寨卡病毒NS1单克隆抗体制备及其在临床诊断中的应用

目的 用寨卡病毒非结构蛋白NS1免疫小鼠并制备鼠源单克隆抗体,建立捕获ELISA方法检测寨卡病毒NS1蛋白.方法 合成NS1基因序列构建真核表达载体pcDNA3.1-NS1,转染HEK293细胞收集上清,经Ni+柱亲和层析法纯化NS1蛋白.以纯化的NS1重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取脾脏进行细胞融合,筛选阳性细...     

抗寨卡病毒包膜蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

目的 制备抗寨卡病毒(zika virus,ZIKV)包膜蛋白(envelope protein,E蛋白)单克隆抗体,检测其免疫反应特异性.方法 将ZIKV重组E蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞用50％聚乙二醇(PEG)融合,经过含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基筛选出阳性克隆,采取有限稀释法获...     

2020年全球传染病重要疫情事件回顾

2020年,新型冠状病毒肺炎疫情全球大流行,导致8000万人患病,170万人死亡。脊髓灰质炎疫情继续扩大,阻碍了全球消灭脊髓灰质炎的目标。非洲埃博拉疫情被扑灭。登革热疫情较上一年明显缓解。年底欧洲和亚洲暴发H5N8禽间禽流感疫情。本文对2020年重要传染病疫情事件进行回顾。     

寨卡疫情与防治研发进展

目的通过对寨卡疫情及疾病特点、全球防治研发进展等进行梳理分析,为从整体上了解把握寨卡疫情及防治研发情况提供参考。方法追踪分析世界卫生组织公布的寨卡疫情及应对措施,并基于Cortellis数据库和其他文献资料公布的相关情况进行系统分析。结果 2014年以来,寨卡疫情主要在拉丁美洲和加勒比海国家大肆流行,波及全球69个国家和地区;寨卡病毒与小头畸形新生儿等神经系统性疾病有关联,但目前对寨卡病毒的感染机制、临床症状及发病机制等尚缺乏足够的认识;美、欧等一些传统科技强国对寨卡病毒的防治研发十分重视,已取得一些实质性的进展。结论对寨卡疫情应高度重视,应加大其防治研发力度,为国家生物安全提供强有力的技术保障。     

单克隆抗体制备技术及应用的研究进展

1975年，Kohler和Milstein创立了杂交瘤技术制备单克隆抗体，近年来随着分子生物学和细胞生物学的发展，单克隆抗体技术的应用已日益普及，单抗的方法论几乎已经应用到生物学研究的每一个区域。单克隆抗体制备技术的发展也就显得尤为重要。     

传染病防控体系建设进展与分析

传染病严重威胁人民群众健康,尤其是近年来新发突发传染病不断出现,给国家经济和人民生活带来极大影响。从2003年严重急性呼吸综合征（severe acute respiratory syndrome, SARS）疫情至今,国内已经陆续经历了甲型H1N1流感、H7N9型禽流感等多次疫情考验。目前,我国已经逐步建立了较为完备的传染病防控体系。在此次应对新型冠状病毒肺炎疫情中,上述防控体系发挥了重要作用,但同时也暴露出一些不足。本文将从SARS疫情、禽流感疫情和新型冠状病毒肺炎疫情等方面分析国家传染病防控体系的进展和不足,为未来防控体系完善提供参考意见。     

对单克隆抗体制备技术及应用研究进展的认识

单克隆抗体是现代生命科学研究的重要内容,本文对单克隆抗体的类别进行了简单分析,并且明确指出了现阶段应用的多种单克隆抗体制备技术,同时,也对单克隆抗体制备技术的应用研究进展进行了一定的介绍,希望能够为我国生命科学研究事业的发展提供一定的理论支持.     

H7N9禽流感病毒血凝素线性B细胞抗原表位单克隆抗体的制备和鉴定

目的研制用于H7N9禽流感病毒诊断的血凝素线性B细胞抗原表位单克隆抗体。方法采用H7N9禽流感病毒血凝素特异性线性B细胞抗原表位免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术和间接ELISA法筛选、鉴定获得稳定分泌抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株;通过SDS-PAGE、间接ELISA和斑点免疫印迹技术鉴定其亚型、效价、纯度等生物学特征。结果共获得2株单克隆抗体(7C8H8和8E9E2),其中7C8H8抗体亚类为IgG2a,腹水抗体效价>1∶512000,且可以特异性结合H7N9禽流感病毒血凝素。8E9E2仅具有较低的H7N9禽流感病毒血凝素蛋白结合力。结论获得1株可分泌高效价、高特异性的抗H7N9禽流感病毒血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞株7C8H8。     

传染病预测模型的应用及研究进展

近年来新发突发传染病疫情不断出现,严重急性呼吸综合征、高致病性禽流感(Influenza in birds)、甲型H1N1流感(Influenza A)、埃博拉疫情(Ebola virus)、中东呼吸综合征、新型冠状病毒感染(COVID-19)等公共卫生事件的不断发生对人类健康和社会、经济的发展造成了严重的危害,对公共卫生领域造成了严重威胁,传染病预测模型在疫情防控中发挥着重要作用,主要应用于疫情发展传播趋势的预测、不同防控措施效果的评价、疫情风险预警以及疾病的日常监测等方面,对疫情精准防控、快速遏制起到重要作用。但目前预测模型在疫情数据的处理、场景的适用性、以及模型的准确性等方面还存在一些局限性,应增加与其他科目的交叉为流行病学发展提供新的思路。     

核酸检测在寨卡病毒病诊断上的应用

目的研究核酸检测技术测定不同样本对我国输入性寨卡病毒(Zika virus)病患者的诊断价值,探讨核酸检测寨卡病毒临床标本的适用性。方法收集医院2016年2月-10月输入性寨卡病毒病患者的血液、唾液和尿液,用于寨卡病毒核酸检测。记录和分析患者临床症状、体征和实验室检验结果。结果血液、唾液和尿液寨卡核酸首次检测阳性率分别为61.5%、76.9%和76.9%;血液、唾液和尿液的核酸总检出阳性率分别为61.5%、84.6%和100%;血液、唾液和尿液核酸阳性持续时间平均分别为2.62、5.69和11.62天,血液没有1例阳性持续时间超过1周,唾液阳性持续时间没有1例超过10天,而尿液有11例核酸阳性超过1周(其中6例超过10天)。随着病程的发展,各样本的检出率也在下降,发病后第3天和第7天采样时,血液、唾液、尿液核酸阳性率分别为25%、100%、100%和7.7%、46.2%、84.6%。少数尿液标本检测阳性有一定滞后现象。结论检测尿液中寨卡病毒核酸具有检出率高、持续时间长的优点,应作为临床诊断寨卡病毒病的主要方法,但在发病早期仍然有必要采集血液、唾液和尿液进行多样本同时检测寨卡病毒核酸。     

上海中心城区白纹伊蚊侵害状况及蚊媒传染病危险性分析

目的 了解白纹伊蚊在上海中心城区的侵害状况,分析蚊媒传染病在上海城市环境的流行与传播风险。方法 采用CO₂法在上海城区绿地与居民区环境进行连续性成蚊观察,分析白纹伊蚊种群密度及季节消长趋势特点及新变化;对城区采集的白纹伊蚊样本进行核酸提取并测序,通过与疫区伊蚊进行序列比对,分析上海城区白纹伊蚊对相关蚊媒病毒的易感性及流行风险。结果 白纹伊蚊是上海中心城区的优势蚊种,住区白纹伊蚊构成比(78.53%)高于绿地(19.99%),差异有统计学意义(χ²=15525.168,P<0.001)。白纹伊蚊在住区环境的密度[分别为11.91、42.02只/(天·观察点)]均高于绿地环境[分别为3.65、2.18、2.73只/(天·观察点)],差异有统计学意义(F=7.704,均P<0.001);2014年住区环境白纹伊蚊呈明显上升的趋势[构成比94.69%,平均密度42.02只/(天·观察点)],其中旧式里弄环境白纹伊蚊密度最高。上海市的白纹伊蚊与2005-2011年非洲开展白纹伊蚊基因分型在进化树上的遗传距离甚大。结论 上海及相邻地区不存在埃及伊蚊,但市中心白纹伊蚊侵害明显,大幅降低白纹伊蚊的侵害是控制寨卡病毒传播的关键。     

豇豆胰蛋白酶抑制剂单克隆抗体的制备及初步应用

目的　检测转豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因水稻叶片中CpTI蛋白 ,来对转CpTI基因作物的检测建立初步的方法。方法　目前国际上主要通过基因检测的方法 ,而基因的检测可能存在假阳性的结果 ,而且基因的导入并不一定代表功能蛋白的表达 ,表达含量也为未可知。因此 ,通过检测转基因蛋白含量的多少是最直接和明确的方法。通过体外基因重组技术制备的CpTI蛋白来免疫动物得到单克隆抗体 ,就可通过westernblotting法检测转基因作物中的CpTI。结果　得到三株抗CpTI的单克隆抗体 ,利用这三种单克隆抗体的混合物对转CpTI蛋白的水稻叶片进行初步检测 ,得到了较为满意的结果。结论　利用抗CpTI的单克隆抗体混合物对转CpTI的水稻叶片进行westernblotting的检测方法较好     

靶向新型冠状病毒棘突蛋白中独特B细胞抗原表位小鼠单克隆抗体的制备与应用

目的制备靶向SARS-CoV-2棘突蛋白中独特B细胞抗原表位的小鼠单克隆抗体, 并用于蛋白质免疫印迹、ELISA和免疫荧光检测(IFA)等多种方法。方法利用传统的杂交瘤单克隆抗体技术, 用间接ELISA法筛选和有限稀释法亚克隆获得稳定的阳性单克隆杂交瘤细胞株并鉴定其亚型。选取其中1株6H8体外培养后注射于SCID裸鼠腹腔产生腹水, 用蛋白A层析柱进行亲合纯化。将纯化抗体用于蛋白质免疫印迹、ELISA和IFA检测SARS-CoV-2棘突蛋白。结果共获得5株单克隆杂交瘤细胞系, 均为IgG2亚型。纯化的小鼠单克隆抗体6H8用于蛋白质免疫印迹仅特异性地识别重组表达的SARS-CoV-2棘突蛋白S1;用于ELISA能检测重组表达的SARS-CoV-2棘突蛋白的NTD区, 实验孔吸光度值为3.824;用于IFA可特异性识别瞬间表达于HEK293细胞内的SARS-CoV-2棘突蛋白, 而对瞬间表达于293T细胞内的SARS-CoV棘突蛋白则无交叉反应。结论成功制备了一株靶向SARS-CoV-2棘突蛋白中独特B细胞抗原表位的小鼠单克隆抗体, 为SARS-CoV-2抗原检测提供了有效工具。     

MPV和P-LCR及NLR参数在新型冠状病毒肺炎中应用的研究

本研究探讨平均血小板体积(mean platelet volume, MPV)和大血小板比率(platelet-large contrast ratio, P-LCR)及中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio, NLR)在不同病情危重程度的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的表达水平及临床应用价值。采用回顾性分析方法, 选取天津市第三中心医院和天津市津南医院2020年1至5月收治的69例COVID-19确诊患者作为研究对象, 根据病情危重程度分为轻型组(15例)、普通型组(46 例)、危重型组(8 例), 另选取同期70例已排除新型冠状病毒肺炎感染的患者作为对照组, 分析各组白细胞总数(white blood cell count, WBC)、中性粒细胞绝对数(absolute neutrophil count, NE#)、淋巴细胞绝对数(absolute lymphocyte count, LY#)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio, NLR)、红细胞计数(red blood cell cou...     

登革热病毒四个型单克隆抗体在型别鉴定上的实际应用

本文应用登革病毒型特异性的单克隆抗体,通过间接免疫荧光法对1978--1981年我国登革热流行时期分离的14株登革病毒进行型别鉴定。结果表明1--4型的单克隆抗体,用于登革病毒鉴定具有型特异性和快速简便的优点。     

传染病预测模型在新型冠状病毒肺炎疫情中的应用研究进展

新型冠状病毒肺炎（COVID-19）在全球范围内迅速传播,快速预测COVID-19规模具有重大公共卫生意义,目前主要利用动力学模型、时间序列模型以及时空交互模型来拟合传染病资料,预测COVID-19的流行特征及发展趋势。本研究对常见传染病预测模型的应用进行综述,总结传染病预测模型在COVID-19发病趋势预测中的应用进展,为传染病预测模型在传染病疫情防控中的应用提供参考。     

糖皮质激素在新型冠状病毒肺炎中的应用进展

新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)的大流行引发了全球性的危机,危害到人们的生命与健康,迫切需要有效的治疗方法来降低COVID-19患者的并发症和病死率.但是在COVID-19的药物治疗上仍存在着争议,尤其是对糖皮质激素的应用.随着时间的推移,一些研究发现糖皮质激素的...     

重金属-螯合剂复合物McAb制备及免疫检测技术进展

环境重金属污染严重威胁人类健康 ,近年来 ,重金属的免疫检测技术已取得较大进展 ,有望成为方便可行的实用检测手段。其中利用制备抗不同重金属螯合物的单克隆抗体建立的免疫检测技术显示很好的应用前景。本文对重金属 -螯合剂复合物抗体制备及免疫检测技术新进展进行综述     

重大传染病防治科技重大专项领导小组2012年第一次会议在京召开

9月14日,“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项领导小组在京召开2012年第一次会议。会议审议了传染病专项2013年立项课题建议方案,研究并部署了下一阶段工作。会议认为传染病专项在2013年立项工作中,认真贯彻落实国家科技创新大会精神,以“培育重点产品、满足重点需求、解决重要问题”的重大任务为导向,注重科技与卫生改革发展结合,强化企业技术创新主体地位,发挥前沿技术引领作用,探索建立协同创新机制,使专项目标更加集中,重点进一步突出。     

登革2型病毒B株E基因部分序列原核蛋白表达及单克隆抗体制备

目的 通过构建登革2型病毒B株E基因区1～476 bp的原核表达载体,进行原核表达,并制备单克隆抗体,为研制登革病毒诊断试剂奠定基础.方法 将登革2型病毒B株E基因序列克隆入原核表达载体pET28a(+),构建原核表达重组体pET28a(+)-E,将重组表达载体转化BL21(DE3)菌株进行原核表达.纯化后的蛋白免疫B...