甲状腺乳头状癌BRAF基因表达及侵袭性研究

目的研究甲状腺乳头状微小癌和直径1 cm甲状腺乳头状癌(PTC)BRAF基因表达及其侵袭性。方法回顾性分析2011年9月至2013年9月期间四川大学华西医院甲状腺外科进行手术治疗、同时有BRAF基因检测结果的275例PTC患者的临床资料。依据肿瘤大小分为3组,分别是直径≤1 cm组、1 cm直径≤2 cm组和直径2 cm组,比较其BRAF基因突变比例以及甲状腺外侵犯和淋巴结转移的风险程度。结果单因素分析显示,PTC的肿瘤大小与患者年龄、性别及BRAF基因突变率均无关(P0.05),而肿瘤大小与甲状腺外侵犯和淋巴结转移有关(P0.05);BRAF基因突变率与甲状腺外侵犯和淋巴结转移有关(P0.05)。多因素分析显示,肿瘤大小与甲状腺外侵犯(P=0.009)及淋巴结转移(P=0.000)密切相关。结论 BRAF基因的突变会增加PTC甲状腺外侵犯和淋巴结转移风险,其与PTC的肿瘤大小无关;PTC的侵袭性随着肿瘤大小增大而增加,但BRAF基因突变阳性的微小乳头状癌仍需积极的临床干预。     

甲状腺肿瘤组织中BRAF基因突变及临床意义

目的 探讨甲状腺良恶性肿瘤中BRAF基因点突变及在甲状腺乳头状癌(PTC)中BRAF突变与临床病理学特征之间的关系.方法 应用聚合酶链反应(PCR)技术和基因直接测序法检测104例甲状腺良恶性肿瘤组织中BRAF点突变.结果 在104例标本中,仅在PTC中检测到BRAF点突变,突变率为58.2%(46/79),其他类型的甲状腺良恶性肿瘤中均未检测到BRAF突变.在PTC中BRAF基因突变与肿瘤高分期、腺体外浸润及淋巴结转移呈正相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别及肿瘤大小无明显相关(P>0.05).结论 BRAF基因突变是PTC中较常见的遗传学事件,它与肿瘤的分期、腺体外浸润及淋巴结转移具有重要关系.

Abstract：

Objective To investigate the BRAF mutation in benign and malignant thyroid tumors and its relationship with clinicopathological features in papillary thyroid cancer (PTC). Methods Polymerase chain reaction (PCR) and gene sequencing were performed to detect BRAF mutation in 104 cases of benign and malignant thyroid tissues. Results In 104 cases, BRAF mutation was detected in 46 out of 79 PTC cases with a detection rate of 58.2%. BRAF mutation was negative in other kinds of thyroid cancer and benign thyroid diseases. BRAF mutation in PTC was positively correlated with clinical stage, extra-thyroidal extension and lymph nodal metastasis (P<0.05), but not with age, gender and tumor size (P>0.05). Conclusion BRAF mutation was an important and common molecular hallmark of PTC and had a significant correlation with the clinical stage, extra-thyroidal extension and lymph nodal metastasis of PTC.     

利用高通量测序技术检测甲状腺乳头状癌基因变异的临床研究

目的 利用高通量测序技术（next-generation sequencing technology,NGS）检测甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）病人癌组织（cancer tissue,CA）及转移淋巴结（metastatic lymph node,MLN）的基因突变情况,分析基因变异与CA、MLN组织及癌旁组织（normal tissues,NT）的相关性,以期为甲状腺乳头状癌的个体化治疗提供依据。方法 利用高通量测序技术对天津医科大学肿瘤肿瘤医院自2020年5月至2020年6月收治入院的20例配对的PTC病人CA、MLN及NT进行基因检测。结果 CA和MLN中BRAF V600E突变率分别为80%（16/20）和55%（11/20）。在NT中未发现任何基因变异。1例CA和MLN均检测到ZNF33B-RET和CCDC6-RET融合。1例多灶性甲状腺微小乳头状癌（papillary thyroid microcarcinoma,PTMC）病人的MLN中发现ATM基因突变,其形态学特征与癌组织相同。结论 BRAF V600E基因是最常见基因突变。原发灶和淋巴结转移组织的BRAF突变受累基本一致。ATM突变可能与PTC的发生及转移存在一定的相关性。     

NDC1基因在结肠癌中诊断及预后价值的生物信息学分析：一项基于TCGA数据库的研究

目的 本研究旨在确定NDC1基因对结肠癌患者诊断和预后评估的作用。方法 NDC1基因的RNA-Seq数据以及对应的每一例患者的临床病理和预后参数从癌症基因图谱（TCGA）数据库下载,而后使用R软件绘制散点图并分析NDC1在结肠癌和癌旁正常组织中的差异化表达,绘制受试者曲（ROC）并分析NDC1基因表达对区分结肠癌患者和健康人的诊断效能。通过GEPIA数据库检索并绘制Kaplan-Meier曲线分析NDC1基因表达与结肠癌患者生存之间的关系,卡方检验分析NDC1基因表达和结肠癌患者临床病理特征的关系并采用单因素及多因素Cox回归模型分析影响结肠癌预后的因素。结果 NDC1表达量的中位数为3.797（3.411~4.118）,高于正常组织3.09（2.897~3.297）,差异有统计学意义（P<0.05）,并且在41对配对组织中的NDC1表达量同样高于对应的癌旁正常组织（P<0.05）,ROC曲线显示NDC1基因对结肠癌较高的诊断价值（AUC=0.8515,95%CI：0.8115~0.8915,P<0.001）。NDC1高表达的患者相比于低表达的患者有着更低的淋巴结转移数、更好的病理分期以及更少的肿瘤淋巴侵犯（P<0.05）。NDC1基因低表达的结肠癌患者有着更低的总体生存率（P<0.05）。单因素COX分析的结果显示患者的年龄、T分期、N分期、M分期、病理分期、淋巴侵犯以及NDC1基因的表达都是影响结肠癌患者的预后因素（P>0.05）。在多因素COX分析的结果显示年龄、M分期、病理分期是结肠癌患者预后的独立因素（P<0.05）。结论 NDC1基因有潜力成为一个用于结肠癌诊断及预后评估的新型生物学标志物。     

BRAFV600E 突变与乳头状甲状腺癌中央区淋巴结转移的关系

目的：探讨乳头状甲状腺癌（PTC）中BRAF基因突变的临床意义。 方法：选择2年间符合条件的PTC手术患者126例,提取患者石蜡切片中的DNA样本,用荧光PCR法检测BRAF基因V600E（BRAFV600E）的突变情况,分析BRAFV600E突变与PTC患者临床病理因素及中央区淋巴结转移的关系。 结果：126例PTC患者BRAFV600E突变的发生率为69.0%（87/126）。单因素与多因素分析显示,BRAFV600E突变与淋巴结转移有关（P<0.05）;中央区淋巴结转移与年龄、肿瘤大小、肿瘤分期和BRAFV600E突变有关（均P<0.05）。进一步分析显示,肿瘤直径≤10 mm时,BRAFV600E突变与中央区淋巴结转移无关（P>0.05）,肿瘤直径>10 mm时,BRAFV600E突变患者的中央区淋巴结转移率高于突变阴性患者（P<0.05）。 结论：BRAFV600E突变是PTC中央区淋巴结转移风险的独立预测因子;对于术前检测BRAFV600E突变阳性患者,肿瘤直径越大越应该重视中央区淋巴结清扫。     

甲状腺乳头状癌BRAFV600E突变与TSHR蛋白检测的临床意义研究

探讨测甲状腺乳头状癌(PTC)组织中鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1基因(BRAFV600E)突变和促甲状腺激素受体(TSHR)蛋白表达的变化及其临床意义。收集2017年1月—2019年4月我院普外科手术治疗的PTC患者164例,另取42例甲状腺良性病变组织作为对照。基因测序检测BRAFV600E突变,免疫组化染色检测组织中TSHR蛋白表达。PTC患者BRAF V600E突变率显著高于对照组(64.6%vs 0,P0.001),PTC患者TSHR蛋白阳性率显著高于对照组(47.6%vs 4.8%,P0.001)。BRAFV600E基因突变率和TSHR蛋白阳性率与PTC患者性别、年龄、病灶数目无关(P0.05),与TNM分期、淋巴结转移、包膜浸润、肿瘤直径有关(P0.05)。PTC患者癌组织中BRAFV600E基因突变和TSHR蛋白表达呈正相关(r=0.417,P0.001)。PTC癌组织中BRAFV600E突变率高、TSHR蛋白阳性率高,BRAFV600E高突变和TSHR蛋白高表达可能参与了PTC的发生、侵袭和转移过程。     

大肠癌K-ras、p53基因突变分析及其与肝转移的关系

目的 对大肠癌患者外周血、手术前后门静脉血及癌组织进行K-ras和p53基因突变分析,探讨K-ras和p53基因突变与结肠癌临床分期及肝转移的关系.方法 大肠癌患者45例,取外周血、手术前后门静脉血及癌组织标本,用PCR-SSCP方法进行K-ras和p53基因突变分析,比较不同标本K-ras和p53基因突变率,并探讨K-ras和p53基因突变与大肠癌分期及肝转移的关系.结果 不同标本K-ras基因突变率:癌组织>术后门静脉>术前门静脉血>外周血.p53基因突变率:癌组织>术后门静脉>术前门静脉血>外周血.大肠癌不同分期术后门静脉血K-ras基因突变率:Duke C>Duke B>Duke A(P<0.05);p53基因突变率:Duke C>Duke B>Duke A(P<0.05).大肠癌术后肝转移组K-ras基因突变率78.6%(11/14).显著高于非肝转移组(P<0.05);肝转移组p53基因突变率71.4%(10/14),显著高于非肝转移组(P<0.05).术后门静脉血K-ras基因突变阳性对诊断大肠癌肝转移的敏感性和特异性分别为78.6%(11/14)和67.7%(21/31);p53基因突变阳性对诊断肝转移的敏感性和特异性分别为71.4%(10/14)和61.3%(19/31).结论 结肠癌术后门静脉血K-ras基因和p53基因突变均有较高的阳性率,术后门静脉血K-ras和p53基因突变与肿瘤分期呈正相关,对预测术后肝转移有一定的应用价值.     

VEGF-A及PI3K/AKT通路在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）-A及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）通路在结直肠癌中的表达及临床意义。方法 选取我院2013年9月到2015年9月间收治的结直肠癌患者80例,作为观察组,同时切取患者癌旁正常肠黏膜组织作为对照组。分别采用免疫组化法检测癌组织和癌旁组织的VEGF-A及PI3K及 AKT表达水平,并分别统计其阳性表达率,比较两组间差异。同时单因素分析结直肠癌组织中VEGF-A、PI3K及AKT表达水平与患者临床病理资料相关性,同时Spearman相关性分析VEGF-A与PI3K及AKT表达相关性。术后随访5年,比较VEGF-A、PI3K及AKT阳性和阴性表达患者生存率。结果 观察组的VEGF-A及PI3K及AKT表达阳性率均明显高于对照组（P<0.05）。结直肠癌患者的VEGF-A及PI3K及AKT表达水平与性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位等临床资料无明显相关性（P>0.05）,与TNM分期、分化程度、淋巴结转移及浸润深度明显相关（P<0.05）。结直肠癌组织中的VEGF-A表达与PI3K、AKT表达呈正相关（r=0.625, 0.517; 均P<0.05）。结直肠癌VEGF-A及PI3K及AKT阳性表达患者的5年生存率均低于阴性组（P<0.05）。结论 结直肠癌组织中的VEGF-A及PI3K及 AKT均存在高表达现象,且与肿瘤分期、淋巴结转移、分化及浸润深度呈现明显相关性,同时可减少患者生存期,可能参与结直肠癌病情发生发展,对临床诊断及治疗具有重要意义。     

肝癌、肝硬化中自然杀伤细胞的免疫组织化学研究

目的: 研究原发性肝细胞癌、肝硬化、正常肝组织中自然杀伤(nature killer,NK)细胞数量、分布及其与患者预后的关系.方法: 原发性肝细胞癌60例,单纯性肝硬化62例,正常肝组织23例,以SP免疫组化法检测NK细胞.结果: ①癌中与癌旁组织的NK细胞计数明显高于肝硬化(P<0.01),癌中NK细胞计数高于正常肝组织(P<0.05).②肝癌组织学分级与NK细胞数量无明显关系.③癌中NK细胞随着临床分期的发展有下降的趋势(P<0.05).④15月内转移复发组癌中和癌旁的NK细胞计数均明显低于无转移复发组(P<0.01).结论: NK细胞计数可能是反映机体抗肿瘤免疫状态和判断患者预后的重要指标.     

甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的预测因素

目的总结甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的影响因素。方法复习甲状腺乳头状癌的相关文献,针对其中央区淋巴结转移特征及预测因素进行综述。结果目前的研究结果表明,男性、年轻患者、肿瘤直径更大、多灶癌及BRAF基因突变均为甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的危险因素,而肿瘤位于上极和合并桥本甲状腺炎(HT)可视为甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移的保护因素。结论甲状腺乳头状癌的中央区淋巴结转移检出率低,无法满足术前诊断的需要。大量研究证实,甲状腺乳头状癌的临床病理学特征对术前颈部淋巴结转移有一定的预测价值,可为甲状腺乳头状癌患者手术方式的选择提供一定的参考。     

Lymphatic mapping establishes the role of BRAF gene mutation in papillary thyroid carcinoma

OBJECTIVE: To define the role of BRAF gene mutation in the progression of papillary thyroid carcinoma. SUMMARY BACKGROUND DATA: BRAF gene mutation is frequently detected in papillary thyroid carcinoma. Its role in pathogenesis or progression is under investigation. METHODS: Patients who underwent thyroidectomy and sentinel lymph node biopsy for papillary thyroid cancer were accrued. BRAF mutation was assessed in primary tumors and matched sentinel lymph nodes by a quantitative real-time PCR assay. RESULTS: Tissue specimens from 103 consecutive patients were evaluated. BRAF mutation of the primary tumor was detected in 34 (33%) patients. In 26 of 34 (76%) patients with BRAF mutation, concomitant lymph node metastasis was detected. On the contrary, in 69 patients with BRAF mutation-negative primary tumors, only 12 (17%) patients had lymph node metastasis (chi, P < 0.0001). BRAF mutation was detected in 20 of 26 (77%) lymph node metastases matched to BRAF mutation-positive primary tumors; it was not detected in lymph node metastases matched to BRAF mutation-negative primary tumors. Univariate analysis identified age, stage, tumor size, and BRAF mutation as prognostic factors for lymph node metastasis. In multivariate analysis, only BRAF mutation remained a significant prognostic factor for lymph node metastasis (odds ratio = 10.8, 95% confidence interval, 3.5-34.0, P < 0.0001). CONCLUSIONS: BRAF mutation may be a key genetic factor for the metastatic progression of papillary thyroid carcinoma. The study demonstrates that this gene mutation is a significant risk factor for locoregional lymph node metastasis and has potential utility as a surrogate marker.     

甲状腺乳头状癌颈侧区淋巴结跳跃性转移危险因素分析

目的 探讨甲状腺乳头状癌（PTC）病人颈侧区淋巴结跳跃性转移的规律（中央区淋巴结无转移而颈侧区淋巴结有转移）及其主要危险因素。方法 回顾性分析2017年1月至2019年10月就诊于郑州大学第一附属医院甲状腺外科行手术治疗并经术后病理学检查证实有侧区淋巴结转移的275例PTC病人的临床资料,分析跳跃性转移的危险因素。结果 颈侧区淋巴结跳跃性转移的发生率为13.1%（36/275）,肿瘤位于上极（OR 2.780,95%CI 1.270～6.083;P=0.011）,年龄（OR 1.077,95%CI 1.039～1.116;P<0.001）,单侧癌（OR 2.459,95%CI 1.094~5.529;P<0.001）是PTC病人出现跳跃性转移的独立危险因素。ROC曲线显示,预测跳跃性转移的最佳年龄界值为48.5岁（敏感度=0.556,特异度=0.753,曲线下面积=0.680,P=0.001）。跳跃性转移病人检出的中央区淋巴结个数及颈侧区淋巴结转移个数与非跳跃性转移病人相比均较少。结论 PTC病人颈侧区淋巴结跳跃性转移并不少见,对肿瘤位于腺体上极,年龄≥48.5岁,单侧癌的病人应仔细评估,必要时可行颈侧区淋巴结清扫术。     

PPIB蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及与预后的相关性

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中亲环素B(Cyclophillin B,PPIB)蛋白表达及其与临床病理因素以及预后的关系。方法收集2011年至2014年在中山大学孙逸仙纪念医院行PTC切除的患者98例及58例癌旁组织石蜡标本。采用免疫组织化学实验检测组织中PPIB的表达水平,并统计分析PPIB蛋白表达与临床病理特征及预后的相关性。结果 PPIB的表达水平明显高于正常甲状腺组织,PPIB的高表达与年龄(P=0.025)、淋巴结转移(P=0.046)、包膜侵犯(P=0.034)和TNM分期(P=0.036)密切相关,Kaplan-Meier生存分析表明PPIB高表达与淋巴结无复发生存率(LN-RFS)显著相关,多因素分析证明PPIB表达是PTC病人LN-RFS的独立危险因素。结论 PPIB高表达与PTC患者预后较差相关,PPIB有望成为PTC临床治疗以及预后评估的重要指标。     

miR-34b基因启动子区甲基化与甲状腺乳头状癌的关系

目的探讨甲状腺乳头状癌（PTC）中微小RNA-34b（miR-34b）基因的表达及其启动子区的甲基化情况,并分析甲基化与其临床病理特征的关系。方法收集2008年9月至2010年10月期间南京医科大学附属淮安第一医院行手术切除的25例PTC患者的癌组织和癌旁组织。采用实时定量PCR法检测其miR-34b mRNA的表达,采用甲基化特异性（MSP）PCR法检测miR-34b基因启动子区的甲基化情况。结果 PTC癌组织中miR-34bmRNA的相对表达量为0.85±0.05,较癌旁组织的1.62±0.09低（P=0.030）。25例PTC癌组织中,有18例（72%）患者的miR-34b基因启动子区发生甲基化,癌旁组织组有10例（40%）,癌组织的甲基化比例较高（P=0.021）。甲基化与PTC患者的年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期和包膜浸润均无关（P〉0.05）,而与淋巴结转移有关,发生淋巴结转移者的甲基化比例高于未发生淋巴结转移者（P〈0.05）。结论 PTC癌组织中miR-34b基因启动子区的异常甲基化可能是该基因失活的原因之一,并且可能与PTC的发生、发展以及转移均有关,其机理值得进一步研究。     

甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移规律及影响因素分析

目的探讨甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）颈部淋巴结的转移规律及其影响因素,为PTC颈部淋巴结清扫手术方式的选择提供依据。方法收集贵阳医学院附属医院甲状腺外科2009年1月至2011年12月期间收治的98例PTC患者的临床资料,对其淋巴结转移特点、规律及其影响因素进行回顾性分析。结果 98例患者中,共行颈部淋巴结清扫114侧。总颈淋巴结转移率为77.55%（76/98）,其中Ⅵ区淋巴结转移率为74.49%（73/98）,颈侧Ⅱ＋Ⅲ＋Ⅳ区为42.86%（42/98）,Ⅴ区为5.10%（5/98）。单因素分析结果显示：当肿瘤直径大于1 cm、侵犯甲状腺包膜、呈多灶性或年龄大于45岁时,Ⅵ区和Ⅱ＋Ⅲ＋Ⅳ区的淋巴结转移率较高（P〈0.05）。多因素分析结果显示：患者年龄、肿瘤直径、包膜侵犯及多灶性是颈部淋巴结转移的影响因素（P〈0.05）;包膜侵犯、多灶性、合并Ⅵ区淋巴结转移及合并颈侧Ⅱ＋Ⅲ＋Ⅳ区淋巴结转移是喉前淋巴结转移的影响因素（P〈0.05）;包膜侵犯和多灶性是跳跃性淋巴结转移的影响因素（P〈0.05）。结论 PTC易发生Ⅵ、Ⅲ及Ⅳ区淋巴结转移,应常规清扫Ⅵ区淋巴结。对颈部淋巴结转移规律的研究可为临床选择合理的颈部淋巴结清扫手术方式提供依据。     

甲状腺乳头状癌中央区淋巴结转移危险因素研究（附3273例回顾性分析）

目的 探讨甲状腺乳头状癌（PTC）病人临床病理学特征及中央区淋巴结转移（CLNM）的危险因素。方法 回顾性分析2007年1月至2016年6月,昆明医科大学第一附属医院甲状腺疾病诊治中心具有完整病例资料的3273例PTC病人临床病理学特征,应用χ2检验和多因素Logistic回归模型分析CLNM的危险因素。结果 PTC的CLNM发生率为40.6%（1331/3273）,清扫中央区淋巴结中位数7.0（4.0,12.0）枚,平均转移（3.70±3.84）枚。单因素分析显示性别、年龄、肿瘤直径、腺外浸润、多灶性、合并结节性甲状腺肿、体征、是否观察均与CLNM相关（P＜0.05）。在肿瘤仅占据甲状腺单个区域病人中,位于下份（41.6%）是CLNM的危险因素（P＜0.001）,而与肿瘤数量无关（P=0.68）。多灶癌CLNM发生率双侧多区域（51.3%）＞单侧多区域（47.2%）＞单个区域（36.7%）（P=0.003）。多因素Logistic回归分析显示性别、年龄、肿瘤直径、腺外浸润和观察是CLNM的独立危险因素。结论 临床病理特征对CLNM具有一定的预测价值,可为PTC病人治疗方案制定提供一定的参考。     

甲状腺乳头状癌颈侧区淋巴结跳跃性转移危险因素分析

目的 探讨甲状腺乳头状癌（PTC）病人颈侧区淋巴结跳跃性转移的规律（中央区淋巴结无转移而颈侧区淋巴结有转移）及其主要危险因素。方法 回顾性分析2017年1月至2019年10月就诊于郑州大学第一附属医院甲状腺外科行手术治疗并经术后病理学检查证实有侧区淋巴结转移的275例PTC病人的临床资料,分析跳跃性转移的危险因素。结果 颈侧区淋巴结跳跃性转移的发生率为13.1%（36/275）,肿瘤位于上极（OR 2.780,95%CI 1.270～6.083;P=0.011）,年龄（OR 1.077,95%CI 1.039～1.116;P<0.001）,单侧癌（OR 2.459,95%CI 1.094~5.529;P<0.001）是PTC病人出现跳跃性转移的独立危险因素。ROC曲线显示,预测跳跃性转移的最佳年龄界值为48.5岁（敏感度=0.556,特异度=0.753,曲线下面积=0.680,P=0.001）。跳跃性转移病人检出的中央区淋巴结个数及颈侧区淋巴结转移个数与非跳跃性转移病人相比均较少。结论 PTC病人颈侧区淋巴结跳跃性转移并不少见,对肿瘤位于腺体上极,年龄≥48.5岁,单侧癌的病人应仔细评估,必要时可行颈侧区淋巴结清扫术。