视黄酸受体抑动剂对正常人体T淋巴细胞增殖的影响

[目的]评价视黄酸受体RARs特异性抑动剂BIBn和视黄酸受体RXRs特异性抑动剂HX603对正常成年人体T淋巴细胞的增殖的影响,确定剂量水平,建立一套通过受体途径研究维生素A功能的实验方法。[方法]用密度梯度分离法和磁性细胞分选法从健康人的外周血分离T淋巴细胞,进行体外培养,采用MTT法,绘制人T淋巴细胞的体外生长曲线,并测定在10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L4个不同浓度时的OD值,用方差检验分析各剂量对细胞的影响。[结果]在培养24h时1×10-4mol/L、1×10-5mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L浓度的BIBn剂量组结果OD值分别为0.538±0.128、0.692±0.068、0.627±0.136、0.730±0.157(P﹤0.05)。[结论]在培养24h时BIBn对T淋巴细胞增殖有抑制作用。HX603对T淋巴细胞增殖可能有抑制作用。     

用串联压电传感器测定水中邻苯二甲酸酯的方法研究

目的研究应用串联压电传感器测定环境水中的邻苯二甲酸酯的含量,建立测定邻苯二甲酸酯的压电传感分析方法。方法在2.50×10-2 mol/L KOH存在下,邻苯二甲酸酯被水解,从而导致频移值的改变。结果频移值△F与邻苯二甲酸酯的摩尔浓度在4.91×10~(-5)~1.64×10~(-3) mol/L范围内线性关系良好,其线性回归方程为△F=4 650.1C(×10~(-5) mol/L)+34 257,相关系数r=0.991 0,检出限为3.79×10~(-5) mol/L,RSD为1.15%~2.33%,加标回收率为94.6%~104.4%。结论该方法操作简便、快速,可用于环境水中邻苯二甲酸酯含量的测定。     

纳米银参与的化学发光法测定蜘蛛香中的香叶木素

目的建立化学发光法测定蜘蛛香中香叶木素的新方法。方法在纳米银参与的碱性介质中,高锰酸钾-鲁米诺-香叶木素体系产生较强的化学发光反应且发光强度与香叶木素的浓度有很好的线性关系,据此建立流动注射化学发光法测定香叶木素的含量。结果在鲁米诺、Na OH、纳米银、KMn O4溶液浓度分别为8.0×10-7mol/L、0.05 mol/L、5.0×10-6mol/L、3.0×10-5mol/L的最佳条件下,香叶木素的线性范围为5.0×10-9g/ml~5.0×10-7g/ml,r=0.998 7,对1.0×10-7g/ml香叶木素平行测定11次,其相对标准偏差RSD为1.88%,检出限为1.8×10-9g/ml,提出了化学发光反应可能的机理。结论该法简单、准确,可用于蜘蛛香中香叶木素的测定。     

人肝细胞系L02胰岛素抵抗细胞模型的建立及鉴定

[目的]采用高浓度胰岛素体外诱导培养法建立人肝细胞IR模型,为研究IR的发生发展机制及筛选改善IR的药物提供一种简便可靠的IR细胞模型。[方法]以人肝细胞系L02为研究对象,在含5×10-7 mol/L人胰岛素的培养液培养16 h,未用高浓度胰岛素培养者为对照组。之后两组分别加入0、1、10、50、100、200 ng/ml人胰岛素。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法检测培养液中残存葡萄糖含量。[结果]在各浓度的胰岛素刺激下,高胰岛素诱导组培养液中残存葡萄糖含量均显著高于对照细胞(P﹤0.01)。[结论]用含5×10-7 mol/L胰岛素的培养液培养16 h的L02细胞产生胰岛素抵抗,作为IR肝细胞模型可广泛用于胰岛素抵抗的研究。     

阴离子表面活性剂的龙胆紫褪色光度测定法

在弱酸性的邻苯二甲酸氢钾-HCl缓冲介质中,阴离子表面活性剂(AS)与龙胆紫(CV)染料反应,形成离子缔合物,溶液颜色发生明显改变。最大褪色波长为578 nm[十二烷基硫酸钠(SDS)体系]、574 nm[十二烷基苯磺酸钠(SDBS)体系],在此波长处,阴离子表面活性剂的浓度与体系吸光度呈良好线性关系,从而建立测定阴离子表面活性剂的光度法。在最大褪色波长处,AS的浓度在0~2.79×10-5mol/L(SDS体系)、0~2.90×10-5mol/L(SDBS体系)范围内遵守比耳定律,表现摩尔吸光系数为1.72×104L/(mol.cm)(SDS体系)、1.86×104L/(mol.cm)(SDBS体系),检出限为8.90×10-7mol/L(SDS体系)、7.81×10-7mol/L(SDBS体系)。该方法具有较高的灵敏度和良好的选择性,用于水样中AS的测定,结果满意。     

食用油中没食子酸丙酯的纳米银催化-高碘酸钠-鲁米诺化学发光测定法

为建立纳米银参与的调和食用油中没食子酸丙酯的高碘酸钠-鲁米诺化学发光体系测定法,在纳米银参与的碱性介质及最佳测定条件(负高压为700 V,泵速为45 r/min,L1为30 cm,L2为31 cm,L3为36 cm,鲁米诺溶液、氢氧化钠溶液、纳米银溶液、高碘酸钠溶液的浓度分别为8.0×10-6、1.0×10-2、1.0×10-6、5.0×10-5 mol/L)下,采用高碘酸钠-鲁米诺化学发光法测定没食子酸丙酯的化学发光强度,以确定调和食用油中没食子酸丙酯的含量。结果显示,在1.0×10-6~8.0×10-4 g/L的线性范围内,所得回归方程均呈良好的线性关系,r≥0.997。方法的检出限为9.4×10-7 g/L,平均回收率为99.5%~106.0%,RSD为1.75%。表明该方法简单、准确,灵敏度高,抗干扰能力强,适用于食用调和油中没食子酸丙脂的测定。     

HPLC法测定盐酸多西环素片中盐酸多西环素的含量

[目的]建立HPLC测定盐酸多西环素片的含量.[方法]采用ODS柱(250mm×4.6mm,5 um),以0.05 mol/L草酸铵溶液:二甲基甲酰胺:0.2 mol/L磷酸氢二铵溶液(65:30:5) (用氨试液调pH 8.3)为流动相,检测波长为280 nm. [结果]峰面积对浓度的回归方程为A=21 489 C-20 287,盐酸多西环素在20-120 ug/ml浓度范围内,呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为100.84%,RSD为0.80%(n=5). [结论]该法简便、准确,适用于盐酸多西环素片剂的含量的测定.     

锰对细胞免疫功能的影响

[目的 ]探讨锰对细胞免疫功能的影响。 [方法 ]利用体外培养的淋巴细胞 ,采用正交试验设计 ,观察不同染锰浓度和时间对淋巴细胞功能的影响。用溴化四氮唑盐检测法 (MTT法 )测定T淋巴细胞增殖功能和自然杀伤细胞 (NK细胞 )杀瘤细胞活性 ;用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定培养液中的白细胞介素 2 (IL 2 )含量。 [结果 ]随着培养液中的锰离子浓度由 1× 10 -6mol/L增大到 1× 10 -3 mol/L ,染锰时间由 2h延长到 4h ,T淋巴细胞增殖功能、NK细胞杀瘤细胞活性和IL 2含量均显著下降。 [结论 ]一定浓度的锰对淋巴细胞具有毒性作用     

HPLC法测定中药钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量

目的：建立高效液相色谱法测定中药钩藤中有效成分钩藤碱和异钩藤碱的含量。方法：色谱柱Lichrospher C18（4.0＆#215;250 mm,5μm）,流动相：甲醇：水（含10 mmol/L的三乙胺,冰醋酸调节pH值为7.4-7.6）=55：45,检测波长为254 nm,加入1%盐酸10μL作为改性剂。温度为25℃,测定钩藤碱和异钩藤碱的线性关系方程。结果：钩藤碱与异钩藤碱的回归方程分别为Y=9.2×10^4-0.281×10^4,Y=7.6×10^4-0.375×10^4,线性范围分别为0.100-1.60μg/mL（r=0.9999）,0.211-1.379μg/mL（r=0.9998）,钩藤碱的平均回收率为99.154%,异钩藤碱的平均回收率为99.40%。结论：HPLC法测定中药钩藤中两种成分的含量,方法简单、快速,精密度及稳定性好,可以用于控制中药材钩藤的品质。     

高灵敏化学发光法检测减肥药物中左旋肉碱的含量

目的建立流动注射-化学发光法测定减肥药物中左旋肉碱含量的新方法。方法基于在碱性介质中,左旋肉碱对Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光体系有显著的增敏作用,且化学发光强度在一定范围内与左旋肉碱的浓度呈线性关系。为此,与流动注射技术相结合,建立了化学发光法测定左旋肉碱的新方法。结果该方法优化后的条件:鲁米诺的浓度为5.0×10-6mol/L,溶于0.106 mol/L Na OH溶液和0.008 mol/L Na CO3溶液;Ag(Ⅲ)浓度为1.0×10-7mol/L,溶于0.067 52 mol/L Na OH溶液和0.002 48 mol/L Na CO3溶液。在优化的条件下,方法的检出限(S/N=3)为1.56 mg/L,左旋肉碱的线性范围为1.562 5 mg/L~50.0 mg/L,回收率为85.7%~90.0%。取20.0 mg/L左旋肉碱进行11次平行测定,其相对标准偏差(RSD)为1.25%。结论此方法简单、灵敏、重现性佳,可用于市售减肥胶囊中左旋肉碱含量的测定,结果令人满意。