癌,用行为学检测小鼠抬爪次数和缩爪时间自发痛情况,用实时定量PCR和免疫荧光染色技术观察小鼠DRG中CXCL1和CXCR2的表达变化和细胞定位。结果:骨癌组小鼠的抬爪次数和缩爪时间,从术后10 d开始均较对照组明显上升(P0.05),并持续到21 d以上。骨癌组小鼠同侧L3-5 DRG中CXCL1和CXCR2 mRNA在手术后7 d时表达较正常小鼠明显增加(P0.05),并能持续到21 d以上。CXCL1和CXCR2表达于DRG神经元内,骨癌组同侧L3-4 DRG中CXCL1和CXCR2阳性神经元在手术后7,14 d和21 d时较正常组明显增多(P0.05)。结论:骨癌小鼠DRG中CXCL1和CXCR2表达增加,DRG中的CXCL1及其受体CXCR2可能参与骨癌痛的调节。     

白介素-24通过干扰CXCL12/CXCR4轴抑制宫颈癌细胞迁移和侵袭的机制研究

目的 探究白介素-24(IL-24)靶向CXCL12/CXCR4轴抑制宫颈癌细胞迁移及侵袭的作用机制。方法 体外培养正常子宫颈上皮细胞HcerEpic及宫颈癌细胞系Hela、Siha、Caski、C-33A,应用RT-PCR与Western blot检测上述细胞中CXCR4的mRNA和蛋白表达水平。将Hela细胞分为Control组(细胞正常培养,无任何特殊处理)、CXCL12组(细胞用100 ng/mL CXCL12处理)、CXCL12+LV-NC组(细胞感染LV-NC后使用100 ng/mL CXCL12处理)、CXCL12+LV-IL-24组(细胞感染LV-IL-24后使用100 ng/mL CXCL12处理)、CXCL12+AMD3100组(联合使用100 ng/mL CXCL12及1μg/mL AMD3100处理细胞)、CXCL12+AMD3100+LV-IL-24组(细胞经LV-IL-24感染后联合100 ng/mL CXCL12与1μg/mL AMD3100处理)。划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测各组宫颈癌细胞的迁移、侵袭能力;Western blot检测CX...