p38MAPK信号通路抑制剂对TNF-α诱导的乳腺癌细胞凋亡的影响

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的乳腺癌细胞凋亡的影响。方法 TNF-α处理乳腺癌细胞MDA-MB-231,Western blot检测细胞中p38MAPK信号通路激活情况。p38MAPK信号通路阻断剂SB203580和TNF-α同时处理MDA-MB-231细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞中活性氧(ROS)水平,Western blot检测细胞中p38MAPK、p-p38MAPK、Bid、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平。结果 TNF-α作用后的MDA-MB-231细胞中p-p38MAPK/p38MAPK蛋白水平由(0. 25±0. 03)升高至(0. 80±0. 07),两者比较差异有统计学意义(P<0. 05)。TNF-α处理后MDA-MB-231细胞凋亡率由(2. 28±0. 47)%升高至(19. 56±1. 33)%,SB203580处理后细胞凋亡率降低至(12. 14±1. 12)%。TNF-α处理后细胞中Bax和Bid水平明显升高,ROS水平升高,而SB203580处理后细胞中Bax、Bid水平和ROS水平有所降低,与对照MDA-MB-231细胞相比差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 TNF-α诱导Bid、Bax介导的乳腺癌细胞凋亡,提高细胞中ROS水平,p38MAPK信号通路抑制剂可以减弱TNF-α的上述作用。     

高糖诱导下肝星形细胞活化与p38MAPK信号通路的关系

目的 探讨高糖诱导下肝星形细胞(HSC)活化与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的相互关系.方法 体外培养人HSC并进行形态学鉴定,选取60份样本,分为对照组、高糖组和阻断组各20份;对照组常规培养,高糖组在常规培养基础上加入葡萄糖(终浓度25 mol/L),阻断组在高糖组基础上加入p38MAPK阻断剂SB203580(终浓度40 mol/L)进行培养,培养120 h后用链霉亲和素-生物素复合物法(SABC)及Western印迹法检测各样本的α-肌动蛋白(α-SMA)和p-p38MAPK蛋白表达情况.结果 经鉴定,培养后的HSC呈扁平状,胞体大,具有发育良好的应力纤维,胞浆内缺乏脂肪滴.SABC法原位检验结果显示:高糖组的α-SMA阳性信号强于对照组,而阻断组的α-SMA阳性信号则近似于对照组.3组HSC的α-SMA和p-p38MAPK蛋白的相对表达量差异均有统计学意义(F=31.36,78.49,P均＜0.01).其中,高糖组的α-SMA表达相对量为(34.61±4.07)％,高于对照组和阻断组的(23.90±6.02)％和(26.48±4.41)％,差异均有统计学意义(t=-7.20和-5.37,P均＜0.01);高糖组表达相对量高糖组为(22.79±3.80)％,对照组和阻断组分别为(8.13±4.95)％和(10.66±4.15)％,差异均有统计学意义(t=-11.01和-10.41,P均＜0.01).结论 活化程度较高的HSC具有较高的p38MAPK信号强度,而阻断p38MAPK信号通路能够降低HSC的活化程度.     

p38MAPK信号通路调控二氧化硅诱导的人支气管上皮细胞上皮-间质转型

目的 探讨 p38 MAPK 信号通路在二氧化硅(SiO2)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)上皮-间质转型(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用机制.方法 采用MAPK活性检测试剂盒检测SiO2处理HBE细胞...     

TPX2基因调控p38MAPK信号通路抑制乳腺癌细胞增殖及促进凋亡的机制研究

目的探讨Xklp2靶蛋白(TPX2)基因调控p38MAPK信号通路抑制乳腺癌细胞增殖及促进凋亡的影响及机制。方法 Western blot检测乳腺癌组织及癌旁组织中TPX2基因的表达;siRNA-NC、TPX2-siRNA1和TPX2-siRNA2转染人乳腺癌MCF-7细胞,未转染任何siRNA作为对照组,Western blot检测转染后各组细胞中TPX2蛋白表达;siRNA-NC、TPX2-siRNA转染细胞48 h后,CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测Cleaved caspase3、p38、p-p38蛋白表达。结果 TPX2在乳腺癌组织的蛋白表达显著高于癌旁组织(P<0.01);TPX2-siRNA1组和TPX2-siRNA2组细胞中TPX2蛋白表达显著低于对照组(P<0.01),TPX2-siRNA2组的抑制效果更明显,选择作为后续研究;siRNA-NC组的细胞存活率、细胞凋亡率及Cleaved caspase3、p-p38蛋白表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05),TPX2-siRNA组细胞存活率及p-p38蛋白表达显著低于对照组,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著高于对照组(P<0.01),p38蛋白表达在三个组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TPX2基因在乳腺癌组织中高表达,抑制TPX2的表达可降低细胞增殖及促进细胞凋亡,其机制与p38MAPK信号通路有关。     

p38MAPK信号通路在免疫调节中的研究

器官移植是目前治疗器官终末期病变的最有效手段,但是移植后的免疫排斥反应明显降低了器官移植的治疗效果。抑制免疫排斥反应是器官移植界的重要课题。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路是当今的研究热点,其与免疫细胞的相关性研究已受到广泛关注。p38MAPK作为MAPK家族的重要一员,它不仅参与细胞增殖、分化、凋亡及炎症刺激等病理生理过程,还在免疫系统中起着重要作用。     

p38MAPK通路在镉毒性机制中的作用

镉是日常生活中常见的环境污染物,其对肾、肺、肝、睾丸、脑、骨骼及血液系统均可产生毒性,并具有致癌作用。近年研究还发现其具有环境内分泌干扰物作用。镉毒性作用的具体机制至今尚未确定。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一,作为MAPK的一个亚族,p38MAPK是广泛存在于细胞浆内的含有丝氨酸/苏氨酸残基的蛋白质激酶,其能被细胞外多种应激所活化,介导细胞的生长、发育、分化及死亡等过程。近年的研究发现镉的毒性机制与p38MAPK活化作用关系密切。     

葡多酚对乳腺癌细胞P38MAPK信号传导通路的影响

目的:探讨葡多酚(grape proanthocyanidins,GPC)对P38MAPK(P38 mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)信号转导通路的影响。方法:将接种EMT-6乳腺癌细胞的BALB/C小鼠分别经口灌胃给予10、100、200mg/kg bw GPC,连续2w。用Western blot方法检测肿瘤组织磷酸化P38MAPK蛋白和MMP-2蛋白的表达水平。结果:肿瘤对照组和200mg/kgGPC组的磷酸化P38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为1.16±0.18和0.58±0.12,MMP-2蛋白表达水平分别为0.98±0.04和0.69±0.04,差别均有显著性意义(P<0.05)。结论:GPC对乳腺癌P38MAPK信号转导通路的活化和MMP-2蛋白的表达均有一定抑制作用。     

视黄酸诱导H9c2细胞p38 MAPK转位的研究

目的了解H9c2心肌细胞中p38MAPK的分布及其在全反式视黄酸(atRA)诱导下的转位。方法对H9c2细胞进行饥饿加药,应用激光扫描共聚焦显微镜对细胞内的p38进行定位扫描。通过对p38荧光强度的核浆比进行分析,得出atRA与SB202190对H9c2细胞内p38核转位的影响。结果在未受刺激细胞内,p38较多分布在胞浆;经atRA分别刺激细胞5min,30min后,胞浆中p38的荧光强度均变弱,核浆比显示实验组与对照组间有显著性差异。SB202190能明显抑制atRA诱导的p38核转位(P<0.01),并且,由SB202190抑制组与对照组的p38核浆比能看出,SB202190降低了26.1%的p38核转位。结论atRA能诱导心肌细胞中p38的核转位,p38信号转导通路可能参与心脏的发育调控。     

PM2.5对变应性鼻炎大鼠NF-κB信号通路的影响

目的 探究大气PM2.5对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路的影响.方法 将40只SPF级雄性Wistar大鼠分为对照组、AR组、AR+PM2.5组和四氢化吡咯二硫代甲酸铵(pyrrolidin-edithioc...     

PM2.5介导的细胞炎症反应信号通路研究进展

大气细颗粒物(fine particulate matter,PM_(2.5))可引起一系列的细胞毒性反应,表现为细胞增殖阻滞、细胞凋亡及自噬、细胞炎症反应及染色体畸变、DNA损伤、细胞能量代谢异常等。其中呼吸系统的失代偿性细胞炎症反应与急性肺损伤、慢性阻塞性肺病及肺纤维化等的发生密切相关,且炎症反应被认为在多数癌症的发展过程中起重要作用。该文就PM_(2.5)介导的细胞炎症反应信号通路进行综述。     

南京市鼓楼区中老年居民幽门螺杆菌感染 现状及相关因素研究

摘要：目的　了解南京市鼓楼区中老年居民幽门螺杆菌（ＨＰ）感染现状及其危险因素,为制定正确有效的 预防措施提供依据。方法　２０１７年５～８月对南京市鼓楼区９３５例居民进行尿素１４Ｃ 呼气试验测定,分析其 感染率;同时应用调查问卷开展危险因素调查,采用单因素和多因素ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析幽门螺杆菌相关危险 因素。结果　９３５例居民中３６６例（３９．１４％）ＨＰ阳性;单因素ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析显示有消化道疾病史、消 化道不适、是否吃辛辣和方便食品与ＨＰ感染有关（犘＜０．０５）;多因素ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型拟合发现消化道疾 病史与ＨＰ感染负相关,而吃辛辣和方便食品与ＨＰ感染正相关（犘＜０．０５）。结论　南京市鼓楼区居民幽 门螺杆菌感染率较全国水平低,但感染仍普遍存在,应加强对消化道疾病的筛查与治疗,大力宣传健康安 全的饮食习惯,积极预防幽门螺杆菌感染与传播。 关键词：中老年;幽门螺杆菌;危险因素;问卷调查;流行病学研究 中图分类号：Ｒ１８３．４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１９）０１ ０００１ ０５     

急性肾功能衰竭应用P38MAPK抑制剂的研究

目的 观察肾缺血后分别于再灌注前、后静脉注射58203580，大鼠肾组织细胞凋亡及肾功能的变化．探讨P38MAPK抑制剂对肾组织的保护作用。方法 大鼠肾缺血后于再灌注前、后尾静脉注射SB203580，测定不同时间点血肌酐和尿素氮值检测肾功能变化；用原位凋亡检测法观察各时间点TUNEL阳性细胞数，检测细胞凋亡情况。结果 于再灌注前应用P38MAPK特异性抑制荆SB203580后，肾功能损害程度及TUNEL阳性细胞均减少，于再灌注后注射SB203580对肾功能损害程度及TUNEL阳性细胞均无明显影响。结论 再灌注早期应用P38MAPK有减轻细胞凋亡和保护肾功能的作用。     

p38信号通路对白蛋白诱导肾小管上皮细胞骨调素mRNA的表达

目的探讨p38信号通路(p38MAPK)在白蛋白介导的大鼠肾小管上皮细胞表达骨调素(OPN)中的作用。方法应用W estern印迹法检测p38MAPK在白蛋白诱导的肾小管上皮细胞中的活化程度,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察白蛋白及p38MAPK特异性阻断剂SB203580对肾小管上皮细胞促炎症介质骨调素OPN mRNA的影响。结果白蛋白以时间依赖性刺激NRK-52E引起的p38MAPK活化,并明显上调肾小管上皮细胞OPN mRNA的表达。SB203580能显著抑制OPN mRNA的表达。结论p38MAPK在白蛋白介导的肾小管上皮细胞上调表达黏附因子OPN中起重要作用。     

Comparative study of p38 MAPK signal transduction pathway of peripheral blood mononuclear cells from patients with coal-combustion-type fluorosis with and without high hair selenium levels

Coal-combustion-type fluorosis has only been reported in China and its pathogenesis has not been fully understood. Fluoride causes chronic toxic effects and selenium modulates cellular activities through signal transduction in human cells. The present study enrolled three groups of subjects with well-defined serum and urine fluoride and hair selenium: high fluoride + high selenium group, high fluoride group and normal control group. The expressions of p38, NF-kB p65, caspase-3 and p53 genes at both protein and mRNA levels in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were determined by Western blotting and quantitative real-time RT-PCR, respectively. The results showed that the expressions of p38, NF-kB p65, and caspase-3 protein in high fluoride group were higher than those in the other two groups. The mRNA level of NF-kB p65 and caspase-3 was significantly higher in high fluoride + high selenium group than control and lower than high fluoride group. The mRNA and protein level of p53 was significantly higher in high fluoride + high selenium group than that in other two groups. These results suggest that selenium may influence the protein and gene expression associated with p38 signal transduction pathway and up-regulate p53 expression in PBMCs from patients with coal-combustion-type fluorosis.     

Hesperetin Induces Apoptosis in Human Glioblastoma Cells via p38 MAPK Activation

Abstract

Glioblastoma (GBM) is the most common and aggressive form of malignant brain tumor, with poor prognosis and a lack of effective treatment. Hesperetin, a natural product found in citrus fruits, displayed bioactivities including antioxidant, anti-inflammatory, and anticancer, while its effects on GBM cells were largely unknown. Here, we explored the anticancer effect of hesperetin on human GBM cells in vitro, as well as the underlying signaling mechanisms. By CCK-8 assay and live/dead assay, hesperetin presented significant inhibitory effect on human GBM U-251 and U-87 cell viability. By DAPI staining and Annexin V-FITC/PI assay, apoptotic death was proved to contribute to the cell viability reduction, and it was verified by the increased Bax/Bcl-2 ratio in western blotting results. Furthermore, by cell cycle analysis and western blotting for cyclin B1, CDK1, and p21, hesperetin was found to induce cell-cycle arrest at G2/M phase. For signaling mechanism, the western blotting results showed elevated p38 MAPK activation, and the reduced Bcl-2 and enhanced Bax upon hesperetin treatment were partly reversed by p38 MAPK inhibitor SB203580. In summary, we have discovered hesperetin as a natural product candidate for the treatment of GBM, and that it could induce GBM cell apoptosis via p38 MAPK activation.     

MAPK信号转导通路及其在脂肪分化中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导通路是真核细胞将胞外信号转导至胞内引起细胞反应的一类重要信号系统。此通路通过影响基因的转录和调控,参与调节细胞增殖、分化、转化、凋亡及细胞间的功能同步等一系列生命活动。肥胖已经成为危害人类健康的重要问题,是许多疾病的独立危险因素。探讨脂肪细胞分化及其调控机制对相关疾病的预防和治疗具有十分重要的意义。MAPK信号转导通路在脂肪细胞分化中发挥重要作用。ERK1／2,JNK和p38MAPK三条通路通过独立作用及复杂的协调作用,参与调控脂肪细胞分化过程的各个环节,其调节作用具有多样性。     

大蒜素对培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的抗凋亡作用通过p38MAPK细胞信号转导通路(英文)

目的探讨大蒜素对培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用并探讨p38MAPK细胞信号转导通路是否发挥作用。方法利用新生大鼠培养心肌细胞缺氧/复氧模型,将培养的心肌细胞分为正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(A/R组)、大蒜素组(A组)、大蒜素+SB203580(A+SB)及SB203580(SB)组共5组;各组均测定缺氧后和复氧后心肌损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量,并利用凝胶电泳及原位末端标记法(TUNEL法)检测心肌细胞凋亡。同时用蛋白免疫印迹(Western Blotting)法检测各组p38MAPK及磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达水平。结果A组较A/R、A+SB、SB组LDH、MDA明显降低,SOD明显增高(均P<0.01);A组AI(心肌细胞凋亡指数)较A/R、A+SB、SB组明显降低(均P<0.01),与凝胶电泳结果相一致。各组p38MAPK无显著性差异,p-p38MAPK在A组表达显著高于其它各组;结论大蒜素有明显抗培养心肌细胞缺氧/复氧损伤作用,其作用是通过减少心肌细胞凋亡而发挥的,p38MAPK细胞信号转导通路在其中起到重要作用。