CD8和CD10在宫颈癌肿瘤浸润淋巴细胞中的表达及意义

目的研究宫颈癌肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)CD8、CD10的表达,分析其与宫颈癌临床病理特征及预后的关系,探讨影响宫颈癌患者预后的因素。方法收集所选患者完整的临床和病理资料,采用免疫组织化学染色法检测宫颈癌TIL CD8、CD10的表达情况。结果 (1)CD8在宫颈癌TIL中的表达随患者年龄的增加、临床病理分期的进展和淋巴结转移的出现而减弱(P<0.05);(2)CD10在宫颈癌TIL中的表达水平较低,且其表达与宫颈癌的临床病理特征及预后无明显相关性(P>0.05);(3)影响宫颈癌预后的因素为年龄、临床分期、CD8表达水平、有无淋巴结转移等,而与肿瘤的组织学类型无关;(4)CD8可作为宫颈癌预后的独立影响因素,且与CD10表达水平的改变不具有一致性(P>0.05)。结论宫颈癌TIL CD8的表达与患者手术时的年龄、临床病理分期及有无淋巴结转移相关,可作为宫颈癌预后的独立影响因素,但与CD10的表达无明显相关性。     

WT1特异性 CD8+ T 细胞治疗乳腺癌的实验研究

摘要： 目的 通过检测 Wilms’肿瘤基因 1 （WT1） 特异性 CD8+ T 细胞对乳腺癌细胞的杀伤活性, 探讨正常外周血中提取的 WT1 特异性 CD8+ T 细胞用于治疗乳腺癌的可行性。方法 运用流式细胞仪检测 20 例人白细胞抗原（HLA） -A2 血清阳性健康志愿者外周血中 WT1 特异性 CD8+ T 细胞的浓度, 通过 WT1/主要组织相容性复合体（MHC） 连锁状多聚体磁珠分选 WT1 特异性 CD8+ T 细胞并进行培养, 细胞毒性实验检测 WT1 特异性 CD8+ T 细胞的功能。结果 20 例 HLA-A2 血清阳性健康志愿者外周血中均可检测到 WT1 特异性 CD8+ T 细胞, 12 例健康外周血中 WT1 特异性 CD8+ T 细胞的浓度＞0.5%, 其中 4 例＞1%。WT1/MHC 连锁状多聚体磁珠分选后, 其浓度明显增加至 80%左右。WT1 特异性 CD8+ T 细胞可特异性杀伤 WT1 多肽负载的乳腺癌细胞株。结论 健康志愿者外周血中可检测到 WT1 特异性 CD8+ T 细胞, 该细胞可能对乳腺癌细胞具有特异性杀伤作用, 提示 WT1 特异性 CD8+ T 细胞用于乳腺癌过继性免疫治疗的可能性。     

BCSG1蛋白在乳腺癌组织中的表达情况及临床意义

目的：探讨乳腺癌特异基因1(breast cancer specific gene l, BCSG1)及其蛋白在乳腺癌组织中的表达情况,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系及其在乳腺癌治疗和预后中的临床意义。方法收集2010年1月—2013年1月手术获取的乳腺癌组织93例,同时选取30例乳腺腺病患者的正常乳腺组织作为对照,分别采用反转录聚合酶链反应( RT-PCR)和免疫组化法检测乳腺癌、正常乳腺组织中BCSG1 mRNA和蛋白水平的表达。根据BCSG1的表达情况分析BCSG1在乳腺癌患者中表达水平的高低与其预后的关系。结果乳腺癌组织中的BCSG1 mRNA和蛋白表达水平显著高于正常乳腺组织(P<0．05),且BCSG1蛋白的表达水平与乳腺癌临床分期和淋巴结转移呈显著相关性(P<0．05)。 BCSG1阴性表达患者1、2、3年累积复发率显著低于BCSG1阳性表达患者,且1、2、3年生存率显著高于BCSG1阳性表达患者(P<0．05)。结论乳腺癌组织中BCSG1 mRNA和蛋白异常高表达,与乳腺癌临床分期及淋巴结转移有一定的相关性,且与乳腺癌的预后呈密切相关性,可能是乳腺癌发生发展的危险因素。     

抑肽酶对脑缺血再灌注大鼠脑组织CD4~+、CD8~+T淋巴细胞表达的影响

目的:探讨抑肽酶在细胞免疫应答的干预下对脑缺血再灌注后继发性脑损伤的保护作用。方法:105只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抑肽酶组(n=35),采用大鼠大脑中动脉闭塞法制作局灶性脑缺血再灌注模型。抑肽酶组在大鼠脑缺血前24h及再灌注即刻、24h、4d、6d、8d、10d、12d、14d分别尾静脉给予抑肽酶,其余组给予生理盐水。应用免疫组织化学方法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间段CD4+、CD8+T淋巴细胞的浸润情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠在缺血再灌注损伤后各时间点脑组织内CD4+、CD8+T淋巴细胞计数均明显增加,10d达高峰;与模型组比较,抑肽酶组大鼠脑组织内CD4+、CD8+T淋巴细胞计数在缺血再灌注损伤后各时间点均更低(P<0.05),8d达高峰。结论:抑肽酶可能通过抑制CD4+、CD8+T淋巴细胞在缺血再灌注损伤后脑组织内的浸润而减少细胞免疫应答介导的神经元凋亡,从而减轻脑组织继发性损伤。     

无症状期艾滋病HIV感染者CD+4 CD+8 T淋巴细胞检测结果分析

目的分析本地区人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者免疫力被破坏情况,制订相应的艾滋病(AIDS)防治方案.方法对1344例无症状HIV感染者进行CD+4、CD+8 T淋巴细胞检测.结果发现18例免疫力极度低下(CD+4＜30个/mm3)的处于无症状期的HIV感染者,其CD+8T淋巴细胞值≥(400～800个/mm3).结论无症状的HIV感染者中存在着免疫力极度低下者,由于高水平的CD+8T淋巴细胞的抗病毒作用而使之处于无症状期,但其免疫系统已严重受损,任何机会性感染都会诱发他们发展为AIDS.测定其CD+4、CD+8T淋细胞作为预见HIV感染状态和进展为AIDS的重要参考指标,具有不可替代的作用.     

CD8~+ T淋巴细胞对HIV感染者生存质量的作用

目的分析探讨CD8+ T淋巴细胞对HIV感染者生存质量的作用,为提高患者的生存质量和免疫重建提供思路。方法对844例感染HIV病毒14年以上的艾滋病感染者和艾滋病患者,进行CD4+和CD8+ T淋巴细胞检测。结果发现25例长期感染者,CD4+ T细胞低下≤200个/mm3个,但CD8+ T细胞≥800个/mm3,他们没有并发症状,身体基本健康,生存质量明显高于有并发症的艾滋病患者。结论高水平的CD8+ T淋巴细胞,对于感染者抵抗并发症状,提高生存质量可能起到非常重要的作用,提示CD8+ T淋巴细胞在患者免疫重建和对抗击HIV病毒可能起到了重要的作用。     

乳腺癌和导管内增生性病变CD105的表达及其临床意义

目的 探讨CD105在乳腺癌和乳腺导管内增生性病变中的表达及其作为肿瘤新生血管标志物的临床价值.方法 检测70例乳腺癌、64例乳腺导管内增生性病变和18例正常乳腺组织中CD105及三种促血管生成因子VEGF、bFGF和PDGF的表达,并对其与临床病理因素进行分析.结果 CD105标记的微血管密度(MVD)各组间差异均有统计学意义,病变区周围MVD明显高于病变区内的MVD,差别具有统计学意义;组织学分化程度低、临床TNM分期高、淋巴结转移阳性以及VEGF、bFGF和PDGF表达阳性的患者中,CD105表达明显升高,差别均有统计学意义.结论 CD105主要在处于增殖状态的血管内皮细胞上表达,在标记肿瘤组织新生血管方面的特异性优于泛血管内皮细胞标志物,可作为乳腺癌预后的重要指标之一.     

程序性死亡受体1的检测方法及其在乳腺癌中表达的研究进展

近年来,肿瘤的免疫治疗已成为继传统手术、放疗、化疗、内分泌治疗和靶向药物治疗手段之后新的治疗方法,尤其以程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)位靶点的免疫检查点抑制治疗使得非小细胞肺癌、黑色素瘤等恶性实体肿瘤患者获得了有效持久的临床获益.PD-L1的检测是免疫检查点抑制剂治疗的关键环节,但在乳腺癌...     

Dual inhibition of STAT1 and STAT3 activation downregulates expression of PD-L1 in human breast cancer cells

Objectives: Breast cancer is the most commonly diagnosed cancer, and it is a leading cause of cancer-related deaths in females worldwide. Triple-negative breast cancer (TNBC) constitutes 15% of breast cancer and shows distinct metastasis profiles with poor prognosis. Strong PD-L1 expression has been observed in some tumors, supporting their escape from immune surveillance. Targeting PD-L1 could be a promising therapeutic approach in breast cancer patients. We investigated potential molecular mechanisms for constitutive expression of PD-L1 by inhibiting upstream STAT1 and STAT3 signals.

Methods: PD-L1 expression in three breast cancer cell lines was measured using quantitative PCR and western blotting. Activation of STAT1 and STAT3 was blocked using pharmacological inhibitors and siRNA. The mechanism underlying the constitutive expression of PD-L1 was investigated using ChIP and co-immunoprecipitation assays.

Results: We found that individual inhibition of STAT1 and STAT3 activation partially downregulated PD-L1, while combined inhibition completely downregulated PD-L1 expression. Moreover, our results suggest that pSTAT1-pSTAT3 dimerize in cytosol and translocate to the nucleus, where they bind to PD-L1 promoter and induce PD-L1 expression.

Conclusion: These findings provide a rationale for combined targeting of STAT1 and STAT3 for the development of immune-based cancer therapies for down regulation of PD-L1 expression.     

Co-immunizing with PD-L1 induces CD8+ DCs-mediated anti-tumor immunity in multiple myeloma

Tumor therapeutic vaccines have faced a challenge for effective protection against malignant tumors by inducing tumor-specific CD8⁺ T cell responses. Here, we designed a DNA vaccine containing a tumor-specific antigen of Dickkopf-1 (DKK-1) and an immune checkpoint of programmed death ligand 1 (PD-L1) delivered by PLGA/PEI nanoparticle-mediated delivery system for multiple myeloma therapy. Murine subcutaneous tumor model established with human DKK1 (hDKK-1)-SP2/0 cells were intramuscularly immunized with PLGA/PEI-pPD-L1/pDDK-1 vaccine and equal amount of control 3 times at 10 day-intervals. Compared with PLGA/PEI-pDKK1 immunization group, PLGA/PEI-pPD-L1/pDKK-1 co-immunization enhanced the induction and mature of CD11c⁺ DCs and CD8⁺CD11c⁺ DCs, and promoted antigen-specific Th1 responses and cytotoxic T lymphocyte (CTL) responses. The reduced tumor volume and weight as well as increased tumor inhibition rate were observed in PLGA/PEI-pPD-L1/pDKK-1 vaccine co-immunization group, indicated that the vaccine could effectively inhibit the tumor growth of multiple myeloma. The anti-tumor activity of PLGA/PEI-pPD-L1/pDKK-1 vaccine was abrogated by CD8 cell depletion accompanied with the reduced percentages of CD8⁺CD11c⁺ DCs and CD8⁺ T cells in the spleen and TILs. These results indicated that the anti-tumor efficacy of PLGA/PEI-pPD-L1/pDKK-1 vaccine was required for CD8⁺CD11c⁺ DCs-mediated CD8⁺ T cell immunity responses. This vaccine strategy may represent a potential and promising approach for hematological malignancy treatment.     

乳腺癌组织中CD133和VEGF的表达及意义

目的 研究CD133及血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学方法检测109例乳腺癌组织中的CD133及VEGF的表达,并对结果进行分析.结果 乳腺癌组织中CD133和VEGF蛋白的表达率分别是46.8%(51/109)和84.4%(92/109),其阳性表达率随肿瘤病理级别的升高而明显增加(P＜0.05).乳腺癌Basal-like亚群中CD133蛋白的阳性率表达高达69.2%,高于其他亚群(P＜0.05).CD133与VEGF表达密切相关(P＜0.01).结论 CD133与VEGF蛋白表达可能与乳腺癌肿瘤干细胞生长有关.     

胃癌组织KAI1/CD82、MRP1/CD9的表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中KAI1/CD82、MRP1/CD9的表达及临床意义。方法应用免疫组化SABC法检测63例胃癌组织中KAI1/CD82、MRP1/CD9的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果胃癌组织KAI1/CD82的阳性表达率为63.5%(40/63)、MRP1/CD9的阳性表达率为46.0%(29/63)。KAI1/CD82的表达与淋巴结转移、肿瘤分级、癌组织大小显著相关(P<0.05)。MRP1/CD9的表达与淋巴结转移、肿瘤分级显著相关(P<0.05或P<0.01)。结论 KAI1/CD82和MRP1/CD9可作为评估胃癌预后的指标。     

FoxM1、Cep55和c-Myc蛋白在基底细胞样乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨Fox M1、Cep55及c-Myc蛋白在基底细胞样型乳腺癌(BLBC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化方法检测66例BLBC、70例NON-BLBC和66例癌旁正常乳腺组织中Fox M1、Cep55及c-Myc蛋白的表达情况及三者间的相互关系。结果 Fox M1蛋白在BLBC、NON-BLBC和癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为77.3%(51/66)、60.0%(42/70)、13.6%(9/66),Cep55蛋白在BLBC、NON-BLBC和癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为74.2%(49/66)、57.1%(40/70)、16.7%(11/66),c-Myc蛋白在BLBC、NON-BLBC和癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率分别为71.2%(47/66)、54.3%(38/70)、22.7%(15/66),差异均有统计学意义(P<0.05)。Fox M1、Cep55及c-Myc蛋白的表达与BLBC的TNM分期及淋巴结转移情况密切相关(P<0.05),而与年龄、绝经与否、肿块大小无关(P>0.05)。Fox M1和Cep55蛋白在BLBC中的表达呈正相关关系(P<0.05),Fox M1和c-Myc蛋白在BLBC中的表达呈正相关关系(P<0.05),而Cep55与c-Myc的表达没有相关性(P>0.05)。结论 Fox M1、Cep55及c-Myc蛋白可能参与了BLBC的发生、发展,并且Fox M1分别与Cep55及c-Myc在BLBC发生发展过程中可能有一定的协同作用;Cep55蛋白与c-Myc蛋白在BLBC中的表达没有相关性,说明Cep55及c-Myc可能通过不同的作用对BLBC的发生发展过程产生影响。     

CXCR4在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的检测乳腺癌组织中趋化因子受体4(CXCR4)的表达情况,分析其与乳腺癌各临床病理学指标之间的关系,探讨CXCR4的临床意义。方法运用免疫组织化学的方法,检测了乳腺癌组织中CXCR4的表达情况。结果 CXCR4在乳腺癌组织中的阳性表达率为26.0%。乳腺癌CXCR4的表达水平与患者肿瘤的大小、组织学类型、ER、PR、Her-2/neu表达、淋巴结转移等密切相关(P<0.05)。结论乳腺癌细胞表达CXCR4可能与乳腺癌恶性生物学行为相关。CXCR4是乳腺癌诊断和治疗的分子靶点,检测CXCR4可望用于评估乳腺癌患者预后。     

mmp-14和CD34在青年乳腺癌演变过程中的表达及意义

目的：研究基质金属蛋白酶14（mmp-14）与CD34在≤35岁乳腺癌、乳腺良性肿瘤、乳腺增生症及乳腺癌旁组织患者中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法对30例乳腺癌、30例乳腺良性肿瘤、30例乳腺增生症及30例癌旁组织中乳腺终末导管及腺泡上皮细胞患者的mmp-14表达情况及CD34标记的间质血管数目进行检测。结果 mmp-14在4组导管及腺泡上皮细胞中的表达情况：乳腺癌组mmp-14高表达,与其他3组两两比较差异具统计学意义（P＜0.05）。CD34在4组中标记间质血管数目的情况：乳腺增生症组和乳腺癌组血管增生数目均高于良性肿瘤组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论乳腺终末导管及腺泡上皮细胞mmp-14的高表达和CD34标记的间质血管数目增加与青年乳腺癌的演变过程密切相关,有望成为青年乳腺癌早期诊断和治疗可靠的临床指标。     

CD105和细胞间粘附分子-1在胃癌中的表达及意义

目的研究CD105在胃癌新生血管中的表达及胃癌患者胃癌组织及外周血中细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达,探讨其在胃癌生长、转移和判断预后中的临床价值。方法以鼠抗人CD105单克隆抗体应用免疫组织化学染色法检测胃癌及正常组织中的微血管密度（MVD）,采用免疫组织化学染色和酶联免疫吸附法分别检测胃癌患者胃癌组织和外周血中ICAM-1的水平。结果 MVD和ICAM-1在胃癌组明显高于对照组,在胃癌组中MVD和ICAM-1与浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关（P〈0.05或〈0.01）,和肿瘤分化程度无关（P〉0.05）。结论以CD105标记的MVD和ICAM-1可作为反映胃癌生物学行为的客观指标,为临床判断胃癌的生长、转移、分期及预后提供一定的依据。